Resumo
Um dos herbicidas mais comumente usados na agricultura é o ácido 2,4 diclorofenoxiacético, seu uso indiscriminado tem gerado aumento da poluição das águas, causando grandes preocupações ambientais. O objetivo do presente estudo foi determinar os efeitos toxicológicos do herbicida 2,4-D em juvenis de Rhamdia quelen (jundiá). Para tal, 96 exemplares de Rhamdia quelen foram submetidos a um teste agudo (96h) de exposição ao herbicida 2,4 D nas concentrações crescentes de 0,0 (grupo controle); 15; 30 e 45 mg/L. Para cada concentração foram feitas 4 réplicas, com 6 exemplares cada. Após 96 horas, os animais foram pesados, medidos e anestesiados para a coleta de sangue para as análises hematológicas, sendo quantificados: o número de eritrócitos, leucócitos, trombócitos e monócitos. Em seguida, os animais foram eutanasiados e laparatomizados para a coleta dos músculos e fígados destinados às análises histomorfométricas e bioquímicas. Para histomorfometria, fígado e músculo foram isolados limpos e pesados sendo submetidos a técnicas histológicas de rotina, corados e avaliados quanto ao Índice hepatossomático (IHS) e Fator de condição (FC). Um fragmento hepático, foi destinado análise enzimática da Lipoperoxidação oxidativa (LPO), Acetilcolinesterase (AChE) e Proteínas totais (PT). As análises hematológicas mostraram que o 2,4-D provoca alteração no número de leucócitos, monócitos e trombócitos, em todas as concentrações em comparação ao grupo controle (não exposto). Já o valor médio de eritrócitos foi de 1,6x106µL-1 . O 2,4-D não alterou significativamente o diâmetro das fibras musculares, porém o herbicida nas concentrações de 30 e 45mg/L reduziu e aumentou, respectivamente, o número de hepatócitos quando comparado ao grupo controle (não exposto). A atividade da LPO hepática não foi alterada pelo 2,4-D em nenhuma concentração utilizadas. Similarmente, não foi evidenciada inibição da atividade da Acetilcolinesterase (AChE) hepática nos animais expostos ao 2,4-D. Todavia, nas concentrações de 30 e 45mg/L do 2,4-D foi observada redução da proteína total. As alterações encontradas em Rhamdia quelen expostos a 2,4-D indicam que, agudamente a exposição ao herbicida promove principalmente danos hepáticos e hematológicos, indicando maior vulnerabilidade destes tecidos ao herbicida a curto prazo. É provável que a exposição crônica possa elevar o dano e provocar maiores alterações em outros tecidos. Os resultados obtidos neste trabalho demonstrarão o grau de toxicidade do herbicida e serão apresentados em dois capítulo que irão contribuir com novas pesquisas desenvolvidas com ensaios toxicológicos utilizando o herbicida 2,4-D, os dados irão auxiliar na compreensão dos comportamentos morfométricos, histológicos, hematológicos e bioquímicos de juvenis da espécie Rhamdia quelen, expostos a uma contaminação aguda pelo herbicida 2,4-D.
One of the most commonly used herbicides in agriculture is 2.4-dichlorophenoxyacetic acid, its indiscriminate use has generated an increase in water pollution, causing great environmental concerns. The aim of the present study was to determine the toxicological effects of the 2.4-D herbicide on juveniles of Rhamdia quelen (jundiá). For this purpose, 96 specimens of Rhamdia quelen were submitted to an acute test (96h) of exposure to the 2.4-D herbicide at increasing concentrations of 0.0 (control group); 15; 30 and 45 mg/L. For each concentration, 4 replicates were made, with 6 copies each. After 96 hours, the animals were weighed, measured and anesthetized for blood collection for hematological analysis, and the number of erythrocytes, leukocytes, thrombocytes and monocytes was quantified. Then, the animals were euthanized and laparatomized to collect the muscles and livers for histomorphometric and biochemical analysis. For histomorphometry, liver and muscle were isolated clean and weighed and subjected to routine histological techniques, stained and evaluated for hepatosomatic index (HSI) and condition factor (CF). A liver fragment was destined for enzymatic analysis of Oxidative Lipoperoxidation (OLP), Acetylcholinesterase (AChE) and Total Proteins (TP). Hematological analysis showed that 2.4-D causes changes in the number of leukocytes, monocytes and thrombocytes at all concentrations compared to the control group (not exposed). The mean value of erythrocytes was 1.5x106µL-1 . 2.4-D did not significantly change the diameter of muscle fibers, but the herbicide at concentrations of 30 and 45mg/L reduced and increased, respectively, the number of hepatocytes when compared to the control group (no exposed). The activity of hepatic LPO was not altered by 2.4-D at any of the concentrations used. Similarly, there was no evidence of inhibition of hepatic Acetylcholinesterase (AChE) activity in animals exposed to 2.4-D. However, at concentrations of 30 and 45mg/L of 2.4-D, a reduction in total protein was observed. The changes found in Rhamdia quelen exposed to 2.4- D indicate that acute exposure to the herbicide mainly promotes liver and hematological damage, indicating greater vulnerability of these tissues to the herbicide in the short term. It is likely that chronic exposure can increase the damage and cause greater changes in other tissues. The results obtained in this work will demonstrate the degree of toxicity of the herbicide and will be presented in two chapters that will contribute to new researches developed with toxicological tests using the 2.4-D herbicide, the data will help to understand the morphometric, histological, hematological behaviors and biochemicals of juveniles of the species Rhamdia quelen, exposed to an acute contamination by the 2.4-D herbicide.
Resumo
O ensaio toxicológico foi realizado com o objetivo de determinar o potencial tóxico do fármaco ibuprofeno através de alterações comportamentais e alterações histopatológicas em brânquias e fígados de juvenis de Rhamdia quelen submetidos a diferentes concentrações de Ibuprofeno (0,0; 0,5; 5,0 e 50,0 mg/L). As quais foram determinadas a partir de ensaios agudos com uma CL50 de 5,0mg/L. Para cada concentração foram feitas quatro réplicas, com quatro exemplares, cada. O experimento teve duração total de 120 horas. Na preparação do material foi utilizada a técnica histológica de rotina para inclusão em parafina, e para as análises as lâminas foram coradas com Hematoxilina e Eosina. Foram evidenciadas alterações nos tecidos analisados, como: Fusão incompleta de lamelas e aneurisma, entre outras, para as brânquias e vacuolização citoplasmática e necrose focal, entre outras, para os fígados, as quais foram classificadas em estágios I, II e III, quanto a severidade das lesões, determinado o Índice de Alterações Histológicas e os Valores Médios das Alterações. O fármaco apresentou potencial tóxico para esta espécie, mesmo em concentrações baixas, sendo evidenciados danos que vão de moderados a severos nos fígados e brânquias dos peixes analisados.
The toxicological test was performed to determine the toxic potential of the drug ibuprofen through histopathological eyepieces in gills and livers of Rhamdia quelen juveniles submitted to different concentrations of Ibuprofen (0,0; 0,5; 5,0 e 50,0 mg/L). These were determined from acute tests with an CL50 of 5,0mg/L. For each of them, four replicates, with four specimens each. The experiment lasted 120 hours. In preparing the material for the routine histological technique for inclusion in paraffin, and as analyzes as slides were stained with Hematoxylin and Eosin. Our analogues were tested, such as: Incomplete lamellae and aneurysm fusion, among others, for gills and vacuolization, cytoplasmic and focal necrosis, among others, for livers, which were classified in stages I, II and III for Severity of injuries, determined the Index of Historical Changes and Average Values of Changes. The drug presented toxic potential for this species, even at low concentrations, and damages ranging from moderate to severe in the livers and gills of the fish analyzed were observed.