O que análises avançadas do sêmen podem contribuir de fato para a os resultados da IA em suínos? / What advanced semen analyzes can contribute to AI results in pigs?

O controle da qualidade seminal produzido por centrais e unidades de disseminação genética permite a maximização da produção de doses inseminantes por ejaculado, bem como organiza o acompanhamento da produtividade de cada macho. Este acompanhamento é crítico tanto quando o reprodutor jovem é introduzido na rotina de coleta de sêmen quanto na determinação do momento do descarte e reposição. Essencialmente, a avaliação do sêmen em suínos é a mesma há décadas, porém novas metodologias de análise individual da célula como a citometria de fluxo e de constituintes de tecidos e fluídos como a proteômica e metabolômica já estão trazendo avanços na andrologia animal. Na presente revisão, são abordados os aspectos técnicos, vantagens e limitações destas três análises avançadas aplicadas ao sêmen suíno, discutindo a sua implementação e impactos no manejo reprodutivo da espécie.(AU)

The quality control of the semen doses produced by artificial insemination centers and allows the maximization of the production of inseminating doses per ejaculate, as well as organizes the monitoring of the productivity of each male. This follow-up is critical when the young male is initiated in routine semen collection and in determining the moment of male replacement. Essentially, semen evaluation in pigs has been the same for decades, but new methodologies for individual cell analysis such as flow cytometry and tissue and fluid constituents such as proteomics and metabolomics are already bringing advances in animal andrology. In this review, the technical aspects, advantages, and limitations of these three advanced analyzes applied to swine semen are addressed, discussing their implementation and impacts on the reproductive management of the species.(AU)

The sperm mitochondria: clues and challenges

Sperm cells rely on different substrates to fulfil thei energy demand for different functions and diverse moments of their life. Species specific mechanism involve both energy substrate transport and their utilization: hexose transporters, a protein family of facilitative passive transporters of glucose and other hexose, have been identified in spermatozoa of different species and, within the species, their localization has been identified and, in some cases, linked to specific glycilitic enzyme presence. The catabolism of hexose sources for energy purposes has been studied in various species, and recent advances has been made in the knowledge of metabolic strategies of sperm cells. In particular, the importance of aerobic metabolism has been defined and described in horse, boar and even mouse spermatozoa; bull sperm cells demonstrate to have a good adaptability and capacity to switch between glycolysis and oxidative phosphorylation; finally, dog sperm cells have been demonstrated to have a great plasticity in energy metabolism management, being also able to activate the anabolic pathway of glycogen syntesis. In conclusion, the study of energy management and mitochondrial function in spermatozoa of different specie furnishes important base knowledge to define new media for preservation as well as newbases for reproductive biotechnologies.(AU)

Superficial necrolytic dermatitis in a dog

Background: Superficial necrolytic dermatitis (SND), hepatocutaneous syndrome (HCS), metabolic epidermal necrosis (MEN), and necrolytic migratory erythema (NME) are useful terms to describe a disease that likely has a multifactorial etiopathogenesis. SND is a rare and fatal disease characterized by skin lesions and liver disease. Common skin lesions include hyperkeratosis, fissures, erosion, ulceration, crusting, exudation from the paws, face, perianal regions, and pressure points. This case report aimed to report the case of a bitch that developed the rare Superficial Necrolytic Dermatitis disease, emphasizing the clinical signs of the disease, and the importance of complementary exams such as abdominal ultrasound and skin biopsy for the definitive diagnosis. Case: A 9-year-old, mixed-breed, neutered female was referred for clinical examination with 5 months history of hyperkeratosis and ulceration of the paw pads, presenting pain, lameness and weight loss. Abdominal ultrasound revealed a liver with heterogeneous echotexture, mixed echogenicity, irregular and poorly delimited margins with hypoechoic nodules throughout like honeycombs. The gallbladder was visualized with a moderately thick layer. Histological analysis confirmed the diagnosis of SND. Skin biopsies showed an increase in thickness of the epidermis due to irregular hyperplasia and proliferation of keratinocytes in the basal layer of the epidermis, pallor of the spinous layer of the epidermis and important parakeratosis. Due to the progression of the disease, significant worsening of the patient's clinical condition and pain, associated with the impossibility of cure, the animal was submitted to euthanasia. A necropsy was performed to allow assessment of the liver and pancreas. The biopsies showed a severe proliferative chronic hepatitis, steatosis and cholestasis associated with pancreatitis and necrotic multifocal proliferative fibrinopurulent areas in the pancreas. Discussion: Clinical signs such as lethargy, inappetence, weight loss, as well as the dermatological signs presented by this bitch are nonspecific clinical signs and require a deeper clinical, pathological and histopathological diagnostic investigation to reach the diagnosis of this disease. The definitive diagnosis is made on the basis of a characteristic honeycomb pattern in the liver or associated with a neoplastic finding in the pancreas on ultrasound examination and confirmed by histopathological evaluation of skin biopsies. Palliative treatment with corticosteroid anti-inflammatories, improvement in feed quality, with higher nutritional and protein intake and intravenous amino acid supplementation are suggested by some authors as treatment alternatives. However, not all owners can afford a costly lifetime treatment. With the progressive worsening of the condition, many owners opt for euthanasia as a way to shorten the suffering of the animal. This decision is not an easy one to make. Despite the poor prognosis of the disease, treatment options should be tried by veterinarians and owners prior to the option of euthanasia. However, new affordable nutritional and pharmacological strategies to treat or control the disease are needed in order to improve quality of life of SND patients.

Estresse oxidativo na preservação do sêmen suíno: como lidar com ele? / Oxidative stress in pig semen preservation: How to deal with it?

O estresse oxidativo é caracterizado pelo desequilíbrio entre a produção de espécies reativas de oxigênio e a atuação de sistemas antioxidantes da própria célula e tecido. O espermatozoide de mamíferos apresenta metabolismo oxidativo e por isso é um potencial produtor destas espécies reativas que podem causar danos a estrutura lipídicas, proteínas e mesmo ao DNA espermático. Na espécie suína, o plasma seminal confere importante proteção antioxidante ao espermatozoide ejaculado no útero da fêmea, onde os desafios à sua sobrevivência são inúmeros. Contudo, esta defesa natural do plasma seminal não é suficiente para garantir o máximo de resultado de fertilidade com o sêmen submetido a processos de refrigeração ou congelação e utilizado na inseminação artificial. Na presente revisão, serão abordados os temas estresse oxidativo e metabolismo espermático, bem como apresentados alguns dados sobre a aplicação de antioxidantes na andrologia suína.

Oxidative stress is characterized by an imbalance between the production of reactive oxygen species and the action of antioxidant systems present in the cell and tissue. Mammalian sperm have oxidative metabolism and are therefore a potential producers of these reactive species which can lead to damage to lipids, proteins and even sperm DNA. In the swine species, seminal plasma provides an important antioxidant protection to spermatozoa that are ejaculated and deposited in the uterus, where the challenges to their survival are numerous. However, this natural seminal plasma defense is not sufficient to guarantee maximum fertility when semen is processed for artificial insemination, and later used after preservation by refrigeration or freezing. In this review, the topics related to oxidative stress and sperm metabolism will be addressed, and results about the application of antioxidants in swine andrology will be presented as well as.

Citometria de Fluxo em andrologia: da pesquisa básica para a rotina clínica / Flow citometry in andrology: from basic research to clinical routine

Os primeiros estudos de espermatozoides com citometria de fluxo com espermatozoides iniciaram no final da década de 1970. Com os avanços tecnológicos, hoje contamos com equipamentos com alta sensibilidade e eficiência que, em conjunto com amplo catálogo de sondas fluorescentes, podemos mensurar com alta precisão características celulares. Como exemplo, destacam-se dano em membrana plasmática, atividade mitocondrial, produção de espécies reativas de oxigênio, dano ao DNA espermático e muito mais. Na presente revisão, as potencialidades e limitação para a implementação da citometria de fluxo na análise seminal de espécies domésticas são exploradas e comentadas.

The first flow cytometry studies with spermatozoa were published in the late 1970s. With the technological advances in the following years, today we have equipments with high sensitivity and efficiency that, together with a large number of commercially available fluorescent probes, allow us to measure different cell characteristics with high accuracy. Some of the most evaluated characteristics are plasma membrane damage, mitochondrial activity, production of reactive oxygen species, sperm DNA damage, and much more. In this review, the potentials and limitations for the implementation of flow cytometry in the seminal analysis of domestic species are explored and commented.

Avaliação seminal em suínos: aplicabilidades das analises proteômicas / Semen evaluation in the boar: use of proteomic analyses

A adequada analise do sêmen na espécie suína é fator chave para a obtenção da máxima eficiência reprodutiva. Com o avanço tecnológico na avaliação andrológica, a implementação sistemas computadorizados de analise seminal (motilidade espermática, concentração, morfologia e vitalidade celular) já é realidade em muitas centrais de produção de doses inseminantes. Tal evolução permitiu uma melhor categorização dos machos com relação a qualidade seminal e a resistência das doses a preservação por refrigeração. Com isto, abriu-se uma janela de oportunidade para investigar de forma mais apurada os componentes seminais que podem contribuir para a diferenças reprodutivas entre machos. É neste cenário que os estudos em proteômica do sêmen suíno vêm contribuindo para um melhor entendimento dos papeis das proteínas do plasma seminal e dos espermatozoides na fertilidade de cachaços. Nesta revisão, serão discutidos os diferentes métodos de aplicação da proteômica na andrologia, bem como as principais proteínas já associadas às características seminais e à fertilidade.(AU)

The proper semen analysis in the boar is a key factor for maximum reproductive efficiency. With the technological advances in andrology, the implementation of computer assisted sperm analyzers (sperm motility, concentration, morphology and cell viability) is a reality in most of the artificial insemination centers. Such evolution allowed a better classification of the sires regarding their seminal quality and resistance to cooling. As a consequence, a window of opportunity opened for a detailed assessment of the seminal components which could influence the reproductive differences among sires. In this scenario, the proteomic studies of the boar semen have been contributing to a better understanding of the roles of seminal plasma and sperm proteins in boar fertility. In this review, the different approaches of proteomics in andrology will be discussed, as well main proteins already associated with seminal characteristics and fertility.(AU)

Avaliação seminal em suínos: aplicabilidades das analises proteômicas / Semen evaluation in the boar: use of proteomic analyses

A adequada analise do sêmen na espécie suína é fator chave para a obtenção da máxima eficiência reprodutiva. Com o avanço tecnológico na avaliação andrológica, a implementação sistemas computadorizados de analise seminal (motilidade espermática, concentração, morfologia e vitalidade celular) já é realidade em muitas centrais de produção de doses inseminantes. Tal evolução permitiu uma melhor categorização dos machos com relação a qualidade seminal e a resistência das doses a preservação por refrigeração. Com isto, abriu-se uma janela de oportunidade para investigar de forma mais apurada os componentes seminais que podem contribuir para a diferenças reprodutivas entre machos. É neste cenário que os estudos em proteômica do sêmen suíno vêm contribuindo para um melhor entendimento dos papeis das proteínas do plasma seminal e dos espermatozoides na fertilidade de cachaços. Nesta revisão, serão discutidos os diferentes métodos de aplicação da proteômica na andrologia, bem como as principais proteínas já associadas às características seminais e à fertilidade.

The proper semen analysis in the boar is a key factor for maximum reproductive efficiency. With the technological advances in andrology, the implementation of computer assisted sperm analyzers (sperm motility, concentration, morphology and cell viability) is a reality in most of the artificial insemination centers. Such evolution allowed a better classification of the sires regarding their seminal quality and resistance to cooling. As a consequence, a window of opportunity opened for a detailed assessment of the seminal components which could influence the reproductive differences among sires. In this scenario, the proteomic studies of the boar semen have been contributing to a better understanding of the roles of seminal plasma and sperm proteins in boar fertility. In this review, the different approaches of proteomics in andrology will be discussed, as well main proteins already associated with seminal characteristics and fertility.

The epididymis and its role on sperm quality and male fertility

The epididymis is a complex organ where spermatozoa acquire motility and ability to fertilize theegg. Epididymal maturation lasts 1 or 2 weeks and exposes the immature spermatozoa to a sequentially modified milieu, promoting intense interactions with secretions by the epididymal epithelium. Sperm surface modifications in response to interactions with epididymal secretions are key steps to achieve fertility ability. However, the precise molecular mechanisms that convert an immotile and infertile gamete into a highly motile cellcapable of fusion with an oocyte are still unknown. Recent data on proteomics and transcriptomics of epididymal fluid and epididymosomes brought new ideas of the physiological roles of proteins and miRNAs in epididymal maturation in spermatozoa. This review focuses on the recent discoveries on epididymal fluid composition and its role on sperm maturation and preservation, linking to their survival and fertility potential.

The epididymis and its role on sperm quality and male fertility

The epididymis is a complex organ where spermatozoa acquire motility and ability to fertilize theegg. Epididymal maturation lasts 1 or 2 weeks and exposes the immature spermatozoa to a sequentially modified milieu, promoting intense interactions with secretions by the epididymal epithelium. Sperm surface modifications in response to interactions with epididymal secretions are key steps to achieve fertility ability. However, the precise molecular mechanisms that convert an immotile and infertile gamete into a highly motile cellcapable of fusion with an oocyte are still unknown. Recent data on proteomics and transcriptomics of epididymal fluid and epididymosomes brought new ideas of the physiological roles of proteins and miRNAs in epididymal maturation in spermatozoa. This review focuses on the recent discoveries on epididymal fluid composition and its role on sperm maturation and preservation, linking to their survival and fertility potential.(AU)

Effect of intramuscular injection of butafosfan and cobalamin on the quality of fresh and cooled stallion semen / Efeito da administração intramuscular de butafosfan e cobalamina na qualidade do sêmen fresco e resfriado de garanhões

The use of butafosfan in combination with cobalamin modulates many cellular metabolic functions in several species. Its use enhances productive and reproductive performance and reduces stress responses in animals. Despite all these attributes, so far there have been no controlled studies to evaluate the effects of butafosfan and cobalamin on the quality of stallion semen. The purpose of this study was to evaluate the action of butafosfan in combination with cobalamin on the quality of fresh and cooled stallion semen. Four healthy stallions were kept in the same place and under the same management conditions during the entire experiment. Stallions were randomly assigned to two treatment groups in a 2x2 crossover design. Group A stallions were treated with an intramuscular injection of butafosfan twice a week for 80 days, while group B did not receive any treatment. After that, both groups were not treated for another 80 days allowing a washout period for the treated group. Then, the groups were reversed, and group B was treated with butafosfan and group A acted as the control for another 80 days. Semen was collected twice a week, diluted in skim milk and evaluated for total sperm count, total and progressive sperm motility, membrane integrity (CFDA/PI staining) and membrane functionality (HOS test) at 0 and 24 hours after preservation at 5ºC. Data were analyzed by comparing the...(AU)

A utilização de Butafosfan em combinação com cobalamina modula uma série de funções metabólicas celulares em várias espécies. Seu uso melhora o desempenho produtivo e reprodutivo e reduz as respostas ao estresse em animais. Apesar de todos esses atributos, até agora não houve estudos controlados para avaliar os efeitos da substância Butafosfan e cobalamina sobre a qualidade do sêmen de garanhões. O objetivo deste estudo foi avaliar a ação do Butafosfan em combinação com cobalamina sobre a qualidade do sêmen fresco e resfriado de garanhões. Quatro garanhões saudáveis foram mantidos no mesmo lugar e sob as mesmas condições de manejo durante todo o experimento. Garanhões foram divididos aleatoriamente em dois grupos de tratamento em um desenho cruzado 2x2. Garanhões do grupo A foram tratados com uma injeção intramuscular de Butafosfan duas vezes por semana durante 80 dias, enquanto o grupo B não recebeu qualquer tratamento. Depois disso, ambos os grupos não foram tratados durante mais 80 dias, permitindo um período de washout para o grupo tratado. Em seguida, os grupos foram invertidos, o grupo B foi tratado com Butafosfan enquanto o grupo A agiu como controle por mais 80 dias. O sêmen foi coletado duas vezes por semana, diluído em leite desnatado e avaliado para a contagem total de espermatozoides, motilidade progressiva e total, integridade da membrana (coloração CFDA/PI) e...(AU)

Apoptosis in spermatozoa: a new approach in sperm viability evaluation / Apoptose em espermatozóides: uma nova abordagem na avaliação da viabilidade espermática

Animal reproduction biotechnics are developing day after day. However, almost every applied and studied technology are basicly cellular stressful procedures. Cryopreservation is the most used technic for gamette conservation, although in some species this methodology is not efficiently applied. Apoptosis has been recognized as the one of the major causes of poor post-thaw sperm viability. This review presents new concepts about spermatogenesis and research findings on sperm apoptosis.

As biotécnicas aplicadas à reprodução animal desenvolvem-se a cada dia. Entretanto, as tecnologias empregadas e estudadas atualmente envolvem processos de grande estresse celular. A criopreservação é a técnica mais utilizada na conservação de gametas, embora esta metodologia ainda não esteja totalmente dominada em algumas espécies. A apoptose vem sendo vista como uma das causas da baixa viabilidade espermática pós-descongelação. A presente revisão aborda novos conceitos da espermatogênese e resultados de pesquisas deste tipo de morte celular em células espermáticas.

Apoptosis in spermatozoa: a new approach in sperm viability evaluation / Apoptose em espermatozóides: uma nova abordagem na avaliação da viabilidade espermática

Animal reproduction biotechnics are developing day after day. However, almost every applied and studied technology are basicly cellular stressful procedures. Cryopreservation is the most used technic for gamette conservation, although in some species this methodology is not efficiently applied. Apoptosis has been recognized as the one of the major causes of poor post-thaw sperm viability. This review presents new concepts about spermatogenesis and research findings on sperm apoptosis.

As biotécnicas aplicadas à reprodução animal desenvolvem-se a cada dia. Entretanto, as tecnologias empregadas e estudadas atualmente envolvem processos de grande estresse celular. A criopreservação é a técnica mais utilizada na conservação de gametas, embora esta metodologia ainda não esteja totalmente dominada em algumas espécies. A apoptose vem sendo vista como uma das causas da baixa viabilidade espermática pós-descongelação. A presente revisão aborda novos conceitos da espermatogênese e resultados de pesquisas deste tipo de morte celular em células espermáticas.

Effect of intramuscular injection of butafosfan and cobalamin on the quality of fresh and cooled stallion semen / Efeito da administração intramuscular de butafosfan e cobalamina na qualidade do sêmen fresco e resfriado de garanhões

The use of butafosfan in combination with cobalamin modulates many cellular metabolic functions in several species. Its use enhances productive and reproductive performance and reduces stress responses in animals. Despite all these attributes, so far there have been no controlled studies to evaluate the effects of butafosfan and cobalamin on the quality of stallion semen. The purpose of this study was to evaluate the action of butafosfan in combination with cobalamin on the quality of fresh and cooled stallion semen. Four healthy stallions were kept in the same place and under the same management conditions during the entire experiment. Stallions were randomly assigned to two treatment groups in a 2x2 crossover design. Group A stallions were treated with an intramuscular injection of butafosfan twice a week for 80 days, while group B did not receive any treatment. After that, both groups were not treated for another 80 days allowing a washout period for the treated group. Then, the groups were reversed, and group B was treated with butafosfan and group A acted as the control for another 80 days. Semen was collected twice a week, diluted in skim milk and evaluated for total sperm count, total and progressive sperm motility, membrane integrity (CFDA/PI staining) and membrane functionality (HOS test) at 0 and 24 hours after preservation at 5ºC. Data were analyzed by comparing the...

A utilização de Butafosfan em combinação com cobalamina modula uma série de funções metabólicas celulares em várias espécies. Seu uso melhora o desempenho produtivo e reprodutivo e reduz as respostas ao estresse em animais. Apesar de todos esses atributos, até agora não houve estudos controlados para avaliar os efeitos da substância Butafosfan e cobalamina sobre a qualidade do sêmen de garanhões. O objetivo deste estudo foi avaliar a ação do Butafosfan em combinação com cobalamina sobre a qualidade do sêmen fresco e resfriado de garanhões. Quatro garanhões saudáveis foram mantidos no mesmo lugar e sob as mesmas condições de manejo durante todo o experimento. Garanhões foram divididos aleatoriamente em dois grupos de tratamento em um desenho cruzado 2x2. Garanhões do grupo A foram tratados com uma injeção intramuscular de Butafosfan duas vezes por semana durante 80 dias, enquanto o grupo B não recebeu qualquer tratamento. Depois disso, ambos os grupos não foram tratados durante mais 80 dias, permitindo um período de washout para o grupo tratado. Em seguida, os grupos foram invertidos, o grupo B foi tratado com Butafosfan enquanto o grupo A agiu como controle por mais 80 dias. O sêmen foi coletado duas vezes por semana, diluído em leite desnatado e avaliado para a contagem total de espermatozoides, motilidade progressiva e total, integridade da membrana (coloração CFDA/PI) e...