Resumo
As membranas biológicas são tecidos compostos principalmente de colágeno e utilizadas de forma a servir de arcabouço em cirurgias reparadoras. Dentre os tecidos utilizados para essa finalidade, há o pericárdio, que é basicamente composto por tecido colágeno e uma fina camada de células epiteliais, suportando boa carga de tração em ensaios biomecânicos. O principal meio utilizado para conservação dessas membranas nas últimas décadas foi a glicerina 98%. Este trabalho objetivou analisar, primeiramente, se há diferenças na tração de acordo com o sentido da coleta em pericárdios bovinos, avaliar diferentes meios de conservação, por até 4 meses. Foi padronizado a abertura do pericárdio no sentido do maior eixo do coração (da base para o ápice), depois com a utilização de um molde realizado a coleta dos corpos de prova com 1 cm de largura e 4 cm de comprimento em sentido paralelo e perpendicular, ao corte de padronização. Foram utilizados 20 pericárdios provenientes de animais machos ou fêmeas, entre 18 e 32 meses, os pericárdios foram lavados em água corrente realizado a sua limpeza para retirada de gordura e os corpos de prova colocados para ensaio biomecânico de tração. Após a padronização do sentido de coleta perpendicular, foram colocados 14 pericárdios bovinos, utilizando o mesmo sentido de corte padronizado, colocados em caixas contendo os seguintes meios glicerina, propilenoglicol, etilenoglicol, butanol, álcool etílico e solução salina a 150%. Os meios foram avaliados mensalmente para cultura microbiológica e as membranas para ensaios biomecânicos de tração. Foi observado diferença significativa da força máxima de ruptura no sentido de coleta perpendicular ao maior eixo do coração, do que o sentido paralelo. Portanto foi padronizado o sentido de coleta perpendicular para as amostras que foram colocadas nos meios de conservação. Foi observado o aumento de força de ruptura significativamente das membranas conservadas no butanol nos períodos 30, 60 e 120 dias e no etilenoglicol com 30 dias. Já a força de deformação só não foi observada diferença estatística comparando o pericárdio fresco as membranas armazenadas no cloreto de sódio a 150%. Foi observado crescimento microbiológico somente no etilenoglicol e solução salina a 150% no momento 60 dias, nos outros meios não foi observado crescimento microbiológico. Todos os meios se demostraram viáveis para a conservação do pericárdio bovino, sendo que o butanol e o etilenoglicol proporcionaram maior resistência.
Biological membranes are tissues composed mainly of collagen and used in order to serve as a framework in reparative surgeries. Among the tissues used for this purpose, there is the pericardium, which is basically composed of collagen tissue and a thin layer of epithelial cells, supporting a good traction load in biomechanical tests. The main means used for the conservation of these membranes in the last decades was glycerin 98%. This work aimed to analyze, first, if there are differences in traction according to the direction of collection in bovine pericardiums, to evaluate different means of conservation, for up to 4 months. The opening of the pericardium in the direction of the largest axis of the heart (from the base to the apex) was standardized, then with the use of a mold, the specimens were collected 1 cm wide and 4 cm long in a parallel and perpendicular direction, to the standardization cut. Twenty pericardiums from male or female animals were used, between 18 and 32 months, the pericardiums were washed in running water, cleaned to remove fat and the specimens were placed for biomechanical traction testing. After standardizing the direction of perpendicular collection, 14 bovine pericardiums were placed, using the same standardized cutting direction, placed in boxes containing the following media: glycerin, propylene glycol, ethylene glycol, butanol, ethyl alcohol and saline solution 150%. The media were evaluated monthly for microbiological culture and the membranes for biomechanical tensile tests. There was a significant difference in the maximum rupture force in the direction of collection perpendicular to the largest axis of the heart, than in the parallel direction. Therefore, the direction of perpendicular collection was standardized for the samples that were placed in the conservation media. It was observed a significant increase in the breaking strength of the membranes conserved in butanol at periods 30, 60 and 120 days and in ethylene glycol at 30 days. However, the deformation force was not observed only when comparing the fresh pericardium with the membranes stored in sodium chloride 150%. Microbiological growth was observed only in ethylene glycol and saline solution 150% at the time of 60 days, in other media no microbiological growth was observed. All means proved to be viable for the conservation of bovine pericardium, but butanol and ethylene glycol provided greater resistance.
Resumo
A síndrome cólica um dos distúrbios de maior importância em equinos, a se destacar entre suas causas os quadros obstrutivos, decorrentes de corpos estranhos e ou enterólitos localizados no cólon menor. No desenvolvimento da cólica há diminuição do fluxo sanguíneo local ao qual se segue, quando de sua correção, a reperfusão sanguínea. A isquemia seguida de reperfusão é a causa do aumento da lesão degenerativa principal pós-cirúrgica. As lesões de reperfusão podem ser causadas pela produção e liberação de espécies reativas de oxigênio(EROs). Diante disto, objetivou-se no presente trabalho analisar moléculas decorrentes da oxidação celular e substâncias antioxidantes no soro e no tecido do cólon menor em equinos submetidos experimentalmente a obstrução intraluminal do cólon menor. Também foram avaliados parâmetros físicos frequência cardíaca (FC), frequência respiratória (FR), temperatura retal (Tr), motilidade, tempo de preenchimento capilar (TPC), coloração de mucosas, pulso digital e turgor cutâneo. Análises hematimétricas e leucométricas foram efetuadas em diferentes momentos. Análises no soro para determinação de malondialdeido (MDA), produto protéico de oxidação avançada (AOPP) (metabólitos da oxidação), glutationa (GSH) e vitamina E (Vit. E) (substâncias antioxidantes), foram realizadas em diferentes momentos: M0 (momento antes do procedimento anestésico e precurção da obstrução), M4 (4 horas, retirada da obstrução), M12, M24, M36, M48, M60 e M72 (correspondendo a 12, 24, 36, 48, 60 e 72 horas após a obstrução). No cólon menor foram obtidas amostras em M0 (antes da obstrução), após 4 horas de obstrução intestinal (M4) foram obtidas na região oral, obstruída e aboral. Após 72 horas de pós cirúrgico (M72) realizou-se nova coleta das regiões do cólon menor. Nestas amostras de tecido foram realizadas as analises de MDA, AOPP, GSH e catalase. Nos parâmetros fisiológicos observou-se aumento significativo da FC e Tr em M12, e aumento da FR em M24. Na avaliação hematológica observou-se diminuição em relação a contagem de hemácias (He), hemoglobina (Hb), hematócrito (Ht) e plaquetas, em M4 com posterior aumento em M12, e nova diminuição em M48 com exceção das plaquetas que se mantiveram sem alteração. Já nas analises leucométricas, foi observado aumento de leucócitos em M12 e M24, sendo que esta ocorreu principalmente pelos neutrófilos bastonetes e segmentados. No soro observou-se aumento do GSH (p<0,05) em relação ao basal registrado a partir de 24 horas, mantendo-se elevado até 48 horas. A Vit E aumentou (p<0,05) 48 horas após o basal e persistiu até 72 horas. Nas amostras de tecido não foi observado diferença significativa. Portanto, pode-se concluir que a metodologia empregada com a finalidade de induzir quadro de cólica e lesões a parede do colón menor mostrou-se efetiva. No entanto, embora houvesse uma resposta oxidativa, não foi observado quadro de estresse oxidativo, uma vez que o aumento de agentes antioxidantes no soro se mostrou eficiente na neutralização dos radicais livres produzidos pela isquemia.
The syndrome colic one of the most important disorders in horses, stand out among its causes obstructive frames, resulting from foreign bodies and or enteroliths located in the lower colon. The development of colic there is reduced local blood flow which follows, when their correction, blood reperfusion. The ischemia followed by reperfusion is the cause of increased postoperative primary degenerative injury. Reperfusion injury can be caused by the production and release of reactive oxygen species (ROS). In view of this, the aim of the present study to analyze molecules resulting from cellular oxidation and antioxidants in serum and lower colonic tissue in horses submitted to experimental intraluminal obstruction of the lower colon. They also evaluated physical parameters heart rate (HR), respiratory rate (RR), rectal temperature (Tr), motility, capillary refill time (TPC), color of mucous membranes, digital pulse and skin turgor. Hematological analysis and leukocytes were made at different times. Analysis of serum for determination of malondialdehyde (MDA) and vitamin E (Vit E), protein product of advanced oxidation (AOPP) (oxidation metabolites), glutathione (GSH) (antioxidant flux), were held at different times: M0 (time before the anesthetic and procedure obstruction), M4 (4 hours, removal of the obstruction), M12, M24, M36, M48, M60 and M72 (corresponding to 12, 24, 36, 48, 60 and 72 hours after occlusion). In the lower colon samples were obtained from M0 (before blocking) after 4 hours of intestinal obstruction (M4) were obtained in the oral region and aboral obstructed. After 72 hours of post surgical (M72) held new collection regions of the lower colon. In these tissue samples were carried out analysis of MDA, AOPP, catalase and GSH. In physiological parameters we observed a significant increase in HR and Tr in M12, and an increase in RR in M24. Hematological evaluation showed a decrease compared to red blood cell count (He), hemoglobin (Hb), hematocrit (Ht) and platelets in M4 with subsequent increase in M12, and further reduction in M48 with the exception of platelets that remained without change. Already in leukocytes analysis, WBC increase was observed at M12 and M24, and this occurred mainly by neutrophils. In the serum was observed increase of GSH (p <0.05) compared to baseline recorded starting 24 hours, remaining increase until 48 hours. The Vit E increased (p <0.05) after 48 hours and initial persisted until 72 hours. All tissue samples there was no significant difference. Therefore, it can be concluded that the methodology used for the purpose of inducing colic above and lower colonic wall lesions showed effective. However, although there was an oxidative response, oxidative stress was observed above, since the increase in serum antioxidant agents proved efficient in neutralizing free radicals produced by ischemia.