Deeper exploration of inflammatory cell populations in milk to monitor udder health in dairy cows

The present study explored the predictive values of milk leukocyte differentials (MLD) as a basis for improving the diagnosis of intramammary infections (IMIs) and subclinical mastitis. Quarter milk samples were collected for bacteriological analysis, quarter somatic cell count (qSCC), and MLD. The MLD were assessed using the cytospin technique, direct microscopic smears, and flow cytometry. The predictive values of each single leukocyte population and useful potential indices that could better reflect immune complexity were also calculated. Changes in the percentage of any leukocyte alone failed to substantially improve the predictive value of qSCC in diagnosing IMIs. Although certain parameters increased the area under the receiver operating characteristic curve (ROC curve) as a result of increased specificity values, a slight reduction in sensitivity was observed. The so-called CD8 complex was a unique parameter which improved both the sensitivity (78.79 %) and the specificity (80.77 %) in IMI diagnosis, resulting in the highest area under the ROC curve (0.87). To diagnose subclinical mastitis, the percentage of macrophages and the sum of the percentage PMNLs and T CD8+ cells divided by the percentage of macrophages showed the highest predictive values (sensitivity = 79.63, specificity = 73.68, and area under the ROC curve = 0.83) in the differentiation of the inflammatory condition status of cows. In conclusion, this study provides further insights into using T CD8+ lymphocytes in diagnosing bovine IMIs, combined with PMNLs and macrophages. The antidromic trend of macrophages vs. PMNLs and T CD8+ lymphocytes due to the increasing qSCCs was crucial to differentiating quarters under both inflammatory and non-inflammatory conditions.

Influência do vírus da leucemia bovina sobre a atividade imunológica por meio da função neutrofílica / Influence of the bovine leukemia virus on the immunological activity by the neutrophilic function

Background: Bovine leukemia virus (VLB) is an oncogenic deltaretrovirus associated with the development of persistent lymphocytosis (LP) and lymphosarcomas in cattle. LP is characterized by chronic elevation of the number of circulating lymphocytes, in the case of B lymphocytes. Several studies have described functional changes in various leukocyte populations in both blood and milk in VLB-infected animals. The impact of some chronic diseases of low lethality is aggravated by the emergence of comorbidities.The objective of the present study was to evaluate the oxidative metabolism and neutrophil phagocytosis of bovines of the Holtein breed naturally infected with the bovine leukemia virus (VLB). Materials, Methods & Results: In this study, 20 cows were divided into three groups: (NG) seven non-seroreagent animals for VLB and without hematological alterations; (GAL) eight seroreagent animals for VLB and without hematological alterations; and (GLP) five seroreagent animals for VLB with persistent lymphocytosis (LP). The oxidative metabolism of neutrophils was determined by the tetrazolium nitroblast reduction test stimulated or not with Zymosan particles. The percentage of neutrophils that phagocytosed Zymosan particle (s) was also evaluated. The data were initially evaluated for normality and homoscedasticity by the Shapiro-Wilk test. Then the ANOVA test followed by the Student-Newman-Keuls test was applied for the comparison between the NG, GAL and GLP animals. Comparison between the NG animals and the seroreagent animals for the VLB (GVLB) was also performed through the unpaired Student’s t-test. The value of P < 0.05 was considered significant. No significant differences were observed in oxidative neutrophil metabolism in stimulated and non-stimulated samples with Zymosan particles nor in the percentage...

Implications of bovine viral diseases for udder health / As implicações das doenças virais para a saúde da glândula mamária bovina

Several factors can affect bovine mammary gland health and although bacterial mastitis is the most studied and reported cause, viral infections may also have negative effects on bovine udder health. Viral infections can indirectly damage the papillary duct of the teat, and induce or exacerbate signs of bovine mastitis due to viral-induced immunosuppressive effects that may lead to a greater susceptibility to bacterial mastitis and even intensify the severity of established bacterial infections. Some viruses (Bovine alphaherpesvirus2, cowpox, pseudocowpox, foot-and-mouth disease, vesicular stomatitis and papillomavirus) affect the integrity of the udder skin, leading to teat lesions, favoring the entry of mastitis-causing pathogens. It is therefore possible that the association between mastitis and viruses is underestimated and may, for example, be associated with negative bacterial culture results. Few milk samples are tested for the presence of viruses, mainly because of the more laborious and expensive procedures required. Furthermore, samples for virus testing would require specific procedures in terms of collection, handling and storage. Thus, there is a knowledge gap in regard to the actual impact of viruses on bovine udder health. Despite the fact that serum anti-virus antibodies can be detected, there is not enough evidence to confirm or exclude the effect of viruses on udder health. However, any expectation of milk production from healthy animals should consider the possible impact of viral infections in mastitis development and not underestimate the importance of actions to diagnose and control the disease. Therefore, the purpose of this review is to describe the association of diagnosis and control of viral diseases and their effect on bovine udder health.(AU)

Diversos fatores podem afetar a saúde da glândula mamária bovina e embora a mastite bacteriana seja a causa mais estudada e relatada, as infecções virais também podem ter efeitos negativos sobre a saúde da glândula mamária bovina. De forma indireta as infecções virais podem danificar o ducto papilar do teto ou ainda, induzir ou agravar a mastite bovina, devido aos seus efeitos imunossupressores que podem levar a uma maior susceptibilidade para casos de mastite bacteriana e até mesmo intensificar a severidade das infecções bacterianas já estabelecidas. Alguns vírus (Alphaherpesvirus bovino 2, cowpox, pseudocowpox, febre aftosa, estomatite vesicular e papilomavírus) afetam a integridade da pele do úbere, levando a lesões no teto, favorecendo a entrada de patógenos causadores de mastite. Portanto é possível que a associação entre mastites e viroses seja subestimada e podem, por exemplo, estar associada às amostras de diagnóstico de mastite bacteriana com resultados de cultura bacteriana negativa. Além disso, as amostras de leite de vacas com mastite não são coletadas, tratadas e armazenadas adequadamente para pesquisa de vírus que requer cuidados específicos, além de um diagnóstico mais trabalhoso e caro. Desse modo, há lacunas a serem preenchidas quanto ao real impacto das viroses sobre a saúde da glândula mamária bovina. Apesar da possibilidade de detecção de anticorpos séricos contra os vírus, não existem evidências suficientes para incluir ou excluir os efeitos das viroses a saúde da glândula mamária bovina. Porém, a expectativa de produção de leite por meio de animais saudáveis deve considerar os possíveis impactos das infecções virais no desenvolvimento de mastites, não se pode, portanto, subestimar a importância de ações para o diagnóstico e controle das mesmas. Sendo assim, o propósito desta revisão é descrever as relações entre o diagnóstico de controle das doenças virais e seus potenciais impactos sobre a saúde da glândula mamária bovina.(AU)

Implications of bovine viral diseases for udder health / As implicações das doenças virais para a saúde da glândula mamária bovina

Several factors can affect bovine mammary gland health and although bacterial mastitis is the most studied and reported cause, viral infections may also have negative effects on bovine udder health. Viral infections can indirectly damage the papillary duct of the teat, and induce or exacerbate signs of bovine mastitis due to viral-induced immunosuppressive effects that may lead to a greater susceptibility to bacterial mastitis and even intensify the severity of established bacterial infections. Some viruses (Bovine alphaherpesvirus2, cowpox, pseudocowpox, foot-and-mouth disease, vesicular stomatitis and papillomavirus) affect the integrity of the udder skin, leading to teat lesions, favoring the entry of mastitis-causing pathogens. It is therefore possible that the association between mastitis and viruses is underestimated and may, for example, be associated with negative bacterial culture results. Few milk samples are tested for the presence of viruses, mainly because of the more laborious and expensive procedures required. Furthermore, samples for virus testing would require specific procedures in terms of collection, handling and storage. Thus, there is a knowledge gap in regard to the actual impact of viruses on bovine udder health. Despite the fact that serum anti-virus antibodies can be detected, there is not enough evidence to confirm or exclude the effect of viruses on udder health. However, any expectation of milk production from healthy animals should consider the possible impact of viral infections in mastitis development and not underestimate the importance of actions to diagnose and control the disease. Therefore, the purpose of this review is to describe the association of diagnosis and control of viral diseases and their effect on bovine udder health.(AU)

Diversos fatores podem afetar a saúde da glândula mamária bovina e embora a mastite bacteriana seja a causa mais estudada e relatada, as infecções virais também podem ter efeitos negativos sobre a saúde da glândula mamária bovina. De forma indireta as infecções virais podem danificar o ducto papilar do teto ou ainda, induzir ou agravar a mastite bovina, devido aos seus efeitos imunossupressores que podem levar a uma maior susceptibilidade para casos de mastite bacteriana e até mesmo intensificar a severidade das infecções bacterianas já estabelecidas. Alguns vírus (Alphaherpesvirus bovino 2, cowpox, pseudocowpox, febre aftosa, estomatite vesicular e papilomavírus) afetam a integridade da pele do úbere, levando a lesões no teto, favorecendo a entrada de patógenos causadores de mastite. Portanto é possível que a associação entre mastites e viroses seja subestimada e podem, por exemplo, estar associada às amostras de diagnóstico de mastite bacteriana com resultados de cultura bacteriana negativa. Além disso, as amostras de leite de vacas com mastite não são coletadas, tratadas e armazenadas adequadamente para pesquisa de vírus que requer cuidados específicos, além de um diagnóstico mais trabalhoso e caro. Desse modo, há lacunas a serem preenchidas quanto ao real impacto das viroses sobre a saúde da glândula mamária bovina. Apesar da possibilidade de detecção de anticorpos séricos contra os vírus, não existem evidências suficientes para incluir ou excluir os efeitos das viroses a saúde da glândula mamária bovina. Porém, a expectativa de produção de leite por meio de animais saudáveis deve considerar os possíveis impactos das infecções virais no desenvolvimento de mastites, não se pode, portanto, subestimar a importância de ações para o diagnóstico e controle das mesmas. Sendo assim, o propósito desta revisão é descrever as relações entre o diagnóstico de controle das doenças virais e seus potenciais impactos sobre a saúde da glândula mamária bovina.(AU)

Implications of bovine viral diseases for udder health / As implicações das doenças virais para a saúde da glândula mamária bovina

Several factors can affect bovine mammary gland health and although bacterial mastitis is the most studied and reported cause, viral infections may also have negative effects on bovine udder health. Viral infections can indirectly damage the papillary duct of the teat, and induce or exacerbate signs of bovine mastitis due to viral-induced immunosuppressive effects that may lead to a greater susceptibility to bacterial mastitis and even intensify the severity of established bacterial infections. Some viruses (Bovine alphaherpesvirus 2, cowpox, pseudocowpox, foot-and-mouth disease, vesicular stomatitis and papillomavirus) affect the integrity of the udder skin, leading to teat lesions, favoring the entry of mastitis-causing pathogens. It is therefore possible that the association between mastitis and viruses is underestimated and may, for example, be associated with negative bacterial culture results. Few milk samples are tested for the presence of viruses, mainly because of the more laborious and expensive procedures required. Furthermore, samples for virus testing would require specific procedures in terms of collection, handling and storage. Thus, there is a knowledge gap in regard to the actual impact of viruses on bovine udder health. Despite the fact that serum anti-virus antibodies can be detected, there is not enough evidence to confirm or exclude the effect of viruses on

Diversos fatores podem afetar a saúde da glândula mamária bovina e embora a mastite bacteriana seja a causa mais estudada e relatada, as infecções virais também podem ter efeitos negativos sobre a saúde da glândula mamária bovina. De forma indireta as infecções virais podem danificar o ducto papilar do teto ou ainda, induzir ou agravar a mastite bovina, devido aos seus efeitos imunossupressores que podem levar a uma maior susceptibilidade para casos de mastite bacteriana e até mesmo intensificar a severidade das infecções bacterianas já estabelecidas. Alguns vírus (Alphaherpesvirus bovino 2, cowpox, pseudocowpox, febre aftosa, estomatite vesicular e papilomavírus) afetam a integridade da pele do úbere, levando a lesões no teto, favorecendo a entrada de patógenos causadores de mastite. Portanto é possível que a associação entre mastites e viroses seja subestimada e podem, por exemplo, estar associada às amostras de diagnóstico de mastite bacteriana com resultados de cultura bacteriana negativa. Além disso, as amostras de leite de vacas com mastite não são coletadas, tratadas e armazenadas adequadamente para pesquisa de vírus que requer cuidados específicos, além de um diagnóstico mais trabalhoso e caro. Desse modo, há lacunas aserem preenchidas quanto ao real impacto das viroses sobre a saúde da glândula mamária bovina. Apesar da possibilidade de detecção de anticorpos séricos c

Viability of mammary bovine leukocytes challenged with anti-mastitis drugs / Viabilidade de leucócitos mamários bovinos desafiados com drogas anti-mastite

The occurrence of viable cells in mammary gland secretions attests the functionality of the defense system. This fact, along with applied medicine, is fundamental for the healing udder . The objective of this study was to evaluate the in vitro viability of milk leukocytes challenged with four intramammary anti-mastitis drugs. We collected eight cow milk samples that were negative after a bacteriological examination. Cell suspensions were submitted to an evaluation of viability through Trypan Blue exclusion before and after incubation with the drugs. Mean pre-incubation viability rate (± standard deviation) of milk cells was 50.17% (± 6.50). Mean post-incubation viability rates (± standard deviation) of control group (devoid of any drug), Drug 1 (anhydrous cephalonium), Drug 2 (gentamicin), Drug 3 (procaine benzylpenicillin associated with dihydrostreptomycin nafcillin), and Drug 4 (benzathine cloxacillin) were, respectively, 31.36% (± 3.61); 26.23% (± 4.49); 7.82% (± 2.33); 3.10% (± 0.94); and 30.33% (± 4.14). The uppermost impairments were found when milk cells were challenged with Drug 2 and Drug 3. Although antimicrobial activity of tested drugs was not appraised, and a single aspect of cell function was tested, we concluded that treatments 2 and 3 could impair the functionality of milk leukocytes and could provide an ineffective immunological response, and an effective response is essential to control mammary infections.

A ocorrência de células viáveis em secreções das glândulas mamárias atestam a funcionalidade do sistema de defesa. Este fato, juntamente com o medicamento aplicado, é fundamental para a cura do úbere. O objetivo deste trabalho foi avaliar a viabilidade in vitro de leucócitos do leite desafiados com quatro drogas anti-mastite intramamárias. Foram coletadas oito amostras de leite de vaca negativas no exame bacteriológico. As suspensões de células foram submetidas à avaliação da viabilidade pelo método de exclusão do Azul de Trypan pré-incubação e pós-incubação com os medicamentos. A taxa média de viabilidade pré-incubação (± desvio padrão) das células do leite foi 50,17% (± 6,50). As taxas médias de viabilidade pós-incubação (± desvio padrão) de grupo controle (desprovido de qualquer droga), Drogas 1 (cefalônio anidro), 2 (gentamicina), 3 (benzilpenicilina procaína associada a diidroestreptomicina naficilina) e 4 (cloxacilina benzatina) foram, respectivamente, 31,36% (± 3,61); 26.23% (± 4,49); 7,82% (± 2,33); 3,10% (± 0,94); e 30,33% (± 4,14). Os maiores prejuízos foram encontrados quando as células do leite foram desafiadas com as drogas 2 e 3. Embora a atividade antimicrobiana das drogas testadas não era avaliada, e um único aspecto da função das células tenha sido testado, concluiu-se que os tratamentos 2 e 3 poderiam prejudicar a funcionalidade de leucócitos do leite e fornecer uma resposta imunológica ineficaz, e uma resposta eficaz é indispensável para controlar as infecções mamárias.

Viability of mammary bovine leukocytes challenged with anti-mastitis drugs / Viabilidade de leucócitos mamários bovinos desafiados com drogas anti-mastite

The occurrence of viable cells in mammary gland secretions attests the functionality of the defense system. This fact, along with applied medicine, is fundamental for the healing udder . The objective of this study was to evaluate the in vitro viability of milk leukocytes challenged with four intramammary anti-mastitis drugs. We collected eight cow milk samples that were negative after a bacteriological examination. Cell suspensions were submitted to an evaluation of viability through Trypan Blue exclusion before and after incubation with the drugs. Mean pre-incubation viability rate (± standard deviation) of milk cells was 50.17% (± 6.50). Mean post-incubation viability rates (± standard deviation) of control group (devoid of any drug), Drug 1 (anhydrous cephalonium), Drug 2 (gentamicin), Drug 3 (procaine benzylpenicillin associated with dihydrostreptomycin nafcillin), and Drug 4 (benzathine cloxacillin) were, respectively, 31.36% (± 3.61); 26.23% (± 4.49); 7.82% (± 2.33); 3.10% (± 0.94); and 30.33% (± 4.14). The uppermost impairments were found when milk cells were challenged with Drug 2 and Drug 3. Although antimicrobial activity of tested drugs was not appraised, and a single aspect of cell function was tested, we concluded that treatments 2 and 3 could impair the functionality of milk leukocytes and could provide an ineffective immunological response, and an effective response is essential to control mammary infections.(AU)

A ocorrência de células viáveis em secreções das glândulas mamárias atestam a funcionalidade do sistema de defesa. Este fato, juntamente com o medicamento aplicado, é fundamental para a cura do úbere. O objetivo deste trabalho foi avaliar a viabilidade in vitro de leucócitos do leite desafiados com quatro drogas anti-mastite intramamárias. Foram coletadas oito amostras de leite de vaca negativas no exame bacteriológico. As suspensões de células foram submetidas à avaliação da viabilidade pelo método de exclusão do Azul de Trypan pré-incubação e pós-incubação com os medicamentos. A taxa média de viabilidade pré-incubação (± desvio padrão) das células do leite foi 50,17% (± 6,50). As taxas médias de viabilidade pós-incubação (± desvio padrão) de grupo controle (desprovido de qualquer droga), Drogas 1 (cefalônio anidro), 2 (gentamicina), 3 (benzilpenicilina procaína associada a diidroestreptomicina naficilina) e 4 (cloxacilina benzatina) foram, respectivamente, 31,36% (± 3,61); 26.23% (± 4,49); 7,82% (± 2,33); 3,10% (± 0,94); e 30,33% (± 4,14). Os maiores prejuízos foram encontrados quando as células do leite foram desafiadas com as drogas 2 e 3. Embora a atividade antimicrobiana das drogas testadas não era avaliada, e um único aspecto da função das células tenha sido testado, concluiu-se que os tratamentos 2 e 3 poderiam prejudicar a funcionalidade de leucócitos do leite e fornecer uma resposta imunológica ineficaz, e uma resposta eficaz é indispensável para controlar as infecções mamárias.(AU)

VIABILITY OF MAMMARY BOVINE LEUKOCYTES CHALLENGED WITH ANTI-MASTITIS DRUGS

Abstract The occurrence of viable cells in mammary gland secretions attests the functionality of the defense system. This fact, along with applied medicine, is fundamental for the healing udder. The objective of this study was to evaluate the in vitro viability of milk leukocytes challenged with four intramammary anti-mastitis drugs. We collected eight cow milk samples that were negative after a bacteriological examination. Cell suspensions were submitted to an evaluation of viability through Trypan Blue exclusion before and after incubation with the drugs. Mean pre-incubation viability rate (± standard deviation) of milk cells was 50.17% (± 6.50). Mean post-incubation viability rates (± standard deviation) of control group (devoid of any drug), Drug 1 (anhydrous cephalonium), Drug 2 (gentamicin), Drug 3 (procaine benzylpenicillin associated with dihydrostreptomycin nafcillin), and Drug 4 (benzathine cloxacillin) were, respectively, 31.36% (± 3.61); 26.23% (± 4.49); 7.82% (± 2.33); 3.10% (± 0.94); and 30.33% (± 4.14). The uppermost impairments were found when milk cells were challenged with Drug 2 and Drug 3. Although antimicrobial activity of tested drugs was not appraised, and a single aspect of cell function was tested, we concluded that treatments 2 and 3 could impair the functionality of milk leukocytes and could provide an ineffective immunological response, and an effective response is essential to control mammary infections.

Resumo A ocorrência de células viáveis em secreções das glândulas mamárias atestam a funcionalidade do sistema de defesa. Este fato, juntamente com o medicamento aplicado, é fundamental para a cura do úbere. O objetivo deste trabalho foi avaliar a viabilidade in vitro de leucócitos do leite desafiados com quatro drogas anti-mastite intramamárias. Foram coletadas oito amostras de leite de vaca negativas no exame bacteriológico. As suspensões de células foram submetidas à avaliação da viabilidade pelo método de exclusão do Azul de Trypan pré-incubação e pós-incubação com os medicamentos. A taxa média de viabilidade pré-incubação (± desvio-padrão) das células do leite foi 50,17% (± 6,50). As taxas médias de viabilidade pós-incubação (± desvio-padrão) de grupo controle (desprovido de qualquer droga), Drogas 1 (cefalônio anidro), 2 (gentamicina), 3 (benzilpenicilina procaína associada a diidroestreptomicina naficilina) e 4 (cloxacilina benzatina) foram, respectivamente, 31,36% (± 3,61); 26.23% (± 4,49); 7,82% (± 2,33); 3,10% (± 0,94); e 30,33% (± 4,14). Os maiores prejuízos foram encontrados quando as células do leite foram desafiadas com as drogas 2 e 3. Embora a atividade antimicrobiana das drogas testadas não tenha sido avaliada, e um único aspecto da função das células tenha sido testado, concluiu-se que os tratamentos 2 e 3 poderiam prejudicar a funcionalidade de leucócitos do leite e fornecer uma resposta imunológica ineficaz, e uma resposta eficaz é indispensável para controlar as infecções mamárias.

Estratégias de prevenção da mastite bovina no período de transição / Prevention strategies of bovine mastitis in transition period

The dry period has a high vulnerability of dairy cows to mastitis. This period is necessary in dairy cattle to optimize production in the next lactation. New intramammary infections increase signifi cantly after drying and remain high during the fi rst three post calving. This period also represents an excellent opportunity to treat existing intramammary infections and the prevention of new infections that negatively affect milk production in subsequent lactation. The fi nding of increased susceptibility infections at the beginning of the dry period and the beginning of the subsequent lactation has led to the development of treatment protocols for this period. Among the preventive measures in the control of mastitis, there is the dry cow therapy, and more recently the use of internal sealants ceilings. The mastitis control in this period is intended to reduce the number of sick breasts in the subsequent lactation, eliminate existing intramammary infections and prevent new infections during the dry period. This review aimed to address the main points related to bovine mastitis control methods in the dry season.

O período seco é considerado uma fase da lactação onde a vaca se torna vulnerável à mastite, este período é necessário em bovinos leiteiros para otimização da produção na lactação seguinte. As novas infecções intramamárias aumentam drasticamente após a secagem, e permanecem elevadas durante as primeiras três semanas pós-secagem. Esta fase representa também uma excelente oportunida­de para o tratamento de infecções intramamárias existentes e para a prevenção de novas infecções que afetam negativamente a produção leiteira da lactação subsequente. A observação de uma maior susceptibili­dade a infecções no início do período seco e no começo da próxima lactação tem levado ao desenvolvimento de protocolos de tratamento para esse período, dentre as medidas preventivas no controle da mastite, a terapia da vaca seca vem sendo adotada como uma estratégia para o controle da mastite, e mais recentemente o uso de selantes internos de tetos. O controle de mastite neste período tem a finalidade de diminuir o núme­ro de mamas enfermas na lactação subsequente, eliminação de infecções intramamárias existentes e impedir novas infecções durante o período em que a vaca permanecer seca. Esta revisão teve como objetivo abordar os principais pontos relacionados aos métodos de controle da mastite bovina no período seco.

Estratégias de prevenção da mastite bovina no período de transição / Prevention strategies of bovine mastitis in transition period

The dry period has a high vulnerability of dairy cows to mastitis. This period is necessary in dairy cattle to optimize production in the next lactation. New intramammary infections increase signifi cantly after drying and remain high during the fi rst three post calving. This period also represents an excellent opportunity to treat existing intramammary infections and the prevention of new infections that negatively affect milk production in subsequent lactation. The fi nding of increased susceptibility infections at the beginning of the dry period and the beginning of the subsequent lactation has led to the development of treatment protocols for this period. Among the preventive measures in the control of mastitis, there is the dry cow therapy, and more recently the use of internal sealants ceilings. The mastitis control in this period is intended to reduce the number of sick breasts in the subsequent lactation, eliminate existing intramammary infections and prevent new infections during the dry period. This review aimed to address the main points related to bovine mastitis control methods in the dry season.(AU)

O período seco é considerado uma fase da lactação onde a vaca se torna vulnerável à mastite, este período é necessário em bovinos leiteiros para otimização da produção na lactação seguinte. As novas infecções intramamárias aumentam drasticamente após a secagem, e permanecem elevadas durante as primeiras três semanas pós-secagem. Esta fase representa também uma excelente oportunida­de para o tratamento de infecções intramamárias existentes e para a prevenção de novas infecções que afetam negativamente a produção leiteira da lactação subsequente. A observação de uma maior susceptibili­dade a infecções no início do período seco e no começo da próxima lactação tem levado ao desenvolvimento de protocolos de tratamento para esse período, dentre as medidas preventivas no controle da mastite, a terapia da vaca seca vem sendo adotada como uma estratégia para o controle da mastite, e mais recentemente o uso de selantes internos de tetos. O controle de mastite neste período tem a finalidade de diminuir o núme­ro de mamas enfermas na lactação subsequente, eliminação de infecções intramamárias existentes e impedir novas infecções durante o período em que a vaca permanecer seca. Esta revisão teve como objetivo abordar os principais pontos relacionados aos métodos de controle da mastite bovina no período seco.(AU)

Contagem automática e microscópica direta de células somáticas do leite de ovelhas santa inês, utilizando como corantes o Broadhurst-Palley e a hematoxilina-eosina / Automatic and direct microscopic somatic cell count in Santa Ines ewes, using the BroadhurstPalley and Hematoxili-eosin stains

A presença de processos inflamatórios na glândula mamária pode ser avaliada pela contagem de células somáticas (CCS) no leite. Em ovinos, devido ao maior conteúdo de sólidos totais, sobretudo gordura, a contagem microscópica pode ser prejudicada, sendo necessário reavaliar os métodos de coloração do esfregaço. O presente estudo buscou avaliar a celularidade do leite de ovelhas e a comparação entre diferentes métodos de CCS no leite de ovinos da raça Santa Inês, através da contagem microscópica direta utilizando os corantes Broadhurst-Palley (BP) e Hematoxilina-eosina (HE) e a contagem automática de células somáticas em ovinos da raça Santa Inês. Foram utilizadas 602 amostras de leite de ovelhas Santa Inês em lactação. Estas amostras foram destinadas para a CCS automática e para a contagem leucocitária utilizando as colorações de BP e HE. Os valores logarítmicos da CCS automática (5,56 + 0,68), da contagem microscόpica utilizando as colorações de BP (5,75 + 0,76) e HE (5,01 + 0,89) foram diferentes entre si (P < 0,0001). A contagens de leucόcitos polimorfonucleares e mononucleares foram maiores ao utilizar a coloração de BP quando comparado com a coloração de HE (P < 0,0001). As correlações entre a CCS automática e a CCS microscópica utilizando as colorações de BP e HE foram de r = 0,82 e r = 0,79 (P < 0,0001), respectivamente. A correlação entre a contagem microscόpica direta utilizando as colorações de BP e HE foi de 0,76 (P < 0,0001). Conclui-se que, a metodologia empregada influencia a CCS no leite de ovinos, apesar da alta correlação observada entre a contagem automática de células somáticas e a contagem microscópica direta de células somáticas utilizando as colorações de BP e HE.

The somatic cell count (SCC) have been widely used as an indirect marker of inflammation, and consequently in the diagnosis of mastitis. In ewes, there is a need to evaluate the different dyes used in microscopic SCC due to the higher total solid content, mainly due to the fat content, that can impair the evaluation of the microscopic SCC. Thus, the present study aimed to evaluate the milk cellularity and compare different methodologies used to determine milk SCC as the microscopic leukocyte count using the Broadhurst-Palley (BP) and Hematoxilin-eosin (HE) stains and the automatic somatic cell count in Santa Ines ewes. Thus, 602 milk samples from Santa Ines ewes in different lactation stages were used and submitted for automatic SCC and the microscopic leukocyte count using the BP and HE stains. The logarithm values of automatic SCC (5.56 + 0.68), the microscopic somatic SCC using the BP (5.75 + 0.76) and the HE dye (5.01 + 0.89) were different (P < 0.0001). The polymorphonuclear and mononuclear leukocytes counts were higher using the BP dye when compared to the HE dye (P < 0.0001). The correlations among automatic CSS and the microscopic SCC using the BP and HE were r = 0.82 and r = 0.79, respectively (P < 0.0001). The correlation between the microscopic SCC using the BP and HE dyes was 0.76 (P < 0.0001). Thus, despite the high correlation observed among the automatic somatic cell count and the microscopic leukocyte count using the BP and HE stains, the methodology applied can influence the milk SCC from Santa Ines ewes.

Metabolismo oxidativo de leucócitos em animais infectados pelo Vírus da Leucemia Bovina / Oxidative burst of leukocytes from bovine leukemia Virus-Infected Cattle

A infecção pelo vírus da leucemia bovina (VLB) leva ao desenvolvimento de linfocitose persistente (LP) ou linfossarcomas, principalmente em rebanhos bovinos leiteiros. Entretanto, os eventos que induzem tais manifestações ou o efeito da infecção na função das diferentes populações de leucócitos são pouco conhecidos. Avaliou-se o efeito da infecção pelo VLB na produção intracelular de peróxido de hidrogênio (H2O2) em leucócitos circulantes, mensurada pela fluorescência produzida pela diclorodihidrofluoresceína, utilizando-se de citometria de fluxo. As células foram obtidas de cinco vacas soronegativas; cinco vacas infectadas pelo VLB, alinfocitóticas; e cinco vacas infectadas, manifestando LP. Verificou-se que a infecção pelo VLB não altera a porcentagem de leucócitos circulantes produzindo H2O2, com ou sem prévio estímulo por adição in vitro: de 12-miristato 13-acetato de forbol (PMA); de lipopolissacarídeos de Escherichia coli (LPS); ou Staphylococcus aureus. Todavia, a produção de H2O2 em leucócitos de animais apresentando LP, com ou sem estímulo, foi menor que aquela verificada em leucócitos de animais soronegativos e de animais soropositivos alinfocitóticos. Os estímulos aumentaram a porcentagem de leucócitos produzindo H2O2 e a produção intracelular média em animais soronegativos ou naqueles infectados alinfocitóticos. Contudo, em leucócitos de vacas soropositivas manifestando LP, a fagocitose de S. aureus não elevou a porcentagem de leucócitos produzindo H2O2. Também, apenas a adição de PMA elevou a produção intracelular de H2O2 em leucócitos de fêmeas soropositivas manifestando LP. Concluiu-se que bovinos infectados pelo VLB, manifestando LP, apresentam menor produção intracelular de H2O2, demonstrando vulnerabilidade funcional refletida por imunossupressão.(AU)

Widespread Bovine Leukemia Virus (BLV) infection leads to persistent lymphocytosis (PL) or lymphosarcoma, mainly in dairy herds. Nevertheless, neither the sequence of events that conducts to these symptoms, nor the effect of infection on function of different leukocyte populations, is well known. We evaluated the effect of BLV infection on immune response of cows through the analysis of hydrogen peroxide (H2O2) intracellular production of circulating leukocytes after in vitro stimuli with phorbol-12-myristate-13-acetate (PMA), Escherichia coli lipopolysaccharides (LPS), or Staphylococcus aureus. Cells were obtained from five BLV-non infected cows, five BLV-infected, non-lymphocytotic cows, and five BLV-infected cows with PL, and analyzed by flow cytometry. Intracellular production of H2O2 was measured by dichlorodihydrofluorescein diacetate dependent fluorescence. Results showed that BLV infection does not alter the percentage of H2O2-producing circulating leukocytes (H2O2-PCL), with or without previous stimuli. However, the average of H2O2 intracellular production, with or without previous stimuli, in leukocytes obtained from cows with PL was smaller than those from cells obtained from BLV-negative cows and from BLV-infected, non-lymphocytotic cows. Moreover, stimuli increased H2O2 intracellular production and the percentage of H2O2-PCL obtained from BLVnegative cows and from BLV-infected, non-lymphocytotic cows. Conversely, neither phagocytosis of S. aureus and stimulus with LPS increases H2O2 intracellular production, nor phagocytosis increases the percentage of H2O2-PCL, when leukocytes were obtained from cows with PL. Thus, results show that BLV-infected cattle, with PL, have an impaired H2O2 intracellular production, demonstrating functional vulnerability reflected by immunosuppression.(AU)

Contagem automática e microscópica direta de células somáticas do leite de ovelhas santa inês, utilizando como corantes o Broadhurst-Palley e a hematoxilina-eosina / Automatic and direct microscopic somatic cell count in Santa Ines ewes, using the BroadhurstPalley and Hematoxili-eosin stains

A presença de processos inflamatórios na glândula mamária pode ser avaliada pela contagem de células somáticas (CCS) no leite. Em ovinos, devido ao maior conteúdo de sólidos totais, sobretudo gordura, a contagem microscópica pode ser prejudicada, sendo necessário reavaliar os métodos de coloração do esfregaço. O presente estudo buscou avaliar a celularidade do leite de ovelhas e a comparação entre diferentes métodos de CCS no leite de ovinos da raça Santa Inês, através da contagem microscópica direta utilizando os corantes Broadhurst-Palley (BP) e Hematoxilina-eosina (HE) e a contagem automática de células somáticas em ovinos da raça Santa Inês. Foram utilizadas 602 amostras de leite de ovelhas Santa Inês em lactação. Estas amostras foram destinadas para a CCS automática e para a contagem leucocitária utilizando as colorações de BP e HE. Os valores logarítmicos da CCS automática (5,56 + 0,68), da contagem microscόpica utilizando as colorações de BP (5,75 + 0,76) e HE (5,01 + 0,89) foram diferentes entre si (P < 0,0001). A contagens de leucόcitos polimorfonucleares e mononucleares foram maiores ao utilizar a coloração de BP quando comparado com a coloração de HE (P < 0,0001). As correlações entre a CCS automática e a CCS microscópica utilizando as colorações de BP e HE foram de r = 0,82 e r = 0,79 (P < 0,0001), respectivamente. A correlação entre a contagem microscόpica direta utilizando as colorações de BP e HE foi de 0,76 (P < 0,0001). Conclui-se que, a metodologia empregada influencia a CCS no leite de ovinos, apesar da alta correlação observada entre a contagem automática de células somáticas e a contagem microscópica direta de células somáticas utilizando as colorações de BP e HE.(AU)

The somatic cell count (SCC) have been widely used as an indirect marker of inflammation, and consequently in the diagnosis of mastitis. In ewes, there is a need to evaluate the different dyes used in microscopic SCC due to the higher total solid content, mainly due to the fat content, that can impair the evaluation of the microscopic SCC. Thus, the present study aimed to evaluate the milk cellularity and compare different methodologies used to determine milk SCC as the microscopic leukocyte count using the Broadhurst-Palley (BP) and Hematoxilin-eosin (HE) stains and the automatic somatic cell count in Santa Ines ewes. Thus, 602 milk samples from Santa Ines ewes in different lactation stages were used and submitted for automatic SCC and the microscopic leukocyte count using the BP and HE stains. The logarithm values of automatic SCC (5.56 + 0.68), the microscopic somatic SCC using the BP (5.75 + 0.76) and the HE dye (5.01 + 0.89) were different (P < 0.0001). The polymorphonuclear and mononuclear leukocytes counts were higher using the BP dye when compared to the HE dye (P < 0.0001). The correlations among automatic CSS and the microscopic SCC using the BP and HE were r = 0.82 and r = 0.79, respectively (P < 0.0001). The correlation between the microscopic SCC using the BP and HE dyes was 0.76 (P < 0.0001). Thus, despite the high correlation observed among the automatic somatic cell count and the microscopic leukocyte count using the BP and HE stains, the methodology applied can influence the milk SCC from Santa Ines ewes.(AU)

Factors affecting immunoglobulin concentration in colostrum of healthy Holstein cows immediately after delivery / Fatores que afetam o nível de imunoglobulina no colostro de vacas holandesas sadias imediatamente após o parto

This study analyzed the influence of the number of milkings, number of births, and udder quarter in immunoglobulin (Ig) concentration in the colostrum of healthy Holstein cows. It was collected two samples of colostrum by manual milking, getting the first jets to completion of bacteriological examination and immunoglobulin levels by radial immunodiffusion test in agar gel. Positive samples for bacteriological examination were excluded from this investigation. Medians of immunoglobulin's G, A and M in the colostrum collected before the first and second milking were respectively 9,200 and 6,400mg/dL (p=0.0029); 400 and 200mg/dL (p=0.0018); 800 and 400mg/dL (p=0.0001). Median immunoglobulin concentration in animals that calved once, twice or three times or in cows that calved 4 to 6 times were 6,400; 6,400; 3,200 and 11,200mg/dL IgG; 100, 200, 100 and 800mg/dL IgA ; and 400, 400, 100 and 800mg/dL IgM, respectively. Concentrations of IgG, IgA and IgM were greater in animals that calved more than 4 times (p<0.05). Medians of IgG, IgA and IgM in the right fore quarter (RF), right hind quarter (RH), left fore quarter (LF) and left hind quarter (LH) were, respectively, 7,800; 6,400; 7,800 and 6,400mg/dL; 200, 200, 200 and 200mg/dL; and 400, 400, 400 and 400mg/dL. Ig concentrations in the colostrum of Holstein cows were influenced by the number of milkings after delivery and number of lactations. These variations may be considered risk factors to passive immunity transfer to newborn calves, predisposing them to diseases and causing economic losses to dairy production.(AU)

A pesquisa avaliou a influência do número de ordenhas, número de parições e quarto mamário na concentração de imunoglobulinas (Ig) do colostro de vacas hígidas da raça Holandesa. Foram colhidas duas amostras de colostro por ordenha manual, obtendo-se os primeiros jatos para a realização do exame bacteriológico e determinação dos níveis de imunoglobulinas pelo teste de imunodifusão em gel de ágar. As amostras positivas ao exame bacteriológico foram eliminadas desta investigação. Os valores medianos obtidos para a concentração de imunoglobulinas das classes G, A e M do colostro colhido antes da primeira e segunda ordenha foram, respectivamente de 9.200 e 6.400mg/dL (p=0,0029); 400 e 200mg/ dL (p=0,0018); 800 e 400mg/dL (p=0,0001), respectivamente. Os valores medianos da concentração de imunglobulinas, nos animais com apenas 1 parto, 2, 3 ou nas vacas com 4 a 6 partos foram de 6.400, 6.400, 3.200 e 11.200mg/ dL para a IgG; 100, 200, 100 e 800mg/dL para a IgA; e 400, 400, 100 e 800mg/dL para a IgM, respectivamente. As concentrações de IgG, IgA e IgM foram superiores nos animais com mais de 4 partos (p<0,05). Os valores medianos de IgG, IgA e IgM obtidos nos quartos mamários anterior direito (AD), posterior direito (PD), anterior esquerdo (AE) e posterior esquerdo (PE) foram respectivamente 7.800, 6.400, 7.800, 6.400mg/dL; 200, 200, 200, 200mg/dL; e 400, 400, 400 e 400mg/dL, não observando-se diferenças estatísticas (p>0,05) entre os quartos mamários. Os teores de Igs do colostro de vacas Holandesas sofrem influência do número de ordenhas pós-parto e número de lactações. Estas variações podem ser consideradas fatores de risco associados à falha na transferência de imunidade passiva em bezerros neonatos, predispondo-os às doenças e ocasionando perdas produtivas á pecuária.(AU)

Influência da leucose enzoótica bovina na função fagocítica de leucócitos circulantes em animais manifestando linfocitose persistente / Influence of enzootic bovine leukosis on phagocytic function of circulating leukocytes from animals with persistent lymphocytosis

Avaliou-se, por citometria de fluxo, a fagocitose de Staphylococcus aureus conjugados com iodeto de propídio (IP), por leucócitos circulantes obtidos de cinco fêmeas bovinas negativas no sorodiagnóstico para a Leucose Enzoótica Bovina (LEB); de cinco fêmeas infectadas, manifestando linfocitose persistente (LP); e de cinco fêmeas infectadas, porém alinfocitóticas. Observou-se que, entre as amostras dos animais soronegativos, a porcentagem média de células realizando fagocitose (12,90%) não diferiu da observada entre as células dos animais alinfocitóticos (14,70%). Contudo, ambas foram maiores (p=0,047) que aquela verificada entre as células obtidas de animais manifestando LP (7,20%). Além disso, a intensidade média de fagocitose (caracterizada pela intensidade de fluorescência do IP, em valores arbitrários), verificada em leucócitos de animais manifestando LP (17,43) foi menor (p<0,001) que a observada em leucócitos de animais alinfocitóticos (29,50), e que a observada em leucócitos de animais soronegativos (25,18), que não diferiram entre si. Assim, os resultados permitem-nos alvitrar que há alteração na função fagocítica de leucócitos circulantes em animais infectados pelo vírus da LEB, manifestando LP.(AU)

This study evaluated the phagocytosis of propidium iodide-labeled Staphylococcus aureus (PI-Sa) by circulating leukocytes obtained from five Enzootic Bovine Leukosis (EBL)-negative cows, five naturally EBL-infected, non-lymphocytotic cows, and five EBL-positive cows with persistent lymphocytosis (PL), analyzed by flow cytometry. Among cells obtained from EBL-infected cows, presenting PL, the percentage of leukocytes carrying out phagocytosis (7.20%), was smaller (p=0.047) than that verified among cells obtained from non-infected (12.90%), and from BLV-infected, non-lymphocytotic cows (14.70%). Furthermore, leukocytes obtained from EBL-infected cows, presenting PL, showed smaller phagocytosis intensity (characterized by the intensity of propidium iodide fluorescence) than leukocytes obtained from non-infected and from EBL-infected, non-lymphocytotic, cows (p<0.001). Therefore, results show a decreased phagocytic function among circulating leukocytes obtained from BLV-infected, lymphocytotic cows.(AU)

Avaliação funcional dos fagócitos sanguíneos e lácteos de vacas naturalmente infectadas pelo vírus da leucose dos bovinos / Functional evaluation of blood and milk phagocytes of cows naturally infected by bovine leukosis virus

O vírus da leucose enzoótica bovina (VLEB) pode interferir na proporção e na funcionalidade dos linfócitos B e das demais células sanguíneas. Acreditando-se que essas alterações pudessem interferir nos mecanismos de defesa da glândula mamária, o presente estudo avaliou funcionalmente os fagócitos sanguíneos e lácteos de vacas naturalmente infectadas pelo VLEB, por meio da expressão de diferentes receptores de superfície celular de fagócitos e linfócitos; da morte celular dos fagócitos e do linfócito B; pelo potencial de fagocitose e produção intracelular de peróxido de hidrogênio pelas células CD14+ e CH138+. Foram selecionadas nove vacas negativas para a LEB (grupo negativo), dez positivas sem linfocitose (grupo AL) e seis positivas com linfocitose persistente (grupo LP). Independente do perfil hematológico das vacas positivas para a LEB, nas amostras de sangue foram observadas menor expressão de células mononucleares CD14+, de linfócitos T (CD3+) e de linfócitos B CD21+ CD11b+ e maior expressão de linfócitos B (CD21+). As vacas do grupo LP apresentaram menores quantidades de linfócitos T auxiliares (CD3+ CD4+) e de linfócitos B CD21+ CD5- CD11b- e maiores quantidades de linfócitos B CD21+ CD5+ CD11b+. Menores quantidades de linfócitos B CD21+ CD5+ foram observados nas vacas do grupo AL do que nas vacas do grupo negativo. As vacas do grupo LP apresentaram menores índices de fagocitose por Escherichia coli pelas células mononucleares CD14+, menor produção de peróxido de hidrogênio e menores índices de fagocitose por Staphylococcus aureus pelas células polimorfonucleares CH138+. As vacas do grupo LP apresentaram menores índices de necrose, de apoptose e/ou necrose e maior viabilidade das células mononucleares CD14+, das células polimorfonucleares CH138+ e dos linfócitos B (CD21+). Apenas os linfócitos B (CD21+) das vacas do grupo LP apresentaram menores índices de morte por apoptose, e as células mononucleares CD14+ das vacas do grupo AL manifestaram maiores índices de apoptose e/ou necrose do que as vacas negativas. Independente do perfil hematológico das vacas, nas amostras de leite foram observadas maiores quantidades de macrófagos e maiores expressões de linfócitos T (CD3+) e de linfócitos B (CD21+). As vacas do grupo AL apresentaram maior quantidade de linfócitos B (CD21+) do que as vacas negativas. As vacas do grupo LP apresentaram menores quantidades de linfócitos T citotóxicos (CD3+ CD8+), de linfócitos B CD21+ CD11b+ e de linfócitos B CD21+ CD5+ CD11b+ e maior quantidade de linfócitos B CD21+ CD5- CD11b-. As vacas do grupo AL apresentaram menores índices de fagocitose por Escherichia coli pelos macrófagos CD14+ e pelos leucócitos CH138+ e as vacas do grupo LP apresentaram maior produção de peróxido de hidrogênio intracelular. As vacas positivas para LEB apresentaram maiores índices de morte por necrose dos macrófagos CD14+ e dos linfócitos B (CD21+) e menores índices de morte por apoptose dos macrófagos CD14+, dos leucócitos CH138+ e dos linfócitos B (CD21+). Estas vacas também apresentaram maior viabilidade dos macrófagos CD14+ e dos leucócitos CH138+. As vacas do grupo LP apresentaram maiores índices de apoptose e/ou necrose dos macrófagos CD14+, de necrose de leucócitos CH138+ e de viabilidade de linfócitos B (CD21+). Resultados permitem concluir que a o VLEB altera a resposta imune da glândula mamária

The enzootic bovine leukemia virus (BLV) can influence the amount of lymphocytes B and other blood cells and their functions. Believing that these changes could interfere in the defense mechanisms of the mammary gland, this study evaluated blood and milk phagocytes functions from cows naturally infected VLEB through the expression of different cell surface receptors of phagocytes and lymphocytes; from death cell of phagocytes and B lymphocytes; the phagocytosis and intracellular production of hydrogen peroxide by CD14+ and CH138+ cells. We chose nine cows negative for the LEB (negative group), ten positive without lymphocytosis (LA group) and six positive with persistent lymphocytosis (LP group). In blood samples of positive cows for BLV, it was observed smaller expression of CD14+ mononuclear, T lymphocytes (CD3+) and CD21+ CD11b+ B lymphocytes, along with increased expression of B lymphocytes (CD21+). Cows of the LP group had lower amounts of T helper lymphocytes (CD3+ CD4+) and CD21+ CD5- CD11b- B lymphocytes and higher amounts of CD21+ CD5+ CD11b+ B lymphocytes. In cows of AL group it was observed lower amounts of CD21+ CD5+ B lymphocytes than in cows of negative group. Cows of LP group had lower rates of Escherichia coli phagocytosis by CD14+ mononuclear cells, lower intracellular production of hydrogen peroxide and lower rates of phagocytosis of Staphylococcus aureus by CH138+ polymorphonuclear cells. Cows of LP group showed less necrosis, apoptosis and/or necrosis and increased viability of CD14+ mononuclear cells, CH138+ polymorphonuclear cells and B lymphocytes (CD21+). Only the B-lymphocytes (CD21+) of the cows in the LP group showed less apoptosis, and CD14 + mononuclear cells from cows in the AL group showed higher rates of apoptosis and/or necrosis than the ones from negative cows. In the milk sample, the positive cows showed higher amounts of macrophages and increased expression of T lymphocytes (CD3+) and B lymphocytes (CD21+). Cows of AL group showed a higher amount of B lymphocytes (CD21+) than negative cows. Cows of LP group had lower amounts of T cytotoxic lymphocytes (CD3+, CD8+), CD21+ CD11b+ B lymphocytes and CD21+, CD5+, CD11b+, B lymphocytes and increased amount of CD21 + CD5- CD11b- B lymphocytes. Cows of the AL group had lower rates of Escherichia coli phagocytosis by CD14+ macrophages and CH138+ leukocytes and cows of group LP had higher production of intracellular hydrogen peroxide. The positive cows for LEB had higher rates of death by necrosis of CD14+ macrophages and B lymphocytes (CD21+) and lower rates of apoptosis of CD14+ macrophages, CH138+ leukocytes and B lymphocytes (CD21+). These cows also had higher viability of CD14+ macrophages and CH138+ leukocytes. Cows on the LP group had higher rates of apoptosis and/or necrosis of CD14+ macrophages, necrosis of CH138+ leukocytes and viability of B lymphocytes (CD21+). Results suggested that the VLEB influence the immune response of the mammary gland

Implications of bovine viral diseases for udder health / As implicações das doenças virais para a saúde da glândula mamária bovina

Several factors can affect bovine mammary gland health and although bacterial mastitis is the most studied and reported cause, viral infections may also have negative effects on bovine udder health. Viral infections can indirectly damage the papillary duct of the teat, and induce or exacerbate signs of bovine mastitis due to viral-induced immunosuppressive effects that may lead to a greater susceptibility to bacterial mastitis and even intensify the severity of established bacterial infections. Some viruses (Bovine alphaherpesvirus 2, cowpox, pseudocowpox, foot-and-mouth disease, vesicular stomatitis and papillomavirus) affect the integrity of the udder skin, leading to teat lesions, favoring the entry of mastitis-causing pathogens. It is therefore possible that the association between mastitis and viruses is underestimated and may, for example, be associated with negative bacterial culture results. Few milk samples are tested for the presence of viruses, mainly because of the more laborious and expensive procedures required. Furthermore, samples for virus testing would require specific procedures in terms of collection, handling and storage. Thus, there is a knowledge gap in regard to the actual impact of viruses on bovine udder health. Despite the fact that serum anti-virus antibodies can be detected, there is not enough evidence to confirm or exclude the effect of viruses on

Diversos fatores podem afetar a saúde da glândula mamária bovina e embora a mastite bacteriana seja a causa mais estudada e relatada, as infecções virais também podem ter efeitos negativos sobre a saúde da glândula mamária bovina. De forma indireta as infecções virais podem danificar o ducto papilar do teto ou ainda, induzir ou agravar a mastite bovina, devido aos seus efeitos imunossupressores que podem levar a uma maior susceptibilidade para casos de mastite bacteriana e até mesmo intensificar a severidade das infecções bacterianas já estabelecidas. Alguns vírus (Alphaherpesvirus bovino 2, cowpox, pseudocowpox, febre aftosa, estomatite vesicular e papilomavírus) afetam a integridade da pele do úbere, levando a lesões no teto, favorecendo a entrada de patógenos causadores de mastite. Portanto é possível que a associação entre mastites e viroses seja subestimada e podem, por exemplo, estar associada às amostras de diagnóstico de mastite bacteriana com resultados de cultura bacteriana negativa. Além disso, as amostras de leite de vacas com mastite não são coletadas, tratadas e armazenadas adequadamente para pesquisa de vírus que requer cuidados específicos, além de um diagnóstico mais trabalhoso e caro. Desse modo, há lacunas aserem preenchidas quanto ao real impacto das viroses sobre a saúde da glândula mamária bovina. Apesar da possibilidade de detecção de anticorpos séricos c

Avaliação da relação do exame físico da glândula mamária de ovelhas da raça Santa Inês com o perfil citológico e bacteriológico do leite / Evaluation of the relantionship between the mammary gland physical examination of Santa Inês sheep and their bacteriological and cytological milk profile

Com o objetivo de avaliar a relação entre o exame físico da glândula mamária de ovelhas com o leite, 292 ovelhas da raça Santa Inês foram examinadas. As amostras de leite foram submetidas ao exame bacteriológico, ao CMT e a CCS (automática e microscópica). Variações especificamente identificadas por inspeção da mama apresentaram alterações de celularidade observadas pelo CMT (p<0,002), na CCS automática (p<0,006), e na CCS microscópica diferencial para células mononucleares (p<0,03). Mamas pendulosas puderam ser associadas a maior isolamento bacteriológico (p<0,0006) e maior celularidade nas CCS automática (p<0,01) e microscópica (p<0,05). Na inspeção do teto foram encontradas diferenças no exame da CCS automática (p<0,002), no CMT (p<0,004) e na CCS microscópica diferencial para células mononucleares (p<0,005). Nos tetos com soluções de continuidade, foram observadas diferenças apenas no exame bacteriológico (p<0,03). Quanto à palpação da mama, foram observadas diferenças no exame bacteriológico (p<0,001), no CMT (p<0,01) e na CCS microscópica total (p<0,02) e diferencial para células polimorfonuleares (p<0,02) e para células mononucleares (p<0,0002). Quanto à palpação do teto, foram encontradas diferenças no CMT (p<0,01) e na CCS microscópica total (p<0,002) e diferencial para células polimorfonucleares (p<0,002) e para células mononucleares (p<0,002). Associando-se a inspeção à palpação das metades mamárias, observou-se diferenças na CCS automática (p<0,0002) e na CCS microscópica total (p<0,04) e diferencial para células mononucleares (p<0,01). No exame do fundo escuro, foram observadas diferenças no CMT (p<0,0001), na CCS automática (p<0,0001), e na CCS microscópica total (p<0,0001) e diferencial para células polimorfonucleares (p<0,0001) e mononucleares (p<0,0001). Quando associadas duas categorias do exame físico da glândula mamária, a inspeção e a palpação, e o exame do fundo escuro, foram observadas diferenças no CMT (p<0,0001), na CCS automática (p<0,0001) e na CCS microscópica total (p<0,0001) e diferencial para células mononucleares (p<0,0001). Nas ovelhas acompanhadas durante a lactação foram observadas diferenças na inspeção da mama (p<0,0001) e do teto (p<0,0001), na palpação da mama (p<0,005) e do teto (p<0,003), na inspeção e palpação das metades mamárias (p<0,04), na inspeção, palpação e fundo escuro das metades mamárias (p<0,03), na CCS automática (p<0,0001) e na CCS microscópica total (p<0,02) e diferencial para células polimorfonucleares (p<0,02) e para células mononucleares (p<0,02). Foi possível concluir que há relação entre o exame físico e o perfil celular e bacteriológico, mas que a inflamação da mama foi melhor identificada pelo CMT, através da inspeção da mama e do teto, da palpação da mama e do teto, do exame do fundo escuro e da avaliação da inspeção, palpação e fundo escuro das metades mamárias. A inflamação também foi identificada pela avaliação da CCS automática e/ou da CCS microscópica total e/ou diferencial através da inspeção da mama e do teto, pendulosidade da mama, palpação da mama e do teto, inspeção e palpação das metades mamárias, exame do fundo escuro e a inspeção, palpação e fundo escuro das metades mamárias. O processo infeccioso mamário pôde ser identificado através da pendulosidade mamária, presença de soluções de continuidade no teto e pela palpação da mama. A maior celularidade ocorreu no início da lactação. No final da lactação, houve maiores proporções de alterações na inspeção da mama e do teto e na palpação do teto. Nas fases intermediárias da lactação, as alterações na inspeção e palpação associadas e na inspeção, palpação e fundo escuro associados foram menores

The aim of this work is to evaluate the relationship between the mammary gland physical examination of ewes and their milk. 292 ewes of Santa Inês breed were evaluated, and the milk samples were submitted to bacteriological examination, to CMT (California Mastitis Test), to automatic SCC (somatic cell count) and microscopic SCC. Specifically identified variations during the mama inspection had cellular alterations, observed in CMT (p<0,002), in automatic SCC (p<0,006) and in differential microscopic count for mononuclear cells (p<0,03). Pendulous mamas could be associated to the largest bacteriological isolation (p<0,0006) and the largest cellular in automatic SCC (p<0,01) and microscopic SCC (p<0,05). In the teat inspection, differences were found in the automatic SCC (p<0,002) in the CMT (p<0,004) and in differential microscopic count for mononuclear cells (p<0,005). In the teat with lesion, differences were observed only in bacteriological examination (p<0,03). In mamma palpation, there were observed differences in bacteriological examination (p<0,001), in CMT (p<0,01), in total microscopic count (p<0,02), differences to polymorphonuclear cells (p<0,02) and to mononuclear cells (p<0,0002). In teat palpation, differences were found in CMT (p<0,01), in total microscopic count (p<0,002) and differences to polymorphonuclear cells (p<0,002) and to mononuclear cells (p<0,002). Associating the inspection and palpation of mammary gland, differences were observed in automatic SCC (p<0,0002) and in total microscopic count (p<0,04) and differences to mononuclear cells (p<0,01). In tamis exam, differences were observed in the CMT (p<0,0001), in automatic SCC (p<0,0001), and in total microscopic count (p<0,0001) and differences to polymorphonuclear cells (p<0,0001) and mononuclear cells (p<0,0001). When the two categories of mammary gland physical exam, the inspection, the palpation, and the tamis exam were associated, there were observed differences in the CMT (p<0,0001), in the automatic SCC (p<0,0001) and in the total microscopic count (p<0,0001), and differences in the microscopic SCC to mononuclear cells (p<0,0001). In the ewes followed during the lactation there were differences in mamma inspection (p<0,0001), in teat (p<0,0001), in mamma palpation (p<0,005) and in teat (p<0,003), in the inspection and palpation of mammary gland (p<0,04), in inspection, palpation and tamis exam of mammary gland (p<0,03), in automatic SCC (p<0,0001) and in total microscopic count (p<0,02), and differences for polymorphonuclear cells (p<0,02) and to mononuclear cells (p<0,02). It can be concluded that there is a relationship among the physical exam and the cellular and bacteriological profile, but the mamma inflammation was better identified by the CMT, through inspection of mamma and teat, and mamma and teat palpation, and tamis exam and the evaluation by inspection, palpation and macroscopic assessment of the milk by mammary glands. The inflammation was also identified by the evaluation of automatic SCC and/or total microscopic count through inspection of mamma and teat, pendulous mamma, palpation of mamma and teat, inspection and palpation of mammary gland, tamis exam and the inspection, palpation and tamis exam of mammary gland and milk. The infection in mammary gland can be identified by pendulous mamma, lesion in teat and by palpation of mamma. The biggest cellular was found in early lactation. And in late lactation, there were found more alterations in mamma and teat inspection and palpation of teat. In the intermediate phases of lactation, the alterations in inspection and palpation associated and the inspection, palpation and the tamis exam associated were smaller