Peça intermediária de espermatozoides bovinos: funções e anormalidades / Midpiece of bovine spermatozoa: functions and abnormalities

O reprodutor tem grande importância na cadeia produtiva por possuir maior potencial de difusão do seu material genético dentro do rebanho do que as fêmeas que produzem apenas uma cria por ano, em manejo de monta natural. Entretanto, este potencial somente se torna real quando os machos apresentam boa qualidade seminal, resultando em menores taxas de retorno ao estro. No entanto, apesar das características reprodutivas apresentarem baixa herdabilidade, é consensual que algumas patologias espermáticas possam apresentar características hereditárias e neste caso podem permanecer disseminadas nos rebanhos. Entre as anomalias espermáticas identificadas nos ejaculados de bovinos, as patologias de peça intermediária são classificadas como defeitos espermáticos maiores, comprometendo a fertilidade dos reprodutores, porém estas têm recebido pouca atenção. O objetivo deste trabalho de revisão é apresentar os principais estudos sobre a formação da peça intermediária, sua importância e como esta pode sofrer anormalidades, visto que ejaculados com presença destas anomalias apresentam baixa motilidade espermática e fertilidade.(AU)

Bulls are of immense importance in the productive chain because they have a greater potential of diffusion of genetic material within the herd than females that produce only one calf per year in natural mating management. However, this potential is only achieved when males present good seminal quality, resulting in lower rates of return to estrus. Although the reproductive traits have low heritability, it is consensual that some sperm pathologies may present hereditary characteristics and in this case they can remain disseminated in the herds. Among the sperm abnormalities identified in bovine ejaculates, the midpiece pathologies are classified as a major sperm defect, compromising bull fertility, but these pathologies have received little attention. The objective of this review is to present the main studies on the midpiece formation, its importance and how it can undergo abnormalities, since ejaculates with the presence of this pathology present low sperm motility and fertility.(AU)

Peça intermediária de espermatozoides bovinos: funções e anormalidades / Midpiece of bovine spermatozoa: functions and abnormalities

O reprodutor tem grande importância na cadeia produtiva por possuir maior potencial de difusão do seu material genético dentro do rebanho do que as fêmeas que produzem apenas uma cria por ano, em manejo de monta natural. Entretanto, este potencial somente se torna real quando os machos apresentam boa qualidade seminal, resultando em menores taxas de retorno ao estro. No entanto, apesar das características reprodutivas apresentarem baixa herdabilidade, é consensual que algumas patologias espermáticas possam apresentar características hereditárias e neste caso podem permanecer disseminadas nos rebanhos. Entre as anomalias espermáticas identificadas nos ejaculados de bovinos, as patologias de peça intermediária são classificadas como defeitos espermáticos maiores, comprometendo a fertilidade dos reprodutores, porém estas têm recebido pouca atenção. O objetivo deste trabalho de revisão é apresentar os principais estudos sobre a formação da peça intermediária, sua importância e como esta pode sofrer anormalidades, visto que ejaculados com presença destas anomalias apresentam baixa motilidade espermática e fertilidade.

Bulls are of immense importance in the productive chain because they have a greater potential of diffusion of genetic material within the herd than females that produce only one calf per year in natural mating management. However, this potential is only achieved when males present good seminal quality, resulting in lower rates of return to estrus. Although the reproductive traits have low heritability, it is consensual that some sperm pathologies may present hereditary characteristics and in this case they can remain disseminated in the herds. Among the sperm abnormalities identified in bovine ejaculates, the midpiece pathologies are classified as a major sperm defect, compromising bull fertility, but these pathologies have received little attention. The objective of this review is to present the main studies on the midpiece formation, its importance and how it can undergo abnormalities, since ejaculates with the presence of this pathology present low sperm motility and fertility.

Características do sêmen caprino descongelado após a adição de Ringer lactato, citrato de sódio e solução Tris / Characteristics of thawed goat semen after addition of Ringer lactate, sodium citrate and Tris solution

Cryopreservation of semen is of great importance for various reproductive biotechnologies such as artificial insemination (IA), In Vitro Embryo Production (PIV) and Intracytoplasmic Sperm Injection (ICSI). The objective of this work was to evaluate the stability and persistence of motility and strength of sperm, as well as changes in the plasma membrane after the addition of Ringer Lactate, sodium citrate 2.92% or TRIS solution in thawed goat semen. Semen was collected from two Alpine Brown goats, and standard procedures for cryopreservation and seminal analysis were performed. After thawing the semen, the extenders Ringer Lactate, sodium citrate 2.92% and TRIS solution were added and Thermoresistance (TTR), Supravital and Morphology Tests were carried out. In TTR, only the group received TRIS solution presented motility and strength for a longer period (90 minutes; P 0,05). No influence of the addition of the solutions was found in the morphological analysis, as well as in the Supravital Test, which showed values ??close to those found for motility (P> 0.05). We concluded that the addition of the solutions does not allow a large persistence of motility and strength of thawed sperm, but TRIS solution could be used for expansion of seminal doses used in vitro reproductive biotechnology.

A criopreservação do sêmen é de grande importância para diversas biotecnologias da reprodução, como Inseminação Artificial (IA), Produção de Embriões In Vitro (PIV) e Injeção Intracitoplasmática de Espermatozoides (ICSI). Avaliou-se a estabilidade e persistência da motilidade e vigor dos espermatozoides, assim como alterações da membrana plasmática, após a adição de Ringer com Lactato, citrato de sódio 2,92% ou solução TRIS ao sêmen caprino descongelado. O sêmen foi coletado de dois bodes da raça Parda Alpina, realizando-se os procedimentos padrões de análise e criopreservação seminal. Após a descongelação do sêmen, foram adicionados os diluentes Ringer Lactato, citrato de sódio 2,92% ou solução TRIS, realizando-se os Testes de Termorresistência (TTR), Supravital e Morfológico. No TTR, somente o grupo a que foi adicionada a Solução TRIS obteve motilidade e vigor por maior período (90 minutos; P 0,05). Não foi encontrada influência da adição das soluções na análise morfológica, assim como no teste Supravital, o qual apresentou valores próximos aos encontrados para motilidade (P> 0,05). Concluiu-se que a adição das soluções não permite uma grande persistência da motilidade e vigor dos espermatozoides descongelados, porém a solução TRIS poderia ser utilizada para expansão de doses seminais utilizadas em biotecnologias reprodutivas in vitro.

Características do sêmen caprino descongelado após a adição de Ringer lactato, citrato de sódio e solução Tris / Characteristics of thawed goat semen after addition of Ringer lactate, sodium citrate and Tris solution

Cryopreservation of semen is of great importance for various reproductive biotechnologies such as artificial insemination (IA), In Vitro Embryo Production (PIV) and Intracytoplasmic Sperm Injection (ICSI). The objective of this work was to evaluate the stability and persistence of motility and strength of sperm, as well as changes in the plasma membrane after the addition of Ringer Lactate, sodium citrate 2.92% or TRIS solution in thawed goat semen. Semen was collected from two Alpine Brown goats, and standard procedures for cryopreservation and seminal analysis were performed. After thawing the semen, the extenders Ringer Lactate, sodium citrate 2.92% and TRIS solution were added and Thermoresistance (TTR), Supravital and Morphology Tests were carried out. In TTR, only the group received TRIS solution presented motility and strength for a longer period (90 minutes; P 0,05). No influence of the addition of the solutions was found in the morphological analysis, as well as in the Supravital Test, which showed values ??close to those found for motility (P> 0.05). We concluded that the addition of the solutions does not allow a large persistence of motility and strength of thawed sperm, but TRIS solution could be used for expansion of seminal doses used in vitro reproductive biotechnology.(AU)

A criopreservação do sêmen é de grande importância para diversas biotecnologias da reprodução, como Inseminação Artificial (IA), Produção de Embriões In Vitro (PIV) e Injeção Intracitoplasmática de Espermatozoides (ICSI). Avaliou-se a estabilidade e persistência da motilidade e vigor dos espermatozoides, assim como alterações da membrana plasmática, após a adição de Ringer com Lactato, citrato de sódio 2,92% ou solução TRIS ao sêmen caprino descongelado. O sêmen foi coletado de dois bodes da raça Parda Alpina, realizando-se os procedimentos padrões de análise e criopreservação seminal. Após a descongelação do sêmen, foram adicionados os diluentes Ringer Lactato, citrato de sódio 2,92% ou solução TRIS, realizando-se os Testes de Termorresistência (TTR), Supravital e Morfológico. No TTR, somente o grupo a que foi adicionada a Solução TRIS obteve motilidade e vigor por maior período (90 minutos; P 0,05). Não foi encontrada influência da adição das soluções na análise morfológica, assim como no teste Supravital, o qual apresentou valores próximos aos encontrados para motilidade (P> 0,05). Concluiu-se que a adição das soluções não permite uma grande persistência da motilidade e vigor dos espermatozoides descongelados, porém a solução TRIS poderia ser utilizada para expansão de doses seminais utilizadas em biotecnologias reprodutivas in vitro.(AU)

CARACTERÍSTICAS DO SÊMEN CAPRINO DESCONGELADO APÓS A ADIÇÃO DE RINGER LACTATO, CITRATO DE SÓDIO E SOLUÇÃO TRIS

Cryopreservation of semen is of great importance for various reproductive biotechnologies such as artificial insemination (IA), In Vitro Embryo Production (PIV) and Intracytoplasmic Sperm Injection (ICSI). The objective of this work was to evaluate the stability and persistence of motility and strength of sperm, as well as changes in the plasma membrane after the addition of Ringer Lactate, sodium citrate 2.92% or TRIS solution in thawed goat semen. Semen was collected from two Alpine Brown goats, and standard procedures for cryopreservation and seminal analysis were performed. After thawing the semen, the extenders Ringer Lactate, sodium citrate 2.92% and TRIS solution were added and Thermoresistance (TTR), Supravital and Morphology Tests were carried out. In TTR, only the group received TRIS solution presented motility and strength for a longer period (90 minutes; P 0,05). No influence of the addition of the solutions was found in the morphological analysis, as well as in the Supravital Test, which showed values close to those found for motility (P> 0.05). We concluded that the addition of the solutions does not allow a large persistence of motility and strength of thawed sperm, but TRIS solution could be used for expansion of seminal doses used in vitro reproductive biotechnology.

A criopreservação do sêmen é de grande importância para diversas biotecnologias da reprodução, como Inseminação Artificial (IA), Produção de Embriões In Vitro (PIV) e Injeção Intracitoplasmática de Espermatozoides (ICSI). Avaliou-se a estabilidade e persistência da motilidade e vigor dos espermatozoides, assim como alterações da membrana plasmática, após a adição de Ringer com Lactato, citrato de sódio 2,92% ou solução TRIS ao sêmen caprino descongelado. O sêmen foi coletado de dois bodes da raça Parda Alpina, realizando-se os procedimentos padrões de análise e criopreservação seminal. Após a descongelação do sêmen, foram adicionados os diluentes Ringer Lactato, citrato de sódio 2,92% ou solução TRIS, realizando-se os Testes de Termorresistência (TTR), Supravital e Morfológico. No TTR, somente o grupo a que foi adicionada a Solução TRIS obteve motilidade e vigor por maior período (90 minutos; P 0,05). Não foi encontrada influência da adição das soluções na análise morfológica, assim como no teste Supravital, o qual apresentou valores próximos aos encontrados para motilidade (P> 0,05). Concluiu-se que a adição das soluções não permite uma grande persistência da motilidade e vigor dos espermatozoides descongelados, porém a solução TRIS poderia ser utilizada para expansão de doses seminais utilizadas em biotecnologias reprodutivas in vitro.

Avaliação morfométrica do processo espermatogênico de ratos Wistar adultos expostos ao ácido2, 4diclorofenoxiacético associado ao picloram (TORDON 2,4-D ® 64/240 BR) / Morphometric evaluation of the spermatogenic process of adults wistar rats exposed to the 2, 4diclorophenoxiacetic acid associated to picloram (TORDON 2,4-D® 64/240 BR)

Thirty adult male wistar rats were used in five groups. Two groups received oral treatment withaqueous solution of TORDON 2,4-D®64/240 BR in different concentrations; group O1: 2 ml.L-1(n = 6); groupO2: 4 ml.L-1(n = 6). Two groups received topical treatment in the dorsal cervical area, the followingconcentrations were used, group T1: 16.7 ml.L-1(n = 6), and group T2: 400 ml.L-1(n = 6). A control group wasused without the addition of the herbicide (n = 6). At the end of the experiment, the animals were euthanized; thetestes were collected and fixed for subsequent histological analysis in light microscope. The T1 group showedincrease in albuginea weight (P < 0.05). The animals of the O2 group showed significant reduction (P < 0.05) ofthe height of seminiferous epithelium. The animals of the O1 and T2 groups did not present harmful effects onthe spermatogenic morphometry.

Trinta ratos Wistar adultos foram usados em cinco grupos. Dois grupos receberam tratamento porvia oral com solução aquosa de 2,4-D Tordon®64/240 BR, em diferentes concentrações, grupo O1: 2 ml.L-1(n =6), grupo de O2: 4 ml.L-1(n = 6). Dois grupos receberam tratamento tópico na região cervical dorsal, foramusadas as seguintes concentrações, grupo T1: 16,7 ml.L-1(n = 6), e um grupo T2: 400 ml.L-1(n = 6). Um grupocontrole foi utilizado sem a adição do herbicida (n = 6). No fim do experimento, os animais foram eutanaziados,os testículos foram removidos e fixados para posterior análise histológica em microscópio de luz. Os animais dogrupo T1 apresentaram aumento no peso da albugínea (P < 0,05). Os animais do grupo de O2 mostraram reduçãosignificativa (P < 0,05) da altura do epitélio seminífero. Os animais dos grupos O1 e T2 não apresentaram efeitosnocivos sobre a morfometria espermatogênica.

Avaliação morfométrica do processo espermatogênico de ratos Wistar adultos expostos ao ácido2, 4diclorofenoxiacético associado ao picloram (TORDON 2,4-D ® 64/240 BR) / Morphometric evaluation of the spermatogenic process of adults wistar rats exposed to the 2, 4diclorophenoxiacetic acid associated to picloram (TORDON 2,4-D® 64/240 BR)

Thirty adult male wistar rats were used in five groups. Two groups received oral treatment withaqueous solution of TORDON 2,4-D®64/240 BR in different concentrations; group O1: 2 ml.L-1(n = 6); groupO2: 4 ml.L-1(n = 6). Two groups received topical treatment in the dorsal cervical area, the followingconcentrations were used, group T1: 16.7 ml.L-1(n = 6), and group T2: 400 ml.L-1(n = 6). A control group wasused without the addition of the herbicide (n = 6). At the end of the experiment, the animals were euthanized; thetestes were collected and fixed for subsequent histological analysis in light microscope. The T1 group showedincrease in albuginea weight (P < 0.05). The animals of the O2 group showed significant reduction (P < 0.05) ofthe height of seminiferous epithelium. The animals of the O1 and T2 groups did not present harmful effects onthe spermatogenic morphometry.(AU)

Trinta ratos Wistar adultos foram usados em cinco grupos. Dois grupos receberam tratamento porvia oral com solução aquosa de 2,4-D Tordon®64/240 BR, em diferentes concentrações, grupo O1: 2 ml.L-1(n =6), grupo de O2: 4 ml.L-1(n = 6). Dois grupos receberam tratamento tópico na região cervical dorsal, foramusadas as seguintes concentrações, grupo T1: 16,7 ml.L-1(n = 6), e um grupo T2: 400 ml.L-1(n = 6). Um grupocontrole foi utilizado sem a adição do herbicida (n = 6). No fim do experimento, os animais foram eutanaziados,os testículos foram removidos e fixados para posterior análise histológica em microscópio de luz. Os animais dogrupo T1 apresentaram aumento no peso da albugínea (P < 0,05). Os animais do grupo de O2 mostraram reduçãosignificativa (P < 0,05) da altura do epitélio seminífero. Os animais dos grupos O1 e T2 não apresentaram efeitosnocivos sobre a morfometria espermatogênica.(AU)

Teste de ligação do espermatozoide à membrana perivitelina da gema de ovo após a a adição de Ringer Lactato, Citrato de Sódio 2,92% e solução TRIS no sêmen caprino congelado / Sperm-perivitelline membrane egg binding assay after addition of Ringer Lactate, Sodium Citrate 2.92% and TRIS Solution in thawed goat semen

Com o presente estudo se verificou através do Teste de Ligação dos Espermatozoides à Membrana Perivitelina da Gema de Ovo a capacidade fecundante dessas células após o descongelamento e adição das soluções Ringer com Lactato, Citrato de Sódio 2,92% e TRIS. O sêmen dos animais foi coletado e realizado os procedimentos padrões de análise e criopreservação seminal. Após o descongelamento foi adicionado os diluentes Ringer com Lactato, Citrato de Sódio 2,92 % e Solução TRIS, os quais continham substâncias protetoras aos espermatozoides. Logo após, foram realizados os Testes de Ligação do Espermatozoide à Membrana Perivitelina da Gema de Ovo e Morfológico. Os parâmetros seminais do sêmen fresco ficaram de acordo com preconizado pela legislação vigente (CBRA,1998). A capacidade de ligação dos espermatozoides à membrana perivitelina da gema do ovo foi semelhante entre os tratamentos (P>0,05), mas foi observada correlação positiva entre a motilidade espermática e a capacidade de ligação (P<0,05). A diluição do sêmen criopreservado com soluções isoosmóticas após o descongelamento pode ser útil na manutenção da qualidade espermática e no aumento do volume existente a fim de otimizar a realização de testes e biotecnologias reprodutivas in vitro.

The present study was verified by testing for binding of sperm to the perivitelline membrane of the egg yolk fertilizing capacity of these cells after thawing and addition of Ringer Lactate, Sodium Citrate 2.92% and TRIS Solution. The semen of animals was collected and performed the standard procedures of analysis and cryopreservation seminal. After thawing was added the solutions Ringer Lactate, Sodium Citrate 2.92% and TRIS, which contained protective substances to sperm and performed the tests in vitro Sperm-Perivitelline Membrane egg Binding and Morphology. The seminal parameters of fresh semen were recommended according to current legislation. The binding capacity of the sperm membrane perivitelline egg yolk was similar between treatments(P>0,05), but there was a positive correlation between sperm motility and binding capacity (P<0,05). Thus, the dilution of semen cryopreserved with solutions isoosmóticas after thawing can be useful in maintaining the quality of sperm and increase existing volume to optimize the testing and reproductive biotechnologies in vitro.

Teste de ligação do espermatozoide à membrana perivitelina da gema de ovo após a a adição de Ringer Lactato, Citrato de Sódio 2,92% e solução TRIS no sêmen caprino congelado / Sperm-perivitelline membrane egg binding assay after addition of Ringer Lactate, Sodium Citrate 2.92% and TRIS Solution in thawed goat semen

Com o presente estudo se verificou através do Teste de Ligação dos Espermatozoides à Membrana Perivitelina da Gema de Ovo a capacidade fecundante dessas células após o descongelamento e adição das soluções Ringer com Lactato, Citrato de Sódio 2,92% e TRIS. O sêmen dos animais foi coletado e realizado os procedimentos padrões de análise e criopreservação seminal. Após o descongelamento foi adicionado os diluentes Ringer com Lactato, Citrato de Sódio 2,92 % e Solução TRIS, os quais continham substâncias protetoras aos espermatozoides. Logo após, foram realizados os Testes de Ligação do Espermatozoide à Membrana Perivitelina da Gema de Ovo e Morfológico. Os parâmetros seminais do sêmen fresco ficaram de acordo com preconizado pela legislação vigente (CBRA,1998). A capacidade de ligação dos espermatozoides à membrana perivitelina da gema do ovo foi semelhante entre os tratamentos (P>0,05), mas foi observada correlação positiva entre a motilidade espermática e a capacidade de ligação (P<0,05). A diluição do sêmen criopreservado com soluções isoosmóticas após o descongelamento pode ser útil na manutenção da qualidade espermática e no aumento do volume existente a fim de otimizar a realização de testes e biotecnologias reprodutivas in vitro.(AU)

The present study was verified by testing for binding of sperm to the perivitelline membrane of the egg yolk fertilizing capacity of these cells after thawing and addition of Ringer Lactate, Sodium Citrate 2.92% and TRIS Solution. The semen of animals was collected and performed the standard procedures of analysis and cryopreservation seminal. After thawing was added the solutions Ringer Lactate, Sodium Citrate 2.92% and TRIS, which contained protective substances to sperm and performed the tests in vitro Sperm-Perivitelline Membrane egg Binding and Morphology. The seminal parameters of fresh semen were recommended according to current legislation. The binding capacity of the sperm membrane perivitelline egg yolk was similar between treatments(P>0,05), but there was a positive correlation between sperm motility and binding capacity (P<0,05). Thus, the dilution of semen cryopreserved with solutions isoosmóticas after thawing can be useful in maintaining the quality of sperm and increase existing volume to optimize the testing and reproductive biotechnologies in vitro.(AU)