Frequency of pathogens in routine bacteriological diagnosis in fish and their antimicrobial resistance / Frequência de patógenos na rotina de diagnóstico bacteriológico em peixes e sua resistência a antimicrobianos

Aquaculture is one of the sectors of animal husbandry with the fastest growth rate. However, the increase in the sector's production chain without proper management can result in factors that favor the development of diseases, especially infectious diseases caused by bacteria. Many factors, such as agriculture or industry resides, improper use of antibiotics in animals or humans, have contributed to increased environmental pressure and the appearance of antibiotic-resistant bacteria, while residues from these drugs can remain in the carcasses and in water a risk to public and environmental health. From that, we identified the bacterial genus/species and their bacterial resistance to antibiotics from samples received from fish disease outbreaks for bacteriosis diagnosis between January 2017 and October 2020. Isolated bacteria were subjected to the Kirby and Bauer sensitivity test for five classes of antibiotics (penicillins, fluoroquinolones, aminoglycosides, amphenicols, and tetracyclines). Of the 181 analyzed outbreaks, 232 bacteria were isolated, including Streptococcus spp., Aeromonas spp., Edwardsiella spp., Plesiomonas shigelloides, Pseudomonas aeruginosa, Chromobacterium violaceum, Flavobacterium spp., Citrobacter spp., Enterococcus spp., Vibrio spp., Enterobacter spp., Chryseobacterium meningosepticum. Of the 232 bacteria, 40 strains were classified as multidrug resistant (MDR), with Plesiomonas shigelloides, Aeromonas spp., and Edwardsiella spp. representing more than half of this number (22/total). With several bacteria demonstrating resistance to Brazilian aquaculture-legalized drugs (tetracycline and florfenicol), it is mandatory to research, not only for alternatives to the use of antibiotics, but also for other [...].

Aquicultura é um dos setores da produção animal com o mais rápido crescimento. Muitos fatores, como resíduos industriais e/ou de agricultura e o uso indevido de antibióticos em animais ou humanos têmc ontribuído para aumentar a pressão ambiental e o aparecimento de bactérias resistentes a antibióticos contribuindo para os resíduos dessas drogas permanecerem nas carcaças e na água, o que é um risco para a saúde pública / ambiental. A partir disso, foram identificados o gênero / espécie de bactérias e sua resistência bacteriana aos antibióticos de amostras recebidas de surtos de doenças em peixes para diagnóstico bacteriológico no período entre janeiro de 2017 e outubro de 2020. As bactérias isoladas foram submetidas ao teste de sensibilidade de Kirby e Bauer para cinco classes de antibióticos (penicilinas, fluoroquinolonas, aminoglicosídeos, anfenicóis e tetraciclinas). Nos 181 surtos analisados, 232 bactérias foram isoladas, sendo estas Streptococcus spp., Aeromonas spp., Edwardsiella spp., Plesiomonas shigelloides, Pseudomonas aeruginosa, Chromobacterium violaceum, Flavobacterium spp.,Citrobacter spp., Enterococcus spp., Vibrio spp., Enterobacter spp., Chryseobacterium meningosepticum dentre outras. Destas 232 bactérias, 40 cepas foram classificadas como multirresistentes (MDR), com Plesiomonas shigelloides, Aeromonas spp. e Edwardsiella spp. representando mais da metade destas (22 / total). Com várias bactérias demonstrando resistência aos medicamentos legalizados na aquicultura brasileira (tetraciclina e florfenicol), torna-se obrigatória a pesquisa, não apenas de alternativas ao uso de antibióticos, mas também de outros medicamentos eficazes contra os principais patógenos circulantes. Além disso, a vigilância sobre a ocorrência de cepas resistentes é necessária levando-se em consideração o aparecimento de bactérias zoonóticas com essa característica, tornando-se um ponto de interesse à saúde pública.

Frequency of pathogens in routine bacteriological diagnosis in fish and their antimicrobial resistance / Frequência de patógenos na rotina de diagnóstico bacteriológico em peixes e sua resistência a antimicrobianos

Aquaculture is one of the sectors of animal husbandry with the fastest growth rate. However, the increase in the sector's production chain without proper management can result in factors that favor the development of diseases, especially infectious diseases caused by bacteria. Many factors, such as agriculture or industry resides, improper use of antibiotics in animals or humans, have contributed to increased environmental pressure and the appearance of antibiotic-resistant bacteria, while residues from these drugs can remain in the carcasses and in water a risk to public and environmental health. From that, we identified the bacterial genus/species and their bacterial resistance to antibiotics from samples received from fish disease outbreaks for bacteriosis diagnosis between January 2017 and October 2020. Isolated bacteria were subjected to the Kirby and Bauer sensitivity test for five classes of antibiotics (penicillins, fluoroquinolones, aminoglycosides, amphenicols, and tetracyclines). Of the 181 analyzed outbreaks, 232 bacteria were isolated, including Streptococcus spp., Aeromonas spp., Edwardsiella spp., Plesiomonas shigelloides, Pseudomonas aeruginosa, Chromobacterium violaceum, Flavobacterium spp., Citrobacter spp., Enterococcus spp., Vibrio spp., Enterobacter spp., Chryseobacterium meningosepticum. Of the 232 bacteria, 40 strains were classified as multidrug resistant (MDR), with Plesiomonas shigelloides, Aeromonas spp., and Edwardsiella spp. representing more than half of this number (22/total). With several bacteria demonstrating resistance to Brazilian aquaculture-legalized drugs (tetracycline and florfenicol), it is mandatory to research, not only for alternatives to the use of antibiotics, but also for other drugs effective against the main circulating bacterial pathogens. In addition, vigilance over the occurrence of resistant bacteria is necessary, considering the appearance of zoonotic bacteria with multi-resistant characteristics, becoming a public health concern.(AU)

Aquicultura é um dos setores da produção animal com o mais rápido crescimento. Muitos fatores, como resíduos industriais e/ou de agricultura e o uso indevido de antibióticos em animais ou humanos têm contribuído para aumentar a pressão ambiental e o aparecimento de bactérias resistentes a antibióticos contribuindo para os resíduos dessas drogas permanecerem nas carcaças e na água, o que é um risco para a saúde pública / ambiental. A partir disso, foram identificados o gênero / espécie de bactérias e sua resistência bacteriana aos antibióticos de amostras recebidas de surtos de doenças em peixes para diagnóstico bacteriológico no período entre janeiro de 2017 e outubro de 2020. As bactérias isoladas foram submetidas ao teste de sensibilidade de Kirby e Bauer para cinco classes de antibióticos (penicilinas, fluoroquinolonas, aminoglicosídeos, anfenicóis e tetraciclinas). Nos 181 surtos analisados, 232 bactérias foram isoladas, sendo estas Streptococcus spp., Aeromonas spp., Edwardsiella spp., Plesiomonas shigelloides, Pseudomonas aeruginosa, Chromobacterium violaceum, Flavobacterium spp., Citrobacter spp., Enterococcus spp., Vibrio spp., Enterobacter spp., Chryseobacterium meningosepticum dentre outras. Destas 232 bactérias, 40 cepas foram classificadas como multirresistentes (MDR), com Plesiomonas shigelloides, Aeromonas spp. e Edwardsiella spp. representando mais da metade destas (22 / total). Com várias bactérias demonstrando resistência aos medicamentos legalizados na aquicultura brasileira (tetraciclina e florfenicol), torna-se obrigatória a pesquisa, não apenas de alternativas ao uso de antibióticos, mas também de outros medicamentos eficazes contra os principais patógenos circulantes. Além disso, a vigilância sobre a ocorrência de cepas resistentes é necessária levando-se em consideração o aparecimento de bactérias zoonóticas com essa característica, tornando-se um ponto de interesse à saúde pública.(AU)

Frequency of pathogens in routine bacteriological diagnosis in fish and their antimicrobial resistance / Frequência de patógenos na rotina de diagnóstico bacteriológico em peixes e sua resistência a antimicrobianos

Aquaculture is one of the sectors of animal husbandry with the fastest growth rate. However, the increase in the sector's production chain without proper management can result in factors that favor the development of diseases, especially infectious diseases caused by bacteria. Many factors, such as agriculture or industry resides, improper use of antibiotics in animals or humans, have contributed to increased environmental pressure and the appearance of antibiotic-resistant bacteria, while residues from these drugs can remain in the carcasses and in water a risk to public and environmental health. From that, we identified the bacterial genus/species and their bacterial resistance to antibiotics from samples received from fish disease outbreaks for bacteriosis diagnosis between January 2017 and October 2020. Isolated bacteria were subjected to the Kirby and Bauer sensitivity test for five classes of antibiotics (penicillins, fluoroquinolones, aminoglycosides, amphenicols, and tetracyclines). Of the 181 analyzed outbreaks, 232 bacteria were isolated, including Streptococcus spp., Aeromonas spp., Edwardsiella spp., Plesiomonas shigelloides, Pseudomonas aeruginosa, Chromobacterium violaceum, Flavobacterium spp., Citrobacter spp., Enterococcus spp., Vibrio spp., Enterobacter spp., Chryseobacterium meningosepticum. Of the 232 bacteria, 40 strains were classified as multidrug resistant (MDR), with Plesiomonas shigelloides, Aeromonas spp., and Edwardsiella spp. representing more than half of this number (22/total). With several bacteria demonstrating resistance to Brazilian aquaculture-legalized drugs (tetracycline and florfenicol), it is mandatory to research, not only for alternatives to the use of antibiotics, but also for other [...].(AU)

Aquicultura é um dos setores da produção animal com o mais rápido crescimento. Muitos fatores, como resíduos industriais e/ou de agricultura e o uso indevido de antibióticos em animais ou humanos têmc ontribuído para aumentar a pressão ambiental e o aparecimento de bactérias resistentes a antibióticos contribuindo para os resíduos dessas drogas permanecerem nas carcaças e na água, o que é um risco para a saúde pública / ambiental. A partir disso, foram identificados o gênero / espécie de bactérias e sua resistência bacteriana aos antibióticos de amostras recebidas de surtos de doenças em peixes para diagnóstico bacteriológico no período entre janeiro de 2017 e outubro de 2020. As bactérias isoladas foram submetidas ao teste de sensibilidade de Kirby e Bauer para cinco classes de antibióticos (penicilinas, fluoroquinolonas, aminoglicosídeos, anfenicóis e tetraciclinas). Nos 181 surtos analisados, 232 bactérias foram isoladas, sendo estas Streptococcus spp., Aeromonas spp., Edwardsiella spp., Plesiomonas shigelloides, Pseudomonas aeruginosa, Chromobacterium violaceum, Flavobacterium spp.,Citrobacter spp., Enterococcus spp., Vibrio spp., Enterobacter spp., Chryseobacterium meningosepticum dentre outras. Destas 232 bactérias, 40 cepas foram classificadas como multirresistentes (MDR), com Plesiomonas shigelloides, Aeromonas spp. e Edwardsiella spp. representando mais da metade destas (22 / total). Com várias bactérias demonstrando resistência aos medicamentos legalizados na aquicultura brasileira (tetraciclina e florfenicol), torna-se obrigatória a pesquisa, não apenas de alternativas ao uso de antibióticos, mas também de outros medicamentos eficazes contra os principais patógenos circulantes. Além disso, a vigilância sobre a ocorrência de cepas resistentes é necessária levando-se em consideração o aparecimento de bactérias zoonóticas com essa característica, tornando-se um ponto de interesse à saúde pública.(AU)

Molecular identification of Leptospira interrogans in naturally infected cows from a rural property in the border region: case report / Identificação molecular de Leptospira interrogans em vacas naturalmente infectadas de uma propriedade rural em região fronteiriça: relato de caso

The aim of this study was to investigate the antibodies and DNA of Leptospira spp. isolated from infected cattle in a small rural dairy farm in a border region between Brazil and Paraguay. Blood and urine samples were collected from 50 Holstein cows aged between 1 and 15 years. The diagnostic tests performed were microscopic serum agglutination for antibody detection and polymerase chain reaction for Leptospira spp. detection. Out of the samples analyzed, 48% were MAT positive with titers ranging from 100 to 400, and the most prevalent antibody was to the serovar Hardjo. One serum sample was amplified to 549 bp for the sec y gene, and sequencing identified it as L. interrogans. This is the first report from northwestern Paraná (PR) State of L. interrogans identification in naturally infected milk cattle. Thus, based on these results, to enhance production efficiency, new serological and molecular studies on dairy cattle from border regions are required to characterize the epidemiology of possible genotypes and their consequences in affected herds.

O objetivo deste trabalho foi pesquisar anticorpos e DNA de Leptospira spp. em uma propriedade rural leiteira de uma região fronteiriça entre Brasil e Paraguai. Foram coletadas amostras de sangue e urina de 50 animais da raça Holandesa com idade variando de um a quinze anos, de uma pequena propriedade rural de exploração leiteira em uma região de fronteira entre Brasil e Paraguai. Quanto aos diferentes diagnósticos foi utilizado a soroaglutinação microscópica para a detecção de anticorpos e também foi realizada a reação em cadeia pela polimerase para a detecção de DNA de Leptospira spp. Das amostras analisadas, 48,00% foram soro reagentes na SAM com títulos variando de 100 a 400 e o anticorpo contra o sorovar mais prevalente foi o Hardjo. Uma amostra de soro amplificou 549pb para o gene sec y, e no sequenciamento foi identificada como Leptospira interrogans. Este é o primeiro relato da região noroeste do estado do Paraná (PR) relacionado à identificação de L. interrogans de bovinos de leite naturalmente infectados e em virtude dos resultados deste trabalho são necessários novos estudos sorológicos e moleculares em criações de gado de leite de regiões fronteiriças para se caracterizar a epidemiologia dos possíveis genótipos e suas possíveis consequências nos rebanhos afetados visando sempre à eficiência da produção.

Molecular identification of Leptospira interrogans in naturally infected cows from a rural property in the border region: case report / Identificação molecular de Leptospira interrogans em vacas naturalmente infectadas de uma propriedade rural em região fronteiriça: relato de caso

The aim of this study was to investigate the antibodies and DNA of Leptospira spp. isolated from infected cattle in a small rural dairy farm in a border region between Brazil and Paraguay. Blood and urine samples were collected from 50 Holstein cows aged between 1 and 15 years. The diagnostic tests performed were microscopic serum agglutination for antibody detection and polymerase chain reaction for Leptospira spp. detection. Out of the samples analyzed, 48% were MAT positive with titers ranging from 100 to 400, and the most prevalent antibody was to the serovar Hardjo. One serum sample was amplified to 549 bp for the sec y gene, and sequencing identified it as L. interrogans. This is the first report from northwestern Paraná (PR) State of L. interrogans identification in naturally infected milk cattle. Thus, based on these results, to enhance production efficiency, new serological and molecular studies on dairy cattle from border regions are required to characterize the epidemiology of possible genotypes and their consequences in affected herds.(AU)

O objetivo deste trabalho foi pesquisar anticorpos e DNA de Leptospira spp. em uma propriedade rural leiteira de uma região fronteiriça entre Brasil e Paraguai. Foram coletadas amostras de sangue e urina de 50 animais da raça Holandesa com idade variando de um a quinze anos, de uma pequena propriedade rural de exploração leiteira em uma região de fronteira entre Brasil e Paraguai. Quanto aos diferentes diagnósticos foi utilizado a soroaglutinação microscópica para a detecção de anticorpos e também foi realizada a reação em cadeia pela polimerase para a detecção de DNA de Leptospira spp. Das amostras analisadas, 48,00% foram soro reagentes na SAM com títulos variando de 100 a 400 e o anticorpo contra o sorovar mais prevalente foi o Hardjo. Uma amostra de soro amplificou 549pb para o gene sec y, e no sequenciamento foi identificada como Leptospira interrogans. Este é o primeiro relato da região noroeste do estado do Paraná (PR) relacionado à identificação de L. interrogans de bovinos de leite naturalmente infectados e em virtude dos resultados deste trabalho são necessários novos estudos sorológicos e moleculares em criações de gado de leite de regiões fronteiriças para se caracterizar a epidemiologia dos possíveis genótipos e suas possíveis consequências nos rebanhos afetados visando sempre à eficiência da produção.(AU)

Serological and molecular findings in diagnosis of leptospirosis serovar hardjo in a dairy bovine herd / Acompanhamento sorológico e molecular do sorovar hardjo no diagnóstico de leptospirose em um rebanho bovino leiteiro

The cattle are considered hosts of the Hardjo serovar, causing economic damages due to the reproductive failures like abortions and infertility. The serovar Hardjo usually remains in the reproductive tract and also in the renal tubules where it is eliminated intermittently in the urine for months. Placental remnants, the aborted fetus and contaminated urine promote the permanence of this bacterium within the herd for years. Thus, the objective of this study was to monitor for prolonged period, cows naturally infected with Leptospira ssp. through microbiological culture, serological examination and DNA detection of the pathogen in the urine. The dairy herd was composed of 50 breeding cows with a history of abortion and infertility, without leptospirosis vaccine and located in the northern region of Paraná. Blood and urine samples were collected and laboratorial diagnosis were performed five times at intervals of four months. Blood samples were collected from the all 50 animals and the serum was submitted to the microscopic agglutination test (MAT) for the detection of anti-leptospira antibodies. Of the total cows, 20 showed antibody titres ≥ 1: 100 in MAT and urine samples were collected from only those animals with higher titers to perform nested-PCR (n-PCR) and bacterial isolation per culture. In addition, two urine samples from five animals with antibody titers < 1: 100 were collected in MAT for n-PCR. Serovar Hardjo wasconsidered the most frequent during the serological monitoring of the animals evaluated. The n-PCRtechnique was able to detect leptospiral DNA in the urine of animals with MAT ≥ 1: 100 antibody titersand urine from animals whose titers were < 1: 100. Sequencing of the leptospiral amplicons shared100% nucleotide sequence identity with the Leptospira interrogans species. Positive n-PCR resultsfrom animals with titers of < 1: 100 suggest that the cut-off of MAT is could be not sufficient to detectrenal carriers, so it is also important to...(AU)

Os bovinos são considerados hospedeiros do sorovar Hardjo, causando prejuízos econômicos devido aos problemas reprodutivos como abortos e infertilidade. O sorovar Hardjo costuma permanecer no trato reprodutivo e também nos túbulos renais onde é eliminado de forma intermitente na urina por meses. Restos placentários, o feto abortado e a urina contaminada favorecem a permanência dessa bactéria dentro do rebanho por anos. Assim, o objetivo deste estudo foi monitorar por período prolongado, vacas naturalmente infectadas por Leptospira ssp. através de cultura microbiológica, exame sorológico e detecção de DNA do patógeno na urina. O rebanho leiteiro estudado era constituído por 50 vacas reprodutoras com histórico de abortos e infertilidade, sem uso de vacina contra a leptospirose e localizada na região Norte do Paraná. As amostras de sangue e urina foram coletadas e submetidas a análises laboratoriais em cinco vezes em intervalos espaçados de quatro meses. As amostras de sangue foram coletadas dos 50 animais e o soro foi submetido ao teste de soroaglutinação microscópica (SAM) para detecção de anticorpos anti-leptospira. Do total vacas, 20 demonstraram títulos de anticorpos ≥ 1: 100 na SAM e foram coletadas amostras de urina apenas destes animais com maiores título para realizar a nested-PCR (n-PCR) e isolamento bacteriano por cultura. Adicionalmente, foram coletadas duas amostras de urina de cinco animais com títulos de anticorpos < 1: 100 na SAM para n-PCR. OSorovar Hardjo foi considerado como sendo o mais frequente durante o monitoramento sorológico dosanimais avaliados. A técnica de n-PCR foi capaz de detectar DNA leptospiral na urina de animais comtítulos de anticorpos ≥ 1: 100 e na urina de animais cujos títulos eram < 1:100. O sequenciamento dosamplicons leptospíricos compartilhou 100% de identidade da sequência de nucleotídeos com a espécieLeptospira interrogans. Os resultados positivos da n-PCR dos animais com títulos < 1: 100 sugerem quea...(AU)

A serological survey of agents causing leptospirosis and toxoplasmosis in Rattus rattus in the city of Umuarama, northwest Paraná, Brazil / Inquérito sorológico de agentes causadores de leptospirose e toxoplasmose em Rattus rattus da cidade de Umuarama, Noroeste do Paraná, Brasil

Synanthropic rodents, present in both urban and rural areas, are responsible for the zoonotic transmission of several diseases to humans as well as for significant economic losses. They act as reservoirs for important viral diseases, bacterial diseases such as leptospirosis, and parasitic diseases such as toxoplasmosis and leishmaniasis. The aim of the present study was to assess the seropositivity of synanthropic rodents in Umuarama city, located in the northwestern region of Paraná State, Brazil, to agents causing leptospirosis and toxoplasmosis. The microscopic agglutination technique (MAT) was used to detect anti-Leptospira antibodies, and the indirect immunofluorescence reaction (IIFR) was used to detect anti-Toxoplasma gondii antibodies. Of 178 animals collected, four (2.24%) were seropositive for Leptospira spp. and ten (5.62%) for Toxoplasma gondii. Ninety-five (53.38%) of the collected animals were male and 83 (46.62%) were female, and two (1.23%) originated from urban areas while 176 (98.87%) originated from peri-urban areas. Serological results showed that the synanthropic rodents examined here had low seroreactivity for agents causing both leptospirosis and toxoplasmosis, in both urban and peri-urban regions of Umuarama city. This could be associated with the high Human Development Index for the study area. However, preventative measures must continue to be observed, as rodents are important reservoirs for, and disseminators of, disease causing agentes.(AU)

Os roedores sinantrópicos determinam grandes prejuízos econômicos, e são responsáveis pela transmissão de várias zoonoses ao homem tanto em áreas urbanas quanto nas rurais, atuando como reservatórios de importantes doenças que incluem a leptospirose, toxoplasmose, leishmaniose e algumas de etiologia viral. O presente trabalho investigou a sororeatividade para leptospirose e toxoplasmose em roedores sinantrópicos da cidade de Umuarama, cidade localizada na região noroeste do estado do Paraná, Brasil. A técnica Soroaglutinação Microscópica (SAM) foi utilizada para a detecção de anticorpos anti-Leptospira spp e a Reação de Imunofluorescência Indireta (RIFI) para a detecção de anticorpos anti-Toxoplasma gondii. Dos 178 animais examinados, quatro (2,24%) foram reagentes para Leptospira spp. e 10 (5,62%) para o Toxoplasma gondii. Destes animais, 95 (53,38%) eram machos e 83 (46,62%) fêmeas, dois (1,23%) eram provenientes da área urbana e 176 (98,87%) da área periurbana. Os resultados obtidos demonstraram que os roedores sinantrópicos examinados apresentaram baixa freqüência de sororeatividade para as duas zoonoses investigadas, tanto na região urbana como na periurbana da cidade de Umuarama, fato que pode estar associado ao alto Índice de Desenvolvimento Humano encontrado, contudo, as medidas preventivas devem ser mantidas, pois os roedores são importantes elos na cadeia epidemiológica das doenças analisadas.(AU)

Cross-sectional study of Leptospira spp. and Brucela abortus in goat herds from Paraná state, Brazil

Background: Leptospirosis and brucellosis are zoonosis worldwide distributed that have great economic importance, especially in goats. This study aimed to carry out a cross-sectional study to determine the prevalence of anti-Leptospira spp. and anti-Brucella abortus antibodies and to determine epidemiological variables associated to infection by these ethiological agents in goats. Materials, Methods & Results: Serum samples were collected from 1055 goats of 95 properties distributed in 18 regional centers of Paraná State from April to August of 2010. Collected samples were submitted to microscopic agglutination test (MAT) for the detection of anti-Leptospira spp. antibodies with 22 reference serovars: Australis, Bratislava, Autumnalis, Butembo, Castellonis, Bataviae, Canicola, Fortbragg, Whitcombi, Cynopteri, Grippotyphosa, Hebdomadis, Copenhageni, Icterohaemorrhagiae, Panama, Pomona, Pyrogenes, Hardjo, Wolffi, Shermani, Tarassovi and Londrina 1 (L1). The samples were also submitted to buffered acidified plate antigen test (BAPA) and 2-mercaptoethanol test (2-ME) to detect anti-Brucella abortus antibodies. The results obtained from epidemiological and serological study were analysed by Epi Info 3.5.3. We observed 9.9% (104/1055) of goats reagents in at least one serovar of Leptospira spp. and no reagent animal to Brucella abortus. The variables that were statistically [...](AU)

Cross-sectional study of Leptospira spp. and Brucela abortus in goat herds from Paraná state, Brazil

Background: Leptospirosis and brucellosis are zoonosis worldwide distributed that have great economic importance, especially in goats. This study aimed to carry out a cross-sectional study to determine the prevalence of anti-Leptospira spp. and anti-Brucella abortus antibodies and to determine epidemiological variables associated to infection by these ethiological agents in goats. Materials, Methods & Results: Serum samples were collected from 1055 goats of 95 properties distributed in 18 regional centers of Paraná State from April to August of 2010. Collected samples were submitted to microscopic agglutination test (MAT) for the detection of anti-Leptospira spp. antibodies with 22 reference serovars: Australis, Bratislava, Autumnalis, Butembo, Castellonis, Bataviae, Canicola, Fortbragg, Whitcombi, Cynopteri, Grippotyphosa, Hebdomadis, Copenhageni, Icterohaemorrhagiae, Panama, Pomona, Pyrogenes, Hardjo, Wolffi, Shermani, Tarassovi and Londrina 1 (L1). The samples were also submitted to buffered acidified plate antigen test (BAPA) and 2-mercaptoethanol test (2-ME) to detect anti-Brucella abortus antibodies. The results obtained from epidemiological and serological study were analysed by Epi Info 3.5.3. We observed 9.9% (104/1055) of goats reagents in at least one serovar of Leptospira spp. and no reagent animal to Brucella abortus. The variables that were statistically [...]

Leptospirosis and brucellosis seroepidemiology in sheep and dogs from non-mechanized rural properties in the northwestern region in the state of Paraná / Soroepidemiologia da leptospirose e brucelose em ovinos e cães de propriedades rurais não tecnificadas da região noroeste do estado do Paraná

Sheep breeding has been important in agribusiness, transforming the Brazilian productive scenario. However, it is still deficient due to the damages caused by infectious diseases. Leptospirosis is a severe disease with global distribution, caused by bacteria from the Leptospira genre affecting both humans and animals. The general infection is unapparent, or its clinical signs, when present, are similar to other infections. Brucellosis is an infectious disease caused by bacteria from the Brucella genre responsible for reproductive disorders in animals, especially ruminants. The purpose of this paper was to seroepidemiological study of Leptospira spp. and Brucella ovis in sheep and dogs from nonmechanized rural properties from the northwestern region in the state of Paraná, Brazil. In order to detect anti-Leptospira antibodies, microscopic agglutination (MAT) was performed. For anti-Brucella antibodies, the agar gel immunodiffusion assay (AGID) was performed. From the total 542 samples from sheep sera analyzed, 11.25% were considered reagent to Leptospira spp. and 18.26% to Brucella ovis. From the 36 dog samples, 25% were reagent to MAT and AGID. From the 32 properties analyzed, 75% were considered positive for leptospirosis and 56.25% for brucellosis. Antibodies against the most probable serovars were Hardjo (34.42%) and Butembo (44.44%) in sheep and dogs, respectively, and the variable exchange of animals among properties was associated to leptospiric infection (p=0.028) in sheep. Leptospirosis and brucellosis are present in the sheep herd and dogs in the rural properties studied, and such result is a warning of the zoonotic importance and the need to establish sanitary programs directed to these animal species.

A ovinocultura tem se destacado no agronegócio, transformando o cenário produtivo do Brasil, porém ainda possui uma deficiência devido aos danos causados por doenças infecciosas. A leptospirose é uma doença grave de distribuição mundial causada por bactérias do gênero Leptospira que afeta o homem e os animais. A infecção geralmente é inapetente, ou os sinais clínicos, quando presentes, são similares aos de outras infecções. A brucelose é uma enfermidade infecciosa causada por bactérias do gênero Brucella responsáveis por desordens reprodutivas nos animais, especialmente nos ruminantes. O objetivo deste trabalho foi realizar um estudo soroepidemiológico de Leptospira spp. e Brucella ovis ovinos e cães de propriedades rurais não tecnificadas da região noroeste do estado do Paraná, Brasil. Para detecção de anticorpos anti-Leptospira foi realizada a soroaglutinação microscópica (SAM), e para anticorpos anti-Brucella, a prova de imunodifusão em gel de ágar (IDGA). Das 542 amostras de soro ovino analisadas, foram consideradas reagentes 11,25% para Leptospira spp. e 18,26% para Brucella ovis. Das 36 amostras de cães, 25% foram regentes a SAM e IDGA. Das 32 propriedades, 75% foram consideradas positivas para leptospirose e 56,25% para brucelose. Os anticorpos contra os sorovares mais prováveis foram Hardjo (34,42%) e Butembo (44,44%) em ovinos e cães respectivamente, e a variável troca de animais entre propriedades foi associada à infecção leptospírica (p=0,028) nos ovinos. A leptospirose e a brucelose estão presentes no rebanho ovino e nos cães das propriedades rurais estudadas, e este resultado serve de alerta à sua importância zoonótica e a necessidade de estabelecer programas sanitários direcionados a esta espécie animal.

Detection of extended spectrum beta-lactamases and resistance in members of the Enterobacteriaceae family isolated from healthy sheep and dogs in Umuarama, Paraná, Brazil / Detecção de beta-lactamases de espectro estendido e resistência as quinolonas mediada por plasmídeos em membros da família Enterobacteriaceae isolados de ovinos e cães sadios de propriedades rurais da região de Umuarama, Paraná, Brasil

Bacterial resistance is a primary public health concern worldwide. Within this context, pets and breeding animals act as reservoirs for multidrug-resistant bacteria (MR), such as those producing extended spectrum beta-lactamases (ESBL) and those presenting plasmid-mediated quinolone resistance (PMQR). The aim of this study was to detect the presence of ESBL and PMQR in members of the Enterobacteriaceae family, isolated from healthy sheep and dogs from non-intense farming rural properties in the Umuarama region of Paraná, Brazil. A total of 81 oral and rectal swabs from dogs and sheep from 11 small rural properties were analyzed. These swabs were inoculated in tubes containing brain heart infusion broth (BHI), and the resulting cultures were inoculated on MacConkey agar (MAC) supplemented with 10 μg/mL cefotaxime for the selection of ESBL producers. The cells were also plated on MAC supplemented with 50 μg/mL nalidixic acid for selecting quinolone-resistant enterobacteria. The bacterial isolates were subjected to biochemical identification tests, antibiograms, double-disk synergic tests, and polymerase chain reaction analysis for resistance-inducing genes (blaESBL, qnr, and genes encoding efflux pump and acetylases). Four (5.00%) bacterial isolates (3 Escherichia coli and 1 Morganella morganii) resistant to cephalosporins and/or quinolones were identified; of these, three (75%) isolates were from sheep and one (25%) from a dog. These findings indicate the presence of MR bacteria in the normal microbiota of the animals studied. Animals colonized with such bacteria can contribute to the dissemination of antimicrobial resistance to other animals, environment, and/or human beings and can harbor endogenous infections in unfavorable conditions, which have poor prognosis due to the limited therapeutic options.(AU)

Resistência bacteriana é considerado o maior problema de saúde pública mundial da atualidade, sendo os relatos de infecções e surtos causados por bactérias multirresistentes cada vez mais frequentes na clínica veterinária e humana. Neste contexto, animais de companhia e criação podem atuar como reservatório de bactérias multirresistentes, como as produtoras de beta-lactamases de espectro estendido (ESBL) e as que apresentam resistência as quinolonas mediada por plasmídeos (PMQR). O objetivo deste trabalho foi detectar beta-lactamases de espectro estendido e resistência as quinolonas mediada por plasmídeos em membros da família Enterobacteriaceae isolados de ovinos e cães de propriedades rurais não tecnificadas da região de Umuarama, Paraná, Brasil. Foram analisados 81 swabs de cães e ovinos provenientes de 11 pequenas propriedades rurais da região de Umuarama (PR). Os swabs foram inoculados em caldo Brain Heart Infusion (BHI) e o crescimento obtivo foi em seguida semeado em placas de Petri contendo ágar MacConkey (MC) acrescido de cefotaxima 10 μg/mL para seleção de bactérias gram-negativas produtoras de ESBL; e placas contendo MC acrescido de ácido nalidíxico 50 g/mL para seleção de bactérias gram-negativas resistentes as quinolonas. Os isolados bacterianos obtidos foram submetidos a testes de antibiograma pelo método de disco-difusão em ágar, teste sinérgico do duplo-disco e reação em cadeia da polimerase (PCR) para genes que conferem resistência do tipo ESBL e para quinolonas. Dos 81 swabs coletados foi possível detectar quatro (4,97%) isolados bacterianos (3Escherichia coli e 1 Morganellamorganii) resistentes a cefalosporinas e/ou quinolonas. Destes isolados, três (75%) eram de ovinos e um (25%) de cão. Os resultados encontrados indicam a presença de cepas multirresistentes na microbiota normal dos animais estudados.[...](AU)

Leptospirosis and brucellosis seroepidemiology in sheep and dogs from non-mechanized rural properties in the northwestern region in the state of Paraná / Soroepidemiologia da leptospirose e brucelose em ovinos e cães de propriedades rurais não tecnificadas da região noroeste do estado do Paraná

Sheep breeding has been important in agribusiness, transforming the Brazilian productive scenario. However, it is still deficient due to the damages caused by infectious diseases. Leptospirosis is a severe disease with global distribution, caused by bacteria from the Leptospira genre affecting both humans and animals. The general infection is unapparent, or its clinical signs, when present, are similar to other infections. Brucellosis is an infectious disease caused by bacteria from the Brucella genre responsible for reproductive disorders in animals, especially ruminants. The purpose of this paper was to seroepidemiological study of Leptospira spp. and Brucella ovis in sheep and dogs from nonmechanized rural properties from the northwestern region in the state of Paraná, Brazil. In order to detect anti-Leptospira antibodies, microscopic agglutination (MAT) was performed. For anti-Brucella antibodies, the agar gel immunodiffusion assay (AGID) was performed. From the total 542 samples from sheep sera analyzed, 11.25% were considered reagent to Leptospira spp. and 18.26% to Brucella ovis. From the 36 dog samples, 25% were reagent to MAT and AGID. From the 32 properties analyzed, 75% were considered positive for leptospirosis and 56.25% for brucellosis. Antibodies against the most probable serovars were Hardjo (34.42%) and Butembo (44.44%) in sheep and dogs, respectively, and the variable exchange of animals among properties was associated to leptospiric infection (p=0.028) in sheep. Leptospirosis and brucellosis are present in the sheep herd and dogs in the rural properties studied, and such result is a warning of the zoonotic importance and the need to establish sanitary programs directed to these animal species.(AU)

A ovinocultura tem se destacado no agronegócio, transformando o cenário produtivo do Brasil, porém ainda possui uma deficiência devido aos danos causados por doenças infecciosas. A leptospirose é uma doença grave de distribuição mundial causada por bactérias do gênero Leptospira que afeta o homem e os animais. A infecção geralmente é inapetente, ou os sinais clínicos, quando presentes, são similares aos de outras infecções. A brucelose é uma enfermidade infecciosa causada por bactérias do gênero Brucella responsáveis por desordens reprodutivas nos animais, especialmente nos ruminantes. O objetivo deste trabalho foi realizar um estudo soroepidemiológico de Leptospira spp. e Brucella ovis ovinos e cães de propriedades rurais não tecnificadas da região noroeste do estado do Paraná, Brasil. Para detecção de anticorpos anti-Leptospira foi realizada a soroaglutinação microscópica (SAM), e para anticorpos anti-Brucella, a prova de imunodifusão em gel de ágar (IDGA). Das 542 amostras de soro ovino analisadas, foram consideradas reagentes 11,25% para Leptospira spp. e 18,26% para Brucella ovis. Das 36 amostras de cães, 25% foram regentes a SAM e IDGA. Das 32 propriedades, 75% foram consideradas positivas para leptospirose e 56,25% para brucelose. Os anticorpos contra os sorovares mais prováveis foram Hardjo (34,42%) e Butembo (44,44%) em ovinos e cães respectivamente, e a variável troca de animais entre propriedades foi associada à infecção leptospírica (p=0,028) nos ovinos. A leptospirose e a brucelose estão presentes no rebanho ovino e nos cães das propriedades rurais estudadas, e este resultado serve de alerta à sua importância zoonótica e a necessidade de estabelecer programas sanitários direcionados a esta espécie animal.(AU)

Epidemiological status of bovine leptospirosis in the State of Paraná, Brazil / Situação epidemiológica da leptospirose bovina no estado do Paraná

The objective of this study was to determine the prevalence of antibodies against Leptospira spp and their geographic distribution and to identify the risk factors associated with this disease in cattle herds with reproductive activity in the state of Paraná. A total of 14 163 females aged ≥24 months originating from 1 926 herds that were not vaccinated against Leptospira spp were evaluated. To detect the Leptospira spp antibodies, all serum samples were submitted for a microscopic serum-agglutination test (MAT). An epidemiological questionnaire was performed at each farm visited to characterize the management practices and study the risk factors associated with the presence or absence of Leptospira spp. To perform geoprocessing, the geographical coordinates of each farm were recorded with a Global Positioning System (GPS), which were then used to create a map. The apparent prevalence of bovine leptospirosis in the herds was the parameter used to generate the final risk map. The apparent prevalences of seropositivity in the herds and animals in Paraná state were 54.28%(95%CI:52.05- 56.51) and 37.70%(95%CI:34.54-40.86), respectively. Multiple logistic regression analysis revealed that the risk factors associated with leptospirosis due to any serovar were the rental of grazing areas [OR=1.91(1.36-2.68)], presence of horses [OR=1.59(1.28-1.97)], presence of > 20 females ≥ 24 months of age [OR=2.25(1.46-3.49)], presence of > 49 bovines [OR=2.78(1.82-4.26)], purchase of animals for reproduction [OR=1.96(1.59-2.41)] and presence of calving pens [OR=1.32(1.04-1.68)]. Risk factors for leptospirosis due specifically to serovar Hardjo were the presence of > 49 bovines [OR=3.05(1.94-4.80)], presence of > 20 females ≥ 24 months [OR=2.38(1.50-3.79)], presence of horses [OR=1.87(1.45-2.43)], purchase of animals for reproduction [OR=2.14(1.68-2.72)] and rental of grazing areas [OR=2.22(1.54-3.21)]. (AU)

O objetivo deste trabalho foi determinar a prevalência de anticorpos anti-Leptospira spp, sua distribuição espacial e identificar os fatores de risco associados à doença nos rebanhos bovinos com atividade reprodutiva do estado do Paraná. Foram estudadas 14.163 fêmeas com idade ≥ 24 meses, provenientes de 1.926 rebanhos não vacinados contra a leptospirose. Para detectar anticorpos contra a Leptospira spp, todos os soros foram submetidos a prova de soroaglutinação microscópica (SAM). . Em cada propriedade visitada foi aplicado um questionário epidemiológico, que permitiu a caracterização das práticas de manejo empregadas e o estudo dos fatores de risco associados com a presença ou ausência da Leptospira spp. Para o geoprocessamento, as coordenadas geográficas de cada propriedade foram obtidas por meio de aparelhos de posicionamento global por satélite (GPS), as quais foram utilizadas para a confecção do mapa. A prevalência aparente de propriedades e animais sororeagentes no estado foi de 54,28%(95%CI:52.05-56.51) e 37,70%(95%CI:34.54- 40.86), respectivamente. Na análise de regressão logística multivariada, foram identificados como fatores de risco para a infecção para qualquer sorovar de Leptospira spp: aluguel de pasto [OR=1.91(1.36-2.68)]; presença de equinos [OR=1.59(1.28-1.97)]; presença de > 20 fêmeas com idade ≥ 24 meses [OR=2.25(1.46-3.49)]; presença de > 49 bovinos [OR=2.78(1.82-4.26)]; compra de reprodutores [OR=1.96(1.59-2.41)] e presença de piquete de parição [OR=1.32(1.04-1.68)]. Os fatores de risco para a infecção pelo sorovar Hardjo foram presença de > 49 bovinos [OR=3.05(1.94- 4.80)], presença de > 20 fêmeas com idade ≥ 24 meses [OR=2.38(1.50-3.79)]; presença de equinos [OR=1.87(1.45-2.43)]; compra de reprodutores [OR=2.14(1.68-2.72)] e aluguel de pasto (O.R=2,22; I.C=1,54-3,21). [OR=2.22(1.54-3.21)]. (AU)

Epidemiological status of bovine leptospirosis in the State of Paraná, Brazil / Situação epidemiológica da leptospirose bovina no estado do Paraná

The objective of this study was to determine the prevalence of antibodies against Leptospira spp and their geographic distribution and to identify the risk factors associated with this disease in cattle herds with reproductive activity in the state of Paraná. A total of 14 163 females aged ≥24 months originating from 1 926 herds that were not vaccinated against Leptospira spp were evaluated. To detect the Leptospira spp antibodies, all serum samples were submitted for a microscopic serum-agglutination test (MAT). An epidemiological questionnaire was performed at each farm visited to characterize the management practices and study the risk factors associated with the presence or absence of Leptospira spp. To perform geoprocessing, the geographical coordinates of each farm were recorded with a Global Positioning System (GPS), which were then used to create a map. The apparent prevalence of bovine leptospirosis in the herds was the parameter used to generate the final risk map. The apparent prevalences of seropositivity in the herds and animals in Paraná state were 54.28%(95%CI:52.05- 56.51) and 37.70%(95%CI:34.54-40.86), respectively. Multiple logistic regression analysis revealed that the risk factors associated with leptospirosis due to any serovar were the rental of grazing areas [OR=1.91(1.36-2.68)], presence of horses [OR=1.59(1.28-1.97)], presence of > 20 females ≥ 24 months of age [OR=2.25(1.46-3.49)], presence of > 49 bovines [OR=2.78(1.82-4.26)], purchase of animals for reproduction [OR=1.96(1.59-2.41)] and presence of calving pens [OR=1.32(1.04-1.68)]. Risk factors for leptospirosis due specifically to serovar Hardjo were the presence of > 49 bovines [OR=3.05(1.94-4.80)], presence of > 20 females ≥ 24 months [OR=2.38(1.50-3.79)], presence of horses [OR=1.87(1.45-2.43)], purchase of animals for reproduction [OR=2.14(1.68-2.72)] and rental of grazing areas [OR=2.22(1.54-3.21)].

O objetivo deste trabalho foi determinar a prevalência de anticorpos anti-Leptospira spp, sua distribuição espacial e identificar os fatores de risco associados à doença nos rebanhos bovinos com atividade reprodutiva do estado do Paraná. Foram estudadas 14.163 fêmeas com idade ≥ 24 meses, provenientes de 1.926 rebanhos não vacinados contra a leptospirose. Para detectar anticorpos contra a Leptospira spp, todos os soros foram submetidos a prova de soroaglutinação microscópica (SAM). . Em cada propriedade visitada foi aplicado um questionário epidemiológico, que permitiu a caracterização das práticas de manejo empregadas e o estudo dos fatores de risco associados com a presença ou ausência da Leptospira spp. Para o geoprocessamento, as coordenadas geográficas de cada propriedade foram obtidas por meio de aparelhos de posicionamento global por satélite (GPS), as quais foram utilizadas para a confecção do mapa. A prevalência aparente de propriedades e animais sororeagentes no estado foi de 54,28%(95%CI:52.05-56.51) e 37,70%(95%CI:34.54- 40.86), respectivamente. Na análise de regressão logística multivariada, foram identificados como fatores de risco para a infecção para qualquer sorovar de Leptospira spp: aluguel de pasto [OR=1.91(1.36-2.68)]; presença de equinos [OR=1.59(1.28-1.97)]; presença de > 20 fêmeas com idade ≥ 24 meses [OR=2.25(1.46-3.49)]; presença de > 49 bovinos [OR=2.78(1.82-4.26)]; compra de reprodutores [OR=1.96(1.59-2.41)] e presença de piquete de parição [OR=1.32(1.04-1.68)]. Os fatores de risco para a infecção pelo sorovar Hardjo foram presença de > 49 bovinos [OR=3.05(1.94- 4.80)], presença de > 20 fêmeas com idade ≥ 24 meses [OR=2.38(1.50-3.79)]; presença de equinos [OR=1.87(1.45-2.43)]; compra de reprodutores [OR=2.14(1.68-2.72)] e aluguel de pasto (O.R=2,22; I.C=1,54-3,21). [OR=2.22(1.54-3.21)].

Serological and molecular findings in diagnosis of leptospirosis serovar hardjo in a dairy bovine herd / Acompanhamento sorológico e molecular do sorovar hardjo no diagnóstico de leptospirose em um rebanho bovino leiteiro

The cattle are considered hosts of the Hardjo serovar, causing economic damages due to the reproductive failures like abortions and infertility. The serovar Hardjo usually remains in the reproductive tract and also in the renal tubules where it is eliminated intermittently in the urine for months. Placental remnants, the aborted fetus and contaminated urine promote the permanence of this bacterium within the herd for years. Thus, the objective of this study was to monitor for prolonged period, cows naturally infected with Leptospira ssp. through microbiological culture, serological examination and DNA detection of the pathogen in the urine. The dairy herd was composed of 50 breeding cows with a history of abortion and infertility, without leptospirosis vaccine and located in the northern region of Paraná. Blood and urine samples were collected and laboratorial diagnosis were performed five times at intervals of four months. Blood samples were collected from the all 50 animals and the serum was submitted to the microscopic agglutination test (MAT) for the detection of anti-leptospira antibodies. Of the total cows, 20 showed antibody titres ≥ 1: 100 in MAT and urine samples were collected from only those animals with higher titers to perform nested-PCR (n-PCR) and bacterial isolation per culture. In addition, two urine samples from five animals with antibody titers < 1: 100 were collected in MAT for n-PCR. Serovar Hardjo wasconsidered the most frequent during the serological monitoring of the animals evaluated. The n-PCRtechnique was able to detect leptospiral DNA in the urine of animals with MAT ≥ 1: 100 antibody titersand urine from animals whose titers were < 1: 100. Sequencing of the leptospiral amplicons shared100% nucleotide sequence identity with the Leptospira interrogans species. Positive n-PCR resultsfrom animals with titers of < 1: 100 suggest that the cut-off of MAT is could be not sufficient to detectrenal carriers, so it is also important to...

Os bovinos são considerados hospedeiros do sorovar Hardjo, causando prejuízos econômicos devido aos problemas reprodutivos como abortos e infertilidade. O sorovar Hardjo costuma permanecer no trato reprodutivo e também nos túbulos renais onde é eliminado de forma intermitente na urina por meses. Restos placentários, o feto abortado e a urina contaminada favorecem a permanência dessa bactéria dentro do rebanho por anos. Assim, o objetivo deste estudo foi monitorar por período prolongado, vacas naturalmente infectadas por Leptospira ssp. através de cultura microbiológica, exame sorológico e detecção de DNA do patógeno na urina. O rebanho leiteiro estudado era constituído por 50 vacas reprodutoras com histórico de abortos e infertilidade, sem uso de vacina contra a leptospirose e localizada na região Norte do Paraná. As amostras de sangue e urina foram coletadas e submetidas a análises laboratoriais em cinco vezes em intervalos espaçados de quatro meses. As amostras de sangue foram coletadas dos 50 animais e o soro foi submetido ao teste de soroaglutinação microscópica (SAM) para detecção de anticorpos anti-leptospira. Do total vacas, 20 demonstraram títulos de anticorpos ≥ 1: 100 na SAM e foram coletadas amostras de urina apenas destes animais com maiores título para realizar a nested-PCR (n-PCR) e isolamento bacteriano por cultura. Adicionalmente, foram coletadas duas amostras de urina de cinco animais com títulos de anticorpos < 1: 100 na SAM para n-PCR. OSorovar Hardjo foi considerado como sendo o mais frequente durante o monitoramento sorológico dosanimais avaliados. A técnica de n-PCR foi capaz de detectar DNA leptospiral na urina de animais comtítulos de anticorpos ≥ 1: 100 e na urina de animais cujos títulos eram < 1:100. O sequenciamento dosamplicons leptospíricos compartilhou 100% de identidade da sequência de nucleotídeos com a espécieLeptospira interrogans. Os resultados positivos da n-PCR dos animais com títulos < 1: 100 sugerem quea...

A serological survey of agents causing leptospirosis and toxoplasmosis in Rattus rattus in the city of Umuarama, northwest Paraná, Brazil / Inquérito sorológico de agentes causadores de leptospirose e toxoplasmose em Rattus rattus da cidade de Umuarama, Noroeste do Paraná, Brasil

Synanthropic rodents, present in both urban and rural areas, are responsible for the zoonotic transmission of several diseases to humans as well as for significant economic losses. They act as reservoirs for important viral diseases, bacterial diseases such as leptospirosis, and parasitic diseases such as toxoplasmosis and leishmaniasis. The aim of the present study was to assess the seropositivity of synanthropic rodents in Umuarama city, located in the northwestern region of Paraná State, Brazil, to agents causing leptospirosis and toxoplasmosis. The microscopic agglutination technique (MAT) was used to detect anti-Leptospira antibodies, and the indirect immunofluorescence reaction (IIFR) was used to detect anti-Toxoplasma gondii antibodies. Of 178 animals collected, four (2.24%) were seropositive for Leptospira spp. and ten (5.62%) for Toxoplasma gondii. Ninety-five (53.38%) of the collected animals were male and 83 (46.62%) were female, and two (1.23%) originated from urban areas while 176 (98.87%) originated from peri-urban areas. Serological results showed that the synanthropic rodents examined here had low seroreactivity for agents causing both leptospirosis and toxoplasmosis, in both urban and peri-urban regions of Umuarama city. This could be associated with the high Human Development Index for the study area. However, preventative measures must continue to be observed, as rodents are important reservoirs for, and disseminators of, disease causing agentes.

Os roedores sinantrópicos determinam grandes prejuízos econômicos, e são responsáveis pela transmissão de várias zoonoses ao homem tanto em áreas urbanas quanto nas rurais, atuando como reservatórios de importantes doenças que incluem a leptospirose, toxoplasmose, leishmaniose e algumas de etiologia viral. O presente trabalho investigou a sororeatividade para leptospirose e toxoplasmose em roedores sinantrópicos da cidade de Umuarama, cidade localizada na região noroeste do estado do Paraná, Brasil. A técnica Soroaglutinação Microscópica (SAM) foi utilizada para a detecção de anticorpos anti-Leptospira spp e a Reação de Imunofluorescência Indireta (RIFI) para a detecção de anticorpos anti-Toxoplasma gondii. Dos 178 animais examinados, quatro (2,24%) foram reagentes para Leptospira spp. e 10 (5,62%) para o Toxoplasma gondii. Destes animais, 95 (53,38%) eram machos e 83 (46,62%) fêmeas, dois (1,23%) eram provenientes da área urbana e 176 (98,87%) da área periurbana. Os resultados obtidos demonstraram que os roedores sinantrópicos examinados apresentaram baixa freqüência de sororeatividade para as duas zoonoses investigadas, tanto na região urbana como na periurbana da cidade de Umuarama, fato que pode estar associado ao alto Índice de Desenvolvimento Humano encontrado, contudo, as medidas preventivas devem ser mantidas, pois os roedores são importantes elos na cadeia epidemiológica das doenças analisadas.

Molecular Identification of Leptospira interrogans in Naturally Infected Cows from a Rural Property in the Border Region - Case Report / Identificação molecular de Leptospira interrogans em Vacas naturalmente infectadas de uma propriedade rural em Região Fronteiriça - Relato de caso

The aim of this study was to investigate the antibodies and DNA of Leptospira spp. isolated from infected cattle in a small rural dairy farm in a border region between Brazil and Paraguay. Blood and urine samples were collected from 50 Holstein cows aged between 1 and 15 years. The diagnostic tests performed were microscopic serum agglutination for antibody detection and polymerase chain reaction for Leptospira spp. detection. Out of the samples analyzed, 48% were MAT positive with titers ranging from 100 to 400, and the most prevalent antibody was to the serovar Hardjo. One serum sample was amplified to 549 bp for the sec y gene, and sequencing identified it as L. interrogans. This is the first report from northwestern Paraná (PR) State of L. interrogans identification in naturally infected milk cattle. Thus, based on these results, to enhance production efficiency, new serological and molecular studies on dairy cattle from border regions are required to characterize the epidemiology of possible genotypes and their consequences in affected herds.

O objetivo deste trabalho foi pesquisar anticorpos e DNA de Leptospira spp. em uma propriedade rural leiteira de uma região fronteiriça entre Brasil e Paraguai. Foram coletadas amostras de sangue e urina de 50 animais da raça Holandesa com idade variando de um a quinze anos, de uma pequena propriedade rural de exploração leiteira em uma região de fronteira entre Brasil e Paraguai. Quanto aos diferentes diagnósticos foi utilizado a soroaglutinação microscópica para a detecção de anticorpos e também foi realizada a reação em cadeia pela polimerase para a detecção de DNA de Leptospira spp. Das amostras analisadas, 48,00% foram soro reagentes na SAM com títulos variando de 100 a 400 e o anticorpo contra o sorovar mais prevalente foi o Hardjo. Uma amostra de soro amplificou 549pb para o gene sec y, e no sequenciamento foi identificada como Leptospira interrogans. Este é o primeiro relato da região noroeste do estado do Paraná (PR) relacionado à identificação de L. interrogans de bovinos de leite naturalmente infectados e em virtude dos resultados deste trabalho são necessários novos estudos sorológicos e moleculares em criações de gado de leite de regiões fronteiriças para se caracterizar a epidemiologia dos possíveis genótipos e suas possíveis consequências nos rebanhos afetados visando sempre à eficiência da produção.

Molecular Identification of Leptospira interrogans in Naturally Infected Cows from a Rural Property in the Border Region - Case Report / Identificação molecular de Leptospira interrogans em Vacas naturalmente infectadas de uma propriedade rural em Região Fronteiriça - Relato de caso

The aim of this study was to investigate the antibodies and DNA of Leptospira spp. isolated from infected cattle in a small rural dairy farm in a border region between Brazil and Paraguay. Blood and urine samples were collected from 50 Holstein cows aged between 1 and 15 years. The diagnostic tests performed were microscopic serum agglutination for antibody detection and polymerase chain reaction for Leptospira spp. detection. Out of the samples analyzed, 48% were MAT positive with titers ranging from 100 to 400, and the most prevalent antibody was to the serovar Hardjo. One serum sample was amplified to 549 bp for the sec y gene, and sequencing identified it as L. interrogans. This is the first report from northwestern Paraná (PR) State of L. interrogans identification in naturally infected milk cattle. Thus, based on these results, to enhance production efficiency, new serological and molecular studies on dairy cattle from border regions are required to characterize the epidemiology of possible genotypes and their consequences in affected herds.

O objetivo deste trabalho foi pesquisar anticorpos e DNA de Leptospira spp. em uma propriedade rural leiteira de uma região fronteiriça entre Brasil e Paraguai. Foram coletadas amostras de sangue e urina de 50 animais da raça Holandesa com idade variando de um a quinze anos, de uma pequena propriedade rural de exploração leiteira em uma região de fronteira entre Brasil e Paraguai. Quanto aos diferentes diagnósticos foi utilizado a soroaglutinação microscópica para a detecção de anticorpos e também foi realizada a reação em cadeia pela polimerase para a detecção de DNA de Leptospira spp. Das amostras analisadas, 48,00% foram soro reagentes na SAM com títulos variando de 100 a 400 e o anticorpo contra o sorovar mais prevalente foi o Hardjo. Uma amostra de soro amplificou 549pb para o gene sec y, e no sequenciamento foi identificada como Leptospira interrogans. Este é o primeiro relato da região noroeste do estado do Paraná (PR) relacionado à identificação de L. interrogans de bovinos de leite naturalmente infectados e em virtude dos resultados deste trabalho são necessários novos estudos sorológicos e moleculares em criações de gado de leite de regiões fronteiriças para se caracterizar a epidemiologia dos possíveis genótipos e suas possíveis consequências nos rebanhos afetados visando sempre à eficiência da produção.