Biocompatibility in vivo of elastic cartilage treated in alkaline solutions / [Biocompatibilidade in vivo de cartilagem elástica tratada em soluções alcalinas]

This study verified the in vivo biocompatibility of bovine elastic cartilage decellularized with alkaline solution in relation to the non-decellularized cartilage implanted in rats. Fifty Wistar rats were divided into two groups, with the experimental group (EG) receiving subcutaneous implants of cartilage treated in alkaline solution and the control group (CG) receiving subcutaneous implants of untreated cartilage. In both groups, the implants were removed on days 3, 7, 14, 21 and 42 with the preparation of histological slides stained with Hematoxylin and Eosin for the quantification of inflammatory cells, fibroblasts, angiogenesis, and cartilage degradation. The results showed that EG presented a less intense inflammatory infiltrate and better organization of collagen fibers compared to CG. It was concluded that the alkaline treatment provided better biocompatibility for elastic cartilage when implanted subcutaneously in rats.

Este estudo verificou a biocompatibilidade in vivo de cartilagem elástica bovina descelularizada com solução alcalina em relação à cartilagem não descelularizada implantada em ratos. Cinquenta ratos Wistar foram divididos em dois grupos; o grupo experimental (GE) recebeu implantes subcutâneos de cartilagem tratada em solução alcalina, e o grupo controle (GC) recebeu implantes subcutâneos de cartilagem não tratada. Em ambos os grupos, os implantes foram retirados nos dias três, sete, 14, 21 e 42, com a preparação de lâminas histológicas coradas com hematoxilina e eosina para a quantificação de células inflamatórias, de fibroblastos, de angiogênese e para a degradação da cartilagem. Os resultados mostraram que o GE apresentou infiltrado inflamatório menos intenso e melhor organização das fibras de colágeno em relação ao GC. Concluiu-se que o tratamento alcalino proporcionou melhor biocompatibilidade para a cartilagem elástica quando implantado por via subcutânea em ratos.

Microstructure of Holstein and Gir breed adult bovine hooves: histomorphometry, three-dimensional microtomography and microhardness test evaluation / Microestrutura de cascos de bovinos adultos das raças Holandesa e Gir: avaliação por histomorfometria, microtomografia tridimensional e teste de microdureza

This study aimed to characterize and compare the aspects involved in the microstructural formation of the Holstein and Gir breed hoof wall by histomorphometry, three-dimensional microtomography and microhardness test techniques. Seventy-two (18H/18G thoracic and 18H/18G pelvic) Holstein (H) and Gir (G) breed hooves were collected in slaughterhouses. The hooves were divided into six groups according to breed and age group: 24 to 36 months (C1H/C1G), 36 to 60 months (C2H/C2G) and over 60 months (C3H/C3G). The normality and homogeneity analysis of morphometric variables by the Kolmogrov-Sminov and Bartlett tests was conducted as a statistical model. Once the assumptions were met, the Sigmastat 3.5 software was used and the means were compared by T test. The 5% probability level is considered. When the assumptions were not met, the means were compared by the Mann-Whitney nonparametric test, considering the 5% probability level. When comparing the Holstein and Gir breeds, no differences were noticed between them as to the length of the dermal papillae; young animals showed thicker papillae than adult animals; the Holstein breed hooves showed higher amount of 7pores on the wall and on the sole compared to the Gir breed; Holstein cattle hooves showed greater microhardness than Gir cattle; there was no microhardness difference between pigmented and non-pigmented hooves of Holstein and Gir cattle(AU)

O presente estudo objetivou caracterizar e comparar os aspectos envolvidos na formação microestrutural do estojo córneo de bovinos das raças Holandesa e Gir pelas técnicas de histomorfometria, microtomografia tridimensional e teste de microdureza. Foram coletados em frigoríficos, de forma igualitária entre as raças Holandesa (H) e Gir (G), 72 cascos (18H/18G torácicos e 18H/18G pélvicos). Os cascos foram divididos em seis grupos de acordo com a raça e a faixa etária: 24 a 36 meses, (C1H/C1G), 36 a 60 meses (C2H/C2G) e acima de 60 meses (C3H/C3G). Como modelo estatístico, realizou-se análise de normalidade e homogeneidade das variáveis morfométricas empregando testes Kolmogrov-Sminov e Bartlett. Atendidas as pressuposições, empregou-se o programa Sigmastat 3.5 e compararam-se as médias pelo teste T. Considerou-se o nível de 5% de probabilidade. Ao comparar as raças Holandesa e Gir, observou-se que não houve diferença entre elas quanto ao comprimento das papilas dérmicas. Os animais jovens apresentaram papilas mais espessas que os adultos. Os cascos da raça Holandesa apresentaram maior quantidade de poros na muralha e na sola em relação à raça Gir. Os cascos de bovinos Holandeses possuem microdureza maior que os de bovinos Gir. No estudo não se evidenciou diferença de microdureza entre cascos pigmentados e despigmentados de bovinos Holandeses e Gir(AU)

Avanços na criopreservação de embriões equinos / Advances of equine embryo cryopreservation

A aplicação de técnicas de preservação pelo frio em embriões equinos se tornou indispensável na atual estrutura imposta à indústria equina. A refrigeração, a congelação ou a vitrificação são técnicas que podem ser utilizadas com sucesso na reprodução assistida desta espécie. Entretanto, os embriões equinos têm características que os diferenciam das demais espécies, exigindo que os protocolos sejam adequados aos diferentes estádios dos embriões. Em função da escassez de literatura com criopreservação de embriões equinos, esta revisão explora tanto a refrigeração de embriões visando a seu transporte durante a estação ovulatória, quanto à congelação e vitrificação visando a sua utilização futura, seja na transferência a uma receptora de melhor qualidade ou na otimização da produção quando necessita seguir uma estação reprodutiva determinada pelo ano hípico. O sucesso da criopreservação depende de vários fatores, dos quais se destacam o diâmetro dos embriões no momento da criopreservação, pois os embriões nas fases iniciais de desenvolvimento (<300 μm) são mais resistentes ao processo de congelação ou vitrificação, bem como o tipo de crioprotetor e a metodologia empregada. Este trabalho tem como objetivo descrever diferentes aspectos relacionados com as características do embrião equino, bem como levantar as metodologias e os respectivos resultados descritos na literatura.(AU)

The use of low temperature techniques to preserve embryos became essential at the actual level of the equine industry. The cooling, freezing, and vitrification are successful techniques applied on assisted reproduction for this specie. This review explores extensively the equine embryos cryopreservation aiming their transport during the ovulatory season. Furthermore, the utilization of freezing and vitrification aiming the storage and future use of embryos, and the production optimization in cases when a breeding season is determined by racing calendar are considered. Accomplishment of these techniques depends on the embryos diameter at the cryopreservation moment. Smaller embryos at early stages of development (<300μm) are more resistant to freezing or vitrification processes due to less amount of fluid present at the blastocoele and a not completed developed embryonary capsule, allowing a better cellular dehydration and consequently better post-transfer pregnancy rates. (AU)

Avanços na criopreservação de embriões equinos / Advances of equine embryo cryopreservation

A aplicação de técnicas de preservação pelo frio em embriões equinos se tornou indispensável na atual estrutura imposta à indústria equina. A refrigeração, a congelação ou a vitrificação são técnicas que podem ser utilizadas com sucesso na reprodução assistida desta espécie. Entretanto, os embriões equinos têm características que os diferenciam das demais espécies, exigindo que os protocolos sejam adequados aos diferentes estádios dos embriões. Em função da escassez de literatura com criopreservação de embriões equinos, esta revisão explora tanto a refrigeração de embriões visando a seu transporte durante a estação ovulatória, quanto à congelação e vitrificação visando a sua utilização futura, seja na transferência a uma receptora de melhor qualidade ou na otimização da produção quando necessita seguir uma estação reprodutiva determinada pelo ano hípico. O sucesso da criopreservação depende de vários fatores, dos quais se destacam o diâmetro dos embriões no momento da criopreservação, pois os embriões nas fases iniciais de desenvolvimento (<300 μm) são mais resistentes ao processo de congelação ou vitrificação, bem como o tipo de crioprotetor e a metodologia empregada. Este trabalho tem como objetivo descrever diferentes aspectos relacionados com as características do embrião equino, bem como levantar as metodologias e os respectivos resultados descritos na literatura.

The use of low temperature techniques to preserve embryos became essential at the actual level of the equine industry. The cooling, freezing, and vitrification are successful techniques applied on assisted reproduction for this specie. This review explores extensively the equine embryos cryopreservation aiming their transport during the ovulatory season. Furthermore, the utilization of freezing and vitrification aiming the storage and future use of embryos, and the production optimization in cases when a breeding season is determined by racing calendar are considered. Accomplishment of these techniques depends on the embryos diameter at the cryopreservation moment. Smaller embryos at early stages of development (<300μm) are more resistant to freezing or vitrification processes due to less amount of fluid present at the blastocoele and a not completed developed embryonary capsule, allowing a better cellular dehydration and consequently better post-transfer pregnancy rates.

Comparação da concentração de citocinas no líquido amnióticos de bezerros Nelore concebidos por meio de diferentes biotecnologias da reprodução / Comparison of the cytokines concentration in amniotic fluid of the Nelore calves conceived by reproduction biotechnologies

O objetivo deste trabalho foi determinar as concentrações de TNF-α, IFN-y, IL-6 e IL-8 no fluido amniótico de bezerros concebidos por meio de PIV, TE e IA no momento do parto. Utilizaram-se sessenta animais divididos em grupos: 1-vinte vacas gestando bezerros Nelore de inovulações de embriões provenientes de doadoras superovuladas (TE); 2-vinte vacas gestando bezerros Nelore de inovulações de embriões provenientes de PIV; 3- vinte vacas Nelore gestando bezerros de IA. Durante a fase de expulsão, realizou-se a colheita do líquido amniótico que foi depositado em tubo plástico e congelado em freezer. Realizou-se ELISA para a dosagem das citocinas, cujas concentrações foram submetidas ao teste de Kruskal-Wallis, com p<0.05. Para TNF-a verificou-se que o grupo TE não apresentou diferença na concentração em relação ao grupo PIV e IA (p>0,05). Contudo no grupo IA, a concentração de TNF-α foi inferior ao do grupo PIV (p<0,05). Para IFN-y não foi observada diferença significativa entre as concentrações nos diferentes grupos (p>0.05). Apenas duas amostras do grupo PIV apresentaram concentração detectável de IL-6 e para IL-8 apenas uma amostra do mesmo grupo. Os resultados desse experimento podem ser adotados como padrões para gestação normal de bovinos. Entretanto novas pesquisas na área da imunologia da gestação são necessárias para melhor descrever o papel das citocinas na manutenção da gestação e no desencadeamento do trabalho de parto em bovinos.

This study aimed to determine the levels of TNF-α, IFN-Y, IL-6 and IL-8 in amniotic fluid of calves from IVP compared with those obtained by conventional embryo transfer and artificial insemination at the delivery. Sixty animals used were divided into groups: 1 - Twenty Nelore cross-breed cows pregnant with Nelore calves of embryos transfer conventional method (ET); 2 - Twenty Nelore cross-breed cows pregnant with Nelore calves obtained by in vitro production after follicular aspiration; 3 Twenty pregnant Nelore cows bearing calves obtained by artificial insemination (AI). All births of the animals of the experiment were observed. During the expulsion phase the amnion was punctured and 15mL of fluid were collected using a needle and syringes compatible. The material was deposited on plastic tube and frozen in freezer for later analysis. The cytokines levels were measured by immunoenzymatic assay. The Kruskal-Wallis Test was used for statistical analysis with 5% significance. The TNF-a levels in the animals of the ET group showed no significant difference the concentration of this cytokine in the group AI and IVP. However for group AI were statistically lower than the IVP group (p<0.05). Furthermore, the median of the INF wasn't different significantly between the groups (p>0.05). Only samples 15 and 18 of the IVP group had detectable concentrations of IL-6 and to IL-8 only 15 of the sample the same group. The results of this experiment can be adopted as standards for normal pregnancy in cattle, since there is no report of such literature. However new researches in immunology of pregnancy are necessary to describe the role of cytokines in both the maintenance of pregnancy and in the delivery labor for the bovine specie.

EFFECT OF ESTRADIOL BENZOATE ON OOCYTES/EMBRYOS RECOVERY AND HEMATOLOGICAL PARAMETERS OF MISMATED BITCHES / Efeito do benzoato de estradiol na recuperação de oócitos, embriões e nos parâmetros hematológicos de cadelas recém acasaladas.

Nosso objetivo foi avaliar os efeitos do benzoato de estradiol sobre a taxa de recuperação oocitária e embrionária e sua influência sobre o sistema hematopoiético. Vinte e quatro fêmeas foram utilizadas: GRUPO I – 12 cadelas que receberam uma única aplicação de benzoato de estradiol, dose de 0,2 mg/Kg, via intramuscular, entre o 2º e 7º dia do último acasalamento ou inseminação. GRUPO II - 12 cadelas que receberam solução oleosa diluente, dose de 0,2 ml/Kg em datas correspondentes. As cadelas foram submetidas a ovariohisterectomia e as tubas uterinas e útero lavados, com solução de PBS, álcool polivinil e heparina. Os oócitos e embriões foram quantificados e classificados de acordo com seu estádio de desenvolvimento. O hemograma foi realizado em M1 (antes da aplicação do fármaco), M2 (15 dias após a aplicação do fármaco) e M3 (40 dias após a aplicação do fármaco). Para as variáveis recuperação de estruturas foi utilizado o coeficiente de correlaç&at

COMPARAÇÃO DA CONCENTRAÇÃO DE CITOCINAS NO LÍQUIDO AMNIÓTICOS DE BEZERROS NELORE CONCEBIDOS POR MEIO DE DIFERENTES BIOTECNOLOGIAS DA REPRODUÇÃO

O objetivo deste trabalho foi determinar as concentrações de TNF-a, IFN-g, IL-6 e IL-8 no fluido amniótico de bezerros concebidos por meio de PIV, TE e IA no momento do parto. Utilizaram-se sessenta animais divididos em grupos: 1- vinte vacas gestando bezerros Nelore de inovulações de embriões provenientes de doadoras superovuladas (TE); 2- vinte vacas gestando bezerros Nelore de inovulações de embriões provenientes de PIV; 3- vinte vacas Nelore gestando bezerros de IA. Durante a fase de expulsão, realizou-se a colheita do líquido amniótico que foi depositado em tubo plástico e congelado em freezer. Realizou-se ELISA para a dosagem das citocinas, cujas concentrações foram submetidas ao teste de Kruskal-Wallis, com p0,05). Contudo no grupo IA, a concentração de TNF-a foi inferior ao do grupo PIV (p0,05). Apenas duas amostras do grupo PIV apresentaram concentração detectável de IL-6 e para IL-8 apenas uma amostra do mesmo grupo. Os resultados desse experimento podem ser adotados como padrões para gestação normal de bovinos. Entretanto novas pesquisas na área da imunologia da gestação são necessárias para melhor descrever o papel das citocinas na manutenção da gestação e no desencadeamento do trabalho de parto em bovinos. PALAVRAS-CHAVE: Bezerros Nelore. Líquido amniótico. Citocinas. Biotecnologias