Serological and molecular investigation of viral agents in free-living jaguars of the Pantanal wetlands, state of Mato Grosso, Brazil / Investigação sorológica e molecular de agentes virais em onças-pintadas de vida livre no Pantanal de Mato Grosso, Brasil

This study investigates the exposure of free-living jaguars from two federal protected areas in the Pantanal of Mato Grosso, Brazil, to a variety viral agents. These viral agents, particularly causing zoonotic diseases, were analyzed using serological and molecular methods. None of the jaguars was positive by RT-PCR for the molecular detection of avian influenza and West Nile Fever (WNF). Only one animal was serologically positive for Eastern Equine Encephalitis (EEE) by virus neutralization test in VERO cell cultures, representing the first reported case of jaguar exposure to EEE virus. However, all the animals were negative for Western Equine Encephalitis (WEE) virus and Venezuelan Equine Encephalitis (VEE) virus. Eleven jaguars were tested by two tests for the detection of antibodies against rabies virus (Simplified Fluorescent Inhibition Microtest SFIMT and Rapid Fluorescent Focus Inhibition Test RFFIT), resulting in five positive animals, two animals in each test and one in both serological tests. Furthermore, three out of 14 samples subjected to the neutralization test were positive for antibodies against canine distemper virus (CDV), and 15 out of 17 samples subjected to the hemagglutination-inhibition test (HI) were positive for antibodies against canine parvovirus (CPV). In view of the findings of this study, it is unlikely that the viruses examined here represent a threat to the jaguar populations in this region.(AU)

Este estudo investigou a exposição de onças-pintadas de vida livre a agentes virais selecionados em duas unidades de conservação federais no Pantanal de Mato Grosso, Brasil. Para a análise desses agentes virais, a maioria de caráter zoonótico, foram utilizados métodos sorológicos e moleculares. Nenhuma das onze onças-pintadas examinadas foi positiva na técnica de real-time RT-PCR para a detecção molecular dos agentes da Influenza aviária e Febre do Nilo Ocidental (WNF). Somente um animal foi positivo sorologicamente para a o vírus da Encefalite Equina do Leste (EEE) pela Microtécnica de vírus neutralização em culturas de células VERO, sendo este o primeiro relato da exposição de onças-pintadas. Todos os animais examinados s foram negativos para o vírus da Encefalite Equina do Oeste (WEE) e Venezuelana (VEE). Amostras de soro colhidas de 11 onças-pintadas foram submetidas a adois testes distintos para a detecção de anticorpos contra o vírus da raiva (Teste Rápido de Inibição de Foco de Fluorescência RFFIT e Microteste Simplificado de Inibição da Fluorescência - SFIMT), resultando em cinco animais positivos, dos quase dois positivos para cada teste e um positivo quando submetido aos dois testes sorológicos. Além disso, três das 14 amostras submetidas a técnica de soroneutralização foram positivas para a pesquisa de anticorpos contra o vírus da cinomose (CDV) e 15 amostras positivas das 17 analisadas para a pesquisa de anticorpos contra o parvovírus canino (CPV) foram identificadas pela técnica de Inibição da Hemaglutinação (HI). De acordo com os resultados deste estudo, é pouco provável que os agentes virais aqui analisados representem ameaça à população de onças pintadas nesta região.(AU)

Identification of a mutation in the spike protein cleavage site in Brazilian strains of wild-type bovine coronavirus

The spike (S) protein of coronaviruses, a type I membrane glycoprotein, is primarily responsible for entry into susceptible cells by binding with specific receptors on cells and mediating subsequent virus-cell fusion. The bovine coronavirus (BCoV) S protein is cleaved into two subunits, the N-terminal S1 and the C-terminal S2. The proteolytic cleavage site of S protein is highly conserved among BCoV strains and is located between amino acids 763 and 768 (KRRSRR). This study describes a single mutation in the S protein cleavage site of three Brazilian strains of BCoV detected in diarrheic fecal samples from calves naturally infected. The sequenced PCR products revealed that amino acid sequence of the cleavage site of our strains was KRRSSR, indicating a mutation at amino acid position 767 (R FONT FACE=Symbol>® /FONT> S). This amino acid substitution occurred due to a single nucleotide substitution in the sequence of DNA corresponding to the proteolytic cleavage site, CGT to AGT. This is the first description of this nucleotide mutation (C to A), which resulted in the substitution of arginine to serine in the S cleavage site. In this study we speculated the probable effects of this mutation in the proteolytic cleavage site using the murine hepatitis coronavirus (MHV) as a comparative model.

A proteína da espícula (S), uma glicoproteína de membrana do tipo I, é primariamente responsável pela entrada do vírus em células susceptíveis por meio da interação inicial com receptores celulares específicos e subseqüente mediação da fusão vírus-célula. A proteína S do coronavírus bovino (BCoV) é clivada em duas subunidades: a S1, na região N-terminal e a S2, na região C-terminal. O sítio de clivagem proteolítica da proteína S é altamente conservado entre as estirpes de BCoV e está situado entre os aminoácidos 763-768 (KRRSRR). Este estudo descreve uma mutação no sítio de clivagem da proteína S de três estirpes do BCoV detectadas em amostras fecais diarréicas de bezerros naturalmente infectados no Brasil. O seqüenciamento dos produtos de PCR identificou a seqüência de aminoácidos KRRSSR no sítio de clivagem de nossas amostras, indicando uma mutação na posição 767 (R->S). Esta mutação ocorreu devido a uma única substituição de nucleotídeo no sítio de clivagem proteolítica, alterando o códon CGT para AGT. Esta é a primeira descrição desta mutação de nucleotídeo (C para A), que resultou na substituição do aminoácido arginina por serina no sítio de clivagem da proteína S. Neste estudo também são sugeridos os prováveis efeitos desta mutação no sitio de clivagem proteolítica utilizando o coronavírus da hepatite dos camundongos (MHV) como um modelo comparativo.

Virus isolation and molecular characterization of canine distemper virus by RT-PCR from a mature dog with multifocal encephalomyelit

A case of multifocal distemper encephalomyelitis in a mature dog is described. In the presented case the ante mortem clinical diagnosis of canine distemper virus (CDV) infection could not be ideally performed due to the absence of typical signs of distemper, such as myoclonus and systemic signs accompanying the nervous signs. The definitive diagnosis of distemper encephalomyelitis was only carried out at post mortem through virus isolation in cell culture from fresh central nervous system (CNS) fragments and CDV nucleoprotein gene detection in the CNS by RT-PCR.

Descreve-se um caso de encefalomielite multifocal pela cinomose em um cão adulto. No caso apresentado o diagnóstico clínico da infecção pelo vírus da cinomose canina (CDV) não pode ser adequadamente realizado devido à ausência de sinais típicos da enfermidade, tais como mioclonia e sinais sistêmicos. O diagnóstico definitivo somente foi possível post mortem pelo isolamento do CDV em cultivo celular a partir dos fragmentos frescos do sistema nervoso central (SNC) e pela detecção do gene da nucleoproteína do CDV em fragmentos do SNC por meio da RT-PCR.

Bovine herpesvirus 5 detection by virus isolation in cell culture and multiplex-PCR in central nervous system from cattle with neurological disease in Brazilian herds

Bovine herpesvirus 5 (BoHV-5) is an important cause of meningoencephalitis in young and adult cattle. The multiple etiology of neurological disturbances in cattle makes the quick and conclusive diagnosis of BoHV-5 infection important for animal and public health, mainly because of herbivore rabies that is endemic in Brazilian cattle herds. The objective of this retrospective study was to use a multiplex-polymerase chain reaction (multiplex-PCR) for BoHV-5 and BoHV-1 glycoprotein C gene detection from stored central nervous system (CNS) tissue fragments of cattle with neurological clinical signs. Forty-seven frozen CNS samples of young and adult cattle from 31 herds in three Brazilian geographical regions (South, Southeast, and Center-west) were evaluated. Eighteen (38.3%) of these CNS samples were BoHV-positive by virus isolation in cell culture. By multiplex-PCR 30 (63.8%) CNS samples were BoHV-5 positive. All 18 positive samples by virus isolation were confirmed as BoHV-5 by the multiplex-PCR, that provided a increase of 25.5% (12/47) in the BoHV-5 diagnosis rate. BoHV-1 was not detected in any CNS sample. This retrospective study demonstrated the wide regional distribution of BoHV-5 infection in Brazilian cattle herds since positive results were obtained in CNS samples of cattle with neurological disease from Paraná, São Paulo, Minas Gerais, Mato Grosso, and Mato Grosso do Sul States.

O herpesvírus bovino 5 (BoHV-5) é um importante agente etiológico de meningoencefalite em bovinos jovens e adultos. A etiologia múltipla dos distúrbios neurológicos em bovinos torna o diagnóstico conclusivo do BoHV-5 importante tanto em termos de sanidade animal quanto de saúde pública, principalmente pela característica endêmica da raiva dos herbívoros nos rebanhos bovinos brasileiros. O objetivo desse estudo retrospectivo foi utilizar a reação em cadeia da polimerase (multiplex-PCR) para a detecção do gene da glicoproteína C do BoHV-5 e do BoHV-1 em fragmentos estocados de sistema nervoso central (SNC) de bovinos com sinais clínicos neurológicos. Foram avaliadas 47 amostras congeladas de fragmentos de SNC de bovinos jovens e adultos pertencentes a 31 rebanhos de três regiões geográficas brasileiras (Sul, Sudeste e Centro-oeste). Por meio do isolamento viral em cultivo celular foi possível o isolamento do BoHV em 18 (38,3%) amostras. Pela técnica de multiplex-PCR 30 (63,8%) amostras de SNC foram positivas para o BoHV-5. Todas as 18 amostras positivas no isolamento viral foram confirmadas como BoHV-5 pela multiplex-PCR, proporcionando um incremento na taxa de diagnóstico do BoHV-5 de 25,5% (12/47). Em nenhuma das amostras avaliadas foi possível a identificação do BoHV-1 pela multiplex-PCR. Esse estudo retrospectivo demonstrou a ampla distribuição da infecção pelo BoHV-5 nos rebanhos bovinos brasileiros uma vez que resultados positivos foram obtidos em amostras de SNC colhidas de bovinos com doença neurológica, provenientes dos estados do Paraná, São Paulo, Minas Gerais, Mato Grosso e Mato Grosso do Sul.

Resistência de estafilococos de origem canina, frente à drogas anti microbianas em Londrina, PR / Resistência de estafilococos de origem canina, frente à drogas anti microbianas em Londrina, PR

The sensitivity of 71 staphylococci (S. aureus and S. intermedius), isolated from dogs with signs of skin disease, to J1 chemotherapeutic agents was determined. Of the strains, 55(77,46%) were resistant to amicacin, 29(40,84%) to penicillin G, 26(36,61%) to ampicillin, 24(33,80%) to tetracycline, 15(21,13%) to chloramphenicol, 12(16,90%) to erytromycin, 11(15,49%) to kanamycin, 8(11,27%) to gentamycin, 5(7,04%) to sulfazothrim, 2(2,82%) to cefoxithin and 1(1,41%) to oxacillin.

Foram examinadas 71 cepas de estafilococos (S. aureus e S. intermedius) isoladas a partir de cães com pioderma, frente a 11 substâncias antimicrobianas. Das cepas, 55(77,46%) apresentaram resistência à amicacina, 29(40,84%) à penicilina G, 26(36,61%) à ampicilina, 24(33,80%) à tetraciclina, 15(21,13%) ao cloranfenicol, 12(16,90%) à eritromicina, 11(15,49%) à canamicina, 8(11,27%) à gentamicina, 5(7,04%) ao sulfazotrim, 2(2,82%) à cefoxitina e 1(1,41%) a oxacilina.

Resistência de estafilococos de origem canina, frente à drogas anti microbianas em Londrina, PR. / Resistência de estafilococos de origem canina, frente à drogas anti microbianas em Londrina, PR.

The sensitivity of 71 staphylococci (S. aureus and S. intermedius), isolated from dogs with signs of skin disease, to J1 chemotherapeutic agents was determined. Of the strains, 55(77,46%) were resistant to amicacin, 29(40,84%) to penicillin G, 26(36,61%) to ampicillin, 24(33,80%) to tetracycline, 15(21,13%) to chloramphenicol, 12(16,90%) to erytromycin, 11(15,49%) to kanamycin, 8(11,27%) to gentamycin, 5(7,04%) to sulfazothrim, 2(2,82%) to cefoxithin and 1(1,41%) to oxacillin.  

 Foram examinadas 71 cepas de estafilococos (S. aureus e S. intermedius) isoladas a partir de cães com pioderma, frente a 11 substâncias antimicrobianas. Das cepas, 55(77,46%) apresentaram resistência à amicacina, 29(40,84%) à penicilina G, 26(36,61%) à ampicilina, 24(33,80%) à tetraciclina, 15(21,13%) ao cloranfenicol, 12(16,90%) à eritromicina, 11(15,49%) à canamicina, 8(11,27%) à gentamicina, 5(7,04%) ao sulfazotrim, 2(2,82%) à cefoxitina e 1(1,41%) a oxacilina.    

Prevalência de anticorpos neutralizantes contra o herpesvírus bovino tipo 1, decorrente de infecção natural, em rebanhos com distúrbios reprodutivos

Serum samples of 1235 adult cattle not infectious bovine rhinotracheitis-vaccinated were analyzed by serum neutralization technique for Bovine Herpesvirus type 1 (BHV-1) antibodies. The samples were collected from 81 beef and dairy herds presenting reproductive problems, at 30 counties of Paraná State, Brazil. In dairy herds 41.9% (409/977) of the serum samples and 90.5% (57/63) of the herds were positives. In beef herds the index of positives was 50.8% (131/258) and 100% (18/18) for serum samples and herds, respectively. The total positive frequency of serum samples (43.7%) and herds (92.6%) show that BHV-1 infections has a wide dissemination in the studied region.

A detecção de anticorpos anti-Herpesvírus Bovino tipo 1 (BHV-1) foi realizada, através da técnica de soroneutralização, em 1235 amostras de soro de bovinos adultos, não-vacinados contra Rinotraqueíte Infecciosa Bovina. As amostras de soro analisadas foram colhidas em 81 rebanhos, com histórico de problemas reprodutivos, incluindo animais com aptidão para carne e leite, provenientes de 30 municípios do Estado do Paraná. Na amostragem proveniente de rebanhos leiteiros, 41,9% (409/977) das amostras de soro e 90,5% (57/63) dos rebanhos foram considerados positivos. Em bovinos de corte, o índice de soropositividade foi de 50,8% (131/258) e 100% (18/18) para amostras de soro e rebanhos, respectivamente. As freqüências de 43,7% (540/1235) de animais e 92,6% (75/81) de rebanhos soropositivos demonstram que as infecções por BHV-1 apresentam-se amplamente disseminadas nas regiões estudadas.

Ensaio imunoenzimático comercial no diagnóstico sorológico das infecções por herpesvírus bovino 1

The performance of a commercial immune assay in the identification antibody of natural infection or vaccination against bovine herpesvirus type 1 (BHV-1) in 1000 samples of bovine serum was evaluated. The comparative analysis from the result of the evaluated system and standard serum neutralization technique showed a rate of agreement of 97.05% (K=0.94) between the two serologic diagnotic methods.

Avaliou-se o desempenho de um ensaio imunoenzimático, obtido de fonte comercial, na identificação de anticorpos contra herpesvírus bovino tipo 1 (BHV-1), induzidos tanto por infecção natural quanto por vacinação, em 1000 amostras de soros sangüíneos de bovinos. A análise comparativa dos resultados obtidos no sistema avaliado e na técnica padrão de soroneutralização mostrou uma concordância de 97,05% (K=0,94) entre as duas metodologias de diagnóstico sorológico.

Ensaio imunoenzimático comercial no diagnóstico sorológico das infecções por herpesvírus bovino 1

The performance of a commercial immune assay in the identification antibody of natural infection or vaccination against bovine herpesvirus type 1 (BHV-1) in 1000 samples of bovine serum was evaluated. The comparative analysis from the result of the evaluated system and standard serum neutralization technique showed a rate of agreement of 97.05% (K=0.94) between the two serologic diagnotic methods.

Avaliou-se o desempenho de um ensaio imunoenzimático, obtido de fonte comercial, na identificação de anticorpos contra herpesvírus bovino tipo 1 (BHV-1), induzidos tanto por infecção natural quanto por vacinação, em 1000 amostras de soros sangüíneos de bovinos. A análise comparativa dos resultados obtidos no sistema avaliado e na técnica padrão de soroneutralização mostrou uma concordância de 97,05% (K=0,94) entre as duas metodologias de diagnóstico sorológico.

Prevalência de anticorpos neutralizantes contra o herpesvírus bovino tipo 1, decorrente de infecção natural, em rebanhos com distúrbios reprodutivos

Serum samples of 1235 adult cattle not infectious bovine rhinotracheitis-vaccinated were analyzed by serum neutralization technique for Bovine Herpesvirus type 1 (BHV-1) antibodies. The samples were collected from 81 beef and dairy herds presenting reproductive problems, at 30 counties of Paraná State, Brazil. In dairy herds 41.9% (409/977) of the serum samples and 90.5% (57/63) of the herds were positives. In beef herds the index of positives was 50.8% (131/258) and 100% (18/18) for serum samples and herds, respectively. The total positive frequency of serum samples (43.7%) and herds (92.6%) show that BHV-1 infections has a wide dissemination in the studied region.

A detecção de anticorpos anti-Herpesvírus Bovino tipo 1 (BHV-1) foi realizada, através da técnica de soroneutralização, em 1235 amostras de soro de bovinos adultos, não-vacinados contra Rinotraqueíte Infecciosa Bovina. As amostras de soro analisadas foram colhidas em 81 rebanhos, com histórico de problemas reprodutivos, incluindo animais com aptidão para carne e leite, provenientes de 30 municípios do Estado do Paraná. Na amostragem proveniente de rebanhos leiteiros, 41,9% (409/977) das amostras de soro e 90,5% (57/63) dos rebanhos foram considerados positivos. Em bovinos de corte, o índice de soropositividade foi de 50,8% (131/258) e 100% (18/18) para amostras de soro e rebanhos, respectivamente. As freqüências de 43,7% (540/1235) de animais e 92,6% (75/81) de rebanhos soropositivos demonstram que as infecções por BHV-1 apresentam-se amplamente disseminadas nas regiões estudadas.

The effects of Bovine herpesvirus type 1 infection on reproductive system of cattle / Consequências da infecção pelo herpesvirus bovino tipo 1 sobre o sistema reprodutivo de bovinos

Bovine herpesvirus type 1 (BHV-1) is recognized a major pathogen in young and adults bovines. After the first infection, the viral latency induces the animals of the carrier state and possible transmitters due to its viral reexcretion episodes. This BHV-1 biological characteristics is responsible for the maintenance and expansion of the infections which composes the Infectious bovine rhinotracheitis (IBR) and Infectious pustular vulvovaginitis (IPV) complex. In the dependency, among other factors, of the viral subtype may determine respiratory, reproductive, nervous and systemic signals. Despite of being identified in the 60s in Brazil, only recently BHV-1 infections were diagnosed in a routine, by serologic techniques. In the present cattle raising system, low levels of reproduction on bovine herd may be responsible for impossibility of the production. Therefore, the infections that undertake the reproductive scale assume a vast sanitary importance. This review has as objective to present and make comments on some topics related to etiologic agent, clinic signal symptoms, diagnosis, control and prophylaxis of BHV-1 infection that undertake the breeding reproduction on bovines.  

O Herpesvirus bovino tipo 1 (BHV-1) é reconhecidamente um dos principais patógenos de bovinos jovens e adultos. Após a primo infecção, a latência viral induz nos animais o estado de portadores e potenciais transmissores devido aos episódios de reexcreção viral. Esta característica biológica do BHV-1 é responsável pela manutenção e expansão da infecção nos rebanhos. Clinicamente as infecções que compõem o complexo rinotraqueíte infecciosa bovina (IBR) e vulvovaginite pustular infecciosa (IPV) na dependência, entre outros fatores, do subtipo virai podem ocasionar sinais respiratórios, reprodutivos, nervosos e sistêmicos. Mesmo tendo sido identificado no Brasil já na década de 60, apenas recentemente as infecções pelo BHV-1 passaram a ser rotineiramente diagnosticadas através de técnicas sorológicas. Particularmente nos sistemas de criação mais tecnificados, que exigem maiores custos de produção, baixos índices reprodutivos nos rebanhos bovinos podem ser responsáveis pela inviabilidade da exploração. Com isto, infecções que comprometem a esfera reprodutiva assumem grande importância sanitária. Esta revisão tem como objetivo apresentar e comentar alguns tópicos relativos ao agente etiológico, sinais clínicos, diagnóstico, controle e profilaxia das infecções pelo BHV-1 que apresentam como conseqüências, diretas e/ou indiretas, reduções no desempenho reprodutivo dos bovinos.    

Animal caliciviruses / Calicivírus animal

The caliciviruses were included in Picornaviridae family, and only in 1979 they were classified as Caliciviridae members. There are four genera included in this family: Vesivirus, Lagovirus, Norovirus and Sapovirus. Its genome consists of a single-stranded poly-adenylated RNA molecule with positive polarity. The Vesivirus genus includes viruses that cause vesicular disease in feline (FCV), swine (VESV) and cetacean and piniped (SMSV). Lagoviruses include the European brown hare syndrome virus (EBHSV) and Rabbit hemorrhagic disease virus (RHDV) which infects hare and rabbits causing hepatic disease. The noroviruses, previously named, Norwalk-like virus, are the main cause of nonbacterial human gastroenteritis in some European countries, United States and Japan. The natural hosts of this virus are the man, bovine, swine, and rats. Sapovirus infects human and swine, especially the young. In human the infection is normally a mild diarrhea. In swine it has been described intestinal villous atrophy and diarrhea in experimental infected piglets. Despite the high genetic variability of sapoviruses, recombination between strains from different genogroups or genotypes was already verified, which suggests the zoonotic potential of the disease.

Os calicivírus eram classificados como membros da família Picornaviridae e somente em 1979 foi proposta a criação da família Caliciviridae. Nessa família estão incluídos quatro gêneros: Vesivirus, Lagovirus, Norovirus e Sapovirus sendo o genoma constituído de uma molécula de RNA fita simples, linear, de polaridade positiva, poliadenilado na extremidade 3. O gênero Vesivirus compreende vírus causadores de doenças vesiculares em felinos (FCV), suínos (VESV) e cetáceos e pinípedes (SMSV). Os lagovírus incluem o European brown hare syndrome virus (EBHSV) e o Rabbit hemorrhagic disease virus (RHDV) que acometem lebres e coelhos causando doença hepática. Os norovírus, anteriormente denominados Norwalk-like virus, são considerados os mais importantes causadores de gastroenterite não-bacteriana em seres humanos adultos e crianças em países da Europa, nos Estados Unidos e Japão. Os hospedeiros naturais dos norovírus são os seres humanos, bovinos, suínos e ratos. Os sapovírus são descritos em seres humanos e suínos, e principalmente os indivíduos jovens são acometidos. Em seres humanos a infecção pelos sapovírus se manifesta como uma diarréia moderada e em suínos já foi verificada atrofia das vilosidades intestinais e diarréia em leitões experimentalmente infectados com a estirpe padrão Cowden. Apesar da grande variabilidade genética descrita nos sapovírus, já foram descritas recombinaç

Enteric virus with segmented double-stranded RNA genome in broiler chicken: Rotavirus, Reovirus and Picobirnavirus / Virus entéricos RNA fita dupla, segmentado, em aves: Rotavírus, Reovírus e Picobirnavírus

Enteric infections account for considerable economic losses to the poultry industry through weight loss, low food conversion, direct and indirect expenses with treatments and increased death rates. Poultry intestinal pathologies, either with local or general manifestations, can be caused by bacteria, protozoa or virus, acting alone or in association. Regarding viral etiology, several genera have been isolated from poultry with enteric disease. However, two genera from the Reoviridae family, the rotavirus and the reovirus are found more frequently in broiler chicken and/or laying hen feces. These viruses have been associated with clinical signs of enteritis in most epidemiological research. This revision aims to present some topics on the etiological agents (rotavirus, reovirus and picobirnavirus), the clinical disease and the diagnostic and control methods and prophylaxis of the infection.  

As infecções entéricas são responsáveis por consideráveis prejuízos econômicos à indústria avícola representados por perda de peso, baixa conversão alimentar, custos diretos e indiretos com tratamentos e por aumento na taxa de mortalidade. As patologias intestinais em aves, tanto com manifestação local quanto geral, podem ser determinadas por bactérias, protozoários e vírus, atuando de forma isolada ou em associação. Com relação a etiologia virai, vários gêneros têm sido isolados a partir de aves com enteropatias. Porém, dois gêneros na família Reoviridae, o rotavírus e o reovírus são encontrados com maior freqüência em fezes de frangos de corte e/ou galinhas poedeiras. Na maioria dos inquéritos epidemiológicos esses vírus estão associados a sinais clínicos de enterite. Esta revisão tem por objetivo apresentar alguns tópicos relativos aos agentes etiológicos (Rotavírus, Reovírus e Picobirnavírus), à doença clínica e aos métodos de diagnóstico, controle e profilaxia da infecção.  

Meningoencephalitis by Herpesvirus Type 5 / Herpesvírus Bovino Tipo 5 e Meningoencefalite Herpética Bovina

Bovine herpesvirus type 5 is an important pathogen in young and adult cattle and causes meningoencephalitis. The infection, although it causes low morbidity, can cause a lethality rate close to 100%. Diagnosis of the clinical disease is very important due to the similarities with other diseases that affect the cattle central nervous system, especially rabies. This revision aims to present topics related to the etiological agent, the disease, diagnosis and prophylaxis methods of bovine herpetic meningoencephalitis.

O herpesvírus bovino tipo 5 é um importante patógeno de bovinos jovens e adultos, e o agente etiológico da meningoencefalite herpética. A infecção, apesar da baixa morbidade, pode ocasionar taxa de letalidade próxima a 100%. Devido às semelhanças com outras enfermidades que comprometem o sistema nervoso central de bovinos, em particular a raiva, o diagnóstico da doença clínica assume especial importância. Esta revisão tem por objetivo apresentar tópicos relacionados ao agente etiológico, à doença e aos métodos de diagnóstico e de profilaxia da meningoencefalite herpética bovina.

Bovine herpervirus type 1: infection and diagnosis methods / Herpesvírus bovino tipo 1: Tópicos sobre a infecção e métodos de diagnóstico

Bovine herpervirus type 1 (BHV-1) is widespread in beef and dairy herds, causing great economic losses in cattle breeding. Infections caused by BHV-1 involving the respiratory, genital, reproductive and nervous systems can determine a wide variety of clinical manifestations wich are common on the other infectious and parasitic diseases. Several methodologies have been developed for laboratory diagnosis of BHV-1. Traditional serological techniques are unable to diferentiate animals exposed to the virus strains in the vaccine from those seropositives by natural exposure to the field strains. Thus the diagnosis can only be conclusive by detecting BHV-1 directly in clinical samples. Virus isolation has the disadvantage of requering viability in the viral particle, which in many situations may reduce the sensitivity and specificity of the technique. The immunoperoxidase and immunofluorescent techniques, although they do not require the infectiousness of the virus, can be seriously compromised if the structural integrity of the viral particle is not maintained. Currently the polymerase chain reaction assay is being universally adopted in the diagnosis of many virus, including BHV-1. This methodology has the advantage of not requiring the viral particle viability while providing high sensitivity and specificity and fast results.

O herpesvírus bovino tipo 1 (BHV-1) encontra-se amplamente disseminado em rebanhos de corte e leite, determinando grandes prejuízos econômicos à exploração pecuária. A infecção pelo BHV-1 pode comprometer os tratos respiratório, genital, reprodutivo e nervoso e ocasionar uma ampla variedade de manifestações clínicas que são comuns a outras doenças infecto-parasitárias, inviabilizando o diagnóstico clínico conclusivo. Várias metodologias foram desenvolvidas para a realização do diagnóstico laboratorial do BHV-1. Contudo, as técnicas sorológicas tradicionais são incapazes de diferenciar a soroconversão originada pela infecção natural daquela devido à vacinação. Com isto, o diagnóstico conclusivo somente é possível pela identificação do BHV-1 diretamente em amostras clínicas. O isolamento viral em cultivo celular apresenta como desvantagem a necessidade da viabilidade da partícula viral, o que em muitas situações pode ocasionar uma redução na sensibilidade e especificidade da técnica. As técnicas de imunoperoxidase e imunofluorescência, apesar de não exigirem a infecciosidade do vírus, podem ser seriamente comprometidas caso a integridade estrutural da partícula não seja mantida. Atualmente a técnica da reação em cadeia pela polimerase está sendo universalmente adotada no diagnóstico de diversas viroses, inclusive do BHV-1. Esta metodologia apresenta como principais vantagens a nã

Porcine rotaviruses: Etiology, infection and control topics / Rotavirose suína: tópicos sobre a etiologia, infecção e controle

All over the world the rotavirus infections are the most important enteric viruses of the piglets. This revision has for objective to present topics relative to the etiological agent, clinical signals, methods of diagnosis, and control and prophylaxis of the infection.  

Em todo o mundo as infeções por rotavirus constituem-se na mais importante virose entérica dos leitões. Esta revisão tem por objetivo apresentar tópicos relativos ao agente etiológico, à doença clinica e aos métodos de diagnóstico, controle e profilaxia da infecção.    

Standardization of a polymerase chain reaction (Semi NestedPCR) to detect bovine herpesvirus type 1 in aborted fetus and semen from naturally infected cattle / Otimização da reação em cadeia pela polimerase (Semi Nested-PCR) para a detecção do herpesvírus bovino tipo 1 em fragmentos de órgãos fetais e em sêmen de bovinos naturalmente infectados

The glycoprotein D gene of bovine herpesvirus type 1 (BHV-1) was detected in clinical samples from naturally infected cattle by semi-nested polymerase chain reaction (SN-PCR). Different protocols were tested to increase the sensitivity and specificity of the technique. An association of DNA extraction methods using phenol/chloroform/isoamyl alcohol followed by silica/guanidine isothiocyanate yield greater concentration and quality of amplified DNA. After optimization of primers and reaction conditions, the genome of BHV-1 (Los Angeles strain) was detected by SN-PCR in tissue culture supernatant and artificially infected semen at the 1 and 0.1 TCID50 limit, respectively. When used on clinical specimens from naturally infected cattle, the SN-PCR yield positive results in semen of seropositive bull and in organ fragments of aborted cattle fetus. The SN-PCR was a viable alternative, which was faster, sensitive, specific and less laborious to be used in the routine diagnosis of BHV-1 infection and semen health monitoring.

A reação em cadeia pela polimerase (PCR) foi empregada para a detecção parcial do gene da glicoproteína D do herpesvírus bovino tipo 1 (BHV-1) em material biológico proveniente de bovinos naturalmente infectados. Para o aumento da sensibilidade e da especificidade da PCR, foram avaliados diferentes protocolos. Para a extração do DNA, a associação dos métodos fenol/clorofórmio/álcool isoamílico e sílica/tiocianato de guanidina, proporcionou a amplificação do DNA em maior concentração e qualidade. Após a otimização dos primers e condições da reação foi possível detectar, por meio da Semi Nested-PCR (SN-PCR), o genoma da estirpe Los Angeles do BHV-1 em sobrenadante de cultura celular, sem processamento prévio, até o limite de 1 TCID50. Em sêmen artificialmente infectado o limite de detecção do BHV-1 foi de 0,1 TCID50. Quando utilizada em material biológico, proveniente de bovinos naturalmente infectados, a SN-PCR apresentou resultados positivos tanto em fragmentos de órgãos de fetos bovinos abortados quanto em sêmen. Essa técnica revelou-se uma alternativa viável, rápida, sensível e específica para aplicação na rotina de diagnóstico da infecção pelo BHV-1, bem como, para o monitoramento sanitário do sêmen.

Estudo genético de fatores de patogenicidade em Escherichia coli isoladas de suínos na região de Londrina, PR

No presente trabalho foram estudadas 25 culturas de E.coli isoladas de leitões com diarréia, quanto a produção dos seguintes fatores de virulência: enterotoxina terlábil (LT), enterotoxina termoestável (STa) e os fatores de colonização K88 e K99. Foi testada a produção de hemolisina, colicina V e resistência a drogas antimicrobianas, além do estudo de transferência por conjugação dos plasmidios Col V, STa, Hly e K88. Nove amostras (36% produziram hemolisina e Colicina V, 4 (16%) LT, 3 (12%) STa e 3 (12%) K88. Das 25 cepas estudadas, 24 (96%) mostraram resistência a drogas e 21 (84%) resistência múltipla., das amostras resistentes 12 (50%) transferiram os marcadores de resistência às drogas das 9 amostras colicinogênicas, 5 transferiram o plasmídio Col V. Em 1 das 3 cepas produtoras de STa, os genes para STa foram transferidos juntos com os da colicina V num mesmo plasmídio. Em outra cepa, o plasmídio STa foi transferido para amostra receptora simultaneamente com o plasmídio que codifica a produção de colicina V e resistência à tetraciclina e estreptomicina. A informação genética para produção de hemolisina e antígeno K88 não foram transferidos para amostras receptoras.

Isolamento, caracterização e susceptibilidade a antimicrobianos de estafilococos coagulase-positivos (Staphylococcus aureus e intermedius) de cães com lesões de pele, na região de Londrina, PR

Foram estudadas 71 cepas de estafilococos coagulase-positivas isoladas de cães com lesões características de piodermatite. Através das diferentes provas bioquímicas utilizadas, 52(73,24%) amostras foram identificadas como S. intermedius e 19 (26,26%) como S. aureus. Todas as cepas foram testadas frente a 10 substâncias antimicrobianas, demonstrando uma acentuada resistência para a penicilina G, ampicilina, tetraciclina e cloranfenicol.

Isolamento, caracterização e susceptibilidade a antimicrobianos de estafilococos coagulase-positivos (Staphylococcus aureus e intermedius) de cães com lesões de pele, na região de Londrina, PR

Foram estudadas 71 cepas de estafilococos coagulase-positivas isoladas de cães com lesões características de piodermatite. Através das diferentes provas bioquímicas utilizadas, 52(73,24%) amostras foram identificadas como S. intermedius e 19 (26,26%) como S. aureus. Todas as cepas foram testadas frente a 10 substâncias antimicrobianas, demonstrando uma acentuada resistência para a penicilina G, ampicilina, tetraciclina e cloranfenicol.