Biofilm forming antimicrobial-multiresistant Staphylococcus aureus / Multirresistência antimicrobiana de Staphylococcus aureus formadores de biofilme

Staphylococcus aureus is one of the main agents isolated from bovine mastitis cases, characterized by lower cure rates compared to other pathogens causing this disease. This phenomenon is mainly explained by the multiresistance acquisition to antimicrobials and the ability of S. aureus to form biofilms on biotic and abiotic surfaces. In this work 15 samples of S. aureus isolated from the automated milking facility were analyzed regarding the resistance profile to antimicrobials, virulence factors (capsule production, hemolysin, and protease) and adhesion capacity under different temperatures (42±1°C, 36±1°C, 25±1°C, 9±1°C, and 3±1°C). All isolates showed methicillin-resistant (MRSA) characteristics and multidrug resistance profile to the antimicrobials tested (penicillin G, chloramphenicol, oxacillin, cephalexin, tetracycline, amoxicillin + clavulanic acid, sulfa + trimetropim, gentamicin, doxycycline, ceftiofur, neomycin, and vancomycin) with an IRMA index between 0.5 and 1.0. Five isolates were resistant to vancomycin (VRSA), two were resistant to all active principles, and the others to at least six of these drugs. Adhesion capacity and biofilm formation were found in 3 of the 5 evaluated temperatures, including the cooling conditions. Regarding the virulence factors, 86.7% of the isolates formed capsules, 60% revealed the presence of protease, 26.7% expressed the α-hemolysin factor, and 13.3% of them presented β-hemolysin. The fact that all isolates presented MRSA characteristics represents a potential risk to those exposed to this agent, and the formation of biofilm in liners even after the use of detergents and sanitization highlights the urgency of searching for alternatives for dispersion of the biofilm by S. aureusin the automated milking facility.

O Staphylococcus aureus é um dos principais agentes isolados de casos de mastite bovina, caracterizado por menores taxas de cura em comparação com outros patógenos desta enfermidade. Esse fenômeno é explicado principal-mente pela aquisição de resistência à antimicrobianos e a capacidade do S. aureus formar biofilmes em superficies bióti-cas e abióticas. Neste trabalho foram utilizadas 15 amostras de S. aureus isolados de ordenhadeira, analisados quanto ao perfil de resistência à antimicrobianos, fatores de virulência (produção de cápsula, hemolisina e protease) e capacidade de adesão sob diferentes temperaturas (42±1°C, 36±1°C, 25±1ºC, 9±1ºC e 3±1ºC). Todos os isolados apresentaram perfil de multirresistência aos antimicrobianos testados (penicilina G, cloranfenicol, oxacilina, cefalexina, tetraciclina, amoxicilina + ácido clavulônico, sulfa + trimetropim, gentamicina, doxiciclina, ceftiofur, neomicina e vancomicina) com índice IRMA entre 0,5 a 1,0. Duas cepas foram resistentes a todos os princípios ativos e as demais a pelo menos seis destes fármacos. Os isolados avaliados apresentaram característica de meticilina-resistentes (MRSA) e destes, 33,34% (5/15) foram resistentes à vancomicina (VRSA). Houve capacidade de adesão e formação de biofilmes em 3 das 5 tem-peraturas avaliadas, incluindo as temperaturas de refrigeração. Em relação aos fatores de virulência, 86,7% dos isolados formaram cápsula, 60% presença de protease, 26,7% expressaram o fator α-hemolisina e 13,3% β-hemolisina. O fato de todos isolados apresentarem característica MRSA representa um risco potencial aos expostos a esse agente. Já a for-mação de biofilmes em teteiras, mesmo após detergência e sanitização, destacam a urgência de alternativas de dispersão de biofilmes no ambiente de ordenha.

Biofilm forming antimicrobial-multiresistant Staphylococcus aureus / Multirresistência antimicrobiana de Staphylococcus aureus formadores de biofilme

Staphylococcus aureus is one of the main agents isolated from bovine mastitis cases, characterized by lower cure rates compared to other pathogens causing this disease. This phenomenon is mainly explained by the multiresistance acquisition to antimicrobials and the ability of S. aureus to form biofilms on biotic and abiotic surfaces. In this work 15 samples of S. aureus isolated from the automated milking facility were analyzed regarding the resistance profile to antimicrobials, virulence factors (capsule production, hemolysin, and protease) and adhesion capacity under different temperatures (42±1°C, 36±1°C, 25±1°C, 9±1°C, and 3±1°C). All isolates showed methicillin-resistant (MRSA) characteristics and multidrug resistance profile to the antimicrobials tested (penicillin G, chloramphenicol, oxacillin, cephalexin, tetracycline, amoxicillin + clavulanic acid, sulfa + trimetropim, gentamicin, doxycycline, ceftiofur, neomycin, and vancomycin) with an IRMA index between 0.5 and 1.0. Five isolates were resistant to vancomycin (VRSA), two were resistant to all active principles, and the others to at least six of these drugs. Adhesion capacity and biofilm formation were found in 3 of the 5 evaluated temperatures, including the cooling conditions. Regarding the virulence factors, 86.7% of the isolates formed capsules, 60% revealed the presence of protease, 26.7% expressed the α-hemolysin factor, and 13.3% of them presented β-hemolysin. The fact that all isolates presented MRSA characteristics represents a potential risk to those exposed to this agent, and the formation of biofilm in liners even after the use of detergents and sanitization highlights the urgency of searching for alternatives for dispersion of the biofilm by S. aureusin the automated milking facility.(AU)

O Staphylococcus aureus é um dos principais agentes isolados de casos de mastite bovina, caracterizado por menores taxas de cura em comparação com outros patógenos desta enfermidade. Esse fenômeno é explicado principal-mente pela aquisição de resistência à antimicrobianos e a capacidade do S. aureus formar biofilmes em superficies bióti-cas e abióticas. Neste trabalho foram utilizadas 15 amostras de S. aureus isolados de ordenhadeira, analisados quanto ao perfil de resistência à antimicrobianos, fatores de virulência (produção de cápsula, hemolisina e protease) e capacidade de adesão sob diferentes temperaturas (42±1°C, 36±1°C, 25±1ºC, 9±1ºC e 3±1ºC). Todos os isolados apresentaram perfil de multirresistência aos antimicrobianos testados (penicilina G, cloranfenicol, oxacilina, cefalexina, tetraciclina, amoxicilina + ácido clavulônico, sulfa + trimetropim, gentamicina, doxiciclina, ceftiofur, neomicina e vancomicina) com índice IRMA entre 0,5 a 1,0. Duas cepas foram resistentes a todos os princípios ativos e as demais a pelo menos seis destes fármacos. Os isolados avaliados apresentaram característica de meticilina-resistentes (MRSA) e destes, 33,34% (5/15) foram resistentes à vancomicina (VRSA). Houve capacidade de adesão e formação de biofilmes em 3 das 5 tem-peraturas avaliadas, incluindo as temperaturas de refrigeração. Em relação aos fatores de virulência, 86,7% dos isolados formaram cápsula, 60% presença de protease, 26,7% expressaram o fator α-hemolisina e 13,3% β-hemolisina. O fato de todos isolados apresentarem característica MRSA representa um risco potencial aos expostos a esse agente. Já a for-mação de biofilmes em teteiras, mesmo após detergência e sanitização, destacam a urgência de alternativas de dispersão de biofilmes no ambiente de ordenha.(AU)

Quantificação de Staphylococcus aureus e bactérias mesófilas aeróbias para avaliar higienização de equipamentos de ordenha / Staphylococcus aureus and mesophilic aerobic bacteria quantification in hygienization process of milking equipment

Background: Milk’s composition is an excellent substrate for microorganism’s multiplication. Presence of Staphylococcusaureus and aerobic mesophilic bacteria are one of the most common problems in dairy farms. On dairy industry’s and milkfarms Clean in Place (CIP) system higyenization are commonly used, then the cleaning occurs as a closed process, forbetter results sanitizans are applied, in order to obtain a safety food. This project aim to evaluate Staphylococcus aureusand aerobic mesophilic bacteria reduction after two milking higyenization process.Materials, Methods & Results: This research was done on a Rio Grande do Sul North Milk farm, with mechanized milkingand Clean in Place system for cleaning. For liners and CIP tubes higyenization commercial products as Sodium Hipoclorite3% and phosphoric acid 11.3% are used for detergency, and peracetic acid 5% for sanitization. Milk bunk tank are higyenized with sodium hypoclorite 3.8% alcalin detergent. After higyenization steps liners, CIP’s water process, bulk milk tankand milk set were collected. At process 1, liners and CIP water were collected after milking, detergency and sanitizationthat occurred immediately at the detergency’s finish, while process 2 the sanitization was realized 8 h after detergency,before following milking. Cooling milk bulk tank was collected before and after detergency, and milk set after milkingsConvencional microbiology were used to count and results in log10 UFC.cm-2...

Quantificação de Staphylococcus aureus e bactérias mesófilas aeróbias para avaliar higienização de equipamentos de ordenha / Staphylococcus aureus and mesophilic aerobic bacteria quantification in hygienization process of milking equipment

Background: Milks composition is an excellent substrate for microorganisms multiplication. Presence of Staphylococcusaureus and aerobic mesophilic bacteria are one of the most common problems in dairy farms. On dairy industrys and milkfarms Clean in Place (CIP) system higyenization are commonly used, then the cleaning occurs as a closed process, forbetter results sanitizans are applied, in order to obtain a safety food. This project aim to evaluate Staphylococcus aureusand aerobic mesophilic bacteria reduction after two milking higyenization process.Materials, Methods & Results: This research was done on a Rio Grande do Sul North Milk farm, with mechanized milkingand Clean in Place system for cleaning. For liners and CIP tubes higyenization commercial products as Sodium Hipoclorite3% and phosphoric acid 11.3% are used for detergency, and peracetic acid 5% for sanitization. Milk bunk tank are higyenized with sodium hypoclorite 3.8% alcalin detergent. After higyenization steps liners, CIPs water process, bulk milk tankand milk set were collected. At process 1, liners and CIP water were collected after milking, detergency and sanitizationthat occurred immediately at the detergencys finish, while process 2 the sanitization was realized 8 h after detergency,before following milking. Cooling milk bulk tank was collected before and after detergency, and milk set after milkingsConvencional microbiology were used to count and results in log10 UFC.cm-2...(AU)

Isolamento de Salmonella na tecnologia de abate de suínos como subsídio para o sistema appcc / Salmonella isolation in a pig slaughtering technology as allowance for the system haccp / Aislamiento de Salmonella en la tecnología de matanza de porcinos como subsidio para el sistema appcc

A Salmonella pode estar presente em carcaças suínas ao final da tecnologia de abate, sendo que não existem procedimentos de inspeção especificamente direcionados para o controle desta bactéria, consideradas um risco potencial para a saúde pública. O objetivo do trabalho foi verificar a presença de Salmonella em carcaças suínas e caracterizar os pontos críticos de controle (PCCs) da tecnologia de abate como subsídio ao sistema APPCC. Foram realizados swabs de carcaças após a escaldagem/depilação, antes da evisceração, após evisceração e serragem da carcaça e após 24 horas de refrigeração, gerando 120 amostras (30 carcaças de cinco lotes). Isolou-se Salmonella em 53,3% dos PCs analisados, sendo 40% antes da eviscerarão e 30% após a escaldagem/depilação e evisceração/serragem. Nas carcaças resfriadas por 24 horas não foi isolada Salmonella. Os sorovares identificados foram Typhimurium (96,7 %) e Panama (3,22%). O isolamento de Salmonella reforça a necessidade de programas de monitoria da bactéria, desde as granjas até os abatedouros, enquanto o não isolamento nas carcaças resfriadas indica a importância da lavagem final e adequação da cadeia do frio, o que minimiza a contaminação pela intensificação das medidas de higiene e controle de pontos críticos para subsidiar o sistema APPCC.(AU)

Salmonella can be present in swine carcasses at the end of slaughtering and there is no specifically guided inspection procedure for the control of this bacterium, considered a potential risk for public health. The objective of this paper is to verify the presence of Salmonella in carcasses and to characterize the critical points of control (CPCs) of the slaughtering technology as a subsidy to the HACCP system. The carcasses were swabbed at different points during the slaughtering process, ant after 24 hours of refrigeration, generating 120 samples (30 carcasses from five different batches). Salmonella was isolated in 53.3% of the CPs analyzed, being 40% before evisceration and 30% after scalding/depilation and evisceration/ sawing. No Salmonella was isolated in the carcasses refrigerated for 24 hours. Typhimurium (96.7%) and Panama (3.22%) were the serovars identified. Salmonella isolation indicates the need of programs to monitor the bacterium from the farms to the slaughterhouse, while the non-isolation in the refrigerated carcasses shows the relevance of the cold chain, which minimizes the contamination by the intensification of hygiene measures and the control of critical points to subsidize the HACCP system.(AU)

La Salmonella puede estar presente en carcasas porcinas al final de la matanza, siendo que no existen procedimientos de inspección específicamente direccionados para el control de esta bacteria, consideradas un riesgo potencial a la salud pública. El objetivo del trabajo ha sido verificar la presencia de Salmonella en carcasas porcinas y caracterizar los puntos críticos de control (PCCs) en la tecnología de matanza como subsidio al sistema APPCC. Se han realizado swabs de carcasas tras escaldadura/depilación, antes de evisceración, después de la evisceración y serrín de la carcasa y después de 24 horas de refrigeración, generando 120 muestras (30 carcasas de cinco lotes) Se ha aislado Salmonella en 53,3% de los PCs analizados, siendo 40% antes de evisceración y 30% después de la escaldadura/depilación y evisceración/serrín. En las carcasas enfriadas por 24 horas no se ha aislado Salmonella. Los serovares identificados fueron Typhimurium (96,7%) y Panama (3,22%). El aislamiento de Salmonella refuerza la necesidad de programas de monitoria de la bacteria, desde las granjas hasta los mataderos, el no aislamiento en las carcasas enfriadas indica la importancia del lavado final y adecuación de la cadena del frío, lo que minimiza la contaminación por la intensificación de las medidas de higiene y control de puntos críticos para subsidiar el sistema APPCC(AU)

Contaminação do queijo colonial de produção artesanal comercializado em mercados varejistas do Rio Grande do Sul / Contamination of cheese colonial of artisan production commercialized in the Rio Grande do Sul

O queijo de produção artesanal, denominado no Sul do Brasil como colonial, é um produto de grande aceitação, consumo e produção em quase todo o país. Rotineiramente, o leite utilizado para sua produção não recebe tratamento térmico (pasteurização), o produto final apresenta alto teor de umidade e não ocorre o processo de maturação, fatores estes que favorecem sua contaminação, oferecendo risco ao consumidor. Com objetivo de verificar a qualidade higiênico-sanitária do queijo colonial produzido de forma artesanal, 30 amostras foram avaliadas e constatou-se que 100% destas estavam impróprias para o consumo humano por apresentarem contagens de Staphylococcus coagulase positiva e coliformes termotolerantes/45ºC superiores aos padrões microbiológicos estabelecidos pela legislação vigente. A presença de microrganismos indicadores de contaminação fecal e de qualidade higiênico-sanitária revelaram condições insatisfatórias do produto. Os resultados obtidos demonstraram que o queijo colonial, fabricado de maneira artesanal, sem inspeção sanitária e controle higiênico-sanitário, comercializado em feiras livres e mercados da região noroeste do Rio Grande do Sul, apresentou alto índice de contaminação, representando risco para a veiculação das doenças transmitidas por alimentos (DTA).(AU)

The artisanal cheese production, known in the South of Brazil as colonial has good acceptance, consumption and production in almost all country. Usually, milk used on production don't receive pasteurization, the final product has high humidity level and do not passed by ripening periods, features that further its contamination and, offer risks for consumers. With the aim of verify hygienic and sanitary quality of colonial homemade cheese, 30 samples were surveyed and 100% were established as not proper for human consuption because of their levels of Staphylococcus coagulase positive and thermotolerant coliforms higher than the present law. Not satisfactory product condition was uncovered because of microorganisms presence wich indicates fecal contamination and sanitary and hygienic quality. The results showed that the colonial cheese, artisanal homemade, without overhaul and hygienic sanitary control sold in Rio Grande do Sul Northwest Region markets and fairs has high contamination level, that means a risk of Foodborne Diseases.(AU)