Resumo
CASALI, R. Avaliação de métodos de inseminação, indução / sincronização da onda folícular em ovelhas e aditivos no congelamento de sêmen ovino. 2018. 81 p. Tese (Doutorado em Ciência Animal. Área: Produção Animal)Universidade do Estado de Santa Catarina. Programa de Pós-graduação em Ciência Animal, Lages, 2018. A ovinocultura encontra-se estagnada no aspecto econômico pela inexistência de uma produção constante e padronizada de carne e leite. Uma das causas é a dificuldade de execução da IA transcervical, em função da anatomia tortuosa da cérvix ovina, determinando que historicamente o sêmen ovino congelado esteja condicionado a inseminação por laparoscopia. Isto demonstra a necessidade de se buscar alternativas que possibilitem o emprego da IA cervical. Igualmente importante é a definição de um protocolo de sincronização que permita concentrar a ovulação em ovelhas, oportunizado o encontro dos gametas no momento mais adequado. Outro importante quesito para possibilitar o melhoramento genético dos ovinos, preconiza o aumento da eficiência da criopreservação do sêmen. Buscando superar estes obstáculos, quatro estudos foram conduzidos. O primeiro estudo comparou o método de inseminação transcervical com os métodos de inseminação cervical superficial e inseminação por laparoscópica. O segundo estudo avaliou o emprego de benzoato de estradiol (BE) no início de protocolo curto de sincronização, utilizando implantes de progesterona de terceiro uso. Neste estudo também foi avaliado o emprego de GnRH, como indutor de ovulação. O diagnóstico de gestação dos estudos 1 e 2 foi realizado 30 dias após a IA, por ultrassonografia. O terceiro estudo avaliou a dinâmica folicular de ovelhas submetidas ao protocolo do estudo 2, para um melhor entendimento dos resultados observados. O estudo 4 avaliou a qualidade do sêmen ovino congelado com a adição de trealose e da associação trealose + plasma seminal equino (PSLE), ao diluente. Foram avaliadas a motilidade e vigor no decorrer do teste de termo resistência (TTR), a integridade de membrana por teste hiposmótico, a migração espermática após swim up, além da morfologia espermática. Os dados obtidos foram submetidos à análise de variância e quando necessário a testes de comparação de médias, com nível de significância de 5%. Os resultados obtidos no estudo 1 demonstraram que quando o sêmen foi depositado no útero, proporcionou maior taxa de prenhez, o que foi alcançado em todas as fêmeas, somente por laparoscopia. Na inseminação transcervical, a taxa de prenhez foi intermediária (42,3%), entre a inseminação cervical e laparoscopia (36,0% e 50,2%; P < 0,05), sendo maior nas ovelhas em que o sêmen foi depositado a uma profundidade superior a 4 cm da cervix (60,0% versus 35,1%). Todavia, a deposição intrauterina foi possível em menos de 30% das ovelhas com inseminação transcervical. O estudo 2 demonstrou maior taxa de prenhez quando foi empregado o BE no início de protocolos curtos (com BE = 46,4%, sem BE = 40,4%). Já o emprego do GnRH como indutor de ovulação, não trouxe benefícios na taxa de prenhez (com GnRH 43,9% e sem GnRH 43%). Os dados do experimento 3 estão sendo avaliados, porém pode-se observar que o diâmetro médio do folículo pré-ovulatório foi 8,6 mm para o grupo sem BE e sem GnRh, 7,7 mm para o grupo sem BE com GnRH, 7,5 mm para o grupo com BE e sem GnRH e 7,3 mm para com BE e com GnRH. Em 12 das 40 ovelhas, foi observado cio durante o protocolo, sendo que em 10 o cio ocorreu nas primeiras 48 horas após a aplicação do BE, indicando um provável efeito colateral. O estudo 4 demonstrou que a trealose e a associação de trealose com PSLE melhora a motilidade e o vigor (controle = 36,5%/3, trealose+plasma= 42%/3,3 e trealose = 43,5%/3,3), a integridade de membrana (controle = 25,8%, trealose+plasma = 38,6% e trealose = 32,7%), bem como a migração espermática após swim up. Os experimentos realizados permitiram contribuir em quesitos para a obtenção de melhores taxas de prenhez em ovelhas. Por fim, o estudo possibilitou o avanço em alguns fatores que dificultam a difusão das biotécnicas de reprodução em ovinos.
CASALI, R. Evaluation of methods of insemination, induction / synchronization of the follicular wave in ewes and additives in the freezing of ovine semen. 2018. 81p. Doctoral Thesis in Animal Science. Area of concentration: Animal Production Santa Catarina State University. Animal Science Postgraduate Program, Lages, 2018. Sheep farming is economically stagnated by the lack of meat and milk production in a constant and standardized way. The difficulty to perform simplified transcervical AI, determined by tortuous cervix anatomy is one cause. This has determined that ovine frozen semen historically was conditioned to insemination by laparoscopy. This characterizes the need to search for alternatives that make possible the use of cervical AI. Also important is the definition of a protocol to synchronize the ovulation in ewes, facilitating the join of the gametes at the most appropriate time. Another important question to improve genetic advances in sheep farming is to increase the efficiency of ram semen cryopreservation. In order to overcome these obstacles, four studies were conducted. The first study compared the method of transcervical insemination with the superficial cervical insemination and laparoscopy methods. The second study evaluated the injection of 200 g of estradiol benzoate (BE) at the start of a short-term synchronization protocol, using a third-use progesterone implant. In this study the use of GnRH (50 g) was also evaluated at the time of insemination. The pregnancy diagnosis from studies 1 and 2 was performed 30 days after AI, by ultrasonography. The third study evaluated the follicular dynamics of ewes submitted to the same protocol of study 2, for a better understanding of the observed results. The study 4 evaluated the seminal quality of ovine semen frozen with the addition of trehalose or trehalose + equine seminal lyophilized plasma (PSLE) to the diluent. It was evaluated motility and vigor during the Thermal Resistent Test (TRT); membrane integrity by hyposmotic test; sperm migration after swim up, and sperm pathologies. The data were submitted to analysis of variance and, when necessary, to means comparison tests, with significance level of 5%. The results obtained in study 1 showed a higher pregnancy rate when the semen was deposited into the uterus, which was achieved in all females only by laparoscopy method. Transcervical insemination provides intermediate pregnancy rates (42.3%) between cervical insemination, and laparoscopy (36.0% and 50.2%, respectively P <0.05), being higher in ewes in which semen was deposited to a depth greater than 4 cm from the cervix (60.0% versus 35.1%). However, in transcervical method the intrauterine semen deposition was possible in less than 30% of the ewes. In addition, it is a more time consuming technique. Study 2 showed a higher pregnancy rate when BE was used at the start of short protocol (with BE = 46.4%, without BE = 40.4%). However, the use of GnRH as an ovulation inducer do not influenced pregnancy rates (with GnRH - 43.9% and without GnRH - 43%). The data from study 3 are being processed. Preliminary results show that mean diameter of the preovulatory follicles was 8.6 mm for group without BE and without GnRH; 7.7 mm for group without BE and with GnRH; 7.5 mm for group with BE and without GnRH and 7.3 mm for group with BE and with GnRH. In 12 out of the 40 ewes, estrus was observed during the protocol, and in 10 the estrus occurred within the first 48 hours after the BE application, indicating a probable side effect. The study 4 show that trehalose and the association of trehalose and PSLE improved motility and vigor (control = 36.5% / 3, trehalose + plasma = 42% / 3.3 and trehalose = 43.5% / 3.3); membrane integrity (control = 25.8%, trehalose + plasma = 38.6% and trehalose = 32.7%), as well as sperm migration after swim up. The experiments carried out allowed us to contribute in questions to obtain adequate pregnancy rates in ewes. Finally, all the studies opportunized knowledge advances in factors that difficult the diffusion of ovine reproductive biotechnologies.