Quantification by computerized morphometry of tissue levels of sulfomucins and sialomucins in diversion colitis in rats / Quantificação por morfometria computadorizada dos níveis teciduais de sulfomucinas e sialomucinas na colite de exclusão em ratos

PURPOSE: To quantify the intensity of sulfomucin and sialomucin expression in the colon mucosa, by means of computer-assisted image processing, comparing segments with and without fecal stream and correlating with the duration of fecal transit exclusion. METHODS: Forty-five Wistar rats were subjected to diversion of the fecal stream in the left colon by means of constructing a proximal colostomy and distal mucosal fistula. They were distributed randomly into three experimental groups of 15 animals, of which 10 were subjected to colon diversion (experimental subgroup) and five were only subjected to laparotomy, without colon diversion (control subgroup). The three experimental groups were formed according to the sacrifice date, which was to be performed six weeks after the surgical procedure (Group A), 12 weeks (Group B) and 18 weeks (Group C). The sulfomucin and sialomucin expression in the colon mucosa was evaluated using the histochemical technique of high iron diamine-alcian blue (HID-AB). The tissue expression was quantified for each animal, in the segments with and without fecal stream, at a location where there were four complete contiguous crypts in two random fields, with the aid of the computer-assisted image analysis software. The final value was taken to be the mean reading from the two fields selected, in the segments with and without fecal stream. To compare the expressions of the two mucin subtypes in the segments with and without fecal stream, the paired Student t test was used. To analyze variance according to duration of exclusion, ANOVA with the Newman-Keuls post-test was used, setting the significance level at 5 percent (p<0.05). RESULTS: There were significant reductions in tissue sulfomucin and sialomucin content in the colon without fecal stream, independent of the duration of exclusion considered. There was increased tissue sulfomucin content and decreased tissue sialomucin in the segments without fecal stream, ...(AU)

OBJETIVO: Quantificar, por meio de processamento de imagem assistida por computador, a intensidade de expressão de sulfomucinas e sialomucinas na mucosa cólica comparando segmentos com e sem trânsito e relacionando-a ao tempo de exclusão de trânsito fecal. MÉTODOS: Quarenta e cinco ratos Wistar machos foram submetidos à derivação do trânsito no cólon esquerdo pela confecção de colostomia proximal e fístula mucosa distal. Foram divididos de forma randomizada em três grupos experimentais de 15 animais, nos quais 10 foram submetidos à derivação do trânsito cólico (subgrupo experimental) e cinco somente a laparotomia exploradora sem desvio do trânsito fecal (subgrupo controle). Os três grupos experimentais foram formados segundo o sacrifício ter sido realizado em seis (grupo A), 12 (Grupo B) e 18 semanas (Grupo C). A avaliação da expressão de sulfomucinas e sialomucinas na mucosa cólica foi realizada pela técnica histoquímica da diamina de ferro alto alcian-blue (HID-AB). A quantificação da expressão tecidual foi determinada, para cada animal, nos segmentos com e sem trânsito, em local onde existiam quatro criptas contíguas e íntegras em dois campos aleatórios com auxílio de programa de análise de imagem assistida por computador. Adotou-se como valor final a média das leituras dos dois campos selecionados, nos segmentos providos e desprovidos de trânsito fecal. Na comparação entre a expressão dos dois subtipos de mucinas nos segmentos com e sem trânsito fecal utilizou-se o teste t de Student pareado. Para análise de variância segundo o tempo de exclusão utilizou-se o teste de ANOVA com o pós-teste de Newmann-Keuls, estabelecendo-se nível de significância de 5 por cento (p<0,05). RESULTADOS: Houve redução significante no conteúdo tecidual de sulfomucinas e sialomucinas no cólon desprovido de trânsito fecal, independente do tempo de exclusão considerado. Houve aumento no conteúdo tecidual de sulfomucinas e diminuição de sialomucinas nos segmentos ...(AU)

Tissue quantification of neutral and acid mucins in the mucosa of the colon with and without fecal stream in rats / Quantificação tecidual de mucinas neutras e ácidas na mucosa do cólon com e sem trânsito intestinal em ratos

PURPOSE: To quantify the intensity of the expression of neutral and acids mucins in mucosa of the colon with and without fecal stream and to correlate this with the duration of fecal transit diversion. METHODS: Thirty male Wistar rats were subjected to fecal transit deviation in the left colon by a proximal colostomy and a distal mucous fistula. The animals were divided into three experimental groups, according to whether sacrificing would be performed six, 12 or 18 weeks after surgery. The expression of neutral and acid mucins was evaluated using the histochemical techniques of Periodic Acid Schiff and Alcian Blue, respectively. The tissue mucins expression was quantified by computer-assisted image analysis software (NIS-Elements) in the segments with and without fecal stream. Student's paired t test was used to compare the quantities of mucins in colon with or without fecal stream and variance between the experimental groups by ANOVA and Newman-Keuls post-test, establishing level of signification of 5 percent (p<0.05). RESULTS: There were significant decreased quantities of acid and neutral mucins in the colon without transit, compared with the colon with fecal stream, independent of the duration of exclusion. There was increased expression of neutral mucins in the colon with fecal stream after 12 and 18 weeks of exclusion. There was no increase in the expression of acid mucins in the colon with transit as the duration of fecal transit exclusion progressed. There was increased production of acid mucins in the animals submitted to diversion of the fecal stream for 18 weeks, compared with those subjected to diversion for 6 and 12 weeks. In the colon without fecal stream, there was increased expression of neutral mucins after 12 and 18 weeks of exclusion. CONCLUSIONS: Deviation of the fecal stream decreased the expression of acid and neutral mucins in the segments without fecal transit, compared with segments with transit. Regardless of ...(AU)

OBJETIVO: Quantificar a intensidade de expressão de mucinas neutras e ácidas na mucosa cólica provida e desprovida de trânsito intestinal relacionando-a ao tempo de exclusão fecal. MÉTODOS: Trinta ratos Wistar machos foram submetidos à derivação do trânsito no cólon esquerdo por colostomia proximal e fístula mucosa distal. Os animais foram divididos em três grupos experimentais segundo o sacrifício ter sido realizado seis, 12 e 18 semanas após a cirurgia. A avaliação da expressão de mucinas neutras e ácidas na mucosa cólica foi realizada com as técnicas histoquímicas do Periódico Ácido de Schiff e Azul de Alcian, respectivamente. A quantificação da expressão tecidual das mucinas foi com auxílio de programa de análise de imagem assistida por computador (NIS-Elements) nos segmentos providos e desprovidos de trânsito fecal. Utilizou-se o teste t de Student pareado na comparação da expressão de mucinas nos segmentos com e sem trânsito e a variação na expressão entre os grupos experimentais pelo teste ANOVA e pós-teste de Newmann-Keuls, estabelecendo-se nível de significância de 5 por cento (p<0,05). RESULTADOS: Houve redução na quantidade de mucinas neutras e ácidas no cólon desprovido de trânsito quando comparado ao cólon provido de trânsito, independente do tempo de exclusão. Ocorreu aumento na expressão de mucinas neutras no cólon provido de trânsito intestinal após 12 e 18 semanas de exclusão. Não houve aumento na expressão de mucinas ácidas no cólon provido de trânsito com o progredir do tempo exclusão de trânsito fecal. Ocorreu aumento na produção de mucinas ácidas nos segmentos com exclusão de trânsito por 18 semanas quando comparados aos animais submetidos à exclusão por seis e 12 semanas. No cólon desprovido de trânsito ocorreu aumento na expressão de mucinas neutras após 12 e 18 semanas de exclusão. CONCLUSÕES: A derivação do trânsito fecal diminui a expressão de mucinas ácidas e neutras nos segmentos desprovidos de trânsito fecal ...(AU)