Inseminação em ovelhas por videolaparoscopia por meio de acesso único: relato de caso / Videolaparoscopic insemination in sheeps: case report

A inseminação artificial (IA) proporciona melhoramento genético, intensifica o manejo animal e possibilita a utilização de sêmen de reprodutores que se encontram em diferentes regiões do país, bem como de animais de alto valor zootécnico que já morreram ou de machos que possuem subfertilidade. Por peculiaridades anatômicas das ovelhas, a inseminação artificial intrauterina transcervical é dificultosa. Dessa forma, bons resultados na IA são alcançados quando há deposição do sêmen diretamente dentro do útero, realizada por meio de laparoscopia. Atualmente, diversas técnicas laparoscópicas são utilizadas para inseminação; os métodos rotineiramente empregados são realizados através de dois ou três portais de acesso. O presente trabalho tem o objetivo de verificar a viabilidade de uma nova técnica de inseminação videolaparoscópica intrauterina em ovelhas, com o uso de um acesso único, visando a um procedimento mais eficaz, mais rápido, com menor trauma tecidual e com menor contaminação bacteriana, a fim de minimizar o desconforto pós-operatório. A média do tempo cirúrgico foi de 5,92 minutos. Não foram encontradas dificuldades para realização dos procedimentos, e os animais recuperaram-se sem nenhuma complicação. A utilização de um único acesso mostrou-se eficaz, pois reduziu o tempo cirúrgico e não apresentou complicações.(AU)

Artificial Insemination (AI) provides genetic gain, enhances animal management and enables the use of semen from rams that are in different regions of the country, high-value livestock animals that have died or males who have subfertility. Because of anatomical peculiarities of sheep, transcervical intrauterine insemination is troublesome, thus good results in IA are achieved when there is deposition of semen directly into the uterus, performed by laparoscopy. Currently, various techniques are used for laparoscopic insemination, those routinely employed are conducted using two or three access portals. This study aims to verify the feasibility of a new laparoscopic intrauterine insemination in sheep using a single access, aiming at a more effective and faster procedure with less tissue trauma, minimizing post-operative discomfort and lower bacterial contamination. The mean operative time was 5,92 minutes, there were no difficulties in the procedures and the animals recovered without complications. The use of a single access was effective, reducing the time of the surgery and complications weren't observed.(AU)

Inseminação em ovelhas por videolaparoscopia por meio de acesso único: relato de caso / Videolaparoscopic insemination in sheeps: case report

A inseminação artificial (IA) proporciona melhoramento genético, intensifica o manejo animal e possibilita a utilização de sêmen de reprodutores que se encontram em diferentes regiões do país, bem como de animais de alto valor zootécnico que já morreram ou de machos que possuem subfertilidade. Por peculiaridades anatômicas das ovelhas, a inseminação artificial intrauterina transcervical é dificultosa. Dessa forma, bons resultados na IA são alcançados quando há deposição do sêmen diretamente dentro do útero, realizada por meio de laparoscopia. Atualmente, diversas técnicas laparoscópicas são utilizadas para inseminação; os métodos rotineiramente empregados são realizados através de dois ou três portais de acesso. O presente trabalho tem o objetivo de verificar a viabilidade de uma nova técnica de inseminação videolaparoscópica intrauterina em ovelhas, com o uso de um acesso único, visando a um procedimento mais eficaz, mais rápido, com menor trauma tecidual e com menor contaminação bacteriana, a fim de minimizar o desconforto pós-operatório. A média do tempo cirúrgico foi de 5,92 minutos. Não foram encontradas dificuldades para realização dos procedimentos, e os animais recuperaram-se sem nenhuma complicação. A utilização de um único acesso mostrou-se eficaz, pois reduziu o tempo cirúrgico e não apresentou complicações.(AU)

Artificial Insemination (AI) provides genetic gain, enhances animal management and enables the use of semen from rams that are in different regions of the country, high-value livestock animals that have died or males who have subfertility. Because of anatomical peculiarities of sheep, transcervical intrauterine insemination is troublesome, thus good results in IA are achieved when there is deposition of semen directly into the uterus, performed by laparoscopy. Currently, various techniques are used for laparoscopic insemination, those routinely employed are conducted using two or three access portals. This study aims to verify the feasibility of a new laparoscopic intrauterine insemination in sheep using a single access, aiming at a more effective and faster procedure with less tissue trauma, minimizing post-operative discomfort and lower bacterial contamination. The mean operative time was 5,92 minutes, there were no difficulties in the procedures and the animals recovered without complications. The use of a single access was effective, reducing the time of the surgery and complications weren't observed.(AU)

Kinematic and spermatic recovery after selection by centrifugation in colloid solutions of ovine cryopreserved semen / Cinética e recuperação espermática após seleção por centrifugação em soluções coloidais de sêmen ovino criopreservado

Frozen and thawed ovine semen undergo morphological and functional changes that prevent or decrease the efficiency of fertilization. Sperm selection methods seek to improve the quality and viability of the fertilizing materials. Four sperm selection methods were employed, using two silica colloidal solutions coated with silane (silica colloidal-silane) or by polyvinylpyrrolidone (silica colloidal-PVP), and varying the volume of colloidal solution. Sperm kinematic and sperm recovery were evaluated by means of CASA. The protocols using silica colloidal-silane showed higher total motility (TM), progressive motility (PM) and percentage of rapid sperm (%RAP) compared to the methods employing silica colloidal-PVP and to the samples prior to sperm selection. The silica colloidal-PVP had greater sperm recovery compared to the silica colloidal-silane. Only the method using 4mL of silica colloidal-PVP was not efficient in selecting samples with better quality compared to the samples analyzed prior to sperm selection. The methods using lower volumes of colloidal solution did not differ from those using higher volumes and the best results were shown by the method with 1mL silica colloidal-silane. The results found in the study indicated greater efficiency of the silica colloidal-silane solution for sperm selection of thawed ovine semen when compared to selection using silica colloidal-PVP. The method using 1mL of silica colloidal-silane was equally efficient to the method with higher volume, presenting itself as an alternative to process samples with lower sperm concentration.(AU)

O sêmen ovino congelado e descongelado sofre alterações morfofuncionais que impossibilitam ou diminuem a eficiência na fecundação. Os métodos de seleção espermática visam melhorar a qualidade e a viabilidade do material fecundante. Foram utilizados quatro métodos de seleção espermática utilizando duas soluções de sílica coloidal revestida por silano (sílica coloidal-silano) ou por polivinilpirrolidona (sílica coloidal-PVP), variando o volume de solução coloidal. Foram testadas a cinética espermática no CASA e a recuperação espermática. Os protocolos utilizando sílica coloidal-silano apresentaram maior motilidade total (MT), motilidade progressiva (MP) e porcentagem de espermatozoides rápidos (% RAP) quando comparados aos métodos utilizando a sílica coloidal-PVP e às amostras antes da seleção espermática. A sílica coloidal-PVP teve maior recuperação espermática quando comparada à sílica coloidal-silano. Somente o método utilizando 4mL de sílica coloidal-PVP não foi eficiente na seleção de amostras com melhor qualidade quando comparado às amostras analisadas antes da seleção espermática. Os métodos utilizando menores volumes de solução coloidal não diferiram dos métodos de maior volume, sendo a sílica coloidal-silano com 1mL o método que apresentou os melhores resultados. Como conclusão, os resultados encontrados no trabalho apontaram a maior eficiência da sílica coloidal-silano em selecionar sêmen ovino congelado e descongelado quando comparado à seleção em sílica coloidal-PVP. O método utilizando 1mL de sílica coloidal-silano foi igualmente eficiente ao método com maior volume, sendo uma alternativa para processar amostras com baixa concentração espermática.(AU)

Kinematic and spermatic recovery after selection by centrifugation in colloid solutions of ovine cryopreserved semen / Cinética e recuperação espermática após seleção por centrifugação em soluções coloidais de sêmen ovino criopreservado

Frozen and thawed ovine semen undergo morphological and functional changes that prevent or decrease the efficiency of fertilization. Sperm selection methods seek to improve the quality and viability of the fertilizing materials. Four sperm selection methods were employed, using two silica colloidal solutions coated with silane (silica colloidal-silane) or by polyvinylpyrrolidone (silica colloidal-PVP), and varying the volume of colloidal solution. Sperm kinematic and sperm recovery were evaluated by means of CASA. The protocols using silica colloidal-silane showed higher total motility (TM), progressive motility (PM) and percentage of rapid sperm (%RAP) compared to the methods employing silica colloidal-PVP and to the samples prior to sperm selection. The silica colloidal-PVP had greater sperm recovery compared to the silica colloidal-silane. Only the method using 4mL of silica colloidal-PVP was not efficient in selecting samples with better quality compared to the samples analyzed prior to sperm selection. The methods using lower volumes of colloidal solution did not differ from those using higher volumes and the best results were shown by the method with 1mL silica colloidal-silane. The results found in the study indicated greater efficiency of the silica colloidal-silane solution for sperm selection of thawed ovine semen when compared to selection using silica colloidal-PVP. The method using 1mL of silica colloidal-silane was equally efficient to the method with higher volume, presenting itself as an alternative to process samples with lower sperm concentration.(AU)

O sêmen ovino congelado e descongelado sofre alterações morfofuncionais que impossibilitam ou diminuem a eficiência na fecundação. Os métodos de seleção espermática visam melhorar a qualidade e a viabilidade do material fecundante. Foram utilizados quatro métodos de seleção espermática utilizando duas soluções de sílica coloidal revestida por silano (sílica coloidal-silano) ou por polivinilpirrolidona (sílica coloidal-PVP), variando o volume de solução coloidal. Foram testadas a cinética espermática no CASA e a recuperação espermática. Os protocolos utilizando sílica coloidal-silano apresentaram maior motilidade total (MT), motilidade progressiva (MP) e porcentagem de espermatozoides rápidos (% RAP) quando comparados aos métodos utilizando a sílica coloidal-PVP e às amostras antes da seleção espermática. A sílica coloidal-PVP teve maior recuperação espermática quando comparada à sílica coloidal-silano. Somente o método utilizando 4mL de sílica coloidal-PVP não foi eficiente na seleção de amostras com melhor qualidade quando comparado às amostras analisadas antes da seleção espermática. Os métodos utilizando menores volumes de solução coloidal não diferiram dos métodos de maior volume, sendo a sílica coloidal-silano com 1mL o método que apresentou os melhores resultados. Como conclusão, os resultados encontrados no trabalho apontaram a maior eficiência da sílica coloidal-silano em selecionar sêmen ovino congelado e descongelado quando comparado à seleção em sílica coloidal-PVP. O método utilizando 1mL de sílica coloidal-silano foi igualmente eficiente ao método com maior volume, sendo uma alternativa para processar amostras com baixa concentração espermática.(AU)

Técnicas de análise de sêmen / Techniques in semen analysis

A análise de sêmen in vitro é importante para evitar prejuízos em programas de inseminação artificial eauxiliar o técnico na escolha de reprodutores para estações de monta. Ainda que as técnicas mais avançadas deavaliação de sêmen ovino estejam restritas a centros de pesquisa, avanços nessa área aumentam a acurácia e arepetibilidade das análises. Foram desenvolvidas tecnologias objetivas de avaliação do sêmen que utilizamsistemas computadorizados e softwares específicos para examinar imagens dos espermatozoides. A análise demotilidade assistida por computador utiliza fotografias sequenciais em que é possível desenhar o trajeto dascélulas espermáticas.Essa tecnologia tem sido aplicada na pesquisa de novos diluidores e crioprotetoresseminais. A morfometria computadorizada diminui a subjetividade da tradicional análise de morfologiaespermática realizada manualmente. A aplicação de sondas fluorescentes com leitura em microscopia defluorescência ou citometria de fluxo permite a avaliação estrutural e funcional dos espermatozoides de formamais ampla, criteriosa e rápida. A pesquisa da capacidade de degradação das espécies reativas de oxigênioauxilia na preservação do sêmen tanto congelado quanto descongelado, e vem sendo utilizada na melhoria demeios para criopreservação. Os testes biológicos, ainda que onerosos na pesquisa em ovinos, geram informaçõesimportantes sobre a sobrevida dos espermatozoides no trato reprodutivo feminino e sua capacidade fecundante.(AU)

In vitro semen analysis is important to prevent errors in artificial insemination programs and assist thetechnician in choosing rams for breeding seasons. While the most advanced assessment techniques ram semenare restricted to research centers, advances in this area increase the accuracy and repeatability of analyzes.Objective semen evaluation technologies using specific computer systems and software to examine images ofsperm were developed. The analysis of computer-assisted motility uses sequential shots that can draw the path ofthe sperm cells, this technology has been applied in search of new extenders and seminal cryoprotectants. Thecomputerized morphometry reduces the subjectivity of traditional sperm morphology analysis performedmanually. The use of fluorescent probes reading fluorescence microscopy or flow cytometry allows structuraland functional assessment of sperm in a more extensive and faster analysis. The research capacity ofdegradation of reactive oxygen species assists in the preservation of frozen and thawed semen, and has beenused in improving the means for cryopreservation. The biological tests, albeit costly research in sheep generateimportant information on the survival of spermatozoa in the female reproductive tract and their fertilizingcapacity.(AU)

Técnicas de análise de sêmen / Techniques in semen analysis

A análise de sêmen in vitro é importante para evitar prejuízos em programas de inseminação artificial eauxiliar o técnico na escolha de reprodutores para estações de monta. Ainda que as técnicas mais avançadas deavaliação de sêmen ovino estejam restritas a centros de pesquisa, avanços nessa área aumentam a acurácia e arepetibilidade das análises. Foram desenvolvidas tecnologias objetivas de avaliação do sêmen que utilizamsistemas computadorizados e softwares específicos para examinar imagens dos espermatozoides. A análise demotilidade assistida por computador utiliza fotografias sequenciais em que é possível desenhar o trajeto dascélulas espermáticas.Essa tecnologia tem sido aplicada na pesquisa de novos diluidores e crioprotetoresseminais. A morfometria computadorizada diminui a subjetividade da tradicional análise de morfologiaespermática realizada manualmente. A aplicação de sondas fluorescentes com leitura em microscopia defluorescência ou citometria de fluxo permite a avaliação estrutural e funcional dos espermatozoides de formamais ampla, criteriosa e rápida. A pesquisa da capacidade de degradação das espécies reativas de oxigênioauxilia na preservação do sêmen tanto congelado quanto descongelado, e vem sendo utilizada na melhoria demeios para criopreservação. Os testes biológicos, ainda que onerosos na pesquisa em ovinos, geram informaçõesimportantes sobre a sobrevida dos espermatozoides no trato reprodutivo feminino e sua capacidade fecundante.

In vitro semen analysis is important to prevent errors in artificial insemination programs and assist thetechnician in choosing rams for breeding seasons. While the most advanced assessment techniques ram semenare restricted to research centers, advances in this area increase the accuracy and repeatability of analyzes.Objective semen evaluation technologies using specific computer systems and software to examine images ofsperm were developed. The analysis of computer-assisted motility uses sequential shots that can draw the path ofthe sperm cells, this technology has been applied in search of new extenders and seminal cryoprotectants. Thecomputerized morphometry reduces the subjectivity of traditional sperm morphology analysis performedmanually. The use of fluorescent probes reading fluorescence microscopy or flow cytometry allows structuraland functional assessment of sperm in a more extensive and faster analysis. The research capacity ofdegradation of reactive oxygen species assists in the preservation of frozen and thawed semen, and has beenused in improving the means for cryopreservation. The biological tests, albeit costly research in sheep generateimportant information on the survival of spermatozoa in the female reproductive tract and their fertilizingcapacity.