Staphylococcal cassette chromosome mec elements from Staphylococcus intermedius group (SIG) isolates from dogs in a center for veterinary diagnostics in Brazil / Cassetes cromossômicos estafilocócicos mec de isolados do grupo Staphylococcus intermedius (GSI) de cães em um centro veterinário de diagnósticos no Brasil

Methicillin resistance in the Staphylococcus intermedius group (SIG) has emerged in small animal practice. Methicillin-resistant SIG (MRSIG) members have been implicated as causes of infections in both companion animals and humans. Staphylococcal cassette chromosome mec (SCCmec) elements carry the mecA/C genes, which encode for the transpeptidase PBP2a (PBP2’) responsible for β-lactam antibiotic resistance in staphylococci. This study examined the SCCmec types of MRSIG isolates from different clinical specimens of dogs that exhibited methicillin MIC ≥ 0.5 μg/mL by an automated identification and susceptibility system in a Center for Veterinary Diagnostics in São Paulo, Brazil. Susceptibility to methicillin was determined by broth microdilution testing, and Oxoid® M.I.C.Evaluator® strips. PBP2a production was detected using a latex agglutination assay. SCCmec typing was performed according to the International Working Group on the Classification of Staphylococcal Cassette Chromosome Elements (IWG-SCC) guidelines. SCCmec type II (2A), SCCmec type III (3A), composite SCC structures consisting of a class A mec gene complex in addition to multiple ccr gene complexes, and non-typable SCCmec elements were reported in these MRSIG isolates. SCCmec type variants differing from those so far acknowledged by IWG-SCC were found, indicating new rearrangements in the genetic context of mecA in these canine MRSIG isolates.

A resistência à meticilina no grupo Staphylococcus intermedius (GSI) tem aumentado na clínica de pequenos animais. Membros GSI resistentes à meticilina (GSIRM) têm sido causas de infecções tanto em animais de companhia e humanos. Cassetes cromossômicos estafilocócicos mec (SCCmec) carregam os genes mecA/C, que codificam a transpeptidase PBP2a (PBP2’) responsável pela resistência aos antibióticos β-lactâmicos em estafilococos. Nosso objetivo foi investigar os elementos SCCmec de GSIRM isolados de diferentes amostras clínicas de cães que exibiram CIM de meticilina ≥ 0,5 μg/mL por meio de um sistema automatizado em um Centro Veterinário de Diagnósticos em São Paulo, Brasil. A sensibilidade à meticilina foi determinada por meio do teste de microdiluição em caldo e fitas Oxoid® M.I.C.Evaluator®. A produção de PBP2a foi detectada usando um ensaio de aglutinação de látex. A tipagem dos elementos SCCmec foi realizada de acordo com as diretrizes do International Working Group on the Classification of Staphylococcal Cassette Chromosome Elements (IWG-SCC). SCCmec tipo II (2A), SCCmec tipo III (3A), SCC compostos de um complexo mec de classe A com múltiplos complexos ccr, e elementos SCCmec não tipáveis foram encontrados nesses isolados GSIRM. Variantes que diferem dos elementos SCCmec reconhecidos até o momento pelo IWG-SCC foram encontradas, indicando novos rearranjos no contexto genético de mecA nesses isolados GSIRM caninos.

Staphylococcal cassette chromosome mec elements from Staphylococcus intermedius group (SIG) isolates from dogs in a center for veterinary diagnostics in Brazil / Cassetes cromossômicos estafilocócicos mec de isolados do grupo Staphylococcus intermedius (GSI) de cães em um centro veterinário de diagnósticos no Brasil

Methicillin resistance in the Staphylococcus intermedius group (SIG) has emerged in small animal practice. Methicillin-resistant SIG (MRSIG) members have been implicated as causes of infections in both companion animals and humans. Staphylococcal cassette chromosome mec (SCCmec) elements carry the mecA/C genes, which encode for the transpeptidase PBP2a (PBP2) responsible for β-lactam antibiotic resistance in staphylococci. This study examined the SCCmec types of MRSIG isolates from different clinical specimens of dogs that exhibited methicillin MIC ≥ 0.5 μg/mL by an automated identification and susceptibility system in a Center for Veterinary Diagnostics in São Paulo, Brazil. Susceptibility to methicillin was determined by broth microdilution testing, and Oxoid® M.I.C.Evaluator® strips. PBP2a production was detected using a latex agglutination assay. SCCmec typing was performed according to the International Working Group on the Classification of Staphylococcal Cassette Chromosome Elements (IWG-SCC) guidelines. SCCmec type II (2A), SCCmec type III (3A), composite SCC structures consisting of a class A mec gene complex in addition to multiple ccr gene complexes, and non-typable SCCmec elements were reported in these MRSIG isolates. SCCmec type variants differing from those so far acknowledged by IWG-SCC were found, indicating new rearrangements in the genetic context of mecA in these canine MRSIG isolates.(AU)

A resistência à meticilina no grupo Staphylococcus intermedius (GSI) tem aumentado na clínica de pequenos animais. Membros GSI resistentes à meticilina (GSIRM) têm sido causas de infecções tanto em animais de companhia e humanos. Cassetes cromossômicos estafilocócicos mec (SCCmec) carregam os genes mecA/C, que codificam a transpeptidase PBP2a (PBP2) responsável pela resistência aos antibióticos β-lactâmicos em estafilococos. Nosso objetivo foi investigar os elementos SCCmec de GSIRM isolados de diferentes amostras clínicas de cães que exibiram CIM de meticilina ≥ 0,5 μg/mL por meio de um sistema automatizado em um Centro Veterinário de Diagnósticos em São Paulo, Brasil. A sensibilidade à meticilina foi determinada por meio do teste de microdiluição em caldo e fitas Oxoid® M.I.C.Evaluator®. A produção de PBP2a foi detectada usando um ensaio de aglutinação de látex. A tipagem dos elementos SCCmec foi realizada de acordo com as diretrizes do International Working Group on the Classification of Staphylococcal Cassette Chromosome Elements (IWG-SCC). SCCmec tipo II (2A), SCCmec tipo III (3A), SCC compostos de um complexo mec de classe A com múltiplos complexos ccr, e elementos SCCmec não tipáveis foram encontrados nesses isolados GSIRM. Variantes que diferem dos elementos SCCmec reconhecidos até o momento pelo IWG-SCC foram encontradas, indicando novos rearranjos no contexto genético de mecA nesses isolados GSIRM caninos.(AU)

Estudo da estabilidade espermática de ouriço-do-mar em diferentes condições de conservação e perfil de toxicidade do metronidazol

Os ouriços-do-mar da espécie Arbacia lixula foram coletados próximo aos recifes da praia de Ponta Verde, na cidade de Maceió. No laboratório, injetou-se 2,5mL de cloreto de potássio (KCl) a 0,5M ao redor da região peribucal, o que provocou a eliminação dos gametas após alguns minutos. Os espermatozóides foram identificados por apresentarem cor esbranquiçada e os óvulos pela cor alaranjada. Para a determinação da forma de acondicionamento, os espermatozóides foram submetidosàs temperaturas de 2-8ºC e 0ºC dentro de tubos fechados com tampa rosqueada e tubos fechados com algodão, e com o passar do tempo foram feitas ativações em água do mar, visualizando-se em microscópio óptico com aumento de 200x as células ativas. Para a toxicidade do metronidazol, soluções na concentração de 10%, 20%, 30% e 50% foram adicionadas aos espermatozóides ativados, monitorando-se a motilidade e em seguida o número de células presentes na amostra foi determinado.Observou-se que inicialmente havia 65% de células espermáticas com viabilidade. Os espermatozóides que foram acondicionados em tubos fechados com algodão apresentaram menor tempo de conservação comparados aos que foram acondicionados em tubos rosqueados. Já a temperatura de 2-8ºC foi a que manteve por um maior período de tempo a viabilidade das células espermáticas. Desta forma concluímos que concentrações de metronidazol iguais ou acima de 30

Estudo da estabilidade espermática de ouriço-do-mar em diferentes condições de conservação e perfil de toxicidade do metronidazol

Os ouriços-do-mar da espécie Arbacia lixula foram coletados próximo aos recifes da praia de Ponta Verde, na cidade de Maceió. No laboratório, injetou-se 2,5mL de cloreto de potássio (KCl) a 0,5M ao redor da região peribucal, o que provocou a eliminação dos gametas após alguns minutos. Os espermatozóides foram identificados por apresentarem cor esbranquiçada e os óvulos pela cor alaranjada. Para a determinação da forma de acondicionamento, os espermatozóides foram submetidosàs temperaturas de 2-8ºC e 0ºC dentro de tubos fechados com tampa rosqueada e tubos fechados com algodão, e com o passar do tempo foram feitas ativações em água do mar, visualizando-se em microscópio óptico com aumento de 200x as células ativas. Para a toxicidade do metronidazol, soluções na concentração de 10%, 20%, 30% e 50% foram adicionadas aos espermatozóides ativados, monitorando-se a motilidade e em seguida o número de células presentes na amostra foi determinado.Observou-se que inicialmente havia 65% de células espermáticas com viabilidade. Os espermatozóides que foram acondicionados em tubos fechados com algodão apresentaram menor tempo de conservação comparados aos que foram acondicionados em tubos rosqueados. Já a temperatura de 2-8ºC foi a que manteve por um maior período de tempo a viabilidade das células espermáticas. Desta forma concluímos que concentrações de metronidazol iguais ou acima de 30