Enterococcus Spp. Survival Through the Use of Standard Protocol for Clostridium Sp. Isolation

The genera Clostridium and Enterococcus are very different from each other, both morphologically and physiologically. Due to the high resistance by the sporulation capacity of Clostridium species, the thermal shock is a characteristic tool used for the isolation and identification of these microorganisms, this way, it would eliminate any other bacteria that did not present spores. The objective of this work is to show that Enterococcus sp. resist the temperature treatment and grow in culture media used for the isolation of Clostridium sp. For this, the present study initially attempted to identify reducing sulfite clostridia in poultry products, through the use of specific culture media and heat shock treatment. However, the PCR did not detect the presence of Clostridium sp. Then, sequencing of the 16S rDNA region was performed, which showed that the reducing sulfite colonies that were being isolated were, actually, Enterococcus spp. With this, some tests were carried out using different temperature and time combinations in the thermal shock, as well as the use of five different selective and differential culture media, in an attempt to eliminate any contaminants, but all without success, because these bacteria resisted to all modification. Therefore, the standard protocol for the isolation of bacteria of the genus Clostridium does not eliminate Enterococcus, which can lead to failures in the quantification and qualification of sulfite reducing microorganisms, a fact that can significantly affect food safety and animal health.(AU)

Enterococcus Spp. Survival Through the Use of Standard Protocol for Clostridium Sp. Isolation

The genera Clostridium and Enterococcus are very different from each other, both morphologically and physiologically. Due to the high resistance by the sporulation capacity of Clostridium species, the thermal shock is a characteristic tool used for the isolation and identification of these microorganisms, this way, it would eliminate any other bacteria that did not present spores. The objective of this work is to show that Enterococcus sp. resist the temperature treatment and grow in culture media used for the isolation of Clostridium sp. For this, the present study initially attempted to identify reducing sulfite clostridia in poultry products, through the use of specific culture media and heat shock treatment. However, the PCR did not detect the presence of Clostridium sp. Then, sequencing of the 16S rDNA region was performed, which showed that the reducing sulfite colonies that were being isolated were, actually, Enterococcus spp. With this, some tests were carried out using different temperature and time combinations in the thermal shock, as well as the use of five different selective and differential culture media, in an attempt to eliminate any contaminants, but all without success, because these bacteria resisted to all modification. Therefore, the standard protocol for the isolation of bacteria of the genus Clostridium does not eliminate Enterococcus, which can lead to failures in the quantification and qualification of sulfite reducing microorganisms, a fact that can significantly affect food safety and animal health.

Antisepsys and profilatic antimicrobial therapy in prevention of surgical site infection of horses / [Antissepsia e terapia antimicrobiana profilática no controle infeccioso do foco cirúrgico em equinos

The efficacy of an antisepsis protocol comprising chlorhexidine gluconate and ethyl alcohol in combination with prophylactic antimicrobial therapy in controlling surgical site infection in horses was studied. To that purpose, seven mixed breed horses received potassium penicillin and gentamicin at least 30 minutes prior to surgery. The surgical site was scrubbed with chlorhexidine gluconate and rinsed with ethyl alcohol. Samples were collected at four time points: (A) - before and (B) - immediately following shaving of the hair coat, (C) - at the end of antisepsis procedures, and (D) - at the end of the surgical procedure. Duration of surgery was recorded. Samples were cultured in three different culture mediums: Mitis Salivarus (Streptococcus sp.), Staphylococcus 110 (Staphylococcus sp.), and Mac Conkey (Enterobacteria). A high level of bacterial growth was observed in all culture mediums at (A) and (B), with no bacterial growth in (C). Staphylococcus sp. growth was observed in (D) in a single patient whose surgical procedure lasted for 120 minutes. Shaving of the hair coat reduced microbial flora on the surface of the skin. Antisepsis in combination with prophylactic antimicrobial therapy was effective in controlling surgical site infection in elective procedures with an average duration of 90 minutes.(AU)

Objetivou-se averiguar a eficácia do protocolo de antissepsia com clorexidina degermante e álcool etílico hidratado 70%, em associação com terapia antimicrobiana profilática, no controle microbiano do foco cirúrgico de equinos submetidos a procedimentos cirúrgicos. Foram utilizados 07 cavalos adultos de raças variadas, onde ambos receberam o mesmo tratamento (terapia antimicrobiana profilática e antissepsia com clorexidina degermante 2% e álcool etílico hidratado 70%), coletando-se amostras em quatro tempos distintos [(A - antes da tricotomia), (B - imediatamente após tricotomia), (C - ao término da antissepsia), (D - ao término do procedimento cirúrgico)]. O tempo de cada procedimento cirúrgico foi contabilizado. Foram utilizados três meios de cultura diferentes, cada um com especificidade para um tipo de crescimento bacteriano. Constatou-se alta incidência de crescimento bacteriano nos três meios utilizados nos tempos de coleta A e B. Para o tempo C, não foi observado crescimento bacteriano. No tempo D averiguou-se crescimento bacteriano do tipo Staphylococcus sp. em um único paciente, cujo tempo cirúrgico foi de 120 minutos de duração. Desta forma, a tricotomia reduziu a carga microbiana na superfície da pele. A antissepsia associada à terapia antimicrobiana profilática mostrou-se eficaz no controle microbiano do foco cirúrgico em procedimentos eletivos, com duração média de 90 minutos.(AU)

Antisepsys and profilatic antimicrobial therapy in prevention of surgical site infection of horses / Antissepsia e terapia antimicrobiana profilática no controle infeccioso do foco cirúrgico em equinos

The efficacy of an antisepsis protocol comprising chlorhexidine gluconate and ethyl alcohol in combination with prophylactic antimicrobial therapy in controlling surgical site infection in horses was studied. To that purpose, seven mixed breed horses received potassium penicillin and gentamicin at least 30 minutes prior to surgery. The surgical site was scrubbed with chlorhexidine gluconate and rinsed with ethyl alcohol. Samples were collected at four time points: (A) - before and (B) - immediately following shaving of the hair coat, (C) - at the end of antisepsis procedures, and (D) - at the end of the surgical procedure. Duration of surgery was recorded. Samples were cultured in three different culture mediums: Mitis Salivarus (Streptococcus sp.), Staphylococcus 110 (Staphylococcus sp.), and Mac Conkey (Enterobacteria). A high level of bacterial growth was observed in all culture mediums at (A) and (B), with no bacterial growth in (C). Staphylococcus sp. growth was observed in (D) in a single patient whose surgical procedure lasted for 120 minutes. Shaving of the hair coat reduced microbial flora on the surface of the skin. Antisepsis in combination with prophylactic antimicrobial therapy was effective in controlling surgical site infection in elective procedures with an average duration of 90 minutes.(AU)

Objetivou-se averiguar a eficácia do protocolo de antissepsia com clorexidina degermante e álcool etílico hidratado 70%, em associação com terapia antimicrobiana profilática, no controle microbiano do foco cirúrgico de equinos submetidos a procedimentos cirúrgicos. Foram utilizados 07 cavalos adultos de raças variadas, onde ambos receberam o mesmo tratamento (terapia antimicrobiana profilática e antissepsia com clorexidina degermante 2% e álcool etílico hidratado 70%), coletando-se amostras em quatro tempos distintos [(A - antes da tricotomia), (B - imediatamente após tricotomia), (C - ao término da antissepsia), (D - ao término do procedimento cirúrgico)]. O tempo de cada procedimento cirúrgico foi contabilizado. Foram utilizados três meios de cultura diferentes, cada um com especificidade para um tipo de crescimento bacteriano. Constatou-se alta incidência de crescimento bacteriano nos três meios utilizados nos tempos de coleta A e B. Para o tempo C, não foi observado crescimento bacteriano. No tempo D averiguou-se crescimento bacteriano do tipo Staphylococcus sp. em um único paciente, cujo tempo cirúrgico foi de 120 minutos de duração. Desta forma, a tricotomia reduziu a carga microbiana na superfície da pele. A antissepsia associada à terapia antimicrobiana profilática mostrou-se eficaz no controle microbiano do foco cirúrgico em procedimentos eletivos, com duração média de 90 minutos.(AU)

Highly Pathogenic and Multidrug Resistant Avian Pathogenic Escherichia Coli in Free-Range Chickens from Brazil

Avian pathogenic Escherichiacoli (APEC) virulence mechanism has been continuously studied and it is believed to be multifactorial and because of this, this work aimed to characterize potentially APEC strains isolated from free-range hens. Isolates were submitted to PCR for the detection of virulence genes, which were of high prevalence. In vivo inoculation of day-old chicks revealed that 49 of these strains were of high and intermediate pathogenicity. In addition, isolates were submitted to antimicrobials susceptibility test with the majority of the strains presenting multiresistance. Phylogenetic analysis showed a greater presence of potentially APEC isolates in-group B2. In addition, high heterogeneity was detected among the isolates byXbaI enzyme. Fifteen serogroups were identified, being the O8 the most frequent. These results strengthen the fact that a combination of diverse factors are associated with the pathogenicity APEC strains, as well as to highlight its importance to public health and that free-range hens can act as a reservoirs of potentially zoonoticbacteria.(AU)

Highly Pathogenic and Multidrug Resistant Avian Pathogenic Escherichia Coli in Free-Range Chickens from Brazil

Avian pathogenic Escherichiacoli (APEC) virulence mechanism has been continuously studied and it is believed to be multifactorial and because of this, this work aimed to characterize potentially APEC strains isolated from free-range hens. Isolates were submitted to PCR for the detection of virulence genes, which were of high prevalence. In vivo inoculation of day-old chicks revealed that 49 of these strains were of high and intermediate pathogenicity. In addition, isolates were submitted to antimicrobials susceptibility test with the majority of the strains presenting multiresistance. Phylogenetic analysis showed a greater presence of potentially APEC isolates in-group B2. In addition, high heterogeneity was detected among the isolates byXbaI enzyme. Fifteen serogroups were identified, being the O8 the most frequent. These results strengthen the fact that a combination of diverse factors are associated with the pathogenicity APEC strains, as well as to highlight its importance to public health and that free-range hens can act as a reservoirs of potentially zoonoticbacteria.

Quantification of enterobacteria and clostridium spp. In poultry slaughterhouses sanitary conveyors belts / Quantificação de enterobactérias e clostridium spp. Em esteiras condutoras de cortes de frango em frigoríficos

The increase in production and consumption of chicken meat has occurred due to modernization in this area. Such increase caused the concern about the transmission of pathogens to humans; however, with proper hygiene this transmission can be controlled. Thus, this study aimed to evaluate the pre-operational and operational hygiene insanitary conveyors belts of chicken cuts in slaughterhouses through Clostridium spp. and Enterobacteria quantification.Statistical data analysis for Clostridium spp. colony count showed a difference between the studied slaughterhouses and the types of cleaning performed on sanitary conveyors belts (p<0,0001). Already statistical analysis for Enterobacteriaceae colony count showed significant differences only between the visited slaughterhouses (p<0,0001),with no difference between the types of conveyors belts cleaning (p=0,4057). The results showed that there was avariation in bacterial count among the slaughterhouses and the hygiene process in sanitary conveyors belts were deficient because they presented counts higher than the values recommended by the international organizations.

O aumento da produção e do consumo per capita de carne de frango ocorreu devido a modernização neste setor. Tal aumento gerou preocupação com a transmissão de patógenos para o ser humano, porém com uma higienização adequada essa transmissão pode ser controlada. Assim, o objetivo deste estudo foi avaliar a higiene pré-operacional e operacional das esteiras condutoras de cortes de frangos através da quantificação de Clostridium spp. e Enterobactérias. As análises estatísticas da contagem de Clostridium spp. mostraram uma diferença entre os frigoríficos visitados e entre os tipos de limpeza realizados nas esteiras (p<0,0001). Já as análises estatísticas para a contagem de Enterobactérias mostraram diferenças significativas somente entre os frigoríficos visitados (p<0,0001), não havendo diferença entre os tipos de limpeza das esteiras (p=0,4057). Os resultados demonstraram que houve uma variação na contagem bacteriana entre os frigoríficos e que a higienização das esteiras foram deficientes pois apresentaram contagens superiores aos valores recomendado pelas organizações internacionais.

Quantification of enterobacteria and clostridium spp. In poultry slaughterhouses sanitary conveyors belts / Quantificação de enterobactérias e clostridium spp. Em esteiras condutoras de cortes de frango em frigoríficos

The increase in production and consumption of chicken meat has occurred due to modernization in this area. Such increase caused the concern about the transmission of pathogens to humans; however, with proper hygiene this transmission can be controlled. Thus, this study aimed to evaluate the pre-operational and operational hygiene insanitary conveyors belts of chicken cuts in slaughterhouses through Clostridium spp. and Enterobacteria quantification.Statistical data analysis for Clostridium spp. colony count showed a difference between the studied slaughterhouses and the types of cleaning performed on sanitary conveyors belts (p<0,0001). Already statistical analysis for Enterobacteriaceae colony count showed significant differences only between the visited slaughterhouses (p<0,0001),with no difference between the types of conveyors belts cleaning (p=0,4057). The results showed that there was avariation in bacterial count among the slaughterhouses and the hygiene process in sanitary conveyors belts were deficient because they presented counts higher than the values recommended by the international organizations.(AU)

O aumento da produção e do consumo per capita de carne de frango ocorreu devido a modernização neste setor. Tal aumento gerou preocupação com a transmissão de patógenos para o ser humano, porém com uma higienização adequada essa transmissão pode ser controlada. Assim, o objetivo deste estudo foi avaliar a higiene pré-operacional e operacional das esteiras condutoras de cortes de frangos através da quantificação de Clostridium spp. e Enterobactérias. As análises estatísticas da contagem de Clostridium spp. mostraram uma diferença entre os frigoríficos visitados e entre os tipos de limpeza realizados nas esteiras (p<0,0001). Já as análises estatísticas para a contagem de Enterobactérias mostraram diferenças significativas somente entre os frigoríficos visitados (p<0,0001), não havendo diferença entre os tipos de limpeza das esteiras (p=0,4057). Os resultados demonstraram que houve uma variação na contagem bacteriana entre os frigoríficos e que a higienização das esteiras foram deficientes pois apresentaram contagens superiores aos valores recomendado pelas organizações internacionais.(AU)

Efeito da utilização de próbióticos em dietas para bovinos nelore terminados em confinamento / Effect of probiotics inclusion in diets for nellore cattle finished in feedlot

O objetivo do presente trabalho foi avaliar se o probiótico DBR® pode substituir a monensina sódica na alimentação de bovinos em confinamento. Foram utilizados 18 bovinos da raça Nelore, com média de idade de 18 meses e 362±30kg de peso vivo, no início do experimento. Os animais foram distribuídos em baias individuais cobertas, com acesso a sombra e água, em um delineamento inteiramente casualizado. A alimentação foi fornecida ad libitum, duas vezes ao dia, às 8h e 16h, com uma dieta a base de bagaço de cana-de-açúcar como fonte de volumoso (18%) e concentrado (82%), que apresentava 72,4% de NDT e 14,2% de PB. Além da dieta citada, os animais receberam diariamente 100g de uma mistura contendo milho moído, pela qual foram fornecidas quantidades específicas de monensina sódica e DBR® Probiótico conforme os seguintes tratamentos: DBR (milho moído + 2,0 g DBR® Probiótico); MON (milho moído + 275 mg de monensina sódica) e DBR + MON (milho moído + 1,0g de DBR® Probiótico + 138mg de monensina sódica). Não foram verificados efeitos dos diferentes aditivos sobre o consumo de matéria seca, ganho de peso, eficiência, conversão alimentar e características da carcaça dos bovinos submetidos aos diferentes tratamentos dietéticos (P>0,05). Conclui-se que o DBR® probiótico pode substituir total ou parcialmente a monensina sódica em dietas com alta proporção de concentrados para bovinos Nelore em confinamento.

The aim of this study was to evaluate if the DBR ® probiotic can replace monensin in cattle feed in confinement. Eighteen animals of Nellore breed were used, with an average age of 18 months and 362 ± 30 kg live weight at the beginning of the experiment. The animals were distributed into individual pen, with access to shade and water, in a completely randomized design. Feed was provided ad libitum, twice daily at 8am and 16h, with a diet of crushed cane sugar as a source of roughage (18%) and concentrate (82%), which had 72.4 % TDN and 14.2% CP). Besides the aforementioned diet, the animals received daily 100 g of a mixture containing corn, which were provided by specific amounts of sodium monensin and probiotic DBR® according to the following treatments: DBR (corn meal + 2.0 g of probiotic DBR® ); MON (corn meal + 275 mg monensin sodium) and MON + DBR (corn meal + 1.0 g probiotic DBR® + 138mg of sodium monensin). The aim of this work was evaluate whether Probiotic DRB could replace the monesin. Data were subjected to analysis of variance using the SAS statistical software. There were no effects of different additives on the dry matter intake, weight gain, efficiency, feed conversion and carcass characteristics of cattle subjected to different dietary treatments (P> 0.05). We conclude that the probiotic DBR® can replace all or part of sodium monensin in diets with high levels of concentrates in feedlot for Nellore cattle.

Efeito da utilização de próbióticos em dietas para bovinos nelore terminados em confinamento / Effect of probiotics inclusion in diets for nellore cattle finished in feedlot

O objetivo do presente trabalho foi avaliar se o probiótico DBR® pode substituir a monensina sódica na alimentação de bovinos em confinamento. Foram utilizados 18 bovinos da raça Nelore, com média de idade de 18 meses e 362±30kg de peso vivo, no início do experimento. Os animais foram distribuídos em baias individuais cobertas, com acesso a sombra e água, em um delineamento inteiramente casualizado. A alimentação foi fornecida ad libitum, duas vezes ao dia, às 8h e 16h, com uma dieta a base de bagaço de cana-de-açúcar como fonte de volumoso (18%) e concentrado (82%), que apresentava 72,4% de NDT e 14,2% de PB. Além da dieta citada, os animais receberam diariamente 100g de uma mistura contendo milho moído, pela qual foram fornecidas quantidades específicas de monensina sódica e DBR® Probiótico conforme os seguintes tratamentos: DBR (milho moído + 2,0 g DBR® Probiótico); MON (milho moído + 275 mg de monensina sódica) e DBR + MON (milho moído + 1,0g de DBR® Probiótico + 138mg de monensina sódica). Não foram verificados efeitos dos diferentes aditivos sobre o consumo de matéria seca, ganho de peso, eficiência, conversão alimentar e características da carcaça dos bovinos submetidos aos diferentes tratamentos dietéticos (P>0,05). Conclui-se que o DBR® probiótico pode substituir total ou parcialmente a monensina sódica em dietas com alta proporção de concentrados para bovinos Nelore em confinamento.(AU)

The aim of this study was to evaluate if the DBR ® probiotic can replace monensin in cattle feed in confinement. Eighteen animals of Nellore breed were used, with an average age of 18 months and 362 ± 30 kg live weight at the beginning of the experiment. The animals were distributed into individual pen, with access to shade and water, in a completely randomized design. Feed was provided ad libitum, twice daily at 8am and 16h, with a diet of crushed cane sugar as a source of roughage (18%) and concentrate (82%), which had 72.4 % TDN and 14.2% CP). Besides the aforementioned diet, the animals received daily 100 g of a mixture containing corn, which were provided by specific amounts of sodium monensin and probiotic DBR® according to the following treatments: DBR (corn meal + 2.0 g of probiotic DBR® ); MON (corn meal + 275 mg monensin sodium) and MON + DBR (corn meal + 1.0 g probiotic DBR® + 138mg of sodium monensin). The aim of this work was evaluate whether Probiotic DRB could replace the monesin. Data were subjected to analysis of variance using the SAS statistical software. There were no effects of different additives on the dry matter intake, weight gain, efficiency, feed conversion and carcass characteristics of cattle subjected to different dietary treatments (P> 0.05). We conclude that the probiotic DBR® can replace all or part of sodium monensin in diets with high levels of concentrates in feedlot for Nellore cattle.(AU)

Aeromonas no processamento de queijos tipos minas frescal e colonial / Aeromonas in processing line of minas frescal and colonial cheeses

Com o objetivo de estabelecer, durante o processamento do queijo Minas Frescal e Colonial os possíveis pontos de contaminação e a forma de disseminação de bactérias do gênero Aeromonas, foram analisados, quanto à presença do micro-organismo, diferentes produtos e pontos do fluxograma de produção. Para o Queijo Minas Frescal, Aeromonas spp. foram isoladas no leite cru, leite pasteurizado, ambiente de produção e nas mãos dos manipuladores. A. caviae foi a espécie mais frequentemente identificada, sendo também isoladas A. sobria e A. schubertii. Durante o processamento do queijo Colonial, as espécies A. hydrophila, A. caviae, A. sobria, A. veronii e A. jandaei foram isoladas a partir da água, mãos dos manipuladores, utensílios, leite cru e após tratamento térmico e de massa coagulada. Os resultados demonstram que o gênero Aeromonas encontra-se disseminado nas diferentes etapas do processamento de queijos, destacando-se o leite cru como principal fonte de contaminação para o processamento industrial e artesanal.

The aim of this study is to establish possible contamination points and dissemination forms of the bacteria genus Aeromonas during the processing of the Brazilian cheeses Minas Frescal and Colonial. Therefore, different products and production points of the process were analyzed to determine the presence of the microorganism. In Minas Frescal cheese, Aeromonas spp. was isolated in raw and pasteurized milk, in the environment and on the handlers’ hands. A. caviae was the most frequently identified species, but A. sobria and A. schubertii were also isolated. During the processing of Colonial cheese, the species A. hydrophila, A. caviae, A. sobria, A. veronii and A. jandaei were isolated in the water, raw milk, after thermal treatment and curd, as well as on the handlers' hands and utensils. The results showed that the genus Aeromonas is disseminated throughout different stages of both cheese processes while the raw milk stands out as the main source of contamination in the industrial and handmade processing.

AEROMONAS IN PROCESSING LINE OF MINAS FRESCAL AND COLONIAL CHEESES / Aeromonas no processamento de queijos tipos minas frescal e colonial

Com o objetivo de estabelecer, durante o processamento do queijo Minas Frescal e Colonial os possíveis pontos de contaminação e a forma de disseminação de bactérias do gênero Aeromonas, foram analisados, quanto à presença do micro-organismo, diferentes produtos e pontos do fluxograma de produção. Para o Queijo Minas Frescal, Aeromonas spp. foram isoladas no leite cru, leite pasteurizado, ambiente de produção e nas mãos dos manipuladores. A. caviae foi a espécie mais frequentemente identificada, sendo também isoladas A. sobria e A. schubertii. Durante o processamento do queijo Colonial, as espécies A. hydrophila, A. caviae, A. sobria, A. veronii e A. jandaei foram isoladas a partir da água, mãos dos manipuladores, utensílios, leite cru e após tratamento térmico e de massa coagulada. Os resultados demonstram que o gênero Aeromonas encontra-se disseminado nas diferentes etapas do processamento de queijos, destacando-se o leite cru como principal fonte de contaminação para o processamento industrial e artesanal. SUMMARY The aim of this study is to establish possible contamination points and dissemination

Aeromonas no processamento de queijos tipos minas frescal e colonial / Aeromonas in processing line of minas frescal and colonial cheeses

Com o objetivo de estabelecer, durante o processamento do queijo Minas Frescal e Colonial os possíveis pontos de contaminação e a forma de disseminação de bactérias do gênero Aeromonas, foram analisados, quanto à presença do micro-organismo, diferentes produtos e pontos do fluxograma de produção. Para o Queijo Minas Frescal, Aeromonas spp. foram isoladas no leite cru, leite pasteurizado, ambiente de produção e nas mãos dos manipuladores. A. caviae foi a espécie mais frequentemente identificada, sendo também isoladas A. sobria e A. schubertii. Durante o processamento do queijo Colonial, as espécies A. hydrophila, A. caviae, A. sobria, A. veronii e A. jandaei foram isoladas a partir da água, mãos dos manipuladores, utensílios, leite cru e após tratamento térmico e de massa coagulada. Os resultados demonstram que o gênero Aeromonas encontra-se disseminado nas diferentes etapas do processamento de queijos, destacando-se o leite cru como principal fonte de contaminação para o processamento industrial e artesanal.(AU)

The aim of this study is to establish possible contamination points and dissemination forms of the bacteria genus Aeromonas during the processing of the Brazilian cheeses Minas Frescal and Colonial. Therefore, different products and production points of the process were analyzed to determine the presence of the microorganism. In Minas Frescal cheese, Aeromonas spp. was isolated in raw and pasteurized milk, in the environment and on the handlers hands. A. caviae was the most frequently identified species, but A. sobria and A. schubertii were also isolated. During the processing of Colonial cheese, the species A. hydrophila, A. caviae, A. sobria, A. veronii and A. jandaei were isolated in the water, raw milk, after thermal treatment and curd, as well as on the handlers' hands and utensils. The results showed that the genus Aeromonas is disseminated throughout different stages of both cheese processes while the raw milk stands out as the main source of contamination in the industrial and handmade processing.(AU)

Morfologia e quantificação da microbiota intestinal do curimbatá (Prochilodus lineatus) e do cascudo cinza (Pterygoplichthys anisitsi) cultivados em cativeiro / Morphology and quantification of intestinal microbiota of curimbatá (Prochilodus lineatus) and the gray armored catfish (Pterygoplichthys anisitsi) reared in captivity

Todos os animais vivem em íntima associação com micro-organismos que desempenham importantes funções em seu desenvolvimento normal. Nos vertebrados, a mais populosa e complexa comunidade de micro-organismos reside no trato intestinal. O intuito do estudo foi quantificar, classificar e verificar morfologicamente a população microbiana intestinal de duas importantes espécies de peixes de água doce, o curimbatá (Prochilodus lineatus) e o cascudo cinza (Pterygoplichthys anisitsi). As amostras foram coletadas por meio de raspagens da mucosa intestinal, diluídas seriadamente até 10-4, semeadas em placas contendo ágar soja tripticaseína (TSA) e ágar chocolate (AC) para contagem de bactérias totais e identificação morfológica por Gram, em aerobiose e em anaerobiose facultativa, respectivamente. As contagens de bactérias totais mostraram resultados que variaram entre 10³ e 10(4)ufc.mL-1. Os tipos morfológicos encontrados foram cocos, leveduras e bastonetes Gram negativos e positivos. Estudos adicionais sobre os padrões de colonização microbiana e a morfologia dos micro-organismos aderidos à mucosa intestinal foram possíveis com o uso da microscopia eletrônica de varredura (MEV), sendo encontradas formas variadas de micro-organismos, tais como leveduras, formas cocoides e bacilares flageladas e não flageladas. A microbiota intestinal do curimbatá e a do cascudo cinza provaram ser bastante diversas e populosas, com o predomínio de micro-organismos Gram negativos.(AU)

All animals exist in intimate associations with microorganisms that play important roles in the hosts' normal development. In vertebrates, the most populous and complex community of microbes resides in the digestive tract.The aim of this research was to morphologically quantify, classify and verify the composition of intestinal microbiota of two species of freshwater fish, the Prochilodus lineatus and the Pterygoplichthys anisitsi. The samples were collected by scrapings of intestinal mucosa, serially diluted to 10-4, plated on tryptic soy agar (TSA) and chocolate agar (CA) for total bacterial counting and morphological identification by Gram, in aerobiosis and facultative anaerobiosis conditions, respectively. In the total bacterial counting results ranged between 10³ to 10(4) cfu.mL-1. The morphological types found were cocci, yeasts and Gram negative and positive rods. Additional studies about patterns of microbial colonization and the morphology of the adhered microorganisms to the intestinal mucosa were possible using the scanning electron microscopy (SEM) and several forms of microorganisms, such as yeasts, cocci and bacillary shapes flagellated and non-flagellated were found. The intestinal microbiota of P. lineatus and P. anisitsi was diverse and populous, with a predominance of Gram negative microorganisms.(AU)

Microbiological evaluation of the muscle surface of lamb carcasses during slaughter processes in the slaughterhouse / Avaliação microbiológica da superfície muscular de carcaças ovinas durante as operações de abate em matadouro

In order to evaluate the hygienic-sanitary conditions of lamb carcasses for human consumption, this study aimed at quantifying populations of indicator microorganisms, such as: mesophiles and psychrotrophs, molds and yeasts, Escherichia coli, Staphylococcus spp. and at identifying pathogenic microorganisms (Salmonella sp. and Listeria spp.). The study was conducted in one lamb slaughterhouse located in the State of São Paulo. Swab samples were collected from muscle surface of forequarter and hindquarter regions of 30 half-carcasses after skinning, evisceration and washing processes. Population counts were between the following values in logio: 2.00 ± 0.32 and 2.59 ± 0.76 UFC/cm² for mesophiles; 1.52 ± 0.98 and 2.35 ± 1.17 UFC/cm² for psychrotrophs: 0.75 ± 0.87 and 1.23 ± 0.97 UFC/cm² for molds and yeasts; 0.00 0.00 and 0.31 ± 0.84 NMP/cm² for Escherichia coli and 1.75 ± 0.71 and 1.95 ± 0.68 UFC/cm² for Staphylococcus spp. Salmonella sp. and Listeria spp. were not detected from any of the sampled points. These results indicate the necessity to improve the hygienic-sanitary conditions.

Objetivando avaliar as condições higiênico-sanitárias de carcaças ovinas destinadas à alimentação humana, o estudo consistiu em realizar a quantificação das populações de microrganismos indicadores: heterotróficos mesófilos e psicrotróficos, bolores e leveduras, Escherichia coli, Staphylococcus spp. e a identificação de microrganismos patogênicos (Salmonella sp. e Listeria spp.). O estudo foi desenvolvido em matadouro-frigorífico de ovinos, situado no interior do Estado de São Paulo. Foram colhidas amostras, através de swabs, da superficie muscular das regiões dianteira e traseira de 30 meias carcaças ovinas, após as etapas de esfola, evisceração e lavagem. As populações encontradas estiveram entre os seguintes valores em logio: 2,00±0,32 e 2,59 ± 0,76 UFC/cm² para mesófilos; 1,52 ± 0,98 e 2,35 ± 1,17 UFC/cm² para psicrotróficos; 0,75 ± 0,87 e 1,23 ± 0,97 UFC/cm² para bolores e leveduras; 0,00 + 0,00 e 0,31 0,84 NMP/cm² para Escherichia coli e 1,75 ± 0.71 e 1,95 ± 0,68 UFC/cm² para Staphylococcus spp. Salmonella sp. e Listeria spp. não foram detectadas em nenhum dos pontos amostrados. Os resultados indicam a necessidade da melhoria dos cuidados higiênico-sanitários adotados.

Estudo epidemiológico das Aeromonas spp, através de REP e ERIC-PCR, em abatedouro bovino / Epidemiological study of Aeromonas spp using REP and ERIC-PCR in bovine abattoir

O gênero Aeromonas compreende espécies consideradas importantes patógenos para os seres humanos, sendo que a principal ação patogênica delas corresponde às gastroenterites. Tendo em vista sua importância como patógeno de origem alimentar, a ocorrência de Aeromonas spp. foi estudada em carcaças bovinas e ambiente do abatedouro em uma indústria do Estado de São Paulo, com o intuito de definir a possível origem comum dessas bactérias no ambiente do frigorífico através de métodos moleculares. Foram colhidas 15 amostras de 19 pontos, totalizando 285 unidades. As amostras foram colhidas dos seguintes pontos: pele seca e úmida, superfície muscular das carcaças durante a toalete e das carcaças resfriadas, mãos dos funcionários antes e durante o trabalho na sala de abate e câmara de resfriamento, facas, parede e piso da câmara de resfriamento, água (clorada, não clorada e residuária da lavagem das carcaças), carne, conteúdo intestinal e ambiente da sala de abate. Foi realizada a caracterização do gênero e os isolados foram analisados pelas técnicas de REP (Repetitive Extragenic Palindromic) e ERIC (Enterobacterial Repetitive Intergenic Consensus)-PCR. Foi encontrada similaridade ? 99% somente entre um isolado de superfície muscular de uma carcaça resfriada com um isolado de mão. As técnicas moleculares não possibilitaram a identificação precisa da origem das bactérias na indústria, mas possibilitaram inferir que os manipuladores podem atuar como disseminadores delas no ambiente de abate.

The genus Aeromonas comprises important human pathogens and the gastroenteritises are the most common infections attributed to these microorganisms. Considering their importance as foodborne pathogens, the occurrence of Aeromonas spp. was studied on bovine carcasses and in the environment of an abattoir in State of São Paulo, Brazil, with the aim of defining the possible origin of these bacteria in the abattoir environment using molecular methods. Fifteen samples from 19 points were collected, totaling 285 units. The collecting points were: dry and wet skin, muscle surface of the carcasses during trimming process and refrigerated carcasses, operatives' hands from the slaughter room before and during the work and from refrigerated rooms, knives, wall and floor from refrigerated room, water (chlorinated, nonchlorinated and from carcass washing), meat, intestinal content and slaughter room environment. Characterization of the genus was performed and the isolates were analyzed with REP (Repetitive Extragenic Palindromic) and ERIC-PCR (Enterobacterial Repetitive Intergenic Consensus PCR) techniques. A similarity of ? 99% was found only between one isolate from the muscle surface of one refrigerated carcass with one isolate from a hand. The molecular techniques did not enable the precise identification of the bacteria's origin within the industry, but they permitted the inference that the operatives can spread Aeromonas in the slaughter environment.

ESTUDO EPIDEMIOLÓGICO DAS AEROMONAS SPP., ATRAVÉS DE REP E ERIC-PCR, EM ABATEDOURO BOVINO

ABSTRACT The genus Aeromonas comprises important human pathogens and the gastroenteritises are the most common infections attributed to these microorganisms. Considering their importance as foodborne pathogens, the occurrence of Aeromonas spp. was studied on bovine carcasses and in the environment of an abattoir in State of São Paulo, Brazil, with the aim of defining the possible origin of these bacteria in the abattoir environment using molecular methods. Fifteen samples from 19 points were collected, totaling 285 units. The collecting points were: dry and wet skin, muscle surface of the carcasses during trimming process and refrigerated carcasses, operatives hands from the slaughter room before and during the work and from refrigerated rooms, knives, wall and floor from refrigerated room, water (chlorinated, nonchlorinated and from carcass washing), meat, intestinal content and slaughter room environment. Characterization of the genus was performed and the isolates were analyzed with REP (Repetitive Extragenic Palindromic) and ERIC-PCR (Enterobacterial Repetitive Intergenic Consensus PCR) techniques. A similarity of ? 99% was found only between one isolate from the muscle surface of one refrigerated carcass with one isolate from a hand. The molecular techniques did not enable the precise identification of the bacterias origin within the industry, but they permitted the inference that the operatives can spread Aeromonas in the slaughter environment.

RESUMO O gênero Aeromonas compreende espécies consideradas importantes patógenos para os seres humanos, sendo que a principal ação patogênica delas corresponde às gastroenterites. Tendo em vista sua importância como patógeno de origem alimentar, a ocorrência de Aeromonas spp. foi estudada em carcaças bovinas e ambiente do abatedouro em uma indústria do Estado de São Paulo, com o intuito de definir a possível origem comum dessas bactérias no ambiente do frigorífico através de métodos moleculares. Foram colhidas 15 amostras de 19 pontos, totalizando 285 unidades. As amostras foram colhidas dos seguintes pontos: pele seca e úmida, superfície muscular das carcaças durante a toalete e das carcaças resfriadas, mãos dos funcionários antes e durante o trabalho na sala de abate e câmara de resfriamento, facas, parede e piso da câmara de resfriamento, água (clorada, não clorada e residuária da lavagem das carcaças), carne, conteúdo intestinal e ambiente da sala de abate. Foi realizada a caracterização do gênero e os isolados foram analisados pelas técnicas de REP (Repetitive Extragenic Palindromic) e ERIC (Enterobacterial Repetitive Intergenic Consensus)-PCR. Foi encontrada similaridade ? 99% somente entre um isolado de superfície muscular de uma carcaça resfriada com um isolado de mão. As técnicas moleculares não possibilitaram a identificação precisa da origem das bactérias na indústria, mas possibilitaram inferir que os manipuladores podem atuar como disseminadores delas no ambiente de abate.

Ocorrência de Aeromonas spp. em abatedouro bovino e sensibilidade a antimicrobianos / Occurrence of Aeromonas spp. in bovine abattoir and antimicrobial sensitivity

O gênero Aeromonas compreende espécies consideradas importantes patógenos para os seres humanos, sendo as gastroenterites as infecções mais comumente atribuídas a estas bactérias. Tendo em vista sua importância como patógeno de origem alimentar, a ocorrência deAeromonas spp. foi estudada em carcaças bovinas e ambiente do abatedouro em uma indústria do Estado de São Paulo. Foram colhidas 285 amostras de 19 locais. Foi realizada a contagem direta por semeadura em meio seletivo, caracterização bioquímica das espécies após enriquecimento seletivo e teste de sensibilidade a antimicrobianos. A contagem direta permitiu a quantificação dessas bactérias em apenas 12 amostras, variando de 0,5 a 9,2 x 100 UFC/cm2, sendo cinco delas de ambiente, com populações que variaram de 1,0 x 100 a 3,0 x 100 UFC/placa. Entretanto, após o enriquecimento seletivo, Aeromonas spp. foram isoladas de 38 amostras que, somadas às amostras de ambiente não submetidas ao enriquecimento, forneceram 62 isolados para análise. A caracterização bioquímica das espécies permitiu verificar a ocorrência de 59 isolados de A. caviae, um de A. sobria, um de A. trota e um de A. schubertii. O teste com antimicrobianos revelou resistência de todos os isolados pela ampicilina e cefalotina, enquanto, para os demais antimicrobianos, esta foi variável. A resistência da totalidade dos isolados a determinados antimicrobianos indica que estes devem ser utilizados criteriosamente com a finalidade de evitar o surgimento precoce de cepas deAeromonas spp. multirresistentes. Ainda, a maior prevalência deA. caviae deve ser considerada relevante, pois trata-se de uma das espécies causadoras de gastroenterite em humanos.

The genus Aeromonas comprises important human pathogens, gastroenteritis being the most common type of infection attributed to these bacteria. Considering their importance as foodborne pathogens, the occurrence of Aeromonas spp. was studied on bovine carcasses and the environment of a slaughterhouse in São Paulo State, Brazil. A total of 285 samples were collected from 19 points. Direct counting was carried out by seeding on selective medium, with biochemical characterization of the species after selective enrichment and antimicrobial sensitivity testing. The direct count permitted bacteria quantification only in 12 samples ranging from 0.5 to 9.2 x 100 CFU/ cm2, of which 5 were from environment, ranging from 1.0 x 100 to 3.0 x 100 CFU/plate. However, after selective enrichment,Aeromonas spp. was isolated from 38 samples, which when added to the environmental samples not subjected to the enrichment provided 62 isolates for analysis. Biochemical characterization allowed for the verification of the occurrence of 59 isolates of A. caviae, 1 ofA. sobria, 1 ofA. trota and 1 ofA. schubertii. Antimicrobial testing revealed that all isolates were resistant to ampicillin and cephalotin, while the results for the other antimicrobials were variable. Resistance of all isolates to some antimicrobials indicates that these must be used carefully to avoid early development of multiresistantAeromonas spp. Also, the greatest prevalence of A. caviae must be considered relevant because it is one of the causative species of human gastroenteritis.

OCORRÊNCIA DE AEROMONAS SPP. EM ABATEDOURO BOVINO E SENSIBILIDADE A ANTIMICROBIANOS

ABSTRACT The genus Aeromonas comprises important human pathogens, gastroenteritis being the most common type of infection attributed to these bacteria. Considering their importance as foodborne pathogens, the occurrence of Aeromonas spp. was studied on bovine carcasses and the environment of a slaughterhouse in São Paulo State, Brazil. A total of 285 samples were collected from 19 points. Direct counting was carried out by seeding on selective medium, with biochemical characterization of the species after selective enrichment and antimicrobial sensitivity testing. The direct count permitted bacteria quantification only in 12 samples ranging from 0.5 to 9.2 x 100 CFU/ cm2, of which 5 were from environment, ranging from 1.0 x 100 to 3.0 x 100 CFU/plate. However, after selective enrichment,Aeromonas spp. was isolated from 38 samples, which when added to the environmental samples not subjected to the enrichment provided 62 isolates for analysis. Biochemical characterization allowed for the verification of the occurrence of 59 isolates of A. caviae, 1 ofA. sobria, 1 ofA. trota and 1 ofA. schubertii. Antimicrobial testing revealed that all isolates were resistant to ampicillin and cephalotin, while the results for the other antimicrobials were variable. Resistance of all isolates to some antimicrobials indicates that these must be used carefully to avoid early development of multiresistantAeromonas spp. Also, the greatest prevalence of A. caviae must be considered relevant because it is one of the causative species of human gastroenteritis.

RESUMO O gênero Aeromonas compreende espécies consideradas importantes patógenos para os seres humanos, sendo as gastroenterites as infecções mais comumente atribuídas a estas bactérias. Tendo em vista sua importância como patógeno de origem alimentar, a ocorrência deAeromonas spp. foi estudada em carcaças bovinas e ambiente do abatedouro em uma indústria do Estado de São Paulo. Foram colhidas 285 amostras de 19 locais. Foi realizada a contagem direta por semeadura em meio seletivo, caracterização bioquímica das espécies após enriquecimento seletivo e teste de sensibilidade a antimicrobianos. A contagem direta permitiu a quantificação dessas bactérias em apenas 12 amostras, variando de 0,5 a 9,2 x 100 UFC/cm2, sendo cinco delas de ambiente, com populações que variaram de 1,0 x 100 a 3,0 x 100 UFC/placa. Entretanto, após o enriquecimento seletivo, Aeromonas spp. foram isoladas de 38 amostras que, somadas às amostras de ambiente não submetidas ao enriquecimento, forneceram 62 isolados para análise. A caracterização bioquímica das espécies permitiu verificar a ocorrência de 59 isolados de A. caviae, um de A. sobria, um de A. trota e um de A. schubertii. O teste com antimicrobianos revelou resistência de todos os isolados pela ampicilina e cefalotina, enquanto, para os demais antimicrobianos, esta foi variável. A resistência da totalidade dos isolados a determinados antimicrobianos indica que estes devem ser utilizados criteriosamente com a finalidade de evitar o surgimento precoce de cepas deAeromonas spp. multirresistentes. Ainda, a maior prevalência deA. caviae deve ser considerada relevante, pois trata-se de uma das espécies causadoras de gastroenterite em humanos.