Resumo
A criptosporidiose e a giardíase são doenças gastrointestinais, com distribuição cosmopolita, causada, respectivamente, por um protozoário coccídio intracelular obrigatório e um parasito flagelado, que pode afetar humanos e animais. O objetivo neste projeto foi detectar por meio da técnica TF-Test Coccidia e pela reação em cadeia da polimerase (RCP), a ocorrência do Cryptosporidium spp. e a Giardia spp. em crianças de pré-escola e seus respectivos cães (Canis familiaris) do Município de Araçatuba, São Paulo, de maneira inédita. Para a identificação dos oocistos do parasito supramencionado foi empregada a nova técnica parasitológica TF-Test Coccidia e RCP. A partir da análise destas amostras, verificou-se que 35,00% (35/100) das crianças estavam infectadas por alguma espécie de parasito intestinal, sendo que 5,00% eram positivas microscopicamente para Cryptosporidium spp. e 30,00% para Giardia spp. Nos cães, 3,13% (1/32) foram considerados positivos para Giardia spp., embora nenhum animal apresentasse oocisto de Cryptosporidium spp. nas fezes. Pela PCR 3,00% das crianças foram positivas para Cryptosporidium spp. e 35,00% para Giardia spp.. Enquanto que para os cães, pela mesma técnica molecular, nenhum animal foi considerado positivo para Cryptosporidium spp. e apenas 6,25% foram positivos para Giardia spp.. Dessa forma, foi verificado que a técnica parasitológica TF-Test Coccidia apresentou boa concentração e morfologia dos parasitos encontrados, com baixa quantidade de debris no esfregaço fecal. Pela primeira vez, Cryptosporidium spp. e a Giardia spp. foram detectados em crianças de pré-escola e seus respectivos cães (Canis familiaris) por meio da técnica TF-Test Coccidia e RCP.
Cryptosporidiosis and giardiasis are gastrointestinal diseases with cosmopolitan distribution, caused respectively by a compulsory intracellular coccidial protozoan and a flagellated parasite, which can affect humans and animals. The objective of this project was to detect by the technique TF-Test Coccidia and polymerase chain reaction (PCR), the occurrence of Cryptosporidium spp. and Giardia spp. in pre-school children and their respective dogs (Canis familiaris) from the Municipality of Araçatuba, São Paulo. For the identification of oocysts of the parasite the new parasitological technique TF-Test Coccidia and PCR were used. From the analysis of these samples, it was verified that 35.00% (35/100) of the children were infected by some kind of intestinal parasite, and 5.00% were microscopically positive for Cryptosporidium spp. and 30,00% for Giardia spp.. In dogs, 3.13% (1/32) were considered positive for Giardia spp., although no animal presented Cryptosporidium spp. Oocyst. in the stool. By PCR 3.00% of the children were positive for Cryptosporidium spp. and 35.00% for Giardia spp.. While for dogs, by the same molecular technique, no animals were considered positive for Cryptosporidium spp. and only 6.25% were positive for Giardia spp.. Thus, was verified that the parasitological technique TF-Test Coccidia presented good concentration and morphology of the parasites found, with a low amount of debris in the fecal smear. For the first time, Cryptosporidium spp. and Giardia spp. were detected in pre-school children and their respective dogs (Canis familiaris) by TF-Test Coccidia and PCR technique.
Resumo
O objetivo do presente estudo foi investigar, por métodos estatísticos, a ocorrência de reações cruzadas entre Leishmania spp. e Ehrlichia spp. com o uso de técnicas sorológicas e moleculares. Um total de 100 amostras sanguíneas de cães foram colhidas e processadas por meio do ELISA (Ensaio Imunoenzimático Indireto) e PCR (Reação em Cadeia da Polimerase). A análise estatística consistiu nos testes de McNemar e Coeficiente de concordância Kappa. As estatísticas foram consideradas significativas quando p<0,05. A sensibilidade e especificidade dos testes foram determinadas pela curva ROC (Receiver Operator Characteristic), considerando o PCR como teste padrão ouro. A partir das análises pode-se verificar que 48,0% dos animais foram reativos na ELISA e 58,0% foram positivos na PCR, no caso da Leishmania spp. Para Ehrlichia spp., a ocorrência de anticorpos pelo ELISA foi de 54,0% e, pela PCR, 48,0% dos cães foram positivos. Nota-se, também, que 37,0% dos animais foram positivos para os dois patógenos por meio do teste molecular, e quatro cães foram reativos no teste ELISA para ambas as doenças e tiveram resultado negativo apena s no teste molecular de Ehrlichia spp. Estes resultados, na sorologia, podem sugerir possíveis casos de reatividade cruzada entre a Leishmania spp. e Ehrlichia spp.. Entretanto, é mais provável que estes resultados estejam relacionados com a coinfecção desses agentes. Por meio dos resultados obtidos, há mais evidências de coinfecção por estes dois agentes patogênicos no cão, do que reatividade cruzada entre eles.
The aim of this study is to investigate, by statistical methods, the occurrence of cross-reactivity between Leishmania spp. and Ehrlichia spp. using serological and molecular techniques. A total of 100 blood samples from dogs were collected and processed by ELISA (indirect Enzyme-Linked Immunosorbent Assay) and PCR (polymerase chain reaction). Statistical analysis consists of McNemar tests and agreement coefficient Kappa. The statistics were considered significant when p <0.05. The sensitivity and specificity of the tests were determined by ROC curve (Receiver Operator Characteristic), considering the PCR as gold standard. From the analysis it can be seen that 48,0% of the animals were reactive in ELISA and 58,0% were positive in PCR in the case of Leishmania spp. For Ehrlichia spp., the occurrence of antibodies by ELISA was 54,0% and, by PCR, 48,0% of the dogs were positive. It can be noted also that 37,0% of the animals were positive for both parasites through molecular test and four dogs were reactive in the ELISA test for both diseases and were negative only in molecular test for Ehrlichia spp. These results in serology can suggest possible cases of cross-reactivity between Leishmania spp. and Ehrlichia spp.. However, it is more likely that these results are related to coinfection of these agents. Through the results obtained, there are more evidences of coinfection by these two pathogens in dogs than cross-reactivity between them.