Variability in the production of extracellular enzymes by entomopathogenic fungi grown on different substrates

Entomopathogenic fungi are important controllers of pest-insects populations in agricultural production systems and in natural environment. These fungi have enzymatic machinery which involve since the recognition and adherence of spores in their hosts culminating with infection and death of these insects. The main objective of this study was to analyzed extracellular enzyme production of the fungi strains Beauveria bassiana, Metarhizium anisopliae and Paecilomyces sp when cultured on substrates. These fungi were grown in minimal media containing specific substrates for the analysis of different enzymes such as amylases, cellulases, esterases, lipases, proteases (gelatin and caseinase), pectinases and cuticles of Musca domestica larvae and adults. All the assays were performed with and without the presence of dextrose in the culture media. The quantification of enzyme activity was performed by the ratio of halo / colony (H/C) and the results subjected to variance analysis level of 5% (ANOVA) followed by post-Tukey test. All strains were positive for lipase and also they showed a high significant enzyme production for gelatin at concentrations of 4 and 1%. B. bassiana and Paecilomyces sp. were positive for amylase, pectinase and caseinase, and only Paecilomyces sp. showed cellulase activity.

O uso de PCR na detecção de Escherichia coli enterotoxigênica em amostras de água de esgoto

Riscos à saúde, associados à transmissão de doenças através do meio aquático, tornam importante a detecção de microrganismos patogênicos nesse ambiente. Portanto, o objetivo deste trabalho foi utilizar a técnica de PCR para uma detecção rápida de Escherichia coli enterotoxigênica (ETEC) em água de esgoto. Com o propósito de isolar esta bactéria, as amostras de esgoto foram inoculadas no meio seletivo ágar eosina azul de metileno (EMB). As colônias isoladas foram identificadas através de testes bioquímicos e as E. coli encontradas foram submetidas à extração de DNA plasmideal por lise alcalina e posteriormente à reação de PCR. Desses isolados, 5 apresentaram resultado positivo: 3 isolados foram positivos para o gene da toxina LT e 2 isolados para os genes de ambas as toxinas. As condições utilizadas na reação de PCR não detectaram a presença de E. coli, quando aplicada diretamente nas amostras de esgoto. Os produtos de amplificação dos 5 isolados de E. coli foram digeridos com enzimas de restrição e os fragmentos resultantes confirmaram a especificidade da amplificação. Os resultados sugerem que a técnica de PCR reduz o tempo de detecção do microrganismo, porém a amostra necessita de um pré-enriquecimento para aumentar a sensibilidade da técnica.

Evaluation of the activity of disinfectants against coliform bacteria group strains isolated from a sewage treatment plant (ETE-Ipanema)

Municipal wastewater usually presents pathogenic enteric bacteria, viruses and intestinal parasites. Primary, secondary and tertiary wastewater treatment eliminates 90-99.9% of these microorganisms and if a more efficient reduction of microorganisms is needed, disinfection with chemical compounds must be done. The extraordinary genetic variability of bacteria gives them adaptation ability against theses chemical agents, which indiscriminate use brings about serious health problems. In this study, chemical agents commonly used in disinfection procedures like chlorhexidine gluconate, sodium hypochlorite and quaternary ammonium compounds were investigated for their activity against bacteria from the coliform group, isolated from a sewage treatment plant, using the macrodilution method. It was observed that the addition of organic matter interferes in sensitivity levels and also that the lower the concentration and the exposure time, the higher the resistance. Sodium hypochlorite was the most effective against the coliforms, once inhibited their growth in every exposure time and at every disinfectant concentration used . Quaternary ammonium compounds and chlorhexidine gluconate were also effective, although a higher percentage of resistance was observed for both.

Avaliação da eficácia do tratamento de esgotos de um sistema de lagoa de estabilização através da identidicação de população bacteriana

As lagoas de estabilização para tratamento de esgoto sanitário são processos biológicos eficientes e econômicos utilizados como solução satisfatória para a remoção de microrganismos potencialmente patogênicos. Neste trabalho, foram isoladas e identificadas bactérias aeróbias e anaeróbias facultativas presentes na Estação de Tratamento de Esgoto (ETE) - Ipanema, Porto Alegre/RS com o objetivo de avaliar a eficiência do processo de tratamento de esgotos. Foram realizadas coletas trimestrais durante o período de um ano. As amostras foram coletadas do afluente, da lagoa facultativa, da lagoa de maturação e do efluente, semeadas em diferentes meios de cultura para a identificação bacteriana. Foram isoladas e identificadas 392 bactérias, destas 40.8% pertencentes ao gênero  Enterobacter, 29.6% ao gênero Bacillus, 6.63% de Acinetobacter e, 4.84% do gênero Alcaligenes e os demais 18.13% distribuídos entre outros 12 gêneros, os quais foram predominantemente Gram-negativos. Observou-se um decréscimo no número de coliformes totais e fecais no afluente e efluente, como dos gêneros bacterianos durante as etapas do sistema de tratamento bem como a DBO, demonstrando a eficácia do processo.

Characterization of microorganisms present in a slaughterhouse and beef processing/chilling environment

The ingestion of contaminated foods of animal origin has considerably increased the occurrence of food-borne diseases. Several bacterium species are deemed responsible for outbreaks of those diseases and the presence of such species in food processing plants depends on the proper hygiene routines there adopted. The aims of this study were: (i) to isolate and characterize the microorganisms present in a bovine slaughterhouse and processing/chilling environment, and (ii) to identify enterotoxigenic Escherihcia coli (ETEC) among isolates using the PCR amplification protocol. Out of the total 580 bacteria isolated and identified by biochemical assays, 168 were Staphylococcus aureus, 123 Escherichia coli, and 79 Corynebacterium vitarumem. The remaining belonged to the Bacillus spp. and Corynebacterium spp. genera, and to the Enterobacteriaceae family. The 123 bacteria identified as E. coli underwent a plasmid DNA extraction routine for the PCR assays. The results revealed 37 E. coli isolates to be positive for the ST gene, out of which 20 were correspondingly positive for the LT gene and 2 were only LT positive. The data evidenced the predominance of bacteria indicating faecal contamination and of bacteria found in bovine hides. The sampling sites of higher contamination were desks, in both the slaughterhouse and in processing/chilling plants inspected.

Characterization of bacterial population during composting of municipal solid waste

Composting is a natural biological process that degrades organic matter which is carried out spontaneously by aerobic microorganisms, whose metabolic action leads to the mineralization and partial humification of organic residue. The aim of this study was to investigate survival of potentially pathogenic bacterial species throughout the process and detection of enterotoxigenic Escherichia coli (ETEC) in the compost using PCR. The presence of heterotrophic bacteria, total total and fecal coliforms, and bacteria succession were also de detrermined. Out of the total 222 bacterial colonies isolated, 33 different genera and 56 different species were identified, being Bacillus, Escherichia, Enterobacter, and Pseudomonas, the prevailing genera. Total coliform counts ranged between 9.0 x 104 and 3.0 x 106 cfu/g, and fecal coliform counts between 1.0 x 104 and 2.3 x 106 cfu/g. The composting process was partially efficient, since even though coliform counts were reduced, enterotoxigenic E. coli was detected in mature compost.

O uso de PCR na detecção de Escherichia coli enterotoxigênica em amostras de água de esgoto

Riscos à saúde, associados à transmissão de doenças através do meio aquático, tornam importante a detecção de microrganismos patogênicos nesse ambiente. Portanto, o objetivo deste trabalho foi utilizar a técnica de PCR para uma detecção rápida de Escherichia coli enterotoxigênica (ETEC) em água de esgoto. Com o propósito de isolar esta bactéria, as amostras de esgoto foram inoculadas no meio seletivo ágar eosina azul de metileno (EMB). As colônias isoladas foram identificadas através de testes bioquímicos e as E. coli encontradas foram submetidas à extração de DNA plasmideal por lise alcalina e posteriormente à reação de PCR. Desses isolados, 5 apresentaram resultado positivo: 3 isolados foram positivos para o gene da toxina LT e 2 isolados para os genes de ambas as toxinas. As condições utilizadas na reação de PCR não detectaram a presença de E. coli, quando aplicada diretamente nas amostras de esgoto. Os produtos de amplificação dos 5 isolados de E. coli foram digeridos com enzimas de restrição e os fragmentos resultantes confirmaram a especificidade da amplificação. Os resultados sugerem que a técnica de PCR reduz o tempo de detecção do microrganismo, porém a amostra necessita de um pré-enriquecimento para aumentar a sensibilidade da técnica.

Characterization of microorganisms present in a slaughterhouse and beef processing/chilling environment

The ingestion of contaminated foods of animal origin has considerably increased the occurrence of food-borne diseases. Several bacterium species are deemed responsible for outbreaks of those diseases and the presence of such species in food processing plants depends on the proper hygiene routines there adopted. The aims of this study were: (i) to isolate and characterize the microorganisms present in a bovine slaughterhouse and processing/chilling environment, and (ii) to identify enterotoxigenic Escherihcia coli (ETEC) among isolates using the PCR amplification protocol. Out of the total 580 bacteria isolated and identified by biochemical assays, 168 were Staphylococcus aureus, 123 Escherichia coli, and 79 Corynebacterium vitarumem. The remaining belonged to the Bacillus spp. and Corynebacterium spp. genera, and to the Enterobacteriaceae family. The 123 bacteria identified as E. coli underwent a plasmid DNA extraction routine for the PCR assays. The results revealed 37 E. coli isolates to be positive for the ST gene, out of which 20 were correspondingly positive for the LT gene and 2 were only LT positive. The data evidenced the predominance of bacteria indicating faecal contamination and of bacteria found in bovine hides. The sampling sites of higher contamination were desks, in both the slaughterhouse and in processing/chilling plants inspected.

O uso de PCR na detecção de Escherichia coli enterotoxigênica em amostras de água de esgoto

Riscos à saúde, associados à transmissão de doenças através do meio aquático, tornam importante a detecção de microrganismos patogênicos nesse ambiente. Portanto, o objetivo deste trabalho foi utilizar a técnica de PCR para uma detecção rápida de Escherichia coli enterotoxigênica (ETEC) em água de esgoto. Com o propósito de isolar esta bactéria, as amostras de esgoto foram inoculadas no meio seletivo ágar eosina azul de metileno (EMB). As colônias isoladas foram identificadas através de testes bioquímicos e as E. coli encontradas foram submetidas à extração de DNA plasmideal por lise alcalina e posteriormente à reação de PCR. Desses isolados, 5 apresentaram resultado positivo: 3 isolados foram positivos para o gene da toxina LT e 2 isolados para os genes de ambas as toxinas. As condições utilizadas na reação de PCR não detectaram a presença de E. coli, quando aplicada diretamente nas amostras de esgoto. Os produtos de amplificação dos 5 isolados de E. coli foram digeridos com enzimas de restrição e os fragmentos resultantes confirmaram a especificidade da amplificação. Os resultados sugerem que a técnica de PCR reduz o tempo de detecção do microrganismo, porém a amostra necessita de um pré-enriquecimento para aumentar a sensibilidade da técnica.

Characterization of microorganisms present in a slaughterhouse and beef processing/chilling environment

The ingestion of contaminated foods of animal origin has considerably increased the occurrence of food-borne diseases. Several bacterium species are deemed responsible for outbreaks of those diseases and the presence of such species in food processing plants depends on the proper hygiene routines there adopted. The aims of this study were: (i) to isolate and characterize the microorganisms present in a bovine slaughterhouse and processing/chilling environment, and (ii) to identify enterotoxigenic Escherihcia coli (ETEC) among isolates using the PCR amplification protocol. Out of the total 580 bacteria isolated and identified by biochemical assays, 168 were Staphylococcus aureus, 123 Escherichia coli, and 79 Corynebacterium vitarumem. The remaining belonged to the Bacillus spp. and Corynebacterium spp. genera, and to the Enterobacteriaceae family. The 123 bacteria identified as E. coli underwent a plasmid DNA extraction routine for the PCR assays. The results revealed 37 E. coli isolates to be positive for the ST gene, out of which 20 were correspondingly positive for the LT gene and 2 were only LT positive. The data evidenced the predominance of bacteria indicating faecal contamination and of bacteria found in bovine hides. The sampling sites of higher contamination were desks, in both the slaughterhouse and in processing/chilling plants inspected.

O uso de PCR na detecção de Escherichia coli enterotoxigênica em amostras de água de esgoto

Riscos à saúde, associados à transmissão de doenças através do meio aquático, tornam importante a detecção de microrganismos patogênicos nesse ambiente. Portanto, o objetivo deste trabalho foi utilizar a técnica de PCR para uma detecção rápida de Escherichia coli enterotoxigênica (ETEC) em água de esgoto. Com o propósito de isolar esta bactéria, as amostras de esgoto foram inoculadas no meio seletivo ágar eosina azul de metileno (EMB). As colônias isoladas foram identificadas através de testes bioquímicos e as E. coli encontradas foram submetidas à extração de DNA plasmideal por lise alcalina e posteriormente à reação de PCR. Desses isolados, 5 apresentaram resultado positivo: 3 isolados foram positivos para o gene da toxina LT e 2 isolados para os genes de ambas as toxinas. As condições utilizadas na reação de PCR não detectaram a presença de E. coli, quando aplicada diretamente nas amostras de esgoto. Os produtos de amplificação dos 5 isolados de E. coli foram digeridos com enzimas de restrição e os fragmentos resultantes confirmaram a especificidade da amplificação. Os resultados sugerem que a técnica de PCR reduz o tempo de detecção do microrganismo, porém a amostra necessita de um pré-enriquecimento para aumentar a sensibilidade da técnica.

O uso de PCR na detecção de Escherichia coli enterotoxigênica em amostras de água de esgoto

Riscos à saúde, associados à transmissão de doenças através do meio aquático, tornam importante a detecção de microrganismos patogênicos nesse ambiente. Portanto, o objetivo deste trabalho foi utilizar a técnica de PCR para uma detecção rápida de Escherichia coli enterotoxigênica (ETEC) em água de esgoto. Com o propósito de isolar esta bactéria, as amostras de esgoto foram inoculadas no meio seletivo ágar eosina azul de metileno (EMB). As colônias isoladas foram identificadas através de testes bioquímicos e as E. coli encontradas foram submetidas à extração de DNA plasmideal por lise alcalina e posteriormente à reação de PCR. Desses isolados, 5 apresentaram resultado positivo: 3 isolados foram positivos para o gene da toxina LT e 2 isolados para os genes de ambas as toxinas. As condições utilizadas na reação de PCR não detectaram a presença de E. coli, quando aplicada diretamente nas amostras de esgoto. Os produtos de amplificação dos 5 isolados de E. coli foram digeridos com enzimas de restrição e os fragmentos resultantes confirmaram a especificidade da amplificação. Os resultados sugerem que a técnica de PCR reduz o tempo de detecção do microrganismo, porém a amostra necessita de um pré-enriquecimento para aumentar a sensibilidade da técnica.

O uso de PCR na detecção de Escherichia coli enterotoxigênica em amostras de água de esgoto

Riscos à saúde, associados à transmissão de doenças através do meio aquático, tornam importante a detecção de microrganismos patogênicos nesse ambiente. Portanto, o objetivo deste trabalho foi utilizar a técnica de PCR para uma detecção rápida de Escherichia coli enterotoxigênica (ETEC) em água de esgoto. Com o propósito de isolar esta bactéria, as amostras de esgoto foram inoculadas no meio seletivo ágar eosina azul de metileno (EMB). As colônias isoladas foram identificadas através de testes bioquímicos e as E. coli encontradas foram submetidas à extração de DNA plasmideal por lise alcalina e posteriormente à reação de PCR. Desses isolados, 5 apresentaram resultado positivo: 3 isolados foram positivos para o gene da toxina LT e 2 isolados para os genes de ambas as toxinas. As condições utilizadas na reação de PCR não detectaram a presença de E. coli, quando aplicada diretamente nas amostras de esgoto. Os produtos de amplificação dos 5 isolados de E. coli foram digeridos com enzimas de restrição e os fragmentos resultantes confirmaram a especificidade da amplificação. Os resultados sugerem que a técnica de PCR reduz o tempo de detecção do microrganismo, porém a amostra necessita de um pré-enriquecimento para aumentar a sensibilidade da técnica.

Characterization of bacterial population during composting of municipal solid waste

Composting is a natural biological process that degrades organic matter which is carried out spontaneously by aerobic microorganisms, whose metabolic action leads to the mineralization and partial humification of organic residue. The aim of this study was to investigate survival of potentially pathogenic bacterial species throughout the process and detection of enterotoxigenic Escherichia coli (ETEC) in the compost using PCR. The presence of heterotrophic bacteria, total total and fecal coliforms, and bacteria succession were also de detrermined. Out of the total 222 bacterial colonies isolated, 33 different genera and 56 different species were identified, being Bacillus, Escherichia, Enterobacter, and Pseudomonas, the prevailing genera. Total coliform counts ranged between 9.0 x 104 and 3.0 x 106 cfu/g, and fecal coliform counts between 1.0 x 104 and 2.3 x 106 cfu/g. The composting process was partially efficient, since even though coliform counts were reduced, enterotoxigenic E. coli was detected in mature compost.

Characterization of bacterial population during composting of municipal solid waste

Composting is a natural biological process that degrades organic matter which is carried out spontaneously by aerobic microorganisms, whose metabolic action leads to the mineralization and partial humification of organic residue. The aim of this study was to investigate survival of potentially pathogenic bacterial species throughout the process and detection of enterotoxigenic Escherichia coli (ETEC) in the compost using PCR. The presence of heterotrophic bacteria, total total and fecal coliforms, and bacteria succession were also de detrermined. Out of the total 222 bacterial colonies isolated, 33 different genera and 56 different species were identified, being Bacillus, Escherichia, Enterobacter, and Pseudomonas, the prevailing genera. Total coliform counts ranged between 9.0 x 104 and 3.0 x 106 cfu/g, and fecal coliform counts between 1.0 x 104 and 2.3 x 106 cfu/g. The composting process was partially efficient, since even though coliform counts were reduced, enterotoxigenic E. coli was detected in mature compost.

Evaluation of the activity of disinfectants against coliform bacteria group strains isolated from a sewage treatment plant (ETE-Ipanema)

Municipal wastewater usually presents pathogenic enteric bacteria, viruses and intestinal parasites. Primary, secondary and tertiary wastewater treatment eliminates 90-99.9% of these microorganisms and if a more efficient reduction of microorganisms is needed, disinfection with chemical compounds must be done. The extraordinary genetic variability of bacteria gives them adaptation ability against theses chemical agents, which indiscriminate use brings about serious health problems. In this study, chemical agents commonly used in disinfection procedures like chlorhexidine gluconate, sodium hypochlorite and quaternary ammonium compounds were investigated for their activity against bacteria from the coliform group, isolated from a sewage treatment plant, using the macrodilution method. It was observed that the addition of organic matter interferes in sensitivity levels and also that the lower the concentration and the exposure time, the higher the resistance. Sodium hypochlorite was the most effective against the coliforms, once inhibited their growth in every exposure time and at every disinfectant concentration used . Quaternary ammonium compounds and chlorhexidine gluconate were also effective, although a higher percentage of resistance was observed for both.

Evaluation of the activity of disinfectants against coliform bacteria group strains isolated from a sewage treatment plant (ETE-Ipanema)

Municipal wastewater usually presents pathogenic enteric bacteria, viruses and intestinal parasites. Primary, secondary and tertiary wastewater treatment eliminates 90-99.9% of these microorganisms and if a more efficient reduction of microorganisms is needed, disinfection with chemical compounds must be done. The extraordinary genetic variability of bacteria gives them adaptation ability against theses chemical agents, which indiscriminate use brings about serious health problems. In this study, chemical agents commonly used in disinfection procedures like chlorhexidine gluconate, sodium hypochlorite and quaternary ammonium compounds were investigated for their activity against bacteria from the coliform group, isolated from a sewage treatment plant, using the macrodilution method. It was observed that the addition of organic matter interferes in sensitivity levels and also that the lower the concentration and the exposure time, the higher the resistance. Sodium hypochlorite was the most effective against the coliforms, once inhibited their growth in every exposure time and at every disinfectant concentration used . Quaternary ammonium compounds and chlorhexidine gluconate were also effective, although a higher percentage of resistance was observed for both.

Avaliação da eficácia do tratamento de esgotos de um sistema de lagoa de estabilização através da identidicação de população bacteriana

As lagoas de estabilização para tratamento de esgoto sanitário são processos biológicos eficientes e econômicos utilizados como solução satisfatória para a remoção de microrganismos potencialmente patogênicos. Neste trabalho, foram isoladas e identificadas bactérias aeróbias e anaeróbias facultativas presentes na Estação de Tratamento de Esgoto (ETE) - Ipanema, Porto Alegre/RS com o objetivo de avaliar a eficiência do processo de tratamento de esgotos. Foram realizadas coletas trimestrais durante o período de um ano. As amostras foram coletadas do afluente, da lagoa facultativa, da lagoa de maturação e do efluente, semeadas em diferentes meios de cultura para a identificação bacteriana. Foram isoladas e identificadas 392 bactérias, destas 40.8% pertencentes ao gênero  Enterobacter, 29.6% ao gênero Bacillus, 6.63% de Acinetobacter e, 4.84% do gênero Alcaligenes e os demais 18.13% distribuídos entre outros 12 gêneros, os quais foram predominantemente Gram-negativos. Observou-se um decréscimo no número de coliformes totais e fecais no afluente e efluente, como dos gêneros bacterianos durante as etapas do sistema de tratamento bem como a DBO, demonstrando a eficácia do processo.

Avaliação da eficácia do tratamento de esgotos de um sistema de lagoa de estabilização através da identidicação de população bacteriana

As lagoas de estabilização para tratamento de esgoto sanitário são processos biológicos eficientes e econômicos utilizados como solução satisfatória para a remoção de microrganismos potencialmente patogênicos. Neste trabalho, foram isoladas e identificadas bactérias aeróbias e anaeróbias facultativas presentes na Estação de Tratamento de Esgoto (ETE) - Ipanema, Porto Alegre/RS com o objetivo de avaliar a eficiência do processo de tratamento de esgotos. Foram realizadas coletas trimestrais durante o período de um ano. As amostras foram coletadas do afluente, da lagoa facultativa, da lagoa de maturação e do efluente, semeadas em diferentes meios de cultura para a identificação bacteriana. Foram isoladas e identificadas 392 bactérias, destas 40.8% pertencentes ao gênero  Enterobacter, 29.6% ao gênero Bacillus, 6.63% de Acinetobacter e, 4.84% do gênero Alcaligenes e os demais 18.13% distribuídos entre outros 12 gêneros, os quais foram predominantemente Gram-negativos. Observou-se um decréscimo no número de coliformes totais e fecais no afluente e efluente, como dos gêneros bacterianos durante as etapas do sistema de tratamento bem como a DBO, demonstrando a eficácia do processo.