Effects of the cryopreservation process on dog sperm integrity

Sperm cryopreservation has become an indispensable tool in reproductive biology. However, frozen/thawed semen has a short lifespan due to loss of sperm cell integrity. To better understand which sperm cell structures are compromised by the cryopreservation process and apoptosis markers, the sperm of five healthy mature dogs was analyzed in this study. Analysis was performed after collection, cooling, and thawing via computer assisted sperm analyzer (CASA) and evaluation of membrane fluidity and permeability, phosphatidylserine translocation (Annexin V), membrane integrity, mitochondrial membrane potential, membrane lipid peroxidation (LPO) and activity of the apoptotic markers caspases 3 and 7 by flow cytometry. Cryopreservation decreased total and progressive motility and the percentage of rapid sperm (P < 0.01). Damage to sperm cells was confirmed by Annexin V (P <0.01), indicating that capacitation-like changes were induced by the cryopreservation procedures. An increase in sperm membrane fluidity was also noted in frozen/thawed samples (P < 0.01). Plasma and acrosomal cell membranes were affected (P < 0.01), with decreases in the subpopulation displaying high membrane potential (P < 0.01). Membrane LPO was increased in thawed sperm compared to cooled sperm (P < 0.05) but was not different from that in fresh sperm. No differences were observed in caspase 3 and 7 activity after cooling, freezing, or thawing. In conclusion, total and progressive motility, plasma membrane integrity and mitochondrial membrane potential suffered from the deleterious effects caused by cryopreservation, unlike the activity of caspases that remained stable during the freezing process.

Effects of the cryopreservation process on dog sperm integrity

Sperm cryopreservation has become an indispensable tool in reproductive biology. However, frozen/thawed semen has a short lifespan due to loss of sperm cell integrity. To better understand which sperm cell structures are compromised by the cryopreservation process and apoptosis markers, the sperm of five healthy mature dogs was analyzed in this study. Analysis was performed after collection, cooling, and thawing via computer assisted sperm analyzer (CASA) and evaluation of membrane fluidity and permeability, phosphatidylserine translocation (Annexin V), membrane integrity, mitochondrial membrane potential, membrane lipid peroxidation (LPO) and activity of the apoptotic markers caspases 3 and 7 by flow cytometry. Cryopreservation decreased total and progressive motility and the percentage of rapid sperm (P < 0.01). Damage to sperm cells was confirmed by Annexin V (P <0.01), indicating that capacitation-like changes were induced by the cryopreservation procedures. An increase in sperm membrane fluidity was also noted in frozen/thawed samples (P < 0.01). Plasma and acrosomal cell membranes were affected (P < 0.01), with decreases in the subpopulation displaying high membrane potential (P < 0.01). Membrane LPO was increased in thawed sperm compared to cooled sperm (P < 0.05) but was not different from that in fresh sperm. No differences were observed in caspase 3 and 7 activity after cooling, freezing, or thawing. In conclusion, total and progressive motility, plasma membrane integrity and mitochondrial membrane potential suffered from the deleterious effects caused by cryopreservation, unlike the activity of caspases that remained stable during the freezing process.(AU)

Centrifugación en gradiente de densidad: alternativa para sexar espermatozoides caninos? / Density gradient centrifugation: alternative for sexing sperm in dogs? / Centrifugação em gradiente de densidade: alternativa para sexagem espermática em cães?

La evolución de técnicas para la separación del sexo de esperma en los últimos años ha permitido avances significativos, pero todavía no hay método que ha sido utilizado con éxito en perros. Apear de la citometría de flujo ser un método eficaz para el sexado de esperma, en perros puede ser considerado difícil de implementar en vista del alto costo de la aplicación de técnica y la recuperación baja de espermatozoides después de la separación. En contraste, la centrifugación en gradiente de densidad también puede ser utilizado para la separación de espermatozoides en los perros. Esta técnica también se basa en la diferencia de contenido en DNA entre los espermatozoides portadores de los cromosomas X e Y. Separación de esperma puede ser confirmada por diversos métodos tales como citometría de flujo, hibridación in situ fluorescente (FISH), coloración con quinacrina mostaza y PCR. El objetivo de esta revisión es abordar el centrifugacion en gradiente de densidad como alternativa a la separación del sexo de espermatozoides en los perros.(AU)

The technical progress concerning sperm sexing in recent years has enabled significant advances, but still none method was used successfully in dogs. Despite the flow cytometry to be an effective method for sperm sexing, in dogs it can be considered difficult to implement in view of high cost of application of the technique and low sperm recovery after separation. In contrast, density gradient centrifugation can also be used for separating sperm in dogs. This technique is also based on the DNA content difference between sperm with chromosomes X and Y. Sperm separation can be confirmed by various methods such as flow cytometry, fluorescence in situ hybridization (FISH) staining with quinacrine mustard and PCR. The objective of this review to address the density gradient centrifugation as an alternative to sperm sexing in dogs.(AU)

A evolução das técnicas de sexagem espermática nos últimos anos permitiu avanços significativos, mas ainda nenhum método foi empregado com sucesso na espécie canina. Apesar da citometria de fluxo ser um método eficiente para sexagem espermática, nos cães pode ser considerada de difícil aplicação, em vista do alto custo da aplicação da técnica e da baixa recuperação espermática após a separação. Em contrapartida, a centrifugação em gradiente de densidade também pode ser utilizada para separação espermática em cães. Essa técnica também se baseia na diferença do conteúdo de DNA entre os espermatozoides portadores dos cromossomos X e Y. A separação espermática pode ser confirmada por diferentes métodos, como citometria de fluxo, hibridização in situ fluorescente (FISH), coloração com quinacrina mostarda e PCR. Objetivou-se, com esta revisão abordar a centrifugação em gradiente de densidade como uma alternativa a sexagem espermática em cães.(AU)

Centrifugación en gradiente de densidad: alternativa para sexar espermatozoides caninos? / Density gradient centrifugation: alternative for sexing sperm in dogs? / Centrifugação em gradiente de densidade: alternativa para sexagem espermática em cães?

La evolución de técnicas para la separación del sexo de esperma en los últimos años ha permitido avances significativos, pero todavía no hay método que ha sido utilizado con éxito en perros. Apear de la citometría de flujo ser un método eficaz para el sexado de esperma, en perros puede ser considerado difícil de implementar en vista del alto costo de la aplicación de técnica y la recuperación baja de espermatozoides después de la separación. En contraste, la centrifugación en gradiente de densidad también puede ser utilizado para la separación de espermatozoides en los perros. Esta técnica también se basa en la diferencia de contenido en DNA entre los espermatozoides portadores de los cromosomas X e Y. Separación de esperma puede ser confirmada por diversos métodos tales como citometría de flujo, hibridación in situ fluorescente (FISH), coloración con quinacrina mostaza y PCR. El objetivo de esta revisión es abordar el centrifugacion en gradiente de densidad como alternativa a la separación del sexo de espermatozoides en los perros.

The technical progress concerning sperm sexing in recent years has enabled significant advances, but still none method was used successfully in dogs. Despite the flow cytometry to be an effective method for sperm sexing, in dogs it can be considered difficult to implement in view of high cost of application of the technique and low sperm recovery after separation. In contrast, density gradient centrifugation can also be used for separating sperm in dogs. This technique is also based on the DNA content difference between sperm with chromosomes X and Y. Sperm separation can be confirmed by various methods such as flow cytometry, fluorescence in situ hybridization (FISH) staining with quinacrine mustard and PCR. The objective of this review to address the density gradient centrifugation as an alternative to sperm sexing in dogs.

A evolução das técnicas de sexagem espermática nos últimos anos permitiu avanços significativos, mas ainda nenhum método foi empregado com sucesso na espécie canina. Apesar da citometria de fluxo ser um método eficiente para sexagem espermática, nos cães pode ser considerada de difícil aplicação, em vista do alto custo da aplicação da técnica e da baixa recuperação espermática após a separação. Em contrapartida, a centrifugação em gradiente de densidade também pode ser utilizada para separação espermática em cães. Essa técnica também se baseia na diferença do conteúdo de DNA entre os espermatozoides portadores dos cromossomos X e Y. A separação espermática pode ser confirmada por diferentes métodos, como citometria de fluxo, hibridização in situ fluorescente (FISH), coloração com quinacrina mostarda e PCR. Objetivou-se, com esta revisão abordar a centrifugação em gradiente de densidade como uma alternativa a sexagem espermática em cães.

Estudio sobre las diferentes técnicas de sexaje de espermatozoides / Study of different spermatozoa sexing techniques / Estudo sobre as diferentes técnicas de sexagem de espermatozoides

El interés en la selección de individuos de un determinado sexo data de la antigua Grecia; sin embargo, estudios sobre métodos eficaces para la selección espermática son relativamente nuevos. Saber cuál será el sexo de la futura progenie trae al mercado un gran potencial para el mejoramiento genético. Esta selección del sexo es realizada con diversos enfoques; en bovinos para la optimización de animales de sexo deseado, en humanos evitando enfermedades ligadas al sexo y en animales salvajes en cautiverio en la selección del sexo. Con el adviento de las tecnologías como la inseminación artificial y la transferencia de embriones, el sexaje comenzó a tener relevancia en el escenario actual y el costo beneficio pasó a ser significativo. Varias técnicas han sido desarrolladas con el objetivo de mejorarla la pre-selección del sexo, la inmunoseparación, gradientes de densidad y citometria de flujo son algunas de ellas, sin embargo, en la actualidad, la citometria de flujo es la técnica con mejores resultados y la única que permite comercialización de semen sexado. No obstante, el proceso de sexaje aun demanda muchos estudios, debido a los daños ocasionados a los espermatozoides durante el proceso de separación, comprometiendo las tasas de la fertilidad. Esta revisión de literatura viene como una herramienta para el entendimiento del proceso de sexaje y las técnicas utilizadas.(AU)

The interest in sex selection of a particular individuals comes from the ancient greeks, but the study on effective methods of this selection is relatively new. Know future progeny sex brings to market great potential for genetic improvement. Sex selection contributes to cattle for animal optimization of desired sex, to human, preventing diseases sex-linked, or even sex selection of wild animals in captivity. With the biotechnologies advent such as artificial insemination and embryo transfer, sexing begins to have relevance in current scenario and benefit costs will be significant. Several techniques have been developed aiming the best pre-selection of sex, such as immuno separation, density gradient, and flow cytometry that in current world scenario is the technique with best results and only one that allows comercialization of sexed semen. Sexing processes still requiremany studies due to damage to sperm cells during the separation process, compromising fertility results. This literature review comes as a tool for understanding the sexing process and techniques used.(AU)

O interesse na seleção de indivíduos de determinado sexo vem dos antigos gregos, mas o estudo sobre métodos eficazes desta seleção é relativamente novo. Saber qual será o sexo da futura progenie traz ao mercado um grande potencial para o melhoramento genético, A seleção do sexo contribui na bovinocultura para a otimização de animais do sexo desejado, em humanos evitando doenças ligadas ao sexo, ou mesmo na seleção de sexo em animais selvagens de cativeiro. Com o advento das biotecnologias, como a inseminação artificial e transferência de embriões, a sexagem começa a ter relevância no cenário atual e o custo benefício passa a ser significativo. Várias técnicas foram desenvolvidas visando a melhor pré-seleção de sexo, tal como a imuno separação, gradiente de densidade, e a citometria de fluxo que, no atual cenário mundial, é a técnica com os melhores resultados e a única que permite a comercialização do sêmen sexado. Os processos de sexagem ainda demandam muitos estudos, devido aos danos causados aos espermatozoides durante o processo de separação, comprometendo os resultados de fertilidade. Essa revisão de literatura vem como uma ferramenta para o entendimento do processo de sexagem e as técnicas utilizadas.(AU)

Estudio sobre las diferentes técnicas de sexaje de espermatozoides / Study of different spermatozoa sexing techniques / Estudo sobre as diferentes técnicas de sexagem de espermatozoides

El interés en la selección de individuos de un determinado sexo data de la antigua Grecia; sin embargo, estudios sobre métodos eficaces para la selección espermática son relativamente nuevos. Saber cuál será el sexo de la futura progenie trae al mercado un gran potencial para el mejoramiento genético. Esta selección del sexo es realizada con diversos enfoques; en bovinos para la optimización de animales de sexo deseado, en humanos evitando enfermedades ligadas al sexo y en animales salvajes en cautiverio en la selección del sexo. Con el adviento de las tecnologías como la inseminación artificial y la transferencia de embriones, el sexaje comenzó a tener relevancia en el escenario actual y el costo beneficio pasó a ser significativo. Varias técnicas han sido desarrolladas con el objetivo de mejorarla la pre-selección del sexo, la inmunoseparación, gradientes de densidad y citometria de flujo son algunas de ellas, sin embargo, en la actualidad, la citometria de flujo es la técnica con mejores resultados y la única que permite comercialización de semen sexado. No obstante, el proceso de sexaje aun demanda muchos estudios, debido a los daños ocasionados a los espermatozoides durante el proceso de separación, comprometiendo las tasas de la fertilidad. Esta revisión de literatura viene como una herramienta para el entendimiento del proceso de sexaje y las técnicas utilizadas.

The interest in sex selection of a particular individuals comes from the ancient greeks, but the study on effective methods of this selection is relatively new. Know future progeny sex brings to market great potential for genetic improvement. Sex selection contributes to cattle for animal optimization of desired sex, to human, preventing diseases sex-linked, or even sex selection of wild animals in captivity. With the biotechnologies advent such as artificial insemination and embryo transfer, sexing begins to have relevance in current scenario and benefit costs will be significant. Several techniques have been developed aiming the best pre-selection of sex, such as immuno separation, density gradient, and flow cytometry that in current world scenario is the technique with best results and only one that allows comercialization of sexed semen. Sexing processes still requiremany studies due to damage to sperm cells during the separation process, compromising fertility results. This literature review comes as a tool for understanding the sexing process and techniques used.

O interesse na seleção de indivíduos de determinado sexo vem dos antigos gregos, mas o estudo sobre métodos eficazes desta seleção é relativamente novo. Saber qual será o sexo da futura progenie traz ao mercado um grande potencial para o melhoramento genético, A seleção do sexo contribui na bovinocultura para a otimização de animais do sexo desejado, em humanos evitando doenças ligadas ao sexo, ou mesmo na seleção de sexo em animais selvagens de cativeiro. Com o advento das biotecnologias, como a inseminação artificial e transferência de embriões, a sexagem começa a ter relevância no cenário atual e o custo benefício passa a ser significativo. Várias técnicas foram desenvolvidas visando a melhor pré-seleção de sexo, tal como a imuno separação, gradiente de densidade, e a citometria de fluxo que, no atual cenário mundial, é a técnica com os melhores resultados e a única que permite a comercialização do sêmen sexado. Os processos de sexagem ainda demandam muitos estudos, devido aos danos causados aos espermatozoides durante o processo de separação, comprometendo os resultados de fertilidade. Essa revisão de literatura vem como uma ferramenta para o entendimento do processo de sexagem e as técnicas utilizadas.

Capacidade De Ligação Dos Espermatozoides Do Epidídimo De Equinos Às Células Da Tuba Uterina Cultivadas In Vitro Revisão De Literatura / Capacity Of Binding From Equine Epididymis Spermatozoa To The Oviduct Cells Cultured In Vitro - Review Of The Literature / Capacidadad De Ligación De Los Espermatozoides Del Epidídimo De Equinos A Células Del Oviducto Uterino Cultivados In Vitro Revisión De Literatura

Muitas biotecnologias estão sendo desenvolvidas visando a conservação do material genético de garanhões de alto valor zootécnico. Dentre estas pode-se destacar a colheita de espermatozoides do epidídimo de animais que sofreram algum trauma ou enfermidade que impossibilitem a colheita do sêmen, óbito ou eutanásia. Porém essas células espermáticas não entram em contato com o plasma seminal, importante por conter proteínas que participam de processos relacionados à proteção e ligação dos espermatozoides aos reservatórios espermáticos na tuba uterina. Neste sentido, sugere-se que ocorram alterações bioquímicas nas células espermáticas do epidídimo. Objetivou-se com esta revisão, estudar as principais diferenças morfofuncionais entre os espermatozoides provenientes do epidídimo e do ejaculado de equinos.(AU)

Several biotechnologies are being developed aiming genetic material conservation of stallions with high zootechnical value, as we can highlight the harvest epididymiss sperm of animals who suffered trauma or illness that makes impossible the semen collection, death or euthanasia. However these sperm cells do not get in touch with seminal plasma, important whereas it has proteins that participate in processes related to the protection and binding of sperm to the sperm reservoir in the oviduct. In this sense, it suggests that there are significant biochemical changes in epididymal sperm. This review aimed to study the main morphological and functional differences between the sperm from the epididymis and ejaculated in horses.(AU)

Muchas biotecnologías desarrolladas actualmente son direccionadas a la conservación del material genético de garañones de alto valor zootécnico. Dentro de estas se destacan la colecta de espermatozoides de epidídimo de animales que sufrieron algún trauma o enfermedad que imposibilita la colecta de semen, y de animales que murieron o fueron eutanasiados. Las células espermáticas del epidídimo no entran en contacto con el plasma seminal, importante porque contiene proteínas que participan en procesos relacionados con la protección y ligación de los espermatozoides al reservorio espermático en el oviducto uterino. En este sentido, se sugiere que existen importantes alteraciones bioquímicas en las células espermáticas del epidídimo, por tanto el motivo de esta revisión es estudiar las principales diferencias morfo funcionales entre los espermatozoides provenientes del epidídimo y los provenientes del eyaculado en caballos.(AU)

Capacidade De Ligação Dos Espermatozoides Do Epidídimo De Equinos Às Células Da Tuba Uterina Cultivadas In Vitro Revisão De Literatura / Capacity Of Binding From Equine Epididymis Spermatozoa To The Oviduct Cells Cultured In Vitro - Review Of The Literature / Capacidadad De Ligación De Los Espermatozoides Del Epidídimo De Equinos A Células Del Oviducto Uterino Cultivados In Vitro – Revisión De Literatura

Muitas biotecnologias estão sendo desenvolvidas visando a conservação do material genético de garanhões de alto valor zootécnico. Dentre estas pode-se destacar a colheita de espermatozoides do epidídimo de animais que sofreram algum trauma ou enfermidade que impossibilitem a colheita do sêmen, óbito ou eutanásia. Porém essas células espermáticas não entram em contato com o plasma seminal, importante por conter proteínas que participam de processos relacionados à proteção e ligação dos espermatozoides aos reservatórios espermáticos na tuba uterina. Neste sentido, sugere-se que ocorram alterações bioquímicas nas células espermáticas do epidídimo. Objetivou-se com esta revisão, estudar as principais diferenças morfofuncionais entre os espermatozoides provenientes do epidídimo e do ejaculado de equinos.

Several biotechnologies are being developed aiming genetic material conservation of stallions with high zootechnical value, as we can highlight the harvest epididymis’s sperm of animals who suffered trauma or illness that makes impossible the semen collection, death or euthanasia. However these sperm cells do not get in touch with seminal plasma, important whereas it has proteins that participate in processes related to the protection and binding of sperm to the sperm reservoir in the oviduct. In this sense, it suggests that there are significant biochemical changes in epididymal sperm. This review aimed to study the main morphological and functional differences between the sperm from the epididymis and ejaculated in horses.

Muchas biotecnologías desarrolladas actualmente son direccionadas a la conservación del material genético de garañones de alto valor zootécnico. Dentro de estas se destacan la colecta de espermatozoides de epidídimo de animales que sufrieron algún trauma o enfermedad que imposibilita la colecta de semen, y de animales que murieron o fueron eutanasiados. Las células espermáticas del epidídimo no entran en contacto con el plasma seminal, importante porque contiene proteínas que participan en procesos relacionados con la protección y ligación de los espermatozoides al reservorio espermático en el oviducto uterino. En este sentido, se sugiere que existen importantes alteraciones bioquímicas en las células espermáticas del epidídimo, por tanto el motivo de esta revisión es estudiar las principales diferencias morfo funcionales entre los espermatozoides provenientes del epidídimo y los provenientes del eyaculado en caballos.

Efeito Do Cloprostenol Sódico Na Involução Uterina, Progesterona E Concentração De 13,14-Dihydro-15-Keto Prostaglandina F2αde Vacas Multíparas Bos Taurus Indicus / Effect Of Cloprostenol Sodium On Uterine Involution, Progesterone And 13,14-Dihydro-15-Keto Prostaglandin F2α Concentrations Of Multiparous Bos Taurus Indicus Cows / Efecto Del Cloprostenol Sódico En La Involución Uterina, Concentraciones De Progesterona Y 13,14-Dihidro-15-Keto Prostaglandina F2α De Vacas Multíparas Bos Taurus Indicus

Este estudo visou avaliar os efeitos do cloprostenol sódico na involução uterina, dosagem de progesterona (P4) e 13,14-dihydro-15-keto prostaglandina F2α (PGFM) e atividade folicular em vacas Nelore multíparas tratadas ou não com cloprostenol sódico nos dias 1 e 4 pós-parto (D0= nascimento), bem como testar a hipótese que o tratamento promove uma involução uterina mais rápida e retorno a atividade cíclica normal no puerpério. Para isso, foi feito ultrassom, palpação transretal, exame vaginoscópicoe determinação da concentração de P4 e PGFM nos dias 1, 7, 14, 28, 35 e 42 pós-parto (D0= nascimento). A vaginoscopia avaliou o óstio cervical (Escore 1 a 3) e descarga cervical (escore 1 a 5), a palpação transretal avaliou a involução uterina (escore 1 a 3) e o ultrassom avaliou o diâmetro dos folículos, tamanho dos cornos uterino e acumulo de fluido intrauterino (escore 0 a 3). O tratamento influenciou na descarga cervical (P= 0.034), e nas outras variáveis foi observada a influência do momento (P>0,05). Baseado nestes resultados, nós acreditamos que o uso desse protocolo nos animais com boa seleção genética, manejo e saudáveis pode ser desnecessário e promove gastos adicionais.(AU)

This study aimed to evaluate the effects of cloprostenol sodium at uterine involution and hormonal dosage of progesterone (P4) and 13,14-dihydro-15-keto prostaglandin F2α (PGFM) and follicular activity on multiparous Nelore cows treated or not with cloprostenol sodium on days 1 and 4 postpartum (D0= birth), as well as test the hypothesis that treatment promotes a faster uterine involution and return to normal cyclical activity at puerperium. For this, it was done ultrasound, transretal palpation, vaginoscopy exams and determination of concentration of P4 and PGFM on days 1, 7, 14, 28, 35 and 42 postpartum (D0= birth). Vaginoscopy evaluated cervical ostium (score 1 to 3) and cervical discharge (score 1 to 5), transrectal palpation evaluated uterine involution (score 1 to 3) and ultrasound evaluated the diameter of follicles, size of uterine horn and intrauterine fluid accumulation (score 0 to 3). Treatment influenced at cervical discharge (P= 0.034), and on the other variables it was observed influence of moment (P>0.05). Based on the results, we believe that the use of this protocol inanimals with good selection genetic, management and health can be unnecessary and promote additional spending.(AU)

El objetivo del estudio fue evaluar el efecto del cloprostenol sódico en la involución uterina y la concentración sérica de progesterona (P4) y 13,14-dihidro-15-keto prostaglandina F2α (PGFM) y actividad folicular en vacas multíparas Nelore tratadas o no, con cloprostenol sódico en los días 1 y 4 posparto (D0= día del nacimiento), de igual forma, comprobar la hipótesis de que el tratamiento promueve una involución uterina más rápida y un retorno de la actividad cíclica normal en el puerperio. Fue realizada ecografía, palpación transrectal, vaginoscopia y determinación de la concentración sérica de P4 y PGFM en los días 1, 7, 14, 28, 35, y 42 posparto (D0= día del nacimiento). La vaginoscopia evaluó el ostium cervical (escala de 1-3) y descarga cervical (escala de 1-5), la palpación transrectal determinó la involución uterina (escala de 1-3) y la ecografía evaluó el diámetro folicular, tamaño de los cuernos uterinos y la acumulación intrauterina de fluidos (escala de 0-3). El tratamiento influyó en la descarga cervical (P= 0.034), para las demás variables fue observado efecto del momento (P>0.05). Basados en los resultados, creemos que el uso de este protocolo en animales con buen manejo, salud y selección genética es innecesario y demanda gastos adicionales.(AU)

Effect of dietary supplementation with omega-3 and -6 on fresh and frozen/thawed sperm quality of dogs / Efeito da suplementação na dieta com ômega-3 e -6 sobre a qualidade do sêmen fresco e congelado de cães

For years, fatty acids have been recommended as a dietary supplement to improve canine hair. For animal reproduction, supplementation with omegas has been used to increase the reproductive efficiency and conception rate, but few studies have been conducted in dogs. The aim of this study was to evaluate the effects of daily dietary supplementation with omega-3 and -6 on the quality of fresh and frozen/thawed semen in canines. Semen was collected from seven dogs and evaluated for sperm motility, vigor, concentration, and morphology. The 17-week study included 119 ejaculates and was divided according to oral supplementation with omega-3 and -6: M1 (1st-5th week) or pre-supplementation; M2 (6th-9th week) and M3 (10th-13th week) or during supplementation; and M4 (14th-17th week) or post-supplementation. After analysis, the semen was frozen and then revaluated both immediately and 30 minutes (at 37 C) after thawing. Supplementation with omegas increased sperm motility, vigor, and concentration; however, supplementation had no influence on semen freezability. In addition, there was no improvement in sperm motility after supplementation when the thawed cells were maintained at 37 C for 30 minutes. We concluded that dietary supplementation with omega-3 and -6 for 4 to 8 weeks can improve the quality of fresh semen, although it has no effect on the freezability of canine semen.(AU)

Os ácidos graxos têm sido recomendados há anos como suplemento dietético para a melhora do pelo canino. Na área de reprodução animal, a suplementação com ômega tem sido usada para aumentar a eficiência reprodutiva e a taxa de concepção em muitas espécies, mas poucos estudos foram conduzidos em cães. Então, o objetivo deste estudo foi avaliar os efeitos da suplementação dietética diária com ômega-3 e -6 sobre a qualidade do sêmen fresco e congelado de cães. Os ejaculados foram colhidos de 7 cães e avaliados quanto a motilidade espermática, vigor, concentração e morfologia. O estudo foi dividido de acordo com os períodos de suplementação oral com omegas-3 e -6, no qual M1 (1ª-5ª semana) foi considerado o período pré-suplementação, M2 (6ª-9ª semana) e M3 (10ª-13ª semana) período de suplementação e M4 (14ª-17ª semana) pós-suplementação, totalizando 17 semanas de estudo (119 ejaculados). Após a análise, o sêmen foi congelado e reavaliado imediatamente e 30 minutos após a descongelação (mantidas a 37º C). A suplementação resultou em aumento da motilidade espermática, vigor e concentração do sêmen fresco; no entanto, não houve influência na congelabilidade do sêmen. Além disso, não houve aumento da motilidade dos espermatozoides após a suplementação, quando as células descongeladas foram mantidas a 37 C, durante 30 minutos. Concluiu-se que a suplementação dietética com omegas-3 e -6, durante 4 a 8 semanas melhora os parâmetros do sêmen fresco de cães, embora não há nenhum efeito sobre a qualidade espermática após a congelação.(AU)

Efeito Do Cloprostenol Sódico Na Involução Uterina, Progesterona E Concentração De 13,14-Dihydro-15-Keto Prostaglandina F2αde Vacas Multíparas Bos Taurus Indicus / Effect Of Cloprostenol Sodium On Uterine Involution, Progesterone And 13,14-Dihydro-15-Keto Prostaglandin F2α Concentrations Of Multiparous Bos Taurus Indicus Cows / Efecto Del Cloprostenol Sódico En La Involución Uterina, Concentraciones De Progesterona Y 13,14-Dihidro-15-Keto Prostaglandina F2α De Vacas Multíparas Bos Taurus Indicus

Este estudo visou avaliar os efeitos do cloprostenol sódico na involução uterina, dosagem de progesterona (P4) e 13,14-dihydro-15-keto prostaglandina F2α (PGFM) e atividade folicular em vacas Nelore multíparas tratadas ou não com cloprostenol sódico nos dias 1 e 4 pós-parto (D0= nascimento), bem como testar a hipótese que o tratamento promove uma involução uterina mais rápida e retorno a atividade cíclica normal no puerpério. Para isso, foi feito ultrassom, palpação transretal, exame vaginoscópicoe determinação da concentração de P4 e PGFM nos dias 1, 7, 14, 28, 35 e 42 pós-parto (D0= nascimento). A vaginoscopia avaliou o óstio cervical (Escore 1 a 3) e descarga cervical (escore 1 a 5), a palpação transretal avaliou a involução uterina (escore 1 a 3) e o ultrassom avaliou o diâmetro dos folículos, tamanho dos cornos uterino e acumulo de fluido intrauterino (escore 0 a 3). O tratamento influenciou na descarga cervical (P= 0.034), e nas outras variáveis foi observada a influência do momento (P>0,05). Baseado nestes resultados, nós acreditamos que o uso desse protocolo nos animais com boa seleção genética, manejo e saudáveis pode ser desnecessário e promove gastos adicionais.

This study aimed to evaluate the effects of cloprostenol sodium at uterine involution and hormonal dosage of progesterone (P4) and 13,14-dihydro-15-keto prostaglandin F2α (PGFM) and follicular activity on multiparous Nelore cows treated or not with cloprostenol sodium on days 1 and 4 postpartum (D0= birth), as well as test the hypothesis that treatment promotes a faster uterine involution and return to normal cyclical activity at puerperium. For this, it was done ultrasound, transretal palpation, vaginoscopy exams and determination of concentration of P4 and PGFM on days 1, 7, 14, 28, 35 and 42 postpartum (D0= birth). Vaginoscopy evaluated cervical ostium (score 1 to 3) and cervical discharge (score 1 to 5), transrectal palpation evaluated uterine involution (score 1 to 3) and ultrasound evaluated the diameter of follicles, size of uterine horn and intrauterine fluid accumulation (score 0 to 3). Treatment influenced at cervical discharge (P= 0.034), and on the other variables it was observed influence of moment (P>0.05). Based on the results, we believe that the use of this protocol inanimals with good selection genetic, management and health can be unnecessary and promote additional spending.

El objetivo del estudio fue evaluar el efecto del cloprostenol sódico en la involución uterina y la concentración sérica de progesterona (P4) y 13,14-dihidro-15-keto prostaglandina F2α (PGFM) y actividad folicular en vacas multíparas Nelore tratadas o no, con cloprostenol sódico en los días 1 y 4 posparto (D0= día del nacimiento), de igual forma, comprobar la hipótesis de que el tratamiento promueve una involución uterina más rápida y un retorno de la actividad cíclica normal en el puerperio. Fue realizada ecografía, palpación transrectal, vaginoscopia y determinación de la concentración sérica de P4 y PGFM en los días 1, 7, 14, 28, 35, y 42 posparto (D0= día del nacimiento). La vaginoscopia evaluó el ostium cervical (escala de 1-3) y descarga cervical (escala de 1-5), la palpación transrectal determinó la involución uterina (escala de 1-3) y la ecografía evaluó el diámetro folicular, tamaño de los cuernos uterinos y la acumulación intrauterina de fluidos (escala de 0-3). El tratamiento influyó en la descarga cervical (P= 0.034), para las demás variables fue observado efecto del momento (P>0.05). Basados en los resultados, creemos que el uso de este protocolo en animales con buen manejo, salud y selección genética es innecesario y demanda gastos adicionales.

Acción de oxígeno en especies reactivas en los espermatozoides / Action of reactive oxygen species on spermatozoa / Ação das espécies reativas de oxigênio nos espermatozoides

Para que el esperma puede desempeñar sus funciones y lograr el objetivo final, que es la fertilización, requieren energía que proviene de trifosfato de adenosina (ATP). Durante el metabolismo de la energía se almacena en forma de electrones de alta energía que se dirige a la cadena de transporte de electrones, compuesto de cinco proteínas supramolecular. En este proceso, se produce la formación de una, el anión intermedio radical semiquinona (Q- ) que es finalmente capaz de transferir este electrón desapareado a O2 y formar especies reactivas del oxígeno, la superóxido principal, peróxido de hidrógeno y el radical hidroxilo. Estas moléculas son procesos de activación altamente reactivos y espermatozoides que llevan a la degradación y la disminución de la calidad celular. Sin embargo, estas mismas moléculas que a menudo se consideran grandes villanos, también participan en los mecanismos que culminan en la fertilización y la formación de cigoto, adquiriendo así una gran importancia. Con el advenimiento de la criopreservación del semen y el estrés oxidativo asociado con el procesamiento, especies reactivas de oxígeno entraron en evidencia en la investigación, por lo que es necesario estudiar su acción y formas de reducir el estrés oxidativo.(AU)

So that spermatozoa can perform functions and achieve the goal that is fertilization, require energy from adenosine triphosphate (ATP). During the energy metabolism is stored in the form of high-energy electrons that are directed to the electron transport chain, comprised of five supramolecular protein. In this process, there is the formation of a semiquinone anion (Q¯) an intermediate radical that is eventually able to transfer this unpaired electron to O2 and form reactive oxygen species, as the main superoxide, hydrogen peroxide and hydroxyl radical. These molecules are highly reactive and sperm trigger processes that lead to degradation and decrease in cell quality. However these same molecules that are often considered great villains, also participate in mechanisms that culminate in fertilization and zygote formation, thus acquiring great importance. With the advent of semen cryopreservation and oxidative stress associated with the processing, reactive oxygen species entered into evidence in the research, making it necessary to study its action and ways to reduce oxidative stress.(AU)

Para que os espermatozoides possam executar suas funções e alcançarem o objetivo final, que é a fecundação, necessitam de energia que advém da adenosina trifosfato (ATP). Durante o metabolismo, a energia é armazenada na forma de elétrons de alta energia que são direcionados a cadeia de transporte de elétrons, composta de cinco proteínas supramoleculares. Neste processo, há a formação de um radical intermediário, o ânion semiquinona (Q) que eventualmente é capaz de transferir este elétron desemparelhado ao O2 e formar as espécies reativas de oxigênio, sendo as principais o superóxido, o peróxido de hidrogênio e o radical hidroxila. Essas moléculas são altamente reativas e nos espermatozoides desencadeiam processos que levam à degradação e decréscimo na qualidade celular. Porém, essas mesmas moléculas que muitas vezes são consideradas grandes vilãs, também participam de mecanismos que culminam na fertilização e formação do zigoto, adquirindo assim uma grande importância. Com o advento da criopreservação de sêmen e o estresse oxidativo associado ao processamento, as espécies reativas de oxigênio entraram em evidência nas pesquisas, tornando-se necessário o estudo de sua ação e maneiras de reduzir o estresse oxidativo.(AU)

Acción de oxígeno en especies reactivas en los espermatozoides / Action of reactive oxygen species on spermatozoa / Ação das espécies reativas de oxigênio nos espermatozoides

Para que el esperma puede desempeñar sus funciones y lograr el objetivo final, que es la fertilización, requieren energía que proviene de trifosfato de adenosina (ATP). Durante el metabolismo de la energía se almacena en forma de electrones de alta energía que se dirige a la cadena de transporte de electrones, compuesto de cinco proteínas supramolecular. En este proceso, se produce la formación de una, el anión intermedio radical semiquinona (Q- ) que es finalmente capaz de transferir este electrón desapareado a O2 y formar especies reactivas del oxígeno, la superóxido principal, peróxido de hidrógeno y el radical hidroxilo. Estas moléculas son procesos de activación altamente reactivos y espermatozoides que llevan a la degradación y la disminución de la calidad celular. Sin embargo, estas mismas moléculas que a menudo se consideran grandes villanos, también participan en los mecanismos que culminan en la fertilización y la formación de cigoto, adquiriendo así una gran importancia. Con el advenimiento de la criopreservación del semen y el estrés oxidativo asociado con el procesamiento, especies reactivas de oxígeno entraron en evidencia en la investigación, por lo que es necesario estudiar su acción y formas de reducir el estrés oxidativo.

So that spermatozoa can perform functions and achieve the goal that is fertilization, require energy from adenosine triphosphate (ATP). During the energy metabolism is stored in the form of high-energy electrons that are directed to the electron transport chain, comprised of five supramolecular protein. In this process, there is the formation of a semiquinone anion (Q¯) an intermediate radical that is eventually able to transfer this unpaired electron to O2 and form reactive oxygen species, as the main superoxide, hydrogen peroxide and hydroxyl radical. These molecules are highly reactive and sperm trigger processes that lead to degradation and decrease in cell quality. However these same molecules that are often considered great villains, also participate in mechanisms that culminate in fertilization and zygote formation, thus acquiring great importance. With the advent of semen cryopreservation and oxidative stress associated with the processing, reactive oxygen species entered into evidence in the research, making it necessary to study its action and ways to reduce oxidative stress.

Para que os espermatozoides possam executar suas funções e alcançarem o objetivo final, que é a fecundação, necessitam de energia que advém da adenosina trifosfato (ATP). Durante o metabolismo, a energia é armazenada na forma de elétrons de alta energia que são direcionados a cadeia de transporte de elétrons, composta de cinco proteínas supramoleculares. Neste processo, há a formação de um radical intermediário, o ânion semiquinona (Q) que eventualmente é capaz de transferir este elétron desemparelhado ao O2 e formar as espécies reativas de oxigênio, sendo as principais o superóxido, o peróxido de hidrogênio e o radical hidroxila. Essas moléculas são altamente reativas e nos espermatozoides desencadeiam processos que levam à degradação e decréscimo na qualidade celular. Porém, essas mesmas moléculas que muitas vezes são consideradas grandes vilãs, também participam de mecanismos que culminam na fertilização e formação do zigoto, adquirindo assim uma grande importância. Com o advento da criopreservação de sêmen e o estresse oxidativo associado ao processamento, as espécies reativas de oxigênio entraram em evidência nas pesquisas, tornando-se necessário o estudo de sua ação e maneiras de reduzir o estresse oxidativo.

Video-assisted ovariohysterectomy in domestic cats (Felis catus, Linnaeus, 1758) using two access portals

PURPOSE: To describe video-assisted ovariohysterectomy (OHE) with two portals access in adult intact queens.METHODSFifty-two females cats were used. A 4 mm cannula was positioned in the abdomen through an incision close to the umbilicus (first portal), and a pneumoperitoneum was established. A second portal was positioned in the midline of the pre-pubic region. Females were positioned in right lateral recumbency to locate the left ovarian pedicle, and the uterine horn was held by a transcutaneous suture. The pedicle was cauterized and incised. The procedure was then performed on the contralateral ovary. The ovaries were exteriorized from the abdomen, along with the uterus, through the second access point. The uterine body was exposed, fixed and sectioned, and the abdominal incisions were sutured.RESULTSSurgeries were performed in an average of 41.4±14.2 minutes. The main complications included hypotension (7.7%) and subcutaneous emphysema (7.7%), and 13.5% of the surgeries were converted to laparotomy.CONCLUSIONOvariohysterectomy using a video-assisted technique and two access portals is safe, has minimal risks and is effective for the spaying of queens.(AU)

Viability of cryopreserved bull spermatozoa collected from the epididymis stored for 12 hours at 4ºC / Viabilidade dos espermatozoides criopreservados de touros, colhidos do epidídimo após 12 horas a 4ºC

The purpose of this study was to evaluate effect of epididymis cooling on bovine frozen sperm viability. Ten pairs of testes/epididymes were collected of a commercial slaughterhouse; one epididymis from each pair was refrigerated at 4ºC for 12 hours and the other immediately proceeded. Epididymis was isolated, sperm cells collected after epididymal slicing and then analyzed regarding to motility, vigor, total number of sperm, morphology and membrane integrity. Sperm cells were frozen in Botubov® extender (Botupharma Biotecnologia Animal, Botucatu, SP, Brazil) and thawed for semen analysis. The same procedure was performed with cooled testis/epididymis. Results demonstrated higher viability (p < = 0,05) of fresh cells to the total number of spermatozoa (1,9 ± 1,2 versus 0,9 ± 0,9 x 109 spermatozoa), sperm motility (74,0 ± 15,1 versus 20,5 ± 13,8%) and vigor (3,7 ± 0,5 versus 1,7 ± 0,8), and for pos-thawing motility (23,5 ± 16,7 versus 8,0 ± 7,9%) and vigor (2,0 ± 0,8 versus 0,8 ± 0,8) when spermatozoa were collected immediately post-slaughter than maintained cooling 12 hours, respectively. We conclude that 12 hours of epididymis cooling after slaughter decreases sperm cells quality.(AU)

O objetivo deste estudo foi avaliar o efeito da refrigeração do epidídimo, sobre a viabilidade dos espermatozoides congelados. Foram colhidos dez pares de testículos/epidídimos de um abatedouro comercial. Um dos epidídimos foi refrigerado a 4C durante 12 horas e o contralateral foi imediatamente processado. O epidídimo foi isolado, as células espermáticas extraídas e analisadas quanto à motilidade, vigor, concentração, morfologia e integridade da membrana. Após a análise, os espermatozoides foram congelados em diluente Botubov® (Botupharma Biotecnologia Animal, Botucatu, SP, Brasil) e descongelados para análise. O mesmo procedimento foi realizado com o testículo/epidídimo refrigerado. Os resultados evidenciaram maior viabilidade (p < = 0,05) das células pré-congelação para os parâmetros, número total de espermatozides (1,9 ± 1,2 versus 0,9 ± 0,9 x 109 espermatozoides), motilidade (74,0 ± 15,1 versus 20,5 ± 13,8%) e vigor (3,7 ± 0,5 versus 1,7 ± 0,8), e pós-congelação, motilidade (23,5 ± 16,7 versus 8,0 ± 7,9%) e vigor (2,0 ± 0,8 versus 0,8 ± 0,8) quando os espermatozoides foram colhidos a partir de epidídimos processados imediatamente após o abate quando comparados aos mantidos 12 horas sob refrigeração, respectivamente. Conclui-se que 12 horas de refrigeração do epidídimo após o abate, prejudica a qualidade das células espermáticas, impossibilitando a congelação do sêmen.(AU)

Endodontics pastes formulated with copaiba oil: action on oral microbiota and dentin bridge formation in dogs / Pastas endodônticas formuladas com óleo de copaíba: ação na microbiota bucal e formação de ponte dentinária em cães

This study analysed the effect of pastes formulated with calcium hydroxide P.A. and different vehicles (saline solution - paste A and Copaifera langsdorffii Desfon oil - paste B) on oral microorganisms and dentin bridge formation in dogs. The antimicrobial action of the pastes and their components was analysed by the minimum inhibitory concentration in agar gel technique. The components were diluted and tested on fifteen standard strains of microorganisms associated with endodontic diseases. The microorganisms were cultivated and after incubation data was analysed using One-Way ANOVA and Turkey's test (P0.05). Four superior incisors of ten animals were used to evaluate dentin bridge formation. Two incisors were capped with paste A (GA) and two with paste B (GB). After 90 days, the teeth were extracted for histological analysis and the degree of dentin bridge formation evaluated. Data was analysed by the Kruskal-Wallis test (P 0.05). The pastes and their components were classified in the following decreasing order of antimicrobial action: calcium hydroxide P.A., paste A, paste B and Copaifera langsdorffii Desfon oil. Calcium hydroxide P.A. showed significantly higher antimicrobial action than the pastes or their vehicles. No significant difference was observed between the two pastes in dentin bridge formation. Based on the microorganisms studied, it can be concluded that the pastes analysed showed similar antimicrobial potential but differed significantly from their individual components. No significant difference was observed in dentin bridge formation between the different pastes tested.(AU)

Foi avaliada a ação de pastas formuladas com hidróxido de cálcio P.A. e diferentes veículos (solução fisiológica - pasta A e óleo de Copaifera langsdorffii Desfon - pasta B) sobre microrganismos bucais e formação de ponte dentinária em cães. A ação antimicrobiana das pastas e de seus componentes individuais foi avaliada pela técnica da concentração inibitória mínima pela diluição em ágar. Os materiais foram diluídos e avaliados contra quinze cepas padrão de microrganismos relacionados a doenças endodônticas. Os microrganismos foram cultivados e, após a incubação, os dados foram analisados (Anova One-Way, Tukey, P0,05). Para a avaliação da formação de ponte dentinária, quatro incisivos superiores de dez animais foram tratados, sendo dois capeados com pasta A (GA) e dois com a pasta B (GB). Após 90 dias, os dentes foram extraídos para obtenção de cortes histológicos, com o objetivo de se avaliar o grau de formação de ponte dentinária. Os dados obtidos foram submetidos à análise estatística (Kruskal-Wallis, P 0,05). Segundo a ação antimicrobiana, os materiais foram classificados em ordem decrescente: hidróxido de cálcio P.A., pasta A, pasta B e óleo de Copaifera langsdorffii Desfon, com diferenças estatisticamente significantes entre o hidróxido de cálcio P.A., as pastas e os veículos. Ao final do estudo, observou-se que as duas pastas avaliadas foram semelhantes quanto à formação de ponte dentinária. Considerando-se os microrganismos selecionados, conclui-se que as pastas avaliadas foram semelhantes entre si em termos de potencial antimicrobiano, diferindo dos componentes individuais. Em relação à formação de ponte dentinária, não foram observadas diferenças significantes entre os dentes tratados com as diferentes pastas.(AU)

Viabilidad de espermatozoides ovinos mantenidos a 5º y 15ºC en diferentes sistemas de refrigeración / Viability of ram sperm chilled at 5º and 15ºC in different cooling systems

El objetivo del presente estudio fue evaluar la cualidad espermática del semen refrigerado de carneros, en cajas térmicas con diferentes temperaturas. Fueron utilizados 6 eyaculados, de 2 carneros colectado con vagina artificial. En el semen se analizó volumen, movimiento en masa, motilidad, vigor, concentración espermática, test hipo-osmótico y coloración supra-vital. Las muestras fueron divididas en 2 alícuotas y diluidas en solución NaCl 0,9% o en un medio (Botubov®, Botupharma, Botucatu, SP, Brasil); después, la dilución fue mantenida a temperatura ambiente, nevera (5ºC), caja Botubox® (15ºC, Botupharma, Botucatu, SP, Brasil), caja Botutainer® (5ºC, Botupharma, Botucatu, SP, Brasil) y caja MaxSemen® (15ºC, EHG Agrofarma, Campinas, SP, Brasil). Todas las muestras fueron analizadas cada 24 horas, siguiendo los mismos parámetros. De acuerdo con los resultados, las muestras mantenidas en el diluyente presentaron viabilidad hasta 48 horas de refrigeración en las cajas térmicas y en la nevera, y la motilidad se mantuvo entorno de 30% hasta las 72 horas. Las muestras diluidas en solución NaCl 0,9% conservaron la motilidad en 30% hasta las 24 horas de refrigeración. Basado en los resultados se concluye que las tres cajas pueden ser utilizadas para transporte de semen ovino, diluido y refrigerado por un período de 24 a 48 horas.(AU)

The aim of this study was to evaluate the ovine sperm quality colled in thermal boxs. Six ejaculates from 2 rams were collectedusing artificial vagina. Samples were analyzed to volume, mass movement, motility, vigor, sperm cell concentration, hypo-osmoticswelling test and supravital stain. Ejaculates were divided into 2 aliquots and diluted in 0.9% NaCl or in the extender (Botubov®,Botupharma, Botucatu, SP, Brazil), and was kept at room temperature, refrigerator (5°C), Botubox® (15°C, Botupharma, Botucatu,SP, Brazil), Botutainer® (5ºC, Botupharma, Botucatu, SP, Brazil) and MaxSemen® (15°C, EHG Agrofarma, Campinas, SP, Brazil).All samples were analyzed each 24 hours to the same parameters. According to the results the samples diluted and cooled inextender preserved sperm viability until 48 hours in thermal boxes and in refrigerator; and the samples extended preserved inenvironment maintained motility 30% up to 72 hours. Samples diluted in 0.9% saline retained motility around 30% until 24 hours ofcooling. Based on the results it is concluded that the three boxes may be used for transport of ram semen, diluted and refrigeratedfor a period of 24 to 48 hours.(AU)

Viabilidad de espermatozoides ovinos mantenidos a 5º y 15ºC en diferentes sistemas de refrigeración / Viability of ram sperm chilled at 5º and 15ºC in different cooling systems

El objetivo del presente estudio fue evaluar la cualidad espermática del semen refrigerado de carneros, en cajas térmicas con diferentes temperaturas. Fueron utilizados 6 eyaculados, de 2 carneros colectado con vagina artificial. En el semen se analizó volumen, movimiento en masa, motilidad, vigor, concentración espermática, test hipo-osmótico y coloración supra-vital. Las muestras fueron divididas en 2 alícuotas y diluidas en solución NaCl 0,9% o en un medio (Botubov®, Botupharma, Botucatu, SP, Brasil); después, la dilución fue mantenida a temperatura ambiente, nevera (5ºC), caja Botubox® (15ºC, Botupharma, Botucatu, SP, Brasil), caja Botutainer® (5ºC, Botupharma, Botucatu, SP, Brasil) y caja MaxSemen® (15ºC, EHG Agrofarma, Campinas, SP, Brasil). Todas las muestras fueron analizadas cada 24 horas, siguiendo los mismos parámetros. De acuerdo con los resultados, las muestras mantenidas en el diluyente presentaron viabilidad hasta 48 horas de refrigeración en las cajas térmicas y en la nevera, y la motilidad se mantuvo entorno de 30% hasta las 72 horas. Las muestras diluidas en solución NaCl 0,9% conservaron la motilidad en 30% hasta las 24 horas de refrigeración. Basado en los resultados se concluye que las tres cajas pueden ser utilizadas para transporte de semen ovino, diluido y refrigerado por un período de 24 a 48 horas.

The aim of this study was to evaluate the ovine sperm quality colled in thermal boxs. Six ejaculates from 2 rams were collectedusing artificial vagina. Samples were analyzed to volume, mass movement, motility, vigor, sperm cell concentration, hypo-osmoticswelling test and supravital stain. Ejaculates were divided into 2 aliquots and diluted in 0.9% NaCl or in the extender (Botubov®,Botupharma, Botucatu, SP, Brazil), and was kept at room temperature, refrigerator (5°C), Botubox® (15°C, Botupharma, Botucatu,SP, Brazil), Botutainer® (5ºC, Botupharma, Botucatu, SP, Brazil) and MaxSemen® (15°C, EHG Agrofarma, Campinas, SP, Brazil).All samples were analyzed each 24 hours to the same parameters. According to the results the samples diluted and cooled inextender preserved sperm viability until 48 hours in thermal boxes and in refrigerator; and the samples extended preserved inenvironment maintained motility 30% up to 72 hours. Samples diluted in 0.9% saline retained motility around 30% until 24 hours ofcooling. Based on the results it is concluded that the three boxes may be used for transport of ram semen, diluted and refrigeratedfor a period of 24 to 48 hours.

Semen parameters and seminal plasma protein and biochemical profiles of dogs with benign prostatic hyperplasia after botulinum toxin type A intraprostatic injection / Parâmetros seminais e perfis bioquímicos e proteicos do plasma seminal de cães com hyperplasia prostática benigna após a administração intra-prostática de toxina botulínica tipo A

This study aimed to determine the effects of different concentrations of botulinum toxin type A (BT-A) on semen parameters, and seminal plasma biochemical and protein profiles of dogs with benign prostatic hyperplasia (BPH). Eighteen sexually intact male dogs with BPH were randomly divided in three groups, and received an intraprostatic injection of saline solution (control group - CG), 250UI (GI) or 500UI (GII) of BT-A under transabdominal ultrasound guidance. Semen was collected at baseline, 2, 4 and 8 weeks after treatment. Semen parameters were determined and seminal plasma pH, total protein (TP), total chlorides (TC), calcium (Ca), potassium (K), and sodium (Na) concentrations were assessed. One-dimensional sodium dodecyl sulfatepolyacrilamide gel eletrophoresis (SDS- PAGE) was performed to determine seminal plasma protein profile. Sperm parameters and seminal plasma pH, TP, TC, Ca and K mean values did not change significantly at any time point and among treated groups (P>0.05). The SDS-PAGE analysis of the pooled fractions identified 31 protein bands with molecular weights ranging from 3.9 to 106.2kDA in all treatment groups during the entire evaluation period. Regardless the used dose, intraprostatic BT-A injection do not alter semen parameters and seminal plasma biochemical and protein profiles of dogs with BPH.(AU)

O objetivo do presente estudo foi determinar a ação de diferentes concentrações de toxina botulínica tipo A (TB-A) sobre os parâmetros seminais, perfis bioquímicos e proteicos do plasma seminal de cães com hiperplasia prostática benigna (HPB). Dezoito cães hígidos, não orquiectomizados com HPB foram divididos em três grupos, os quais foram submetidos à injeção intra-prostática de solução salina (grupo controle - GC), 250UI (GI) ou 500UI (GII) de TB-A. Amostras seminais foram coletadas previamente aos tratamentos e após 2, 4 e 8 semanas. Os parâmetros seminais assim como os valores de pH e concentrações de proteínas totais (TP), cloretos totais (CT), cálcio (Ca), potássio (K), sódio (Na) do plasma seminal foram mensurados após as coletas. O perfil proteico do fluido prostático foi estabelecido por meio de eletroforese SDS-PAGE. Não foram constatadas diferenças significativas quanto aos parâmetros espermáticos e perfil bioquímico do plasma seminal intragrupos e intergrupos (P>0,05). À SDS-PAGE foram identificadas 31 bandas proteicas com pesos moleculares de 3,9 a 106,2kDA, em todos os tratamentos e durante todo o período de avaliação. Dessa forma, concluiu-se que, independentemente da dose utilizada, a injeção intra-prostática de TB-A não altera os parâmetros seminais, assim como os perfis bioquímico e proteico do plasma seminal de cães com HPB.(AU)

Splenic congestion associated with acepromazine administration in dogs / Congestão esplênica associada à aplicação de acepromazina em cães

The effects splenic dilatation induced by acepromazine in a prospective, randomized study. Thirtythree adult mongrel dogs were divided into two groups designated as AG (acepromazine 0.05 mg/kg, i.v., n = 23) and CG (0.9% sodium chloride administered at a similar volume, n = 10). In both groups underwent sonographic examinations before (T0) and fifteen minutes (T15) after drug injection. The thickness spleen and splenic vein width were measured. Higher thickness was found in the AG group at T15 (2.47 cm) when compared to that at T0 (2.06 cm, p = 0.016), while the T0 (2.33 cm) and T15 (2.39 cm) measures did not differ within the CG group. Moreover, the splenic vein width was higher (p = 0.013) at T15 than at T0 in the AG group. Based on results of this study, we concluded that acepromazine, in doses of 0.05 mg/kg, promotes splenomegaly in dogs after fifteen minutes of the injection.(AU)

Foram avaliados os efeitos de dilatação esplênica induzidos pela acepromazina em estudo do tipo prospectivo e randomizado. Trinta e três cães foram distribuídos em dois grupos designados como GA (acepromazina 0,05 mg/kg, i.v., n = 23) e GC (solução de cloreto de sódio 0,9% em volume semelhante ao GA, i.v., n = 10). Em ambos os grupos foi realizada ultrassonografia abdominal previamente à aplicação das substâncias (T0) e após 15 minutos (T15). A espessura do baço e a largura da veia esplênica foram mensuradas. Foi verificada maior espessura esplênica no GA no T15 (2,47 cm) quando comparado a T0 (2,06 cm, p = 0,016), enquanto no GC não houve diferença significativa, sendo T0 (2,33 cm) e T15 (2,39 cm). Ainda, a largura da veia esplênica foi maior no T15 (p = 0,013) comparado a T0no GA. Baseado nos resultados encontrados, pode-se concluir que a acepromazina na dose de 0,05 mg/kg induz a esplenomegalia em cães após 15 minutos da aplicação.(AU)