Effect of mesenchymal stem cells on movement and urination of rats with spinal cord injury / Efeitos da aplicação das células-tronco mesenquimais sobre a locomoção e micção de ratos submetidos à lesão medular

Cell therapy has frequently been reported as a possible treatment for spinal trauma in humans and animals; however, without pharmacologically curative action on damage from the primary lesion. In this study, we evaluated the effect of administering human adipose-derived stem cells (hADSC) in rats after spinal cord injury. The hADSC were used between the third and fifth passages and a proportionof cells were transduced for screening in vivo after transplantation. Spinal cord injury was inducedwith a Fogarty catheter no. 3 inserted into the epidural space with a cuff located at T8 and filled with 80-μL saline for 5 min. The control group A (n = 12) received culture medium (50 μL) and group B (n = 12) received hADSC (1.2 × 106) at 7 and 14 days post-injury, in the tail vein. Emptying of thebladder by massage was performed daily for 3 months. Evaluation of functional motor activity was performed daily until 3 months post-injury using the Basso-Beattie-Bresnahan scale. Subsequently, the animals were euthanized and histological analysis of the urinary bladder and spinal cord was performed. Bioluminescence analysis revealed hADSC at the application site and lungs. There was improvement of urinary bladder function in 83.3% animals in group B and 16.66% animals in group A. The analysis of functional motor activity and histology of the spinal cord and urinary bladder demonstrated nosignificant difference between groups A and B. The results indicate that transplanted hADSC improved urinary function via a telecrine mechanism, namely action at a distance.(AU)

A terapia celular tem sido reportada como possibilidade de tratamento para os traumas medulares, frequentes em pessoas e em animais, e que não apresentam cura farmacológica para danos advindos da lesão primária. Foram avaliados os efeitos da aplicação de células-tronco derivadas do tecido adiposo humano (hADSC) em ratos Wistar após lesão medular. As hADSC foram cultivadas, utilizadas entre aterceira e quinta passagens e parte delas foi transduzida para o rastreamento in vivo após o transplante. A lesão medular foi realizada com cateter de Fogarty nº. 3, introduzido no espaço epidural, com cuff localizado em T8 e preenchido com 80 μL de solução salina, por 5 minutos. Os animais do grupocontrole (A, n=12) receberam aplicações de meio de cultura (50 μL) e o grupo B (n=12) recebeu duas aplicações de hADSC (1,2 x 106), sete e 14 dias pós-lesão, ambas na veia da cauda. O esvaziamento vesical, por massagem, foi efetuado diariamente, durante três meses. As avaliações motoras foramrepetidas, diariamente, até três meses pós-lesão, utilizando a escala Basso-Beattie-Bresneham. Após este período os animais foram submetidos à eutanásia e foram realizadas análises histológicas de bexigaurinária e medula espinhal. As análises de bioluminescência revelaram hADSC no local da aplicação e nos pulmões. Houve melhora da função da bexiga urinária em 83,3% dos animais do grupo B e 16,66% dos animais do grupo A. A análise das avaliações motoras e histológicas das medulas espinhais e bexigas urinárias não demonstrou diferenças significativas entre os grupos A e B. Os resultados indicam que as hADSC transplantadas influenciaram a micção, de forma benéfica, por um mecanismo de açãoà distância, telécrino.(AU)

Effect of mesenchymal stem cells on movement and urination of rats with spinal cord injury / Efeitos da aplicação das células-tronco mesenquimais sobre a locomoção e micção de ratos submetidos à lesão medular

Cell therapy has frequently been reported as a possible treatment for spinal trauma in humans and animals; however, without pharmacologically curative action on damage from the primary lesion. In this study, we evaluated the effect of administering human adipose-derived stem cells (hADSC) in rats after spinal cord injury. The hADSC were used between the third and fifth passages and a proportionof cells were transduced for screening in vivo after transplantation. Spinal cord injury was inducedwith a Fogarty catheter no. 3 inserted into the epidural space with a cuff located at T8 and filled with 80-μL saline for 5 min. The control group A (n = 12) received culture medium (50 μL) and group B (n = 12) received hADSC (1.2 × 106) at 7 and 14 days post-injury, in the tail vein. Emptying of thebladder by massage was performed daily for 3 months. Evaluation of functional motor activity was performed daily until 3 months post-injury using the Basso-Beattie-Bresnahan scale. Subsequently, the animals were euthanized and histological analysis of the urinary bladder and spinal cord was performed. Bioluminescence analysis revealed hADSC at the application site and lungs. There was improvement of urinary bladder function in 83.3% animals in group B and 16.66% animals in group A. The analysis of functional motor activity and histology of the spinal cord and urinary bladder demonstrated nosignificant difference between groups A and B. The results indicate that transplanted hADSC improved urinary function via a telecrine mechanism, namely action at a distance.

A terapia celular tem sido reportada como possibilidade de tratamento para os traumas medulares, frequentes em pessoas e em animais, e que não apresentam cura farmacológica para danos advindos da lesão primária. Foram avaliados os efeitos da aplicação de células-tronco derivadas do tecido adiposo humano (hADSC) em ratos Wistar após lesão medular. As hADSC foram cultivadas, utilizadas entre aterceira e quinta passagens e parte delas foi transduzida para o rastreamento in vivo após o transplante. A lesão medular foi realizada com cateter de Fogarty nº. 3, introduzido no espaço epidural, com cuff localizado em T8 e preenchido com 80 μL de solução salina, por 5 minutos. Os animais do grupocontrole (A, n=12) receberam aplicações de meio de cultura (50 μL) e o grupo B (n=12) recebeu duas aplicações de hADSC (1,2 x 106), sete e 14 dias pós-lesão, ambas na veia da cauda. O esvaziamento vesical, por massagem, foi efetuado diariamente, durante três meses. As avaliações motoras foramrepetidas, diariamente, até três meses pós-lesão, utilizando a escala Basso-Beattie-Bresneham. Após este período os animais foram submetidos à eutanásia e foram realizadas análises histológicas de bexigaurinária e medula espinhal. As análises de bioluminescência revelaram hADSC no local da aplicação e nos pulmões. Houve melhora da função da bexiga urinária em 83,3% dos animais do grupo B e 16,66% dos animais do grupo A. A análise das avaliações motoras e histológicas das medulas espinhais e bexigas urinárias não demonstrou diferenças significativas entre os grupos A e B. Os resultados indicam que as hADSC transplantadas influenciaram a micção, de forma benéfica, por um mecanismo de açãoà distância, telécrino.

Aplicação intravenosa de células-tronco mesenquimais em ratos wistar submetidos à lesão raquimedular

A lesão raquimedular (LRM) tem consequências irreversíveis e sua abordagem é desafiadora para a Medicina e Medicina Veterinária. Depois do dano causado à medula espinal, não há restauração da função neurológica no segmento afetado. Os tratamentos incluem estabilização mecânica, descompressão e reabilitação dos pacientes. Um tratamento alternativo é o transplante celular com células-tronco derivadas de tecido adiposo (CTDAs). Estas células são facilmente obtidas, de alta capacidade proliferativa, e sua frequência no tecido é de 0,5%. Seu mecanismo de ação não é claro, mas parece que sinalizações parácrinas podem promover a reparação dos tecidos. O objetivo deste estudo foi avaliar a capacidade de regeneração da lesão medular em ratos submetidos à terapia celular com células-tronco derivadas de tecido adiposo humano (hCTDAs). A lesão da medula espinal dos ratos foi realizada por meio da compressão da região toracolombar (T8 - T9) com um cateter Forgaty No. 3, mantido durante cinco minutos. O cuff do cateter foi insuflado utilizando 80 ?L de solução salina. Os animais foram separados em dois grupos de 12 indivíduos cada: grupo A, grupo controle, que recebeu apenas meio de cultura; grupo B foram transplantados com hCTDAs. O transplante foi realizado no sétimo dia e décimo quarto dia após a lesão medular e 1,2 x106 células foram injetadas via punção da veia da cauda. A atividade locomotora dos animais foi avaliada usando a escala BBB desenvolvida por Basso et al, 1995. A avaliação locomotora após contusão da medula espinhal foi realizada em campo aberto a cada 15 dias, durante os 90 dias, num total de 6 avaliações. Após três meses da lesão, os animais foram eutanasiados, a medula espinhal e a bexiga foram removidos para avaliação histológica com as colorações hematoxilina-eosina (HE) e tricrômico de Masson (TM) (somente para a bexiga). Não houve mudanças nas pontuações para os grupos A e B (escore 0 na escala BBB, nenhum movimento dos membros inferiores). Observou-se melhoria clínica na função da bexiga urinária no grupo B, e 83,33% dos animais não apresentavam qualquer retenção / incontinência urinária, em média 8 dias após a segunda aplicação de hCTDAs. A análise histológica da medula não demonstrou diferença significativa entre os grupos A e B. Em relação à avaliação histológica da bexiga, não se observou diferença histologica entre os grupos A e B. Também não se evidenciou diferença entre os grupos em relação à bexiga normal. Foi realizada em dois animais, avaliação quantitativa por meio da bioluminescência, com o objetivo de identificar a localização e intensidade das hCTDAs após as aplicações, in vivo. Foi observada maior intensidade de sinal na segunda aplicação de hCTDAs e a localização das células foi identificada no local de aplicação e nos pulmões. Os presentes resultados indicam que o transplante de hCTDAs em ratos com LRM pode ser associado a uma melhora na retenção / incontinência urinária