Elevada frequência de Aeromonas spp. e genes de virulência em cultivos de tilápia-do-nilo (Oreochromis niloticus) em tanques-rede, na região semiárida de Pernambuco, Brasil / High frequency of Aeromonas spp. and virulence genes in Nile Tilapia farms (Oreochromis niloticus) in semi-arid regions of Pernambuco, Brazil

Objetivou-se avaliar a ocorrência de Aeromonas spp. em peixes e amostras de água na região semiárida de Pernambuco e avaliar a frequência de aerolissina (aerA), enterotoxina citotóxica (act), enterotoxina citotônica (alt) e serina protease (ahp) nesses isolados. Foram analisados 70 peixes vivos e oito mortos com sinais clínicos de aeromoniose e 16 amostras de água. Aeromonas spp. foram identificadas por análises microbiológicas (provas bioquímicas) e molecular, usando-se primers específicos para a região 16S rRNA, e a distribuição dos quatro fatores de virulência (aerA, alt, act e ahp) foi investigada por ensaio de PCR. Cento e cinquenta e cinco (84,7%) isolados foram confirmados como Aeromonas spp. na análise molecular. Os genes de virulência mais frequentes foram act (53,55%) e aerA (51,61%). De acordo com o tipo de amostra, observou-se maior frequência do gene aerA (87,5% P=0,0474) em isolados de peixes mortos e a menor frequência do gene act (47,73% P=0,0002) em peixes vivos. Este estudo demonstrou a presença de aeromoniose no cultivo de tilápias em tanques-rede, nos municípios de Jatobá e Petrolândia, na região semiárida de Pernambuco. A detecção de aerA, act e alt pode ser utilizada na tipagem de virulência de Aeromonas spp.(AU)

The purpose of this study was to evaluate the occurrence of Aeromonas spp. from fishes and tilapia net-cage farm water in semi-arid regions of Pernambuco and to evaluate the frequency of the aerolysin (aerA), cytotoxic enterotoxin (act), cytotonic enterotoxin (alt) and serine protease (ahp) genes in Aeromonas isolates. 70 live and eight dead fish with aeromoniosis clinical signs and 16 water samples were analyzed. Aeromonas spp. isolated were identified by microbiological (biochemical evidence) and molecular analysis using specific primers for 16SrRNA region, while the distribution of four virulence factors, including aerA, alt, act and ahp, was investigated by PCR assay. One hundred fifty-five (84.7%) isolates were confirmed as Aeromonas spp. by molecular analysis. The most frequent virulence genes in isolates were act (53.55%) and aerA (51,61%). According to the kind of sample, the higher frequency of aerA gene (87.5% P= 0.0474) was observed in isolates from dead fish and the lowest frequency of act gene (47.73% P= 0.0002) from live fish. This study found the presence of aeromoniosis on tilapia farming in net-cages on Jatobá and Petrolândia counties in the semiarid Pernambuco region. The detection of aerA, act and alt can be used for virulence typing of Aeromonas spp. isolates.(AU)

Elevada frequência de Aeromonas spp. e genes de virulência em cultivos de tilápia-do-nilo (Oreochromis niloticus) em tanques-rede, na região semiárida de Pernambuco, Brasil / High frequency of Aeromonas spp. and virulence genes in Nile Tilapia farms (Oreochromis niloticus) in semi-arid regions of Pernambuco, Brazil

Objetivou-se avaliar a ocorrência de Aeromonas spp. em peixes e amostras de água na região semiárida de Pernambuco e avaliar a frequência de aerolissina (aerA), enterotoxina citotóxica (act), enterotoxina citotônica (alt) e serina protease (ahp) nesses isolados. Foram analisados 70 peixes vivos e oito mortos com sinais clínicos de aeromoniose e 16 amostras de água. Aeromonas spp. foram identificadas por análises microbiológicas (provas bioquímicas) e molecular, usando-se primers específicos para a região 16S rRNA, e a distribuição dos quatro fatores de virulência (aerA, alt, act e ahp) foi investigada por ensaio de PCR. Cento e cinquenta e cinco (84,7%) isolados foram confirmados como Aeromonas spp. na análise molecular. Os genes de virulência mais frequentes foram act (53,55%) e aerA (51,61%). De acordo com o tipo de amostra, observou-se maior frequência do gene aerA (87,5% P=0,0474) em isolados de peixes mortos e a menor frequência do gene act (47,73% P=0,0002) em peixes vivos. Este estudo demonstrou a presença de aeromoniose no cultivo de tilápias em tanques-rede, nos municípios de Jatobá e Petrolândia, na região semiárida de Pernambuco. A detecção de aerA, act e alt pode ser utilizada na tipagem de virulência de Aeromonas spp.(AU)

The purpose of this study was to evaluate the occurrence of Aeromonas spp. from fishes and tilapia net-cage farm water in semi-arid regions of Pernambuco and to evaluate the frequency of the aerolysin (aerA), cytotoxic enterotoxin (act), cytotonic enterotoxin (alt) and serine protease (ahp) genes in Aeromonas isolates. 70 live and eight dead fish with aeromoniosis clinical signs and 16 water samples were analyzed. Aeromonas spp. isolated were identified by microbiological (biochemical evidence) and molecular analysis using specific primers for 16SrRNA region, while the distribution of four virulence factors, including aerA, alt, act and ahp, was investigated by PCR assay. One hundred fifty-five (84.7%) isolates were confirmed as Aeromonas spp. by molecular analysis. The most frequent virulence genes in isolates were act (53.55%) and aerA (51,61%). According to the kind of sample, the higher frequency of aerA gene (87.5% P= 0.0474) was observed in isolates from dead fish and the lowest frequency of act gene (47.73% P= 0.0002) from live fish. This study found the presence of aeromoniosis on tilapia farming in net-cages on Jatobá and Petrolândia counties in the semiarid Pernambuco region. The detection of aerA, act and alt can be used for virulence typing of Aeromonas spp. isolates.(AU)

Contagem de células somáticas, composição e contagem bacteriana total do leite de propriedades leiteiras nos municípios de Miranda do Norte, Itapecurú­Mirim e Santa Rita, Maranhão / Somatic cell counts, composition and total bacterial counts of milk from dairy farms in the cities of Miranda do Norte, Itapecurú-Mirim and Santa Rita, Maranhão State, Brazil

Objetivou-se com este estudo avaliar a contagem de células somáticas (CCS), composição e contagem bacteriana total (CBT) sobre a qualidade do leite produzido em propriedades leiteiras de Miranda do Norte, Itapecurú-Mirim e Santa Rita, Estado do Maranhão. Verificou-se no período A que a média de CCS foi de 2.236.700 células/mL, 3,87 % de gordura, 3,19% de proteína, 4,36% de lactose, 12,25% de EST, 8,55% de ESD (%) e CBT de 677,90 UFC/mL, e no período B a média de CCS foi de 2.629.950 células/mL, 3,87% de gordura, 3,27% de proteína, 4,45% de lactose, 13,19% de EST, 8,74% de ESD e CBT de 8421,35 UFC/mL. Quanto à sazonalidade, as médias de CCS e CBT foram mais elevadas no período B do que no período A.

The aim of this study was to evaluate somatic cell counts (SCC), composition and total bacterial counts (TBC) of milk from dairy farms in Miranda do Norte, Itapecurú-Mirim and Santa Rita, all located in Brazilian Maranhão state. In the A period, it were verified means of 2,236,700 somatic cells/mL; 3.87% fat; 3.19% protein; 4.36% lactose; 12.25% (TS); 8.55% non-fat solids (NFS) and 677.90 clonies forming unit (CFU)/mL. In the winter period means were 2,629,950 cells/mL; 3.87% fat; 3.27% protein; 4.45% lactose; 13.19% TS; 8.74% NFS and 8,421,35 CFU/mL. Regarding sazonality, both SCC and TBC means were higher during the period B than during the period A.

CONTAGEM DE CÉLULAS SOMÁTICAS, COMPOSIÇÃO E CONTAGEM BACTERIANA TOTAL DO LEITE DE PROPRIEDADES LEITEIRAS NOS MUNICÍPIOS DE MIRANDA DO NORTE, ITAPECURÚ MIRIM E SANTA RITA, MARANHÃO

ABSTRACT The aim of this study was to evaluate somatic cell counts (SCC), composition and total bacterial counts (TBC) of milk from dairy farms in Miranda do Norte, Itapecurú-Mirim and Santa Rita, all located in Brazilian Maranhão state. In the A period, it were verified means of 2,236,700 somatic cells/mL; 3.87% fat; 3.19% protein; 4.36% lactose; 12.25% (TS); 8.55% non-fat solids (NFS) and 677.90 clonies forming unit (CFU)/mL. In the winter period means were 2,629,950 cells/mL; 3.87% fat; 3.27% protein; 4.45% lactose; 13.19% TS; 8.74% NFS and 8,421,35 CFU/mL. Regarding sazonality, both SCC and TBC means were higher during the period B than during the period A.

RESUMO Objetivou-se com este estudo avaliar a contagem de células somáticas (CCS), composição e contagem bacteriana total (CBT) sobre a qualidade do leite produzido em propriedades leiteiras de Miranda do Norte, Itapecurú-Mirim e Santa Rita, Estado do Maranhão. Verificou-se no período A que a média de CCS foi de 2.236.700 células/mL, 3,87 % de gordura, 3,19% de proteína, 4,36% de lactose, 12,25% de EST, 8,55% de ESD (%) e CBT de 677,90 UFC/mL, e no período B a média de CCS foi de 2.629.950 células/mL, 3,87% de gordura, 3,27% de proteína, 4,45% de lactose, 13,19% de EST, 8,74% de ESD e CBT de 8421,35 UFC/mL. Quanto à sazonalidade, as médias de CCS e CBT foram mais elevadas no período B do que no período A.

Qualidade microbiológica da água utilizada em fazendas leiteiras para limpeza das tetas de vacas e equipamentos leiteiros em três municípios do estado do maranhão

ABSTRACT The present study was aimed at evaluating the quality of the water used for the cleaning of dairy-cow teats and milking equipment on dairy farms located in the counties of Miranda do Norte, Itapecurú-Mirim and Santa Rita, in Maranhão State, Brazil, by using the MPN (most probably number) technique in the enumeration of total coliforms and Escherichia coli, according to the Colilert method. Samples of water were taken during summertime (August through December 2006, 20 samples) and wintertime (January through July 2007, 20 samples). Analysis showed that, in summertime, total coliforms ranged from absent to maximum contamination (> 2419.6 NMP) while E. coli ranged from absent to 344.1 NMP, and that, during wintertime, total coliforms ranged from absent to maximum contamination (> 2419.6 NMP) while E.coli ranged from absent to 770.1 NMP. During summertime, 90% and 75% of samples did not meet the requirements of the Brazilian Health Ministry regulation 518/2004 for total coliforms and E. coli, respectively. The same percentages in wintertime were 90% and 70%. The results clearly indicate the need for a sanitary education effort involving the rural population, coupled with the implementation of preventive measures, in order to improve the quality of the milk produced in the facilities studied.

RESUMO Objetivou-se com este estudo avaliar a qualidade da água utilizada na higienização do úbere dos animais, de equipamentos e utensílios de ordenha em propriedades leiteiras nos municípios de Miranda do Norte, Itapecurú-Mirim e Santa Rita, MA, através do NMP de coliformes totais e Escherichia coli, pelo método Colilert. Foram coletadas 20 amostras de água no período de verão (agosto a dezembro/2006) e 20 amostras no período de inverno (janeiro a julho/2007). Verificouse no verão que coliformes totais variaram de ausência a contaminação máxima tabelada (> 2419,6 NMP) e E. coli variou de ausência a 344,1 NMP e no inverno, coliformes totais variaram de ausência a contaminação máxima (> 2419,6 NMP) e E. coli variou de ausência a 770,1 NMP. No verão, 90% das amostras para coliformes totais e 75% de amostras para E. coli e no inverno, 90% das amostras para coliformes totais e 70% para E. coli estavam em desacordo com a portaria n° 518/2004 do Ministério da Saúde. É necessária a realização de um trabalho de educação sanitária junto à população do meio rural, a adoção de medidas preventivas, visando minimizar a ocorrência de enfermidades de veiculação hídrica, e melhoria da qualidade do leite produzido nas propriedades leiteiras.

Contagem de células somáticas e análises físico-químicas e microbiológicas do leite cru tipo c produzido na região agreste do estado de pernambuco

ABSTRACT This study was designed to evaluate the effects of somatic cell count (SCC) on milk quality from 13 dairy farms according to federal regulations of Ministério da Agricultura, Pecuária e Abastecimento (Agriculture Ministry of Brazil). Three hundred and one samples of type C milk were collected by hand and by milking machine. The samples were tested for physicochemical, cytological (SCC) and aspects. The results showed SCC ranging from 400,000 to 1,000,000 cells/mL; acidity varied from of 19.03 to 19.40ºD; total fat (3.34% to 3.56%); total solids (12.04% to 11.89%); solids not fat (8.53% to 8.17%); lactose (4.43% to a 4.48%); protein (3.06% to 3.12%) and the bacterial count (1.8 x 109 to 4.0 x 109mL). According to federal regulations no differences in physicochemical and cytological (SCC) patterns of milk were found in these samples, but a continuous education program must be installed in this area to provide milk quality.

RESUMO Objetivou-se com este estudo avaliar a influência da contagem de células somáticas (CCS) sobre a qualidade do leite produzido em 13 propriedades rurais do Estado de Pernambuco. Este trabalho foi realizado tendo em vista a instrução normativa nº 51, publicada pelo Ministério da Agricultura, Pecuária e Abastecimento (MAPA), por intermédio do Departamento de Inspeção de Produtos de Origem Animal (DIPOA). Foram coletadas 301 amostras de leite cru tipo C de animais em lactação com sistema de ordenha manual e mecânica. O leite coletado foi submetido a testes físicoquímicos, microbiológicos e à contagem de células somáticas (CCS). Os resultados foram comparados aos padrões estabelecidos pela Instrução Normativa nº 51. Das 301 amostras analisadas, verificou-se que as médias para CCS variaram de 400.000 a 1.000.000 células/mL, a acidez (Dº) de 19,03 a 19,40, a gordura (%) de 3,34 a 3,56, o EST(%) de 12,04 a 11,89, ESD (%) 8,53 a 8,17, a lactose (%) de 4,43 a 4,48; proteína (%) de 3,06 a 3,12 e contagem bacteriana total de 1,8 x 109 a 4,0 x 109 mL. A maioria das amostras encontravam-se dentro dos padrões exigidos pela instrução normativa nº 51, contudo há necessidade de revisão dos procedimento na produção leiteira e introdução de um programa de educação sanitária na região.

Perfil de sensibilidade antimicrobiana in vitro de staphylococcus coagulase positivos isolados de leite de vacas com mastite no agreste do estado de pernambuco / Profile of in vitro antimicrobial susceptibility of coagulase-positive staphylococcus isolated from cows' milk with mastitis in the rural area of the state of pernambuco

RESUMO A mastite, inflamação da glândula mamária, é uma das principais doenças da bovinocultura de leite tendo como principal agente infeccioso bactérias do gênero Staphylococcus spp. que comumente apresentam resistência aos antibióticos utilizados no tratamento da mastite. Desta forma, objetivouse com este estudo traçar o perfil de sensibilidade antimicrobiana de 59 cepas de estafilococos coagulase positivo, isolados de amostras de leite de vaca com mastite. Os testes de sensibilidade antimicrobiana foram realizados através da técnica de difusão com discos para 13 antibióticos, verificando-se que os mais eficazes foram a vancomicina com 100% de sensibilidade e a norfloxacina com 96%. O menos eficaz foi a penicilina com 20% de sensibilidade. Em alguns municípios estudados as cepas de estafilococos apresentaram resistência múltipla para 6 a 9 antibióticos simultaneamente. Conclui-se que a análise da sensibilidade antimicrobiana in vitro deve ser considerada pelos proprietários antes da tomada de decisões para a escolha do tratamento adequado para reduzir perdas na produção de leite e em programas de controle da doença em questão.

ABSTRACT Mastitis, inflammation of the mammary gland, is one of the main diseases of milk cattle, having as the main infectious agent the Staphylococcus spp. bacteria, which commonly presents resistance to the antibiotics used in the treatment of mastitis. For this reason, this study was aimed at drawing the profile of anti-microbial sensibility of 59 strains of coagulase-positive staphylococcus, isolated from samples of cow milk with mastitis. The tests of anti-microbial sensibility were accomplished through a diffusion technique with disks for 13 antibiotics, it being verified that the most effective were vancomycin with 100% of susceptibility and norfloxacin with 96%. The least effective was penicillin with 20% of susceptibility. In some of the studied coutries the staphylococcus strains presented multiple resistance to from 6 to 9 antibiotics simultaneously. The conclusion is that the analysis of the anti-microbial susceptibility in vitro should be considered by the proprietors before taking decisions about the choice of the appropriate treatment in order to reduce losses in the production of milk and in control programs of the disease in question.