Resumo
A fertilidade é a característica mais importante a ser considerada no manejo reprodutivo de bovinos. A este respeito, o efeito individual do touro é conhecido por ser de extrema importância, uma vez que um touro pode fertilizar um grande número de fêmeas. Tal efeito pode ser ainda mais acentuado com o uso de sêmen criopreservado que permite que o material genético de touros superiores seja conservado e transmitido ao rebanho. No entanto, lotes subférteis podem levar a perdas significativas. Isto pode ocorrer pois alguns touros apresentam características espermáticas dentro dos valores preconizados para a análise rotineira, mas com baixo índice de fertilidade. Um fator importante que pode prejudicar a fertilidade é o estresse oxidativo. Visando evitar esse efeito, uma terapia antioxidante pode ser uma alternativa. No entanto, escolher o antioxidante certo é a chave para o sucesso da terapia. Portanto, o objetivo deste estudo foi avaliar a susceptibilidade de espermatozóides de touros com diferentes taxas de fertilidade a diferentes desafios oxidativos com o objetivo de detectar os mais deletérios. Para tanto, 20 palhetas de sêmen de touros altamente férteis (n = 10) e pouco férteis (n = 10) foram descongelados e submetidos a desafios oxidativos induzidos (ânion superóxido [O¯], peróxido de hidrogênio [HO], radical hidroxila [(OH¯] e o subproduto tóxico da peroxidação lipídica (malondialdeído [MDA]). A fertilidade foi determinada usando um índice baseado em 170.000 inseminações artificiais realizadas em 543 fazendas. As amostras foram avaliadas quanto ao subproduto da peroxidação lipídica (substâncias reativas com ácido tiobarbitúrico), cinética espermática (CASA), atividade mitocondrial (3'3 diamenobenzidina), estado oxidativo (CellROX verde e 2'-7 'diclorofluoresceína diacetato) , potencial mitocondrial (JC-1), integridade do DNA (SCSA), integridade das membranas plasmática (eosina-nigrosina) e acrossomal (Fast green/ rosa bengala). A análise estatística foi realizada utilizando o sistema SAS para Windows. Independentemente da fertilidade, a indução de hidroxila reduziu a atividade mitocondrial, enquanto a incubação com peróxido aumentou a atividade mitocondrial. No entanto, o grupo do peróxido foi altamente deletério para a cinética dos espermatozoides tanto em touros de alta quanto baixa fertilidade. O grupo de baixa fertilidade apresentou aumento da peroxidação nas amostras incubadas com peróxido de hidrogênio, enquanto o grupo de alta fertilidade foi mais suscetível ao radical hidroxila. Em conclusão, HO e OH¯ parecem ser as EROs mais deletérias para os espermatozoides bovinos, sendo que o grupo de baixa fertilidade é altamente afetado pelo peróxido de hidrogênio.
Fertility is the most important trait to consider in cattle reproductive management. In this regard, individual effect of bull is known to be of utmost importance as a bull can fertilize large numbers of females. Such effect can be even more pronounced when using cryopreserved semen, which allows the genetic material of superior bulls to be conserved and transmitted to the herd; However, sub fertile batches may lead to significant losses. This may occur due to bulls with seminal characteristics within the recommended values in the routine analysis but with lower fertility values. An important factor that may lead to impaired fertility is oxidative stress. Aiming to avoid this effect, an antioxidant therapy may be an alternative. However, choosing the right antioxidant is key to a successful therapy. Therefore, the aim of this study was to evaluate the susceptibility of bull spermatozoa with different fertility rates to different oxidative challenges aiming to detect the most deleterious. Toward this aim, 20 semen batches of highly fertile (n=10) and low fertile bulls (n=10)were thawed and submitted to induced oxidative challenges (superoxide anion [OH¯], hydrogen peroxide [HO], hydroxyl radical [OH¯] and the toxic by-product of lipid peroxidation (malondialdehyde [MDA])). Fertility was determined using an index based on 170,000 timed artificial inseminations in 543 farms. Samples were assessed for the quantification of the by-product of lipid peroxidation (thiobarbituric acid reative substances), sperm kinetics (CASA), mitochondrial activity (33 diamenobenzidine), oxidative status (CellROX green and 2'-7' dichlorofluorescein diacetate), mitochondrial potential (JC-1), DNA integrity (SCSA), and plasma membrane (eosin-nigrosin) and acrosome integrity (fast green/rose bengal). Statistical analysis was performed using the SAS system for windows. Regardless of fertility, hydroxyl induction reduced mitochondrial activity, whereas peroxide incubation increased mitochondrial activity. However, the peroxide group was highly deleterious to sperm kinetics. The low fertility group presented increased peroxidation in samples incubated with hydrogen peroxide whereas the high fertility group was more susceptive to hydroxyl. In conclusion, HO e OH¯ appears to be the most deleterious ROS to bovine sperm with the oxidative status of the low fertility group highly affected by the hydrogen peroxide.