Uso de técnica adaptada para cavotomia em cão com feocromocitoma associado a trombo neoplásico / Adapted cavotomy technique for pheochromocytoma associated tumor thrombi in a dog

Background: In dogs pheochromocytoma usually compress and invade into the adjacent vessels and structures, whichmay lead to the occurrence of caudal vena caval tumor thrombi. The surgical approach in these cases requires adrenalectomy with caval thrombectomy. Conventionally, tourniquets and partial occlusion clamp are used to reduce intraoperativeblood loss, but in dogs with a large thrombus associated to a great local tumor invasion, the traditional technique may behindered. The aim of this study was to report the use of a purse-string suture during venotomy of the caudal vena cava forthrombectomy, as an alternative to tourniquet and partial occlusion clamp.Case: An 11-year-old male Daschound breed dog, was referred for evaluation because of the appearance of small blackenednodules in the ventral abdomen. During a search for metastatic lesions with abdominal ultrasound, the right adrenal wasidentified with significant volume increase, and presence of tumor-associate circular formation that appeared to invade thecaudal vena cava, suggestive of neoplastic invasion or thrombus. Abdominal computed tomography showed caudal venacava in its hepatic portion presenting considerable increase in diameter, with caudal dilation and presence of hypoattenuatingmaterial in its lumen. Right adrenal gland with rounded appearance and regular borders, heterogeneous parenchyma andjuxtaposed caudal vena cava suggesting invasion of this, confirming the sonographic findings. During exploratory celiotomy,adherence of the adrenal mass to the right renal vessels and invasion of the caudal vena cava were observed, leading to theneed of nephrectomy and venotomy for thrombectomy. To perform the venotomy, a Rumel tourniquet was placed looselyaround the vena cava only caudal to the invasion point of the tumor thrombus, cranially, tourniquet application was notpossible due to the presence of a large thrombus extending into the intrahepatic cava...

Uso de técnica adaptada para cavotomia em cão com feocromocitoma associado a trombo neoplásico / Adapted cavotomy technique for pheochromocytoma associated tumor thrombi in a dog

Background: In dogs pheochromocytoma usually compress and invade into the adjacent vessels and structures, whichmay lead to the occurrence of caudal vena caval tumor thrombi. The surgical approach in these cases requires adrenalectomy with caval thrombectomy. Conventionally, tourniquets and partial occlusion clamp are used to reduce intraoperativeblood loss, but in dogs with a large thrombus associated to a great local tumor invasion, the traditional technique may behindered. The aim of this study was to report the use of a purse-string suture during venotomy of the caudal vena cava forthrombectomy, as an alternative to tourniquet and partial occlusion clamp.Case: An 11-year-old male Daschound breed dog, was referred for evaluation because of the appearance of small blackenednodules in the ventral abdomen. During a search for metastatic lesions with abdominal ultrasound, the right adrenal wasidentified with significant volume increase, and presence of tumor-associate circular formation that appeared to invade thecaudal vena cava, suggestive of neoplastic invasion or thrombus. Abdominal computed tomography showed caudal venacava in its hepatic portion presenting considerable increase in diameter, with caudal dilation and presence of hypoattenuatingmaterial in its lumen. Right adrenal gland with rounded appearance and regular borders, heterogeneous parenchyma andjuxtaposed caudal vena cava suggesting invasion of this, confirming the sonographic findings. During exploratory celiotomy,adherence of the adrenal mass to the right renal vessels and invasion of the caudal vena cava were observed, leading to theneed of nephrectomy and venotomy for thrombectomy. To perform the venotomy, a Rumel tourniquet was placed looselyaround the vena cava only caudal to the invasion point of the tumor thrombus, cranially, tourniquet application was notpossible due to the presence of a large thrombus extending into the intrahepatic cava...(AU)

Evaluation of left atrial function in asymptomatic dogs with chronic myxomatous mitral valve disease: two-dimensional feature-tracking echocardiography and Simpsons monoplanar methods / Avaliação da função atrial esquerda em cães assintomáticos com degeneração mixomatosa crônica de valva mitral: métodos ecocardiográficos bidimensional feature tracking e monoplanar de Simpson

The present study evaluated the volume and function of the left atrium by two-dimensional echocardiographic feature-tracking imaging (2D-FTI) and Simpson's monoplanar modeling in dogs with asymptomatic degenerative mitral valve disease (DMVD). The study consisted of 80 dogs that were divided into the following three groups: Group 1, 21 dogs (A); Group 2, 30 dogs (B1) and Group 3, 29 dogs (B2). The variable strain (contraction phase) was significantly lower in Group 3 than in Group 1 (12.92±4.54 x 16.69±5.74, p=0.014), and significant differences in the contraction strain index (CSI) were observed between all of the groups that were evaluated (1 = 46.82±8.10, 2 = 39.88±8.03, 3 = 35.25±5.64, p<0.0001). The atrial diastolic volume index (AdVi) that was measured by 2D-FTI was significantly higher in Group 3 than in Group 1 (1.31±0.95 x 0.96±0.31, p=0.038), and the atrial cardiac index (ACI) was also higher in Group 3 than in Group 1 (102.38±80.18 x 78.19±33.38, p=0.030). Atrial function was assessed by Simpson's monoplanar method, which demonstrated an increase in the left atrial systolic volume, while the contractile function decreased with an increasing disease severity (Group 1 0.21±0.06; Group 2 0.25±0.06; Group 3 0.32±0.08, p<0.0001). The intraobserver and interobserver assessments showed low to moderate variability; most of the values for the coefficient of variation for the variables that were analysed with each method were below 25%. Thus, DMVD was determined to cause an alteration in atrial function, especially in the contraction phase, and even in asymptomatic animals, and the methods of 2D-FTI echocardiography and Simpson's monoplanar evaluation are sensitive and early methods for the detection of left atrial dysfunction.(AU)

O presente estudo avaliou o volume e a função atrial esquerda obtidos por meio da ecocardiografia bidimensional feature tracking (2D-FTI) e pelo método monoplanar de Simpson em cães saudáveis e cães com DMVD assintomáticos. Foram avaliados 80 cães distribuídos em três grupos: Grupo 1, 21 cães (classe A); Grupo 2, 30 cães (classe B1) e Grupo 3, 29 cães (classe B2). A variável strain (fase de contração) foi significativamente menor no Grupo 3 que no Grupo 1 (12,92±4,54 x 16,69±5,74, p=0,014) e para a variável índice de strain de contração (CSI), houve diferença estatística entre todos os grupos avaliados (1 = 46,82±8,10; 2 = 39,88±8,03; 3 = 35,25±5,64, p<0,0001). O índice de volume diastólico atrial (iVdA) mensurado por meio do 2D-FTI foi significativamente maior no Grupo 3 que no Grupo 1 (1,31±0,95 x 0,96±0,31, p=0,038), assim como para o índice cardíaco atrial (iCA) também foi maior no Grupo 3 (102,38±80,18 x 78,19±33,38, p=0,030). A função atrial avaliada pelo método monoplanar de Simpson demonstrou um aumento do volume atrial esquerdo e do volume sistólico do átrio esquerdo, enquanto que a função contrátil diminuiu com o aumento da gravidade da doença (Grupo 1 0,21±0,06; Grupo 2 0,25±0,06; Grupo 3 0,32±0,08; p<0,0001). A avaliação intraobservador e interobservador, demonstrou variabilidade baixa a moderada, uma vez que a maioria dos valores de coeficiente de variação se concentraram abaixo de 25% para as variáveis analisadas em ambos os métodos. Dessa forma, conclui-se que a DMVD causa alteração na função atrial, principalmente na fase de contração, mesmo em animais assintomáticos e que a ecocardiografia 2D-FTI e o método monoplanar de Simpson são métodos sensíveis e precoces na detecção da disfunção atrial esquerda.(AU)

Evaluation of left atrial function in asymptomatic dogs with chronic myxomatous mitral valve disease: two-dimensional feature-tracking echocardiography and Simpsons monoplanar methods / Avaliação da função atrial esquerda em cães assintomáticos com degeneração mixomatosa crônica de valva mitral: métodos ecocardiográficos bidimensional feature tracking e monoplanar de Simpson

The present study evaluated the volume and function of the left atrium by two-dimensional echocardiographic feature-tracking imaging (2D-FTI) and Simpson's monoplanar modeling in dogs with asymptomatic degenerative mitral valve disease (DMVD). The study consisted of 80 dogs that were divided into the following three groups: Group 1, 21 dogs (A); Group 2, 30 dogs (B1) and Group 3, 29 dogs (B2). The variable strain (contraction phase) was significantly lower in Group 3 than in Group 1 (12.92±4.54 x 16.69±5.74, p=0.014), and significant differences in the contraction strain index (CSI) were observed between all of the groups that were evaluated (1 = 46.82±8.10, 2 = 39.88±8.03, 3 = 35.25±5.64, p<0.0001). The atrial diastolic volume index (AdVi) that was measured by 2D-FTI was significantly higher in Group 3 than in Group 1 (1.31±0.95 x 0.96±0.31, p=0.038), and the atrial cardiac index (ACI) was also higher in Group 3 than in Group 1 (102.38±80.18 x 78.19±33.38, p=0.030). Atrial function was assessed by Simpson's monoplanar method, which demonstrated an increase in the left atrial systolic volume, while the contractile function decreased with an increasing disease severity (Group 1 0.21±0.06; Group 2 0.25±0.06; Group 3 0.32±0.08, p<0.0001). The intraobserver and interobserver assessments showed low to moderate variability; most of the values for the coefficient of variation for the variables that were analysed with each method were below 25%. Thus, DMVD was determined to cause an alteration in atrial function, especially in the contraction phase, and even in asymptomatic animals, and the methods of 2D-FTI echocardiography and Simpson's monoplanar evaluation are sensitive and early methods for the detection of left atrial dysfunction.(AU)

O presente estudo avaliou o volume e a função atrial esquerda obtidos por meio da ecocardiografia bidimensional feature tracking (2D-FTI) e pelo método monoplanar de Simpson em cães saudáveis e cães com DMVD assintomáticos. Foram avaliados 80 cães distribuídos em três grupos: Grupo 1, 21 cães (classe A); Grupo 2, 30 cães (classe B1) e Grupo 3, 29 cães (classe B2). A variável strain (fase de contração) foi significativamente menor no Grupo 3 que no Grupo 1 (12,92±4,54 x 16,69±5,74, p=0,014) e para a variável índice de strain de contração (CSI), houve diferença estatística entre todos os grupos avaliados (1 = 46,82±8,10; 2 = 39,88±8,03; 3 = 35,25±5,64, p<0,0001). O índice de volume diastólico atrial (iVdA) mensurado por meio do 2D-FTI foi significativamente maior no Grupo 3 que no Grupo 1 (1,31±0,95 x 0,96±0,31, p=0,038), assim como para o índice cardíaco atrial (iCA) também foi maior no Grupo 3 (102,38±80,18 x 78,19±33,38, p=0,030). A função atrial avaliada pelo método monoplanar de Simpson demonstrou um aumento do volume atrial esquerdo e do volume sistólico do átrio esquerdo, enquanto que a função contrátil diminuiu com o aumento da gravidade da doença (Grupo 1 0,21±0,06; Grupo 2 0,25±0,06; Grupo 3 0,32±0,08; p<0,0001). A avaliação intraobservador e interobservador, demonstrou variabilidade baixa a moderada, uma vez que a maioria dos valores de coeficiente de variação se concentraram abaixo de 25% para as variáveis analisadas em ambos os métodos. Dessa forma, conclui-se que a DMVD causa alteração na função atrial, principalmente na fase de contração, mesmo em animais assintomáticos e que a ecocardiografia 2D-FTI e o método monoplanar de Simpson são métodos sensíveis e precoces na detecção da disfunção atrial esquerda.(AU)

Evaluation of left atrial function in asymptomatic dogs with chronic myxomatous mitral valve disease: two-dimensional feature-tracking echocardiography and Simpsons monoplanar methods

ABSTRACT: The present study evaluated the volume and function of the left atrium by two-dimensional echocardiographic feature-tracking imaging (2D-FTI) and Simpsons monoplanar modeling in dogs with asymptomatic degenerative mitral valve disease (DMVD). The study consisted of 80 dogs that were divided into the following three groups: Group 1, 21 dogs (A); Group 2, 30 dogs (B1) and Group 3, 29 dogs (B2). The variable strain (contraction phase) was significantly lower in Group 3 than in Group 1 (12.92±4.54 x 16.69±5.74, p=0.014), and significant differences in the contraction strain index (CSI) were observed between all of the groups that were evaluated (1 = 46.82±8.10, 2 = 39.88±8.03, 3 = 35.25±5.64, p 0.0001). The atrial diastolic volume index (AdVi) that was measured by 2D-FTI was significantly higher in Group 3 than in Group 1 (1.31±0.95 x 0.96±0.31, p=0.038), and the atrial cardiac index (ACI) was also higher in Group 3 than in Group 1 (102.38±80.18 x 78.19±33.38, p=0.030). Atrial function was assessed by Simpsons monoplanar method, which demonstrated an increase in the left atrial systolic volume, while the contractile function decreased with an increasing disease severity (Group 1 0.21±0.06; Group 2 0.25±0.06; Group 3 0.32±0.08, p 0.0001). The intraobserver and interobserver assessments showed low to moderate variability; most of the values for the coefficient of variation for the variables that were analysed with each method were below 25%. Thus, DMVD was determined to cause an alteration in atrial function, especially in the contraction phase, and even in asymptomatic animals, and the methods of 2D-FTI echocardiography and Simpsons monoplanar evaluation are sensitive and early methods for the detection of left atrial dysfunction.

RESUMO: O presente estudo avaliou o volume e a função atrial esquerda obtidos por meio da ecocardiografia bidimensional feature tracking (2D-FTI) e pelo método monoplanar de Simpson em cães saudáveis e cães com DMVD assintomáticos. Foram avaliados 80 cães distribuídos em três grupos: Grupo 1, 21 cães (classe A); Grupo 2, 30 cães (classe B1) e Grupo 3, 29 cães (classe B2). A variável strain (fase de contração) foi significativamente menor no Grupo 3 que no Grupo 1 (12,92±4,54 x 16,69±5,74, p=0,014) e para a variável índice de strain de contração (CSI), houve diferença estatística entre todos os grupos avaliados (1 = 46,82±8,10; 2 = 39,88±8,03; 3 = 35,25±5,64, p 0,0001). O índice de volume diastólico atrial (iVdA) mensurado por meio do 2D-FTI foi significativamente maior no Grupo 3 que no Grupo 1 (1,31±0,95 x 0,96±0,31, p=0,038), assim como para o índice cardíaco atrial (iCA) também foi maior no Grupo 3 (102,38±80,18 x 78,19±33,38, p=0,030). A função atrial avaliada pelo método monoplanar de Simpson demonstrou um aumento do volume atrial esquerdo e do volume sistólico do átrio esquerdo, enquanto que a função contrátil diminuiu com o aumento da gravidade da doença (Grupo 1 0,21±0,06; Grupo 2 0,25±0,06; Grupo 3 0,32±0,08; p 0,0001). A avaliação intraobservador e interobservador, demonstrou variabilidade baixa a moderada, uma vez que a maioria dos valores de coeficiente de variação se concentraram abaixo de 25% para as variáveis analisadas em ambos os métodos. Dessa forma, conclui-se que a DMVD causa alteração na função atrial, principalmente na fase de contração, mesmo em animais assintomáticos e que a ecocardiografia 2D-FTI e o método monoplanar de Simpson são métodos sensíveis e precoces na detecção da disfunção atrial esquerda.

Protocol for collection and separation of bone marrow mononuclear cells in Chlorocebus aethiops / Protocolo para colheita e isolamento de células mononucleares de medula óssea em Chlorocebus aethiops

Chlorocebus aethiops is a species of non-human primate frequently used in biomedical research. Some research involves this species as an experimental model for various diseases and possible treatment with stem cells. The bone marrow is one of the main sources of these cells and provides easy access. The aim of this study was to standardize the protocol of collection and separation of bone marrow in C. aethiops. Ten animals were submitted to puncture of bone marrow with access to the iliac crest and cell separation by density gradient. The bone marrow of C. aethiops had an average of 97% viability. From the results achieved, we can conclude that C. aethiops is an excellent model to obtain and isolate mononuclear cells from bone marrow, fostering several studies in the field of cell therapy.(AU)

Chlorocebus aethiops é uma espécie de primata não humano frequentemente utilizados em pesquisa biomédica. Algumas pesquisas envolve esta espécie como modelo experimental para várias doenças e possível tratamento com células-tronco. A medula óssea é uma das principais fontes destas células e proporciona fácil acesso. O objetivo deste estudo foi o de padronizar o protocolo de coleta e separação de medula óssea em C. aethiops. Dez animais foram submetidos a punção de medula óssea com acesso à crista ilíaca e separação de células por gradiente de densidade. A medula óssea de C. aethiops tinha uma média de 97% de viabilidade. A partir dos resultados obtidos, podemos concluir que C. aethiops é um excelente modelo para obter e isolar células mononucleares da medula óssea, promovendo vários estudos no campo da terapia celular.(AU)

Morfologia e morfometria da traqueia da preguiça (Bradypus variegatus): conhecimentos para procedimentos de emergência / Morphological and morphometric trachea sloth (Bradypus variegatus): knowledge for emergency procedures

Por ser uma espécie pouco estudada, principalmente do ponto de vista morfológico, objetivou-se conhecer a anatomia da traqueia da preguiça (Bradypus variegatus) a fim de fornecer informações para facilitar a eleição de tubo endotraqueal adequado, máscara laríngea ou cânula de traqueostomia para anestesia e procedimentos de emergência, uma vez que a mesma revelou-se possuidora de uma morfologia especial. Foram investigados 11animais jovens de idades diferentes, sendo quatro machos e sete fêmeas, provenientes do Museu Emilio Goeldi e doados a UFRA. Os exemplares foram perfundidos via intramuscular com solução aquosa de formol a 10% para fins de conservação e posteriormente foram dissecados em nível cervico-torácico, por meio de mesoscopia, expondo-se desde a laringe até os brônquios principais direito e esquerdo ao nível do hilo pulmonar. As traqueias foram divididas em cinco regiões (região cervical, região da primeira flexura, região da segunda flexura, região da terceira flexura e região da carina) as quais foram mensuradas altura e largura, assim como o comprimento traqueal total e parte do material foi submetido à técnicas de rotina histológica. Macroscopicamente, destacou-se a presença de sinuosidades acentuadas em porção médio caudal, contemplando a carina. O comprimento médio traqueal foi de 14,6cm. Microscopicamente, a traqueia era constituída por placas separadas de cartilagem hialina constituindo cada anel, sendo revestido por epitélio estratificado ciliado. Apesar da traqueia da preguiça comum apresentar revestimento padrão encontrado na traqueia de outros animais, na literatura não há registros de outras espécies que tenham morfologia macroscópica nas condições descritas, o que nos leva a sugerir, quando necessário acesso para ventilação de emergência, a prática da IOT e não a de traqueostomia.(AU)

As the sloth (Bradypus variegatus) is a little studied species, especially from a morphological point of view, this research aimed to define the anatomy of its trachea. The information would facilitate the selection of a proper endotracheal tube, laryngeal mask or tracheostomy tube for anesthesia and emergency procedures, since it appeared to have a special morphology. Eleven young animals of different ages were investigated, four males and seven females, obtained from the Emilio Goeldi Museum and donated to UFRA. The specimens were infused intramuscularly with 10% aqueous formaldehyde for preservation and were later dissected at the cervico-thoracic level, by mesoscopia, exposing the area from the larynx to the right and left primary bronchi at the hilum. The tracheae were divided into five regions (cervical, first flexure, second flexure, third flexure, and carina) for which length and width were measured, as well as the total tracheal length. Sharp windings were seen in the middle caudal portion, including the carina. The average tracheal length was 14.6 cm. Microscopically, the trachea was made up of separate plates of hyaline cartilage forming each ring, lined with ciliated epithelium. Despite the trachea of the common sloth displaying the same lining pattern found in other animals, there are no reports in the literature of other species having a macroscopic morphology as described here, which leads us to suggest, where appropriate access to emergency ventilation, the practice of IOT and not tracheostomy.(AU)

Uso de esponja hemostática de gelatina para o desenvolvimento de infarto agudo do miocárdio em suínos / Use of the haemostatic gelatin sponge for development of the acute myocardium infarct in swine

O infarto agudo do miocárdio resulta da obstrução temporária de uma coronária com redução de sangue para parte do miocárdio, bastando alguns minutos de interrupção do fluxo sanguíneo para estabelecer a injúria. Foi cateterizado a porção distal da origem do 1° ramo diagonal da artéria coronária interventricular esquerda de dois suínos e infundida solução de esponja hemostática de gelatina. Pós um período de 21 dias os animais foram eutanasiados e o coração foi processado para microscopia de luz, revelando expressiva cicatriz na região apical do ventrículo esquerdo em um animal enquanto que no outro, a lesão estava localizada na parede ventricular esquerda, e com menor extensão. Foi possível observar também a presença de áreas não pertencentes à região infartada, com grande depósito de colágeno, sugerindo um processo bastante heterogêneo. Desta forma, podemos concluir que esta técnica não é interessante para o desenvolvimento de modelo experimental de infarto agudo do miocárdio.

The acute infarction of myocardium results of the temporary blockage of coronary with reduction of blood for part of the myocardium, some minutes of interruption of the sanguineous flow are sufficient for the establishment of injury. Was catheterized the distal portion of the origin of the first diagonal branch of coronary interventricular left artery from two swine and a solution of haemostatic gelatin sponge was infused. After a period of 21 days the animals had been euthanized and the heart was processed for light microscopy, show an expressive scar in the apical region of the left ventricle in an animal whereas in the other, the injury was located in the left ventricular wall, and with lesser extension. It was possible also to observe the presence of areas not pertaining to the infarction region, with great collagen deposit, suggesting a heterogeneous process. In such a way, we can conclude that this technique is not interesting for the development of acute experimental model of infarction of the myocardium.

Morphological aspects of buffaloes (Bubalus bubalis) umbilical cord / Aspectos Morfológicos do cordão umbilical de búfalos (Bubalus bubalis)

Buffalo is an important livestock resource, with a great participation in agricultural systems, providing milk, meat, and work power. Umbilical cord is responsible for maternal-fetal nutrients exchange during pregnancy, and its alterations can compromise the fetal development. We investigated ten pregnant uteruses collected from cross-bread buffaloes in different stages of gestation. Pregnancy and fetal age was determined by measuring the apex sacral length and development period was calculated by previously published formula. Umbilical cords were measured for length determination. Umbilical cord vascular net and anastomosis were observed by injection of Neoprene latex. Histological sections of the umbilical cord were studied after stain with HE, picrossirius, toluidine blue, orceine, and PAS reaction. Buffaloes' umbilical cord was formed by two central arteries, an allantois duct and two peripheral veins. The artery wall was composed by large quantity of collagen, elastic fibers, fibroblasts and large number of vasa vasorum. The allantois duct was located between the arteries and presented a great number of small nourishing vessels. Small nourishing vessels should be carefully considered to avoid to be mistaken to the arterials and veins vasa vasorum. Medium length of umbilical cord from buffalos was 11.8cm (minimum of 6.8cm and maximum of 17.4cm).(AU)

Búfalo é uma importante fonte de recurso nos rebanhos animais, apresentando uma grande participação na agropecuária, provendo leite, carne e força de trabalho. O Cordão umbilical é responsável pela troca de nutrientes materno-fetais durante a gestação, e suas alterações podem comprometer o desenvolvimento fetal. Nós investigamos dez úteros gravídicos de búfalos de raças cruzadas em fases diferentes de gestação. O período de gestação e a idade fetal foram determinados pelo comprimento ápice sacral, aplicando fórmulas previamente estabelecidas. Posteriormente mediu-se o comprimento do cordão umbilical. A rede vascular do cordão umbilical e anastomoses foram observadas por injeção ou látex de neoprene. O cordão umbilical foi estudado a partir de cortes histológicos, corados por HE, picrossirius, azul de Toluidina, orceína e reação histoquímica de PAS. O cordão umbilical de búfalos é formado por duas artérias centrais, ducto alantóide e duas veias periféricas e apresentam forma de ampulheta. A parede da artéria umbilical é composta por grande quantidade de fibras colágenas e elásticas, fibroblastos e um grande número de vasa vasorum. O ducto alantóide fica alocado entre as artérias e apresenta um grande número de pequenos vasos nutritivos. Os vasos nutritivos devem ser cuidadosamente identificados para evitar-se confundi-los com vasa vasorum. O comprimento médio do cabo de cordão umbilical dos búfalos era 11.8cm (mínimo de 6.8cm e máximo de 17.4cm).(AU)

Chorion biopsy in mongrel dogs / Biopsia do cório fetal em cães

With the great development of the gestational studies in all of the species, we noticed the necessity of adaptations of these techniques for prenatal diagnosis in dogs. Based on this, we studied the feasibility of chorion biopsy guided by ultrasound. Our results demonstrated accuracy on the sex determination being 2 males and 12 females, as well as it would be possible to identify chromosome alteration due to the quality of samplings. Sex determination was accomplished with the identification of Y gene chromosomes in PCR technique. After the collection, fragments were prepared for light microscopy studies and revealed fetal chorion tissue, blood colloid and erythrocyte. In the whole material we found hemosiderin impregnations due to the hemolysis and to the residue of blood of the placental marginal hematomes. The submitted female dogs to this technique demonstrated normal puppy births without death.(AU)

Com o grande desenvolvimento dos estudos gestacionais em todas as espécies, percebemos a necessidade de adaptarmos técnicas para diagnóstico pré-natal para cães. Assim, buscamos bases nas técnicas já existentes empregadas em humanos, e através destas, conseguimos estabelecer um método para coleta em cães, utilizando PCR para garantirmos a integridade das amostras. O procedimento foi realizado através de punção da cinta placentária com agulha de biopsia guiada por ultra-som. De todas as 14 amostras coletadas, duas apresentaram-se positivas para o cromossomo Y, presente apenas em machos, confirmando assim a viabilidade das amostras demonstrando com isso que através desta técnica podemos coletar material fetal para diagnóstico de alterações gênicas ou cromossômicas presentes nos cães antes mesmo destes virem a termo. A microscopia de material revelou fragmentos de cório fetal, colóide sangüíneo e eritrócitos. Em todo o material encontramos impregnações de hemosiderina devido à hemólise e ao resíduo de sangue dos hematomas marginais placentários. As cadelas submetidas a esta técnica tiveram partos normais sem óbito de nenhum filhote.(AU)

Atrial quantification of bone marrow mononuclear cells (BMMC) infusioned by intrapericardic route in swine submitted to myocardial infarction / Quantificação atrial de células mononucleares de medula óssea (cmmo) infundidas via intrapericárdica em suínos submetidos a infarto agudo do miocárdio

In the last decades, the regenerative medicine have been applied and investigated worldwide due to the stem cell therapy, which has shown high capacity of differentiation into a diverse cell lineage, restoring damaged tissues. In this study we applied bone marrow, which contains adult stem cells, hematopoietic and mesenchimal lineages. Mesenchimal lineage belongs to the mononuclear cell group that among its function, have demonstrated capacity for cardiac remodeling after ischemic processes and, can be introduced into the heart by infusion techniques like intrapericardic technique which has been investigated lately. In this study we investigated the application of intrapericardic technique for mononuclear cell infusion in swine induced to myocardial infarction. We used 6 female swine, averaging 25 kg distributed into control group (3 animals) and experimental group (3 animals), which animal were induced to infarction and received mononuclear cell infusion by intrapericardic technique. Control group received only mononuclear cell infusion by the same technique in normal heart. Mononuclear cells were obtained by Ficoll density and were stained by Hoescht fluorocrome. Atria analysis in both groups revealed a homogeneous distribution of the infusioned cells in the atria with no significant difference, p>0.01 between control and experimental group. Keywords: Cell therapy, rote i

Nas últimas décadas a medicina regenerativa tem se destacado em todo o mundo, graças ao surgimento da terapia com células-tronco, as quais tem grande capacidade de diferenciação em diversos tipos de linhagens celulares, reconstruindo tecidos lesados. A medula óssea, fonte das células utilizadas nesse estudo, contém células-tronco adultas, hematopoiéticas e mesenquimais, pertencentes ao grupo de células mononucleares, que dentre outras funções, são capazes de levar ao remodelamento cardíaco pós processo isquêmico, e para tanto, podem ser introduzidas no coração sob algumas vias de infusão, sendo que a mais recentemente estudada foi a via intrapericárdica, a qual foi eleita para o desenvolvimento deste estudo, sendo utilizados 6 suínos, fêmeas, com média de peso de 25Kg, divididos em 2 grupos: 3 animais induzidos ao infarto agudo do miocárdio e tratados com células mononucleares de medula óssea, e 3 animais que apenas receberam as mesmas células, porém não foram induzidos ao infarto (animais controle). As células mononucleares da medula óssea foram coletadas e separadas por densidade Ficoll, marcadas com fluorocromo Hoechst® e infundidas via intrapericárdica. Após analisarmos os átrios dos animais dos 2 grupos, percebemos que houve uma distribuição homogênea, independente da presença de fator quimiotático no grupo dos animais infartados e que as células foram capazes de sair do e

Culture of swine cardiomyocites / Cultivo de cardiomiócitos suínos

Cardiac insufficiency is one of the most harmful disease in the occidental world; A range of researches have been developed in order to provide new and more efficient therapeutics for the disease. New therapeutics purposes have been directed to the origin of the pathological process and aim to re-establish functional physiology, as in transplants of cells like smooth or striated muscular cells, fetal or adult cardiomyocytes into the fibroid myocardium. In this study, previous published protocols developed in rats and mice were adapted for swine cardiomyocytes. The main goal was to stablish a viable protocol for swine cardiomiocyte culture, and the establishment of an experimental model using swine. Three protocols were tested (A - enzimatic digestion in adult heart; B- enzimatic digestion in fetal heart; C - explant of samples of adult and fetal hearts. We observed that protocol B produced a reliable result suggesting cardiac fibre formation, although, further immunecitochemistry and ultrastrucutural will be investigated to confirm the hypothesis. Keywords: Cell culture, heart, swine cardiomyocites.

A insuficiência cardíaca é uma das doenças mais deletérias no mundo ocidental. Muitas pesquisas foram desenvolvidas com o intuito de promover novos e mais eficientes abordagens terapêuticas para a doença. Estas novas propostas terapeuticas tem ênfase nas origens dos processos patológicos e no re-estabelecimento da funcionalidade, tal como nos transplantes de células lisas ou estriadas musculares, de cardiomiócitos fetais e adultos no tecido cardíaco fibrosado. Neste estudo, protocolos desenvolvidos e testados em ratos e camundongos e previamente publicados foram adaptados para cardiomiócitos suínos, objetivando estabelecer um protocolo para cultivo de cardiomiócitos em suínos. Três protocolos foram testados (A- digestão enzimática em coração de adulto, B- digestão enzimática em coração fetal e C- explante de coração adulto e fetal) e apenas um produziu resultados confiáveis (protocolo B) sugerindo a formação de fibras cardíacas, no entanto, faz-se necessária avaliação imunocitoquímica e análises ultraestruturais para a confirmação da hipótese. Palavras-chave - Cultivo celular, coração, cardiomiócitos suínos.

Evaluation of the cerebral arteriography technique guided for fluoroscopy in swine / Avaliação da técnica de arteriografia cerebral guiada por fluoroscopia em suínos

The cerebral arteriography is a radiologic exam for demonstration of arterial vascularization using an injection of positive contrast for visualization of blood supply. In this research six pigs were submitted to cerebral arteriography under general anesthesia and with the assistant of fluoroscopy the femoral artery was catheterized until the carotid common right artery using contrast under selective form. The aim of this work was to analyze this technique as a complementary method in cases of suspect of alterations of blood flow. This technique shows be effective to obtain nithid images and to determinate the cerebral irrigation. Keywords: Cerebral arteriography, swine, fluoroscopy.

A arteriografia cerebral é um exame radiológico demonstrativo da vascularização arterial por meio de injeção de solução de contraste radio-positivo possibilitando adequada visualização da vascularização sanguínea. Neste experimento seis suínos foram submetidos à arteriografia cerebral, sob anestesia geral e com auxílio de fluoroscópio, a artéria femoral foi cateterizada e um guia foi direcionado à artéria carótida comum direita de forma seletiva por meio de contraste. Este trabalho teve como objetivo avaliar esta técnica como método complementar ao exame radiográfico simples em casos de suspeita de alteração do fluxo sangüíneo. A técnica mostrou-se efetiva para a obtenção de imagens nítidas e determinação da área de irrigação cerebral. Palavras-Chave: Arteriografia cerebral, suínos, fluoroscopia.

Use of the haemostatic gelatin sponge for development of the acute myocardium infarct in swine / USO DE ESPONJA HEMOSTÁTICA DE GELATINA PARA O DESENVOLVIMENTO DE INFARTO AGUDO DO MIOCÁRDIO EM SUÍNOS

The acute infarction of myocardium results of the temporary blockage of coronary with reduction of blood for part of the myocardium, some minutes of interruption of the sanguineous flow are sufficient for the establishment of injury. Was catheterized the distal portion of the origin of the first diagonal branch of coronary interventricular left artery from two swine and a solution of haemostatic gelatin sponge was infused. After a period of 21 days the animals had been euthanized and the heart was processed for light microscopy, show an expressive scar in the apical region of the left ventricle in an animal whereas in the other, the injury was located in the left ventricular wall, and with lesser extension. It was possible also to observe the presence of areas not pertaining to the infarction region, with great collagen deposit, suggesting a heterogeneous process. In such a way, we can conclude that this technique is not interesting for the development of acute experimental model of infarction of the myocardium. Keywords: Acute myocardial infarct, animal model, gelatin haemostatic sponge.

O infarto agudo do miocárdio resulta da obstrução temporária de uma coronária com redução de sangue para parte do miocárdio, bastando alguns minutos de interrupção do fluxo sanguíneo para estabelecer a injúria. Foi cateterizado a porção distal da origem do 1 ramo diagonal da artéria coronária interventricular esquerda de dois suínos e infundida solução de esponja hemostática de gelatina. Pós um período de 21 dias os animais foram eutanasiados e o coração foi processado para microscopia de luz, revelando expressiva cicatriz na região apical do ventrículo esquerdo em um animal enquanto que no outro, a lesão estava localizada na parede ventricular esquerda, e com menor extensão. Foi possível observar também a presença de áreas não pertencentes à região infartada, com grande depósito de colágeno, sugerindo um processo bastante heterogêneo. Desta forma, podemos concluir que esta técnica não é interessante para o desenvolvimento de modelo experimental de infarto agudo do miocárdio. Palavras-Chave: Infarto agudo do miocárdio, modelo animal, esponja de gelatina hemostática.

Evaluation of the cerebral arteriography technique guided for fluoroscopy in swine / AVALIAÇÃO DA TÉCNICA DE ARTERIOGRAFIA CEREBRAL GUIADA POR FLUOROSCOPIA EM SUÍNOS

The cerebral arteriography is a radiologic exam for demonstration of arterial vascularization using an injection of positive contrast for visualization of blood supply. In this research six pigs were submitted to cerebral arteriography under general anesthesia and with the assistant of fluoroscopy the femoral artery was catheterized until the carotid common right artery using contrast under selective form. The aim of this work was to analyze this technique as a complementary method in cases of suspect of alterations of blood flow. This technique shows be effective to obtain nithid images and to determinate the cerebral irrigation. Keywords: Cerebral arteriography, swine, fluoroscopy.

A arteriografia cerebral é um exame radiológico demonstrativo da vascularização arterial por meio de injeção de solução de contraste radio-positivo possibilitando adequada visualização da vascularização sanguínea. Neste experimento seis suínos foram submetidos à arteriografia cerebral, sob anestesia geral e com auxílio de fluoroscópio, a artéria femoral foi cateterizada e um guia foi direcionado à artéria carótida comum direita de forma seletiva por meio de contraste. Este trabalho teve como objetivo avaliar esta técnica como método complementar ao exame radiográfico simples em casos de suspeita de alteração do fluxo sangüíneo. A técnica mostrou-se efetiva para a obtenção de imagens nítidas e determinação da área de irrigação cerebral. Palavras-Chave: Arteriografia cerebral, suínos, fluoroscopia.

Culture of swine cardiomyocites / CULTIVO DE CARDIOMIÓCITOS SUÍNOS

Cardiac insufficiency is one of the most harmful disease in the occidental world; A range of researches have been developed in order to provide new and more efficient therapeutics for the disease. New therapeutics purposes have been directed to the origin of the pathological process and aim to re-establish functional physiology, as in transplants of cells like smooth or striated muscular cells, fetal or adult cardiomyocytes into the fibroid myocardium. In this study, previous published protocols developed in rats and mice were adapted for swine cardiomyocytes. The main goal was to stablish a viable protocol for swine cardiomiocyte culture, and the establishment of an experimental model using swine. Three protocols were tested (A - enzimatic digestion in adult heart; B- enzimatic digestion in fetal heart; C - explant of samples of adult and fetal hearts. We observed that protocol B produced a reliable result suggesting cardiac fibre formation, although, further immunecitochemistry and ultrastrucutural will be investigated to confirm the hypothesis. Keywords: Cell culture, heart, swine cardiomyocites.

A insuficiência cardíaca é uma das doenças mais deletérias no mundo ocidental. Muitas pesquisas foram desenvolvidas com o intuito de promover novos e mais eficientes abordagens terapêuticas para a doença. Estas novas propostas terapeuticas tem ênfase nas origens dos processos patológicos e no re-estabelecimento da funcionalidade, tal como nos transplantes de células lisas ou estriadas musculares, de cardiomiócitos fetais e adultos no tecido cardíaco fibrosado. Neste estudo, protocolos desenvolvidos e testados em ratos e camundongos e previamente publicados foram adaptados para cardiomiócitos suínos, objetivando estabelecer um protocolo para cultivo de cardiomiócitos em suínos. Três protocolos foram testados (A- digestão enzimática em coração de adulto, B- digestão enzimática em coração fetal e C- explante de coração adulto e fetal) e apenas um produziu resultados confiáveis (protocolo B) sugerindo a formação de fibras cardíacas, no entanto, faz-se necessária avaliação imunocitoquímica e análises ultraestruturais para a confirmação da hipótese. Palavras-chave - Cultivo celular, coração, cardiomiócitos suínos.

Atrial quantification of bone marrow mononuclear cells (BMMC) infusioned by intrapericardic route in swine submitted to myocardial infarction / QUANTIFICAÇÃO ATRIAL DE CÉLULAS MONONUCLEARES DE MEDULA ÓSSEA (CMMO) INFUNDIDAS VIA INTRAPERICÁRDICA EM SUÍNOS SUBMETIDOS A INFARTO AGUDO DO MIOCÁRDIO

In the last decades, the regenerative medicine have been applied and investigated worldwide due to the stem cell therapy, which has shown high capacity of differentiation into a diverse cell lineage, restoring damaged tissues. In this study we applied bone marrow, which contains adult stem cells, hematopoietic and mesenchimal lineages. Mesenchimal lineage belongs to the mononuclear cell group that among its function, have demonstrated capacity for cardiac remodeling after ischemic processes and, can be introduced into the heart by infusion techniques like intrapericardic technique which has been investigated lately. In this study we investigated the application of intrapericardic technique for mononuclear cell infusion in swine induced to myocardial infarction. We used 6 female swine, averaging 25 kg distributed into control group (3 animals) and experimental group (3 animals), which animal were induced to infarction and received mononuclear cell infusion by intrapericardic technique. Control group received only mononuclear cell infusion by the same technique in normal heart. Mononuclear cells were obtained by Ficoll density and were stained by Hoescht fluorocrome. Atria analysis in both groups revealed a homogeneous distribution of the infusioned cells in the atria with no significant difference, p>0.01 between control and experimental group. Keywords: Cell therapy, rote i

Nas últimas décadas a medicina regenerativa tem se destacado em todo o mundo, graças ao surgimento da terapia com células-tronco, as quais tem grande capacidade de diferenciação em diversos tipos de linhagens celulares, reconstruindo tecidos lesados. A medula óssea, fonte das células utilizadas nesse estudo, contém células-tronco adultas, hematopoiéticas e mesenquimais, pertencentes ao grupo de células mononucleares, que dentre outras funções, são capazes de levar ao remodelamento cardíaco pós processo isquêmico, e para tanto, podem ser introduzidas no coração sob algumas vias de infusão, sendo que a mais recentemente estudada foi a via intrapericárdica, a qual foi eleita para o desenvolvimento deste estudo, sendo utilizados 6 suínos, fêmeas, com média de peso de 25Kg, divididos em 2 grupos: 3 animais induzidos ao infarto agudo do miocárdio e tratados com células mononucleares de medula óssea, e 3 animais que apenas receberam as mesmas células, porém não foram induzidos ao infarto (animais controle). As células mononucleares da medula óssea foram coletadas e separadas por densidade Ficoll, marcadas com fluorocromo Hoechst® e infundidas via intrapericárdica. Após analisarmos os átrios dos animais dos 2 grupos, percebemos que houve uma distribuição homogênea, independente da presença de fator quimiotático no grupo dos animais infartados e que as células foram capazes de sair do e

Modelo experimental de doença pulmonar intersticial fibrosante associado à terapia celular utilizando células mononucleares de medula óssea / Fibrotic interstitial pulmonary disease: experimental model and bone marrow mononuclear cell therapy

Doenças pulmonares intersticiais fibrosantes são doenças que afetam homens, mulheres e crianças, tem prognóstico ruim e os pacientes possuem sobrevida estimada entre 3 e 5 anos após a confirmação diagnóstica, sobretudo os portadores de Fibrose pulmonar idiopática. Estudos recentes demonstram a capacidade das células-tronco em se diferenciar em diferentes linhagens celulares e tecidos, como já comprovado em órgãos como coração, fígado, trato gastrointestinal, sistema nervoso e pulmão. Os objetivos deste trabalho foram os de estabelecer a espécie suína como modelo experimental e utilizar a terapia celular experimentalmente como possibilidade de estudo para tratamento das doenças pulmonares intersticiais fibrosantes. Para estabelecer o modelo experimental e induzir a doença nos dois grupos de animais estudados (grupos tratado e controle) foi utilizado sulfato de bleomicina pela via intratraqueal em procedimento único. Após a instalação da doença, os animais dos grupos tratado e controle foram submetidos a tomografia computadorizada de alta resolução (TCAR); um grupo tratado com terapia celular e após noventa dias os dois grupos reavaliados com TCAR antes da eutanásia, totalizando para os dois grupos, cento e oitenta dias de doença instalada. As análises tomográficas mostraram que o tempo para que a doença intersticial seja estabelecida ocorre até três meses após a infusão de bleomicina. As provas histológicas corroboram a viabilidade do modelo testado e as análises imunohistoquímicas sugerem a migração das células mononucleares de medula óssea para os pulmões, bem como a presença de populações celulares que indicam provável reestruturação do parênquima pulmonar

Fibrotic Interstitial pulmonary illnesses affect men, women and children, and presents bad prognostic, 3-5 years depending on the diagnostic confirmation, mainly in idiopathic pulmonary fibrosis. Recent studies demonstrate the capacity of the stem cells in differentiating into different cellular lineages and different tissues, as in heart, liver, gastrointestinal, nervous system and lung. The objectives of this study were to investigate the possibility to consider the swine as experimental model of fibrotic pulmonary disease and experimental stem cell therapy. Bleomycin sulphate was injected into the trachea to induce the pulmonary disease in control and treatment groups. High resolution computed scan (TCAR) was carried out in both groups after the confirmation of the disease. The tomographic analyses showed that the interstitial illness was established after three months of the bleomicine infusion. Histologic investigation revealed the viability of the tested model and the imunohistochemical analyses suggest the migration of the mononuclear cells to the lungs, as well as the presence of new cellular populations that would indicate probable reorganization of the pulmonary parenchyma