Potentially pathogenic Staphylococcus aureus and Listeria spp. in Brazilian unpasteurized cheese production / Staphylococcus aureus e Listeria spp. potencialmente patogênicos na produção de queijos não pasteurizados

This study aimed to identify potentially pathogenic microorganisms (Listeria innocua, L. seeligeri, L. ivanovii, L. monocytogenes, Staphylococcus aureus, and several virulence genes) in unpasteurized cheese production in the northeastern region of the state of São Paulo, Brazil. Listeria species were detected in 68 (64.14%) out of 106 samples of bovine feces, swabs from milkers' and cheese handlers' hands, milking buckets, raw milk, whey, water, cheese processing surface,s and utensils. All the samples collected at one farm were contaminated with Listeria spp. L. innocua, L. seeligeri, L. ivanovii, or L. monocytogenes were not detected in the samples collected in this study. A set of 391 Staphylococcus spp. isolates were obtained in these samples, from which 60 (15.31%) were identified as S. aureus using PCR (Polymerase Chain Reaction). S. aureus carrying virulence genes (eta, hlg, seg, seh, sei) were detected in milk, in swabs from cheese handler's hands, whey, milk, sieves, buckets, and cheese. The hlg gene (encodes gamma hemolysin) was detected in all the S. aureus isolates. These findings show that poor hygienic practice is associated with a higher risk of pathogenic bacteria in milk or cheese, providing useful information for public health authorities to increase food safety surveillance and prevent the dissemination of pathogens.

O objetivo desse estudo foi identificar microrganismos potencialmente patogênicos (Listeria innocua, L. seeligeri, L. ivanovii, L. monocytogenes, Staphylococcus aureus e diversos genes de virulência) na produção de queijos de leite cru na região noroeste do Estado de São Paulo, Brasil. Listeria foram detectadas em 68 (64,14%) das 106 amostras obtidas de fezes bovinas, suabes das mãos de ordenhadores e queijeiros, baldes, leite cru, soro, água, superfícies e utensílios da produção de queijos. Todas as amostras coletadas em uma fazenda estavam contaminadas com Listeria spp. L. innocua, L. seeligeri, L. ivanovii, e L. monocytogenes não foram detectadas nas amostras coletadas nesse estudo. Um conjunto de 391 isolados de Staphylococcus spp. foram obtidos das amostras, e desses 60 (15,31%) foram identificados como S. aureus pela PCR (Polymerase Chain Reaction). S. aureus contendo genes de virulência (eta, hlg, seg, seh, sei) foram detectados em leite, mãos dos ordenhadores, soro, utensílios e queijos. O gene hlg (gama-hemolisina)foi detectado em todos os isolados de S. aureus.Esses resultados demonstram que práticas inadequadas de higiene estão associadas com um maior risco da presença de bactérias patogênicas no leite e queijos crus, fornecendo informações para as autoridades de saúde pública para incrementarem a vigilância e prevenirem a disseminação de patógenos.

Molecular and serological diagnosis for Leptospira spp. in biological samples of cattle collected during the slaughter line / Diagnóstico molecular e sorológico para Leptospira spp. em amostras biológicas de bovinos coletadas durante a linha de abate / Diagnóstico molecular y serológico para Leptospira spp. en muestras biológicas de bovinos recogidas durante la línea de sacrificio

A leptospirose é considerada uma zoonose bacteriana de importância para a saúde pública. É comum em áreas tropicais, especialmente em países em desenvolvimento com escassos recursos de saúde e saneamento. Este estudo avaliou a presença de Leptospira spp. em bovinos abatidos em frigorífico da região Centro-Oeste de São Paulo, Brasil, e identificou animais positivos tanto por sorologia quanto em análise molecular. Amostras biológicas de sangue, fígado e rins de 150 bovinos foram investigadas pela técnica de Soroaglutinação Microscópica (SAM) e Reação em Cadeia da Polimerase convencional (cPCR). Os resultados sorológicos mostraram que dos 150 animais, 71 (47,3%) foram reagentes. Os resultados moleculares mostraram a presença de Leptospira spp. nos rins de 21 animais (14%), no fígado de 5 animais (3,3%), no fígado e rins em 2 animais (1,3%) e no sangue em 1 animal (0,7%). Esses resultados indicam um alerta sobre a saúde dos bovinos de corte devido à possibilidade desses animais serem fonte de infecção e a importância da característica ocupacional desta doença. Verificou-se também a importância de complementar as técnicas sorológicas e moleculares.

Leptospirosis is considered a bacterial zoonosis of public health importance. It is common in tropical areas, especially in developing countries with scarce health and sanitation resources. This study evaluated the presence of Leptospira spp. in slaughtered bovine in a slaughterhouse in the Midwest region of São Paulo, Brazil, as well as identified positive animals both in serology and by molecular analysis. Biological samples of blood, liver and kidneys from 150 cattle were investigated by the technique of Microscopic Agglutination Test (MAT) and conventional Polymerase Chain Reaction (cPCR). The serological results showed that of the 150 animals, 71 (47.3%) were reactive. The molecular results showed the presence of Leptospira spp. in kidneys of 21 (14%) animals, in liver of five (3.3%) animals, in liver and kidneys in two animals (1.3%) and in blood, in one (0.7%) animal. These results indicate a warning about the health of beef cattle due to the possibility of these animals being the source of infection and the importance of the occupational characteristic of this disease. It was also verified the importance of complementing serological and molecular techniques.

La leptospirosis es considerada una zoonosis bacteriana de importancia en salud pública. Es común en áreas tropicales, especialmente en países en desarrollo con escasos recursos de salud y saneamiento. Este estudio evaluó la presencia de Leptospira spp. en bovinos sacrificados en un matadero de región Centro-Oeste de São Paulo, Brasil, así como animales positivos identificados tanto en serología como por análisis molecular. Se investigaron muestras biológicas de sangre, hígado y riñones de 150 bovinos mediante la técnica de Aglutinación Microscópica (MAT) y Reacción en Cadena de la Polimerasa convencional (cPCR). Los resultados serológicos mostraron que de los 150 animales, 71 (47,3%) fueron reactivos. Los resultados moleculares mostraron la presencia de Leptospira spp. en riñones de 21 (14%) animales, en hígado de cinco (3,3%) animales, en hígado y riñones en dos animales (1,3%) y en sangre, en un (0,7%) animal. Estos resultados indican una alerta sobre la salud de los bovinos de carne debido a la posibilidad de que estos animales sean fuente de infección y la importancia de la característica ocupacional de esta enfermedad. También se verificó la importancia de complementar las técnicas serológicas y moleculares.

Isolation and identification of Yersinia enterocolitica in bovine milk samples of bulk tanks from dairy farms in São Paulo, Brazil / Isolamento e identificação de Yersinia enterocolitica em amostras de leite cru bovino a partir de tanques de expansão, São Paulo, Brasil

Milk and its derivatives are good substrates for the proliferation of pathogenic and quality-deteriorating microorganisms, demanding rigorous care with milking, processing, and storage. Among the various bacteria that can grow in raw refrigerated milk, Yersinia enterocolitica, is an invasive enteropathogen of humans. This bacterium can cause a number of intestinal and extraintestinal clinical symptoms, ranging from mild gastroenteritis to mesenteric lymphadenitis, similar to appendicitis. To evaluate the prevalence of pathogenic Yersinia enterocolitica in raw milk from bulk milk tanks located in the State of São Paulo, 102 bovine milk samples (one per dairy farm) were evaluated by microbiological analyses, followed by biochemical tests PCR and genetic sequencing. Microbiological testing did not isolate Y. enterocolitica. However, PCR analysis revealed six samples that were positive for Y. enterocolitica (5.9%), confirmed by genetic sequencing. Only the inv gene was detected, which is present in virulent and avirulent Y. enterocolitica strains. There was great difficulty in microbiological isolation due to the difficulty of competitiveness of Y. enterocolitica in a very rich microbiota of raw milk. Although virulence genes known to be present in potentially pathogenic strains of Y. enterocolitica have not been identified, the presence of this pathogen in milk from expansion tanks...(AU)

O leite e seus derivados possuem substratos que favorecem o desenvolvimento de micro-organismos patogênicos e deteriorantes, devido a isso, cuidados rigorosos são exigindo durante a ordenha, processamento e seu armazenamento. Dentre os vários grupos de bactérias que podem contaminar o leite refrigerado cru está Yersinia enterocolitica. Esta bactéria pode causar a uma série de sintomas clínicos intestinais e extraintestinais, variando de gastroenterite leve a linfadenite mesentérica, semelhante à apendicite. Para avaliar a prevalência de Y. enterocolitica patogênica no leite cru de tanques de expansão localizados no estado de São Paulo, foram avaliadas 102 amostras de leite bovino, por análises microbiológicas, seguido de provas bioquímicas; a Reação em Cadeia de Polimerase (PCR) e sequenciamento genético. Não houve o isolamento de Y. enterocolitica pelas provas microbiológicas clássicas. No entanto, a análise de PCR, realizada diretamente do leite, revelou seis (6) amostras positivas para Y. enterocolitica (5,9%), confirmadas por sequenciamento genético. Somente o gene inv, foi detectado, que pode estar presente em cepas virulentas e avirulentas. Houve dificuldade de isolamento microbiológico devido à dificuldade de competitividade da Y. enterocolitica em uma microbiota muito rica do leite cru. Ainda que não tenham sido identificados os genes de virulência que sabidamente estão...(AU)

Isolation and identification of Yersinia enterocolitica in bovine milk samples of bulk tanks from dairy farms in São Paulo, Brazil / Isolamento e identificação de Yersinia enterocolitica em amostras de leite cru bovino a partir de tanques de expansão, São Paulo, Brasil

Milk and its derivatives are good substrates for the proliferation of pathogenic and quality-deteriorating microorganisms, demanding rigorous care with milking, processing, and storage. Among the various bacteria that can grow in raw refrigerated milk, Yersinia enterocolitica, is an invasive enteropathogen of humans. This bacterium can cause a number of intestinal and extraintestinal clinical symptoms, ranging from mild gastroenteritis to mesenteric lymphadenitis, similar to appendicitis. To evaluate the prevalence of pathogenic Yersinia enterocolitica in raw milk from bulk milk tanks located in the State of São Paulo, 102 bovine milk samples (one per dairy farm) were evaluated by microbiological analyses, followed by biochemical tests PCR and genetic sequencing. Microbiological testing did not isolate Y. enterocolitica. However, PCR analysis revealed six samples that were positive for Y. enterocolitica (5.9%), confirmed by genetic sequencing. Only the inv gene was detected, which is present in virulent and avirulent Y. enterocolitica strains. There was great difficulty in microbiological isolation due to the difficulty of competitiveness of Y. enterocolitica in a very rich microbiota of raw milk. Although virulence genes known to be present in potentially pathogenic strains of Y. enterocolitica have not been identified, the presence of this pathogen in milk from expansion tanks...

O leite e seus derivados possuem substratos que favorecem o desenvolvimento de micro-organismos patogênicos e deteriorantes, devido a isso, cuidados rigorosos são exigindo durante a ordenha, processamento e seu armazenamento. Dentre os vários grupos de bactérias que podem contaminar o leite refrigerado cru está Yersinia enterocolitica. Esta bactéria pode causar a uma série de sintomas clínicos intestinais e extraintestinais, variando de gastroenterite leve a linfadenite mesentérica, semelhante à apendicite. Para avaliar a prevalência de Y. enterocolitica patogênica no leite cru de tanques de expansão localizados no estado de São Paulo, foram avaliadas 102 amostras de leite bovino, por análises microbiológicas, seguido de provas bioquímicas; a Reação em Cadeia de Polimerase (PCR) e sequenciamento genético. Não houve o isolamento de Y. enterocolitica pelas provas microbiológicas clássicas. No entanto, a análise de PCR, realizada diretamente do leite, revelou seis (6) amostras positivas para Y. enterocolitica (5,9%), confirmadas por sequenciamento genético. Somente o gene inv, foi detectado, que pode estar presente em cepas virulentas e avirulentas. Houve dificuldade de isolamento microbiológico devido à dificuldade de competitividade da Y. enterocolitica em uma microbiota muito rica do leite cru. Ainda que não tenham sido identificados os genes de virulência que sabidamente estão...

Potentially pathogenic Staphylococcus aureus and Listeria spp. in Brazilian unpasteurized cheese production: Staphylococcus aureus e Listeria spp. potencialmente patogênicos na produção de queijos não pasteurizados

Resumo O consume de queijos de leite cru contaminados com patógenos pode colocar a saúde pública em risco. Por isso, o objetivo foi identificar microrganismos potencialmente patogênicos (Listeria innocua, L. seeligeri, L. ivanovii, L. monocytogenes, Staphylococcus aureus e diversos genes de virulência) na produção de queijos de leite cru na região noroeste do Estado de São Paulo, Brasil. Listeria foram detectadas em 68 (64,14%) das 106 amostras obtidas de fezes bovinas, suabes das mãos de ordenhadores e queijeiros, baldes, leite cru, soro, água, superfícies e utensílios da produção de queijos. Todas as amostras coletadas em uma fazenda estavavam contaminadas com Listeria spp., apesar de nenhuma ser identificadas como L. innocua, L. seeligeri, L. ivanovii, ou L. monocytogenes. Um conjunto de 391 isolados de Staphylococcus spp. foram obtidos das amostras, e desses 60 (15,31%) foram identificados como S. aureus pela PCR.  S. aureus contendo genes de virulência foram detectados em leite, mãos dos ordenhadores, soro, utensílios e queijos. Esses resultados demonstram que práticas inadequadas de higiene estão associadas com um maior risco da presença de bactérias patogênicas no leite e queijos crus, fornecendo informações para as autoridades de saúde pública para incrementarem a vigilância e prevenirem a prevenção da disseminação de patógenos.