In vivo phagocytosis and hematology in Astyanax altiparanae, a potential model for surrogate technology

Although the potential of surrogate propagation technology for aquaculture and conservation of Neotropical fish, the poor understanding of the host immune system may results in rejection and destruction of the donor material. Thus, it is necessary to study and to develop methods to evaluate the effects of immunosuppressive drugs employment and to evaluate the immunocompatibility between donor and receptor. Thus, the present study aimed to optimize a methodology to assess in vivo phagocytosis in Astyanax altiparanae using Saccharomyces cerevisiae and to evaluate their hematological response resultant from the inflammatory induction. To this, S. cerevisiae were labeled with Congo red and injected in the coelomic cavity of A. altiparanae at the concentration of 2.5 x 106 cells mL-1. A PBS solution and a non-injected group were kept as control. Fish blood was sampled and the phagocytic capacity and index were determined at 1, 2, 3 and 6 h post-injection (hpi). The yeast injection successfully stimulated phagocytosis, with the best result for phagocytosis assessment after 2 hpi. Moreover, it was achieved a high traceability of phagocytized and non-phagocytized yeast under optic microscopy analysis due to the Congo red labeling. The hematological profile was similar to usually observed in early infections, indicating lymphocyte migration to inflammatory site and increase in number of circulating phagocytes due to natural response to inflammatory stimulus. In conclusion, our method was efficient to assess in vivo phagocytosis in A. altiparanae and will be an important tool to evaluate the efficacy of immunosuppressive drugs in this species. Additionally, these results may serve as support for further studies in fish immunocompetence, both in laboratory and in field conditions.(AU)

Apesar do potencial apresentado pela tecnologia de propagação mediada para a aquicultura e conservação de peixes Neotropicais, o pobre entendimento do sistema imune do hospedeiro pode resultar na rejeição e destruição do material do doador. Com isso, se fazem necessários o estudo e o desenvolvimento de métodos para análise tanto dos efeitos de drogas imunossupressoras quanto para a avaliação da imunocompatibilidade entre doadores e receptores. Logo, o presente estudo teve como objetivo aperfeiçoar um método para analisar a fagocitose in vivo em Astyanax altiparanae usando Saccharomyces cerevisiae marcado e avaliar seu perfil hematológico resultante da indução inflamatória. Para isso, S. cerevisiae foram marcados com vermelho Congo e injetados na cavidade celomática dos A. altiparanae na concentração de 2,5 x 106 células.mL-1. Peixes injetados com PBS e peixes não injetados foram mantidos como controle. Sangue foi colhido e a capacidade fagocítica e o índice fagocítico foram determinados após 1, 2, 3 e 6 horas após à injeção (hpi). A injeção de levedura estimulou a fagocitose com sucesso, com o melhor resultado atingido após 2 hpi. Ainda, foi observada uma alta rastreabilidade das leveduras fagocitadas e não fagocitadas sob microscopia óptica devido à marcação com vermelho Congo. O perfil hematológico foi similar ao observado usualmente em infecções recém-induzidas, indicando migração de linfócitos ao sítio inflamatório e aumento no número de fagócitos circulantes devido à resposta natural ao estímulo inflamatório. Como conclusão, nosso método foi eficiente para analisar a fagocitose in vivo em A. altiparanae e será uma ferramenta importante para a avaliação de eficácia de drogas imunossopressoras para esta espécie. Em adição, estes resultados podem contribuir para futuros estudos em imunocompetência em peixes, tanto em âmbito laboratorial quanto a campo.(AU)

In vivo phagocytosis and hematology in Astyanax altiparanae, a potential model for surrogate technology

Abstract Although the potential of surrogate propagation technology for aquaculture and conservation of Neotropical fish, the poor understanding of the host immune system may results in rejection and destruction of the donor material. Thus, it is necessary to study and to develop methods to evaluate the effects of immunosuppressive drugs employment and to evaluate the immunocompatibility between donor and receptor. Thus, the present study aimed to optimize a methodology to assess in vivo phagocytosis in Astyanax altiparanae using Saccharomyces cerevisiae and to evaluate their hematological response resultant from the inflammatory induction. To this, S. cerevisiae were labeled with Congo red and injected in the coelomic cavity of A. altiparanae at the concentration of 2.5 x 106 cells mL-1. A PBS solution and a non-injected group were kept as control. Fish blood was sampled and the phagocytic capacity and index were determined at 1, 2, 3 and 6 h post-injection (hpi). The yeast injection successfully stimulated phagocytosis, with the best result for phagocytosis assessment after 2 hpi. Moreover, it was achieved a high traceability of phagocytized and non-phagocytized yeast under optic microscopy analysis due to the Congo red labeling. The hematological profile was similar to usually observed in early infections, indicating lymphocyte migration to inflammatory site and increase in number of circulating phagocytes due to natural response to inflammatory stimulus. In conclusion, our method was efficient to assess in vivo phagocytosis in A. altiparanae and will be an important tool to evaluate the efficacy of immunosuppressive drugs in this species. Additionally, these results may serve as support for further studies in fish immunocompetence, both in laboratory and in field conditions.

Resumo Apesar do potencial apresentado pela tecnologia de propagação mediada para a aquicultura e conservação de peixes Neotropicais, o pobre entendimento do sistema imune do hospedeiro pode resultar na rejeição e destruição do material do doador. Com isso, se fazem necessários o estudo e o desenvolvimento de métodos para análise tanto dos efeitos de drogas imunossupressoras quanto para a avaliação da imunocompatibilidade entre doadores e receptores. Logo, o presente estudo teve como objetivo aperfeiçoar um método para analisar a fagocitose in vivo em Astyanax altiparanae usando Saccharomyces cerevisiae marcado e avaliar seu perfil hematológico resultante da indução inflamatória. Para isso, S. cerevisiae foram marcados com vermelho Congo e injetados na cavidade celomática dos A. altiparanae na concentração de 2,5 x 106 células.mL-1. Peixes injetados com PBS e peixes não injetados foram mantidos como controle. Sangue foi colhido e a capacidade fagocítica e o índice fagocítico foram determinados após 1, 2, 3 e 6 horas após à injeção (hpi). A injeção de levedura estimulou a fagocitose com sucesso, com o melhor resultado atingido após 2 hpi. Ainda, foi observada uma alta rastreabilidade das leveduras fagocitadas e não fagocitadas sob microscopia óptica devido à marcação com vermelho Congo. O perfil hematológico foi similar ao observado usualmente em infecções recém-induzidas, indicando migração de linfócitos ao sítio inflamatório e aumento no número de fagócitos circulantes devido à resposta natural ao estímulo inflamatório. Como conclusão, nosso método foi eficiente para analisar a fagocitose in vivo em A. altiparanae e será uma ferramenta importante para a avaliação de eficácia de drogas imunossopressoras para esta espécie. Em adição, estes resultados podem contribuir para futuros estudos em imunocompetência em peixes, tanto em âmbito laboratorial quanto a campo.

In vivo phagocytosis and hematology in Astyanax altiparanae, a potential model for surrogate technology

Abstract Although the potential of surrogate propagation technology for aquaculture and conservation of Neotropical fish, the poor understanding of the host immune system may results in rejection and destruction of the donor material. Thus, it is necessary to study and to develop methods to evaluate the effects of immunosuppressive drugs employment and to evaluate the immunocompatibility between donor and receptor. Thus, the present study aimed to optimize a methodology to assess in vivo phagocytosis in Astyanax altiparanae using Saccharomyces cerevisiae and to evaluate their hematological response resultant from the inflammatory induction. To this, S. cerevisiae were labeled with Congo red and injected in the coelomic cavity of A. altiparanae at the concentration of 2.5 x 106 cells mL-1. A PBS solution and a non-injected group were kept as control. Fish blood was sampled and the phagocytic capacity and index were determined at 1, 2, 3 and 6 h post-injection (hpi). The yeast injection successfully stimulated phagocytosis, with the best result for phagocytosis assessment after 2 hpi. Moreover, it was achieved a high traceability of phagocytized and non-phagocytized yeast under optic microscopy analysis due to the Congo red labeling. The hematological profile was similar to usually observed in early infections, indicating lymphocyte migration to inflammatory site and increase in number of circulating phagocytes due to natural response to inflammatory stimulus. In conclusion, our method was efficient to assess in vivo phagocytosis in A. altiparanae and will be an important tool to evaluate the efficacy of immunosuppressive drugs in this species. Additionally, these results may serve as support for further studies in fish immunocompetence, both in laboratory and in field conditions.

Resumo Apesar do potencial apresentado pela tecnologia de propagação mediada para a aquicultura e conservação de peixes Neotropicais, o pobre entendimento do sistema imune do hospedeiro pode resultar na rejeição e destruição do material do doador. Com isso, se fazem necessários o estudo e o desenvolvimento de métodos para análise tanto dos efeitos de drogas imunossupressoras quanto para a avaliação da imunocompatibilidade entre doadores e receptores. Logo, o presente estudo teve como objetivo aperfeiçoar um método para analisar a fagocitose in vivo em Astyanax altiparanae usando Saccharomyces cerevisiae marcado e avaliar seu perfil hematológico resultante da indução inflamatória. Para isso, S. cerevisiae foram marcados com vermelho Congo e injetados na cavidade celomática dos A. altiparanae na concentração de 2,5 x 106 células.mL-1. Peixes injetados com PBS e peixes não injetados foram mantidos como controle. Sangue foi colhido e a capacidade fagocítica e o índice fagocítico foram determinados após 1, 2, 3 e 6 horas após à injeção (hpi). A injeção de levedura estimulou a fagocitose com sucesso, com o melhor resultado atingido após 2 hpi. Ainda, foi observada uma alta rastreabilidade das leveduras fagocitadas e não fagocitadas sob microscopia óptica devido à marcação com vermelho Congo. O perfil hematológico foi similar ao observado usualmente em infecções recém-induzidas, indicando migração de linfócitos ao sítio inflamatório e aumento no número de fagócitos circulantes devido à resposta natural ao estímulo inflamatório. Como conclusão, nosso método foi eficiente para analisar a fagocitose in vivo em A. altiparanae e será uma ferramenta importante para a avaliação de eficácia de drogas imunossopressoras para esta espécie. Em adição, estes resultados podem contribuir para futuros estudos em imunocompetência em peixes, tanto em âmbito laboratorial quanto a campo.

Redução do uso de formaldeído no tratamento da tricodiníase em tilápias

Neste estudo, objetivou-se a redução do uso do desinfetante formaldeído no tratamento da tricodiníase em tilápia do Nilo Oreochromis niloticus, um dos principais peixes cultivados no mundo. A efetividade de um protocolo terapêutico (banho único de 15 minutos) contendo 1 ml/L de formaldeído + 1% de cloreto de sódio (T1) comumente utilizado em pisciculturas e o potencial para redução de 50 % (0,5 ml/L de formaldeído + 1% de cloreto de sódio T2) e 75% (0,25 ml/L de formaldeído + 1% de cloreto de sódioT3) do uso do desinfetante foram avaliados. A fase larval dos peixes é a mais afetada pela doença efoi utilizada como modelo. Larvas de tilápias parasitadas (20/tanque) de piscicultura comercial foram distribuídas em 9 tanquesde plástico (três por tratamento). O parasitismo inicial foi registrado (197,67±202,24 tricodinídeos/peixe) através de análise parasitológica de 10 animais. O parasitismo final do tratamento foi baseado na análise de 18 animais por tratamento.A efetividade do tratamento foi calculada pela fórmula ET=100-(Dx100/A). ET é a eficácia do tratamento (%), D é a média de parasitos depois do tratamento e A é a média de parasitos antes do tratamento. Os dados foram submetidos à análise de variância one-way e teste de Tukey, usando o software R. Probabilidade menor ou igual a 0,05 foi considerada estatisticamente significativa. O protocolo T1 (100% de formaldeído) matou

DESCRIÇÃO DE GIRINO DE Rhinella schneideri COMO RESERVATÓRIO DE PARASITO EM PISCICULTURA

O objetivo foi estudar girinos como possíveis reservatórios de parasitos em tanques escavados que são utilizados na piscicultura. As coletas (SISBIO 51444-1) foram realizadas em setembro de 2015 (Jaboticabal, São Paulo). Os girinos (n=60) foram capturados com auxílio de puçá e transferidos imediatamente em sacos plásticos com água proveniente do tanque até o laboratório, onde foram medidos, pesados e eutanasiados pela secção da medula espinhal. Cada girino foi colocado individualmente em tubos falcon contendo 4ml de formalina 1:4000 para desprendimento dos parasitos. Após 2h de descanso, o girino foi retirado e 1ml da solução colocada em câmara de Sedgewick-Rafter para contagem dos ectoparasitos (os dados foram multiplicados por 4 para estimar a quantidade total por girino). Os descritos ecológicos de prevalência, abundância e intensidade média parasitária foram calculados. O restante do conteúdo do tubo foi depositado em lâmina de vidro e depois de secas, impregnadas com nitrato de prata 2% para identificação taxonômica dos parasitos. Os girinos (comprimento total 2,0cm± 0,2 e peso 0,2g± 0,03) foram identificados como sendo Rhinella schneideri e apresentaram 100% de prevalência de tricodinídeos, com alta taxa de abundância e intensidade média parasitária (4107,1 ± 1526,6). Os tricodinídeos eram da espécie Trichodina heterodentata, um parasito cosmopolita que tem sido relatad

RELAÇÃO ENTRE Spironucleus vortens E Citrobacter freundii EM ACARÁ-BANDEIRA Pterophyllum scalare

Doenças parasitárias e bacterianas são fatores limitantes na produção animal, no entanto, descrições científicas sobre enfermidades que afetam peixes ornamentais são escassas se comparado a outros cultivos. O Acará-Bandeira Pterophyllum scalare, peixe amazônico, é uma das principais espécies da aquariofilia brasileira, sendo exportado e apreciado em todo o mundo. Neste estudo, as causas da mortalidade crônica em Acará-Bandeira P. scalare criados em sistema in-door foram pesquisadas. Análise de ectoparasitos da brânquia e tegumento foi realizada com auxílio de lâminas e lamínulas de vidro e o material coletado foi visualizado em microscópio (Nikon E200). Para a pesquisa de endoparasitos, o conteúdo intestinal foi depositado em lâmina de vidro e o tecido também foi raspado com auxílio de uma lamínula. Além disso, descrição patológica (sinais clínicos e alterações macroscópicas) foi realizada durante as necropsias. Para análise microbiológica, rim cranial e baço foram coletados assepticamente, semeados em meio líquido (TSB) e sólido (TSA) e incubados a 30ºC por 48 h. Colônias purificadas foram submetidas à coloração de gram e coletadas para identificação por PCR de colônia (sequenciamento do gene 16S rRNA). Não foram encontrados ectoparasitos nas análises das brânquias e do tegumento. No entanto, na análise intestinal, foi observado elevado grau de infestação por protozoários mi

ASPECTOS SAZONAIS DE Lamproglena spp. (COPEPODA: LERNAEIDAE) PARASITANDO AS BRÂNQUIAS DE Oreochromis niloticus

O estudo teve por objetivo relatar a ocorrência de sazonalidade de ectoparasitos do gênero Lamproglena spp. infestando tilápias de tanques-rede e observar se o tamanho corporal dos animais influencia os níveis de parasitismo. As coletas foram realizadas em uma piscicultura comercial localizada no Rio Grande, em Igarapava, São Paulo. Foram coletados mensalmente 30 peixes de diferentes fases de produção (10 peixes da fase inicial 150g, 10 peixes da fase intermediária 150-450g e 10 peixes da fase final 450g), no período de setembro de 2013 a agosto de 2014. Após a captura, os animais foram medidos, pesados e mortos através de secção da medula espinhal, as brânquias removidas e acondicionadas em formol 5% e observadas em estereomicroscópio. Os microcrustáceos foram coletados e quantificados. Os índices ecológicos de prevalência, abundância e intensidade média parasitária foram calculados. Os dados foram analisados utilizando o teste não-paramétrico de Kruskal Wallis no GraphPad Prism 6, para determinar possíveis diferenças nos níveis de parasitismo ao longo das estações do ano, e o coeficiente de correlação de Spearman r foi utilizado para avaliar a equiparação entre o tamanho dos peixes e o parasitismo. As maiores abundâncias médias parasitárias foram verificadas no inverno (1,46) o qual diferiu significativamente da primavera (0,40) e verão (0,52), porém o outono (0,91) difer

Primeiro registro de g. cichlidarum paperna, 1968 em produção de tilápias (oreochromis niloticus) do brasil

A larvicultura de tilápia - espécie de peixe mais produzida no Brasil, é caracterizada pelo sistema de criação intensivo que predispõe os animais a uma grande variedade de patógenos, como o ectoparasito Gyrodactylus Nordmann,1832 (Monogenea), responsável por surtos de mortalidade em juvenis de tilápia ao redor do mundo. Apesar disso, não existe informações sobre a fauna de gyrodactílideos no Brasil, dificultando o diagnóstico e controle sanitário deste parasito. O objetivo deste estudo foi realizar a identificação da espécie de Gyrodactylus encontradas parasitando tilápias em pisciculturas no Sudeste e Nordeste do Brasil. Durante avaliação sanitária em 1 piscicultura localizada no estado da Bahia e 2 pisciculturas do estado de São Paulo, observou-se alta infestação de Gyrodactylus sp em larvas de tilápia. Os parasitos foram removidos da pele e nadadeiras e fixados em álcool 96% para estudos de morfologia e de molecular. Os espécimes foram montados em meio de Hoyer para avaliação morfológica do haptor em microscópio de contraste de fases (Nikon E200®). Foram realizadas um total de 25 medidas por espécime com programa Moticam 2.300® e posteriormente comparadas com Gyrodactylus sp previamente descritas em ciclídeos. Para análise molecular, o DNA genômico foi extraído com kit DNeasy Blood & Tissue Kit (Qiagen) e a região ITS1-5.8S-ITS2 do rRNA foi amplificada e sequenciada u

RELAÇÃO DA TEMPERATURA DA ÁGUA COM OS NÍVEIS DE PARASITISMO POR Cichlidogyrus spp. (MONOGENEA: ANCYROCEPHALIDAE) EM Oreochromis niloticus

O objetivo deste estudo foi avaliar a sazonalidade de Cichlidogyrus spp. parasitando as brânquias de tilápias criadas em tanques-rede e correlacionar os níveis de parasitismo com a temperatura da água. As coletas foram realizadas em duas pisciculturas comerciais, produtoras de tilápia, localizadas no Estado de São Paulo. Uma propriedade situada no Rio Tietê (propriedade 1) e outra no Rio Grande (propriedade 2). Foram coletados mensalmente, 30 peixes de cada uma, no período de setembro de 2013 a agosto de 2014. Após a captura, os animais foram medidos, pesados e mortos por meio de secção da medula espinhal, as brânquias removidas e acondicionadas em formol a 5% e os monogenóideos quantificados. A temperatura foi aferida no final de cada coleta utilizando cinco pontos previamente demarcados em cada piscicultura, usando sonda YSI 55. O teste não-paramétrico de Kruskal Wallis e o teste de Dunn foram utilizados e os dados analisados no software GraphPad Prism 6, para determinar possíveis diferenças de parasitismo nas estações do ano e coeficiente de correlação de Spearman r foi usado para associar o nível parasitismo com as temperaturas. Nas pisciculturas 1 e 2, os valores mais elevados de temperatura foram obtidos no Verão (29,0C e 29,7C) e Outono (25,9C e 26,9C), assim como os níveis de parasitismo, diferindo significativamente da Primavera (25,4C e 24,2C) e Inverno (21,1C

Serum bactericidal activity as indicator of innate immunity in pacu Piaractus mesopotamicus (Holmberg, 1887) / Atividade bactericida do soro como indicador de imunidade inata de pacu Piaractus mesopotamicus (Holmberg, 1887)

The immune system of teleost fish has mechanisms responsible for the defense against bacteria through protective proteins in several tissues. The protein action can be evaluated by serum bactericidal activity and this is an important tool to analyze the immune system. Pacu, Piaractus mesopotamicus, is one of the most important fish in national aquaculture. However there is a lack of studies on its immune responses. In order to standardize and assess the accuracy of the serum bactericidal activity assay, fish were briefly challenged with Aeromonas hydrophila and sampled one week after the challenge. The bacterial infection increased the concentration of protective proteins, resulting in a decrease of colony-forming unit values expressed as well as an enhanced serum bactericidal activity. The protocol showed a reliable assay, appropriate to determine the serum bactericidal activity of pacu in the present experimental conditions.(AU)

O sistema imune de peixes teleósteos tem mecanismos responsáveis pela defesa contra bactérias e atua através de proteínas presentes em diversos tecidos. A ação destas proteínas pode ser avaliada pela atividade bactericida do soro, sendo esta uma importante ferramenta para analisar o sistema imune. O pacu, Piaractus mesopotamicus, é um peixe nativo muito importante para aquicultura nacional, entretanto há pouco conhecimento sobre o funcionamento de seu sistema imune. Assim foi realizado experimento para padronizar e avaliar a eficiência do ensaio de atividade bactericida. Resumidamente, peixes foram desafiados por Aeromonas hydrophila e amostradas uma semana após o desafio. A infecção bacteriana promoveu um aumento na concentração de proteínas protetoras, resultando em diminuição dos valores de unidades formadoras de colônias ou expressos também como aumento da atividade bactericida do soro. O protocolo se mostrou confiável, sendo apropriado para determinar a atividade bactericida do soro de pacu nas condições experimentais.(AU)

Hematology and productive performance of nile tilapia (Oreochromis niloticus) naturally infected with Flavobacterium columnare

Columnaris disease is one of the main causes of mortality in tilapia rearing and is responsible for large economic losses worldwide. Hematology is a tool that makes it possible to study organisms' physiological responses to pathogens. It may assist in making diagnoses and prognoses on diseases in fish populations. The hematological variables of nile tilapia were studied in specimens with a clinical diagnosis of columnaris disease and in specimens that were disease-free. The total erythrocyte count, hemoglobin rate, hematocrit percentage, mean corpuscular hemoglobin (MCH), mean corpuscular hemoglobin concentration (MCHC), mean corpuscular volume (MCV), organic defense blood cell percentages (leukocytes and thrombocytes) and hepatosomatic and splenosomatic index were determined. The results showed that there were changes in the erythrocytic series and in organic defense blood cells, in the fish infected with the bacterium, with reductions in erythrocytic variables and significant increases in the numbers of circulating lymphocytes and neutrophils.

Isolamento e resistência a antimicrobianos de cepas de Streptococcus spp. provenientes de rãs-touro (Lithobates catesbeianus) / Isolation and antimicrobial resistance of Streptococcus spp. strains from bullfrog (Lithobates catesbeiana)

Twelve bullfrogs were selected from two commercial frog farms and clinically diagnosed as attacked by Streptococcus disease. Sixty samples were collected, and Streptococcus spp. was isolated from all bullfrog, being 12 (100%) from the encephalus, seven from the kidneys (58.3%), three from the liver (25%), two from the spleen (16.6%), and one from the ascitic liquid (8.3%). Streptococcus "-hemolytic were isolated from all the 60 samples, which were sensible to chloramphenicol (100%), gentamycin (100%), vancomycin (96%), cefotaxime (96%), and cefoxitine (92%).(AU)

Isolation and characterization of Flavobacterium columnare (Bernardet et al. 2002) from four tropical fish species in Brazil

Flavobacterium columnare is the causative agent of columnaris disease in freshwater fish, implicated in skin and gill disease, often causing high mortality. The aim of this study was the isolation and characterization of Flavobacterium columnare in tropical fish in Brazil. Piracanjuba (Brycon orbignyanus), pacu (Piaractus mesopotamicus), tambaqui (Colossoma macropomum) and cascudo (Hypostomus plecostomus) were examined for external lesions showing signs of colunmaris disease such as greyish white spots, especially on the head, dorsal part and caudal fin of the fish. The sampling comprised 50 samples representing four different fish species selected for study. Samples for culture were obtained by skin and kidney scrapes with a sterile cotton swabs of columnaris disease fish and streaked onto Carlson and Pacha (1968) artificial culture medium (broth and solid) which were used for isolation. The strains in the liquid medium were Gram negative, long, filamentous, exhibited flexing movements (gliding motility), contained a large number of long slender bacteria and gathered into ‘columns'. Strains on the agar produced yellow-pale colonies, rather small, flat that had rhizoid edges. A total of four Flavobacterium columnare were isolated: 01 Brycon orbignyanus strain, 01 Piaractus mesopotamicus strain, 01 Colossoma macropomum strain, and 01 Hypostomus plecostomus strain. Biochemical characterization, with its absorption of Congo red dye, production of flexirubin-type pigments, H2S production and reduction of nitrates proved that the isolate could be classified as Flavobacterium columnare.

Flavobacterium columnare é o agente etiológico da columnariose em peixes de água doce, ocasionando enfermidade na pele e nas brânquias, provocando freqüentemente um grande número de mortalidade. O objetivo deste estudo foi o isolamento e a caracterização de Flavobacterium columnare em peixes tropicais no Brasil. Piracanjuba (Brycon orbignyanus), pacu (Piaractus mesopotamicus), tambaqui (Colossoma macropomum) e cascudo (Hypostomus plecostomus) foram examinados externamente com relação a sinais característicos de columnariose, como manchas acinzentadas na cabeça, região dorsal e pedúnculo caudal dos peixes. A amostragem compreendeu a coleta de 50 exemplares de peixes, representando as quatro diferentes espécies escolhidas para este estudo. Amostras para o isolamento foram obtidas através de raspado com swab estéril das lesões e do rim dos peixes clinicamente diagnosticados como acometidos por columnarios e imediatamente semeados em meios de culturas artificiais (líquido e sólido) próprios para o estudo de Flavobacterium segundo Carlson e Pacha (1968). No meio líquido, houve o desenvolvimento de microrganismos que observados em gota pendente apresentaram a forma de bacilos finos, longos, móveis por deslizamento. Através da coloração de Gram, apresentaram morfologia de bacilos finos, Gram negativos, agrupados em colunas. Em meio sólido, as colônias eram pequenas, cinza-amareladas, com borda em forma de raiz. No total, foram obtidos quatro isolamentos: 01 cepa de Brycon orbignyanus; 01 cepa de Piaractus mesopotamicus; 01 cepa de Colossoma macropomum; e 01 cepa de Hypostomus plecostomus. A caracterização bioquímica das amostras, como absorção do vermelho Congo, produção de flexirrubina, produção de H2S e redução do nitrato, sugere que os isolamentos poderiam ser classificados como Flavobacterium columnare.

REDUÇÃO DO USO DE FORMALDEÍDO NO TRATAMENTO DA TRICODINÍASE EM TILÁPIAS

Neste estudo, objetivou-se a redução do uso do desinfetante formaldeído no tratamento da tricodiníase em tilápia do Nilo Oreochromis niloticus, um dos principais peixes cultivados no mundo. A efetividade de um protocolo terapêutico (banho único de 15 minutos) contendo 1 ml/L de formaldeído + 1% de cloreto de sódio (T1) comumente utilizado em pisciculturas e o potencial para redução de 50 % (0,5 ml/L de formaldeído + 1% de cloreto de sódio T2) e 75% (0,25 ml/L de formaldeído + 1% de cloreto de sódioT3) do uso do desinfetante foram avaliados. A fase larval dos peixes é a mais afetada pela doença efoi utilizada como modelo. Larvas de tilápias parasitadas (20/tanque) de piscicultura comercial foram distribuídas em 9 tanquesde plástico (três por tratamento). O parasitismo inicial foi registrado (197,67±202,24 tricodinídeos/peixe) através de análise parasitológica de 10 animais. O parasitismo final do tratamento foi baseado na análise de 18 animais por tratamento.A efetividade do tratamento foi calculada pela fórmula ET=100-(Dx100/A). ET é a eficácia do tratamento (%), D é a média de parasitos depois do tratamento e A é a média de parasitos antes do tratamento. Os dados foram submetidos à análise de variância one-way e teste de Tukey, usando o software R. Probabilidade menor ou igual a 0,05 foi considerada estatisticamente significativa. O protocolo T1 (100% de formaldeído) matou

DESCRIÇÃO DE GIRINO DE Rhinella schneideri COMO RESERVATÓRIO DE PARASITO EM PISCICULTURA

O objetivo foi estudar girinos como possíveis reservatórios de parasitos em tanques escavados que são utilizados na piscicultura. As coletas (SISBIO 51444-1) foram realizadas em setembro de 2015 (Jaboticabal, São Paulo). Os girinos (n=60) foram capturados com auxílio de puçá e transferidos imediatamente em sacos plásticos com água proveniente do tanque até o laboratório, onde foram medidos, pesados e eutanasiados pela secção da medula espinhal. Cada girino foi colocado individualmente em tubos falcon contendo 4ml de formalina 1:4000 para desprendimento dos parasitos. Após 2h de descanso, o girino foi retirado e 1ml da solução colocada em câmara de Sedgewick-Rafter para contagem dos ectoparasitos (os dados foram multiplicados por 4 para estimar a quantidade total por girino). Os descritos ecológicos de prevalência, abundância e intensidade média parasitária foram calculados. O restante do conteúdo do tubo foi depositado em lâmina de vidro e depois de secas, impregnadas com nitrato de prata 2% para identificação taxonômica dos parasitos. Os girinos (comprimento total 2,0cm± 0,2 e peso 0,2g± 0,03) foram identificados como sendo Rhinella schneideri e apresentaram 100% de prevalência de tricodinídeos, com alta taxa de abundância e intensidade média parasitária (4107,1 ± 1526,6). Os tricodinídeos eram da espécie Trichodina heterodentata, um parasito cosmopolita que tem sido relatad

RELAÇÃO DA TEMPERATURA DA ÁGUA COM OS NÍVEIS DE PARASITISMO POR Cichlidogyrus spp. (MONOGENEA: ANCYROCEPHALIDAE) EM Oreochromis niloticus

O objetivo deste estudo foi avaliar a sazonalidade de Cichlidogyrus spp. parasitando as brânquias de tilápias criadas em tanques-rede e correlacionar os níveis de parasitismo com a temperatura da água. As coletas foram realizadas em duas pisciculturas comerciais, produtoras de tilápia, localizadas no Estado de São Paulo. Uma propriedade situada no Rio Tietê (propriedade 1) e outra no Rio Grande (propriedade 2). Foram coletados mensalmente, 30 peixes de cada uma, no período de setembro de 2013 a agosto de 2014. Após a captura, os animais foram medidos, pesados e mortos por meio de secção da medula espinhal, as brânquias removidas e acondicionadas em formol a 5% e os monogenóideos quantificados. A temperatura foi aferida no final de cada coleta utilizando cinco pontos previamente demarcados em cada piscicultura, usando sonda YSI 55. O teste não-paramétrico de Kruskal Wallis e o teste de Dunn foram utilizados e os dados analisados no software GraphPad Prism 6, para determinar possíveis diferenças de parasitismo nas estações do ano e coeficiente de correlação de Spearman r foi usado para associar o nível parasitismo com as temperaturas. Nas pisciculturas 1 e 2, os valores mais elevados de temperatura foram obtidos no Verão (29,0C e 29,7C) e Outono (25,9C e 26,9C), assim como os níveis de parasitismo, diferindo significativamente da Primavera (25,4C e 24,2C) e Inverno (21,1C

PRIMEIRO REGISTRO DE G. CICHLIDARUM PAPERNA, 1968 EM PRODUÇÃO DE TILÁPIAS (OREOCHROMIS NILOTICUS) DO BRASIL

A larvicultura de tilápia - espécie de peixe mais produzida no Brasil, é caracterizada pelo sistema de criação intensivo que predispõe os animais a uma grande variedade de patógenos, como o ectoparasito Gyrodactylus Nordmann,1832 (Monogenea), responsável por surtos de mortalidade em juvenis de tilápia ao redor do mundo. Apesar disso, não existe informações sobre a fauna de gyrodactílideos no Brasil, dificultando o diagnóstico e controle sanitário deste parasito. O objetivo deste estudo foi realizar a identificação da espécie de Gyrodactylus encontradas parasitando tilápias em pisciculturas no Sudeste e Nordeste do Brasil. Durante avaliação sanitária em 1 piscicultura localizada no estado da Bahia e 2 pisciculturas do estado de São Paulo, observou-se alta infestação de Gyrodactylus sp em larvas de tilápia. Os parasitos foram removidos da pele e nadadeiras e fixados em álcool 96% para estudos de morfologia e de molecular. Os espécimes foram montados em meio de Hoyer para avaliação morfológica do haptor em microscópio de contraste de fases (Nikon E200®). Foram realizadas um total de 25 medidas por espécime com programa Moticam 2.300® e posteriormente comparadas com Gyrodactylus sp previamente descritas em ciclídeos. Para análise molecular, o DNA genômico foi extraído com kit DNeasy Blood & Tissue Kit (Qiagen) e a região ITS1-5.8S-ITS2 do rRNA foi amplificada e sequenciada u

ASPECTOS SAZONAIS DE Lamproglena spp. (COPEPODA: LERNAEIDAE) PARASITANDO AS BRÂNQUIAS DE Oreochromis niloticus

O estudo teve por objetivo relatar a ocorrência de sazonalidade de ectoparasitos do gênero Lamproglena spp. infestando tilápias de tanques-rede e observar se o tamanho corporal dos animais influencia os níveis de parasitismo. As coletas foram realizadas em uma piscicultura comercial localizada no Rio Grande, em Igarapava, São Paulo. Foram coletados mensalmente 30 peixes de diferentes fases de produção (10 peixes da fase inicial 150g, 10 peixes da fase intermediária 150-450g e 10 peixes da fase final 450g), no período de setembro de 2013 a agosto de 2014. Após a captura, os animais foram medidos, pesados e mortos através de secção da medula espinhal, as brânquias removidas e acondicionadas em formol 5% e observadas em estereomicroscópio. Os microcrustáceos foram coletados e quantificados. Os índices ecológicos de prevalência, abundância e intensidade média parasitária foram calculados. Os dados foram analisados utilizando o teste não-paramétrico de Kruskal Wallis no GraphPad Prism 6, para determinar possíveis diferenças nos níveis de parasitismo ao longo das estações do ano, e o coeficiente de correlação de Spearman r foi utilizado para avaliar a equiparação entre o tamanho dos peixes e o parasitismo. As maiores abundâncias médias parasitárias foram verificadas no inverno (1,46) o qual diferiu significativamente da primavera (0,40) e verão (0,52), porém o outono (0,91) difer

RELAÇÃO ENTRE Spironucleus vortens E Citrobacter freundii EM ACARÁ-BANDEIRA Pterophyllum scalare

Doenças parasitárias e bacterianas são fatores limitantes na produção animal, no entanto, descrições científicas sobre enfermidades que afetam peixes ornamentais são escassas se comparado a outros cultivos. O Acará-Bandeira Pterophyllum scalare, peixe amazônico, é uma das principais espécies da aquariofilia brasileira, sendo exportado e apreciado em todo o mundo. Neste estudo, as causas da mortalidade crônica em Acará-Bandeira P. scalare criados em sistema in-door foram pesquisadas. Análise de ectoparasitos da brânquia e tegumento foi realizada com auxílio de lâminas e lamínulas de vidro e o material coletado foi visualizado em microscópio (Nikon E200). Para a pesquisa de endoparasitos, o conteúdo intestinal foi depositado em lâmina de vidro e o tecido também foi raspado com auxílio de uma lamínula. Além disso, descrição patológica (sinais clínicos e alterações macroscópicas) foi realizada durante as necropsias. Para análise microbiológica, rim cranial e baço foram coletados assepticamente, semeados em meio líquido (TSB) e sólido (TSA) e incubados a 30ºC por 48 h. Colônias purificadas foram submetidas à coloração de gram e coletadas para identificação por PCR de colônia (sequenciamento do gene 16S rRNA). Não foram encontrados ectoparasitos nas análises das brânquias e do tegumento. No entanto, na análise intestinal, foi observado elevado grau de infestação por protozoários mi

PRIMEIRO REGISTRO DE G. CICHLIDARUM PAPERNA, 1968 EM PRODUÇÃO DE TILÁPIAS (OREOCHROMIS NILOTICUS) DO BRASIL

A larvicultura de tilápia - espécie de peixe mais produzida no Brasil, é caracterizada pelo sistema de criação intensivo que predispõe os animais a uma grande variedade de patógenos, como o ectoparasito Gyrodactylus Nordmann,1832 (Monogenea), responsável por surtos de mortalidade em juvenis de tilápia ao redor do mundo. Apesar disso, não existe informações sobre a fauna de gyrodactílideos no Brasil, dificultando o diagnóstico e controle sanitário deste parasito. O objetivo deste estudo foi realizar a identificação da espécie de Gyrodactylus encontradas parasitando tilápias em pisciculturas no Sudeste e Nordeste do Brasil. Durante avaliação sanitária em 1 piscicultura localizada no estado da Bahia e 2 pisciculturas do estado de São Paulo, observou-se alta infestação de Gyrodactylus sp em larvas de tilápia. Os parasitos foram removidos da pele e nadadeiras e fixados em álcool 96% para estudos de morfologia e de molecular. Os espécimes foram montados em meio de Hoyer para avaliação morfológica do haptor em microscópio de contraste de fases (Nikon E200®). Foram realizadas um total de 25 medidas por espécime com programa Moticam 2.300® e posteriormente comparadas com Gyrodactylus sp previamente descritas em ciclídeos. Para análise molecular, o DNA genômico foi extraído com kit DNeasy Blood & Tissue Kit (Qiagen) e a região ITS1-5.8S-ITS2 do rRNA foi amplificada e sequenciada u