Resumo
A produção de sêmen congelado nas centrais de reprodução é uma ferramenta importante para a pecuária brasileira, todavia o processo de coleta do sêmen pode influenciar nas características biológicas do ejaculado. Considerando a coleta para a inseminação artificial um procedimento não estéril, podendo promover vários gêneros de bactérias no ejaculado, o objetivo do trabalho foi avaliar os aspectos microbiológicos de amostras de sêmen bovino, in natura e congelado, assim como os diluidores utilizados na rotina em uma central de produção de sêmen. Para o presente trabalho foram utilizados cinco touros da raça nelore, e, destes, avaliados dois ejaculados de cada animal, sendo coletados no intervalo de duas semanas. As colheitas de sêmen foram realizadas pelo método de vagina artificial. Também foram avaliados dois diluidores, Triladyl® e BotuBov®. Realizou-se o experimento pelo método de semeadura em Ágar TSA por esgotamento, e após 24h, 48h e 72 horas foram realizadas análises para a identificação e contagem de colônias crescidas de UFC/mL. As colônias foram avaliadas por coloração pelo método de Gram e microscopia óptica (100x) e classificadas conforme morfologia. Os dados laboratoriais foram submetidos ao teste de Kolmogorov-Smirnov para a verificação de normalidade ou homocedasticidade. Observou-se o predomínio de Bastonetes Gram Negativos e Gram Positivos ao fim do experimento, bem como a presença de outros microrganismos em menores quantidades, sugerindo contaminação nas amostras. Houve presença de microrganismos tanto no sêmen in natura e congelado, quanto nos diluidores comerciais, mesmo seguindo protocolos microbiológicos para garantir a esterilidade das amostras Os resultados demonstram níveis aceitáveis de microrganismos no sêmen e nos diluidores; entretanto, estabelecer novas diretrizes no controle da qualidade microbiológica tende a ser uma linha de trabalho promissora na área da biotecnologia.
The production of frozen semen in the central specialized in animal reproduction is an important tool for the Brazilian livestock. However the semen collection process can influence the biological characteristics of the ejaculated. Considering the collection for artificial insemination as non-sterile procedure, it can promote several types of bacteria in the ejaculated semen. In this context, the aim of this study was to evaluate the microbiological aspects of bovine semen samples, fresh, frozen and thinners used in routine in a insemination center. For this study, it was used five bulls of the Nelore breed, and evaluated two ejaculated semen from each animal, being collected at two weeks interval. Semen samples were collected by the method of artificial vagina. There were also evaluated two thinners, Triladyl® and BotuBov®. Furthermore, the experiment was conducted by seeding method Agar TSA by exhaustion, and after 24 hours; 48h; and 72 hours analysis was performed for identification and counting of colonies grown in CFU / ml. The colonies were assessed by staining by the Gram method and optical microscopy (100x) and classified as its morphology. The laboratory data were submitted to the Kolmogorov-Smirnov test for normality or check homoscedasticity. There was a predominance of Rods Gram Negative and Gram Positive at the end of the experiment, as well as presence of other microorganisms in smaller amounts, suggesting contamination in the samples. There were microorganisms present in both fresh and frozen semen,and in commercial thinners, even following microbiological protocols to ensure sample sterility. The results demonstrate acceptable microorganismslevelsin semen and thinners; however, establishing new guidelines for microbiological quality control tends to be a promising biotechnology area.
Assuntos
Masculino , Animais , Bovinos , Controle de Qualidade , Crescimento Bacteriano , Preservação do Sêmen/veterinária , Sêmen/microbiologia , ReproduçãoResumo
A produção de sêmen congelado nas centrais de reprodução é uma ferramenta importante para a pecuária brasileira, todavia o processo de coleta do sêmen pode influenciar nas características biológicas do ejaculado. Considerando a coleta para a inseminação artificial um procedimento não estéril, podendo promover vários gêneros de bactérias no ejaculado, o objetivo do trabalho foi avaliar os aspectos microbiológicos de amostras de sêmen bovino, in natura e congelado, assim como os diluidores utilizados na rotina em uma central de produção de sêmen. Para o presente trabalho foram utilizados cinco touros da raça nelore, e, destes, avaliados dois ejaculados de cada animal, sendo coletados no intervalo de duas semanas. As colheitas de sêmen foram realizadas pelo método de vagina artificial. Também foram avaliados dois diluidores, Triladyl® e BotuBov®. Realizou-se o experimento pelo método de semeadura em Ágar TSA por esgotamento, e após 24h, 48h e 72 horas foram realizadas análises para a identificação e contagem de colônias crescidas de UFC/mL. As colônias foram avaliadas por coloração pelo método de Gram e microscopia óptica (100x) e classificadas conforme morfologia. Os dados laboratoriais foram submetidos ao teste de Kolmogorov-Smirnov para a verificação de normalidade ou homocedasticidade. Observou-se o predomínio de Bastonetes Gram Negativos e Gram Positivos ao fim do experimento, bem como a presença de outros microrganismos em menores quantidades, sugerindo contaminação nas amostras. Houve presença de microrganismos tanto no sêmen in natura e congelado, quanto nos diluidores comerciais, mesmo seguindo protocolos microbiológicos para garantir a esterilidade das amostras Os resultados demonstram níveis aceitáveis de microrganismos no sêmen e nos diluidores; entretanto, estabelecer novas diretrizes no controle da qualidade microbiológica tende a ser uma linha de trabalho promissora na área da biotecnologia.(AU)
The production of frozen semen in the central specialized in animal reproduction is an important tool for the Brazilian livestock. However the semen collection process can influence the biological characteristics of the ejaculated. Considering the collection for artificial insemination as non-sterile procedure, it can promote several types of bacteria in the ejaculated semen. In this context, the aim of this study was to evaluate the microbiological aspects of bovine semen samples, fresh, frozen and thinners used in routine in a insemination center. For this study, it was used five bulls of the Nelore breed, and evaluated two ejaculated semen from each animal, being collected at two weeks interval. Semen samples were collected by the method of artificial vagina. There were also evaluated two thinners, Triladyl® and BotuBov®. Furthermore, the experiment was conducted by seeding method Agar TSA by exhaustion, and after 24 hours; 48h; and 72 hours analysis was performed for identification and counting of colonies grown in CFU / ml. The colonies were assessed by staining by the Gram method and optical microscopy (100x) and classified as its morphology. The laboratory data were submitted to the Kolmogorov-Smirnov test for normality or check homoscedasticity. There was a predominance of Rods Gram Negative and Gram Positive at the end of the experiment, as well as presence of other microorganisms in smaller amounts, suggesting contamination in the samples. There were microorganisms present in both fresh and frozen semen,and in commercial thinners, even following microbiological protocols to ensure sample sterility. The results demonstrate acceptable microorganismslevelsin semen and thinners; however, establishing new guidelines for microbiological quality control tends to be a promising biotechnology area.(AU)