Resumo
The bacterial wilt caused by Curtobacterium flaccumfaciens pv. flaccumfaciens is currently considered one of the most important bacterial bean disease in Brazil. One of the most effective control methods against this disease is the use of healthy seeds. However, no methods are known that could be routinely used to detect this bacterium in bean seeds under Brazilian condition. The aim of this work was to evaluate qualitative and quantitative detection methods for Curtobacterium flaccumfaciens pv. flaccumfaciens in naturally-infected bean seeds, and the detection of this pathogen in thirty bean seed samples, by sowing onto a semi-selective culture medium the leachate obtained from soaked bean seeds. Both the qualitative and quantitative methods were effective for detecting the presence of the bacteria in the seeds samples analysed. The qualitative method proved more practical for rotine use; of the thirty bean seed samples analyzed by this method, fifty percent were infected with Curtobacterium flaccumfaciens pv. flaccumfaciens.
Atualmente, a murcha-de-curtobacterium, causada por Curtobacterium flaccumfaciens pv. flaccumfaciens, é considerada uma das principais doenças baterianas da cultura do feijoeiro, no Brasil. Um dos métodos eficazes de controle desta doença é o emprego de sementes sadias. Entretanto, não se tem conhecimento de métodos que possam ser utilizados em rotina para o isolamento desta bactéria em sementes de feijoeiro. O presente trabalho teve por objetivo avaliar os métodos qualitativos e quantitativos de isolamento de Curtobacterium flaccumfaciens pv. flaccumfaciens em sementes de feijoeiro naturalmente infectadas e a detecção deste patógeno em trinta amostras de sementes de feijoeiro, pela semeadura do líquido de maceração das sementes em meio de cultura semi-seletivo. Tanto o método quantitativo quanto o quantitativo foram eficazes em detectar a presença da bactéria nas amostras de sementes analisadas. O método qualitativo mostrou-se mais prático para o uso em rotina e das trinta amostras de sementes de feijoeiro analisadas por este método cinqüenta porcento delas estavam infectadas com Curtobacterium flaccumfaciens pv. flaccumfaciens.
Resumo
An experiment was carried out to evaluate the in vivo and in vitro sensibility of a Clavibacter michiganensis subsp. michiganensis isolate (Cmm) to the products kasugamicyn cloridrate, fulusulfamide and oxytetracicline. In the in vitro tests, the inhibition formed around the discs of filter papers soaked with the chemicals was evaluated, for concentrations of 0, 1, 10, 100 and 1000 mug mL-1, 24 h after the installation of the experiment. In the in vivo evaluation, two experiments were installed under greenhouse conditions, with tomato plants cv. Ângela Hiper and two methods of inoculation: leaf spray and stem injury. In both experiments, the plants were sprayed with 0.06 mL L-1 of kasugamicyn chloridrate, 0.025, 0.05 and 0.075 mL L-1 of fulusulfamide and 0.40 g L-1 of oxytetracycline, twice before and twice after the inoculations, at intervals of 5 to 7 days. The incidence of diseased leaves (inoculation by leaf spray) and the severity of the symptoms in the plants inoculated by stem injury was evaluated. The Cmm isolate was in vitro sensitive to kasugamicyn chloridrate, fulusulfamide and oxytetracycline in the respective concentrations of 1000, 100 and 10 mug mL-1. Only the oxytetracycline promoted a lower incidence of diseased leaves in the plants inoculated by leaf spray. None of the chemicals had success in the disease control (inoculation by stem injury). The fulusulfamide, in all concentrations, was toxic to the leaves of tomato plants.
O presente trabalho teve como objetivo avaliar a sensibilidade in vitro e in vivo de um isolado de Clavibacter michiganensis subsp. michiganensis (Cmm) aos produtos cloridrato de kasugamicina, fulusulfamide e oxitetraciclina. Para o teste in vitro, foram avaliados os halos de inibição formados ao redor de discos de papel de filtro umedecidos com os produtos, nas concentrações de 0, 1, 10, 100 e 1000 mig mL-1, 24 h após a instalação do ensaio. Quanto à avaliação dos produtos in vivo, dois ensaios foram instalados sob condições de casa-de-vegetação, com plantas de tomateiro cultivar Ângela Hiper, através da inoculação das plantas por dois métodos: pulverização foliar e ferimento no caule. Nos dois ensaios, as plantas foram pulverizadas com os produtos cloridrato de kasugamicina a 0,06 mL L-1, fulusulfamide a 0,025, 0,05 e 0,075 mL L-1 e oxitetraciclina a 0,40 g L-1, duas vezes antes e duas vezes após a inoculação, em intervalos médios de 5-7 dias. Foram avaliados a incidência de folíolos doentes (inoculação foliar) e a severidade dos sintomas nas plantas inoculadas por ferimento no caule. Verificou-se que o isolado de Cmm foi sensível in vitro ao cloridrato de kasugamicina, ao fulusulfamide e à oxitetraciclina, respectivamente a partir das concentrações de 1000, 100 e 10 mig mL-1. Com relação aos ensaios in vivo, apenas oxitetraciclina propiciou menor incidência de folíolos doentes nas plantas inoculadas através de pulverização foliar; nenhum produto teve êxito em controlar a doença nas plantas inoculadas por ferimento no caule. O fulusulfamide, em todas as concentrações, foi fitotóxico aos folíolos das plantas de tomateiro.
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An experiment was carried out to evaluate the in vivo and in vitro sensibility of a Clavibacter michiganensis subsp. michiganensis isolate (Cmm) to the products kasugamicyn cloridrate, fulusulfamide and oxytetracicline. In the in vitro tests, the inhibition formed around the discs of filter papers soaked with the chemicals was evaluated, for concentrations of 0, 1, 10, 100 and 1000 mug mL-1, 24 h after the installation of the experiment. In the in vivo evaluation, two experiments were installed under greenhouse conditions, with tomato plants cv. Ângela Hiper and two methods of inoculation: leaf spray and stem injury. In both experiments, the plants were sprayed with 0.06 mL L-1 of kasugamicyn chloridrate, 0.025, 0.05 and 0.075 mL L-1 of fulusulfamide and 0.40 g L-1 of oxytetracycline, twice before and twice after the inoculations, at intervals of 5 to 7 days. The incidence of diseased leaves (inoculation by leaf spray) and the severity of the symptoms in the plants inoculated by stem injury was evaluated. The Cmm isolate was in vitro sensitive to kasugamicyn chloridrate, fulusulfamide and oxytetracycline in the respective concentrations of 1000, 100 and 10 mug mL-1. Only the oxytetracycline promoted a lower incidence of diseased leaves in the plants inoculated by leaf spray. None of the chemicals had success in the disease control (inoculation by stem injury). The fulusulfamide, in all concentrations, was toxic to the leaves of tomato plants.
O presente trabalho teve como objetivo avaliar a sensibilidade in vitro e in vivo de um isolado de Clavibacter michiganensis subsp. michiganensis (Cmm) aos produtos cloridrato de kasugamicina, fulusulfamide e oxitetraciclina. Para o teste in vitro, foram avaliados os halos de inibição formados ao redor de discos de papel de filtro umedecidos com os produtos, nas concentrações de 0, 1, 10, 100 e 1000 mig mL-1, 24 h após a instalação do ensaio. Quanto à avaliação dos produtos in vivo, dois ensaios foram instalados sob condições de casa-de-vegetação, com plantas de tomateiro cultivar Ângela Hiper, através da inoculação das plantas por dois métodos: pulverização foliar e ferimento no caule. Nos dois ensaios, as plantas foram pulverizadas com os produtos cloridrato de kasugamicina a 0,06 mL L-1, fulusulfamide a 0,025, 0,05 e 0,075 mL L-1 e oxitetraciclina a 0,40 g L-1, duas vezes antes e duas vezes após a inoculação, em intervalos médios de 5-7 dias. Foram avaliados a incidência de folíolos doentes (inoculação foliar) e a severidade dos sintomas nas plantas inoculadas por ferimento no caule. Verificou-se que o isolado de Cmm foi sensível in vitro ao cloridrato de kasugamicina, ao fulusulfamide e à oxitetraciclina, respectivamente a partir das concentrações de 1000, 100 e 10 mig mL-1. Com relação aos ensaios in vivo, apenas oxitetraciclina propiciou menor incidência de folíolos doentes nas plantas inoculadas através de pulverização foliar; nenhum produto teve êxito em controlar a doença nas plantas inoculadas por ferimento no caule. O fulusulfamide, em todas as concentrações, foi fitotóxico aos folíolos das plantas de tomateiro.
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Ensaios foram conduzidos sob condições de casa-de-vegetação para avaliar o efeito de pyraclostrobin (0,0375; 0.0750 e 0,150 mL.L-1) e acibenzolar-S-methyl (ASM) (0.025 g.L-1) sobre o crestamento bacteriano comum, em folhas de feijão-vagem cultivar Bragança. Os produtos foram pulverizados em três diferentes períodos: cinco dias antes, cinco dias antes + cinco dias após e cinco dias após a inoculação dos folíolos com um isolado de Xanthomonas axonopodis pv. phaseoli. Foram determinados os teores de polifenoloxidase, peroxidase e proteínas solúveis totais em folhas inoculadas e não-inoculadas de feijão-vagem pulverizadas com pyraclostrobin (0,075 g.L-1) e ASM (0,025 g.L-1). Todas as concentrações de pyraclostrobin e ASM reduziram os valores da área abaixo da curva do progresso da doença (AUPDC) e o menor valor da AUPDC foi observado para a aplicação dos produtos cinco dias antes + cinco dias após a inoculação. Altos teores de polifenoloxidase, peroxidase e proteínas solúveis totais foram observados nas folhas pulverizadas com pyraclostobin e ASM.
Assays were done under greenhouse conditions in order to evaluate the effect of pyraclostrobin (0.0375, 0.0750 and 0.150 mL.L-1) and acibenzolar-S-methyl (ASM) (0.025 g.L-1) in common bacterial blight, using leaves of snap beans cultivar Bragança. These chemicals were sprayed at three different times: five days before; five days before + five days after; and five days after leaf inoculation with an isolate of Xanthomonas axonopodis pv. phaseoli. They were determinate the levels of polyphenoloxidase, peroxidase and total soluble proteins on inoculated and non-inoculated leaves of snap beans sprayed with pyraclostrobin (0.075 g.L-1) and ASM (0.025 g.L-1). All concentration of pyraclostrobin and ASM reduced the area under the disease progress curve (AUDPC) on leaves of snap beans, and the least AUDPC value was observed when this products were sprayed five days before + five days after inoculation. Higher levels of polyphenoloxidase, peroxidase and the total soluble proteins were observed on leaves sprayed with pyraclostrobin or ASM.
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Ensaios foram conduzidos sob condições de casa-de-vegetação para avaliar o efeito de pyraclostrobin (0,0375; 0.0750 e 0,150 mL.L-1) e acibenzolar-S-methyl (ASM) (0.025 g.L-1) sobre o crestamento bacteriano comum, em folhas de feijão-vagem cultivar Bragança. Os produtos foram pulverizados em três diferentes períodos: cinco dias antes, cinco dias antes + cinco dias após e cinco dias após a inoculação dos folíolos com um isolado de Xanthomonas axonopodis pv. phaseoli. Foram determinados os teores de polifenoloxidase, peroxidase e proteínas solúveis totais em folhas inoculadas e não-inoculadas de feijão-vagem pulverizadas com pyraclostrobin (0,075 g.L-1) e ASM (0,025 g.L-1). Todas as concentrações de pyraclostrobin e ASM reduziram os valores da área abaixo da curva do progresso da doença (AUPDC) e o menor valor da AUPDC foi observado para a aplicação dos produtos cinco dias antes + cinco dias após a inoculação. Altos teores de polifenoloxidase, peroxidase e proteínas solúveis totais foram observados nas folhas pulverizadas com pyraclostobin e ASM.
Assays were done under greenhouse conditions in order to evaluate the effect of pyraclostrobin (0.0375, 0.0750 and 0.150 mL.L-1) and acibenzolar-S-methyl (ASM) (0.025 g.L-1) in common bacterial blight, using leaves of snap beans cultivar Bragança. These chemicals were sprayed at three different times: five days before; five days before + five days after; and five days after leaf inoculation with an isolate of Xanthomonas axonopodis pv. phaseoli. They were determinate the levels of polyphenoloxidase, peroxidase and total soluble proteins on inoculated and non-inoculated leaves of snap beans sprayed with pyraclostrobin (0.075 g.L-1) and ASM (0.025 g.L-1). All concentration of pyraclostrobin and ASM reduced the area under the disease progress curve (AUDPC) on leaves of snap beans, and the least AUDPC value was observed when this products were sprayed five days before + five days after inoculation. Higher levels of polyphenoloxidase, peroxidase and the total soluble proteins were observed on leaves sprayed with pyraclostrobin or ASM.