In vitro selection of autochthonous bacterium with probiotic potential for the neotropical fish piauçu Megaleporinus microcephalus / [Seleção in vitro de bactéria autóctone com potencial probiótico para o peixe neotropical piauçu Megaleporinus macrocephalus]

The study aimed to isolate, identify, and apply in vitro tests on bacteria with autochthonous probiotic potential isolated from fifteen healthy specimens of Megaleporinus macrocephalus. The strains were selected from the intestinal tract of fish and inoculated in the Petri plate containing Sharp Man Rogosa Agar (MRS) for (48 hours at 35ºC). They were isolated based on a test of catalase, Gram stain, tolerance to different gradients NaCl (1, 2 and 3%), pH (4, 5, 6, 8 and 9) values and bile salts (2.5 and 5%), in addition to the inhibition zone against pathogens. Of the 42 strains isolated, ST1 and ST9 had higher values (p<0.05) for total viable cells (31.80±0.07 and 32.51±0.05 CFU/mL × 108) respectively. In the resistance tests, strains ST1 and ST9 presented the best results, with emphasis on ST9 in the gradients of pH, high values of bile salts and larger inhibition zones against Aeromonas hydrophila and Aeromonas jandaei. The strains with the best results in the tests, ST1 and ST9, were identified by the MALDI-TOF-MS method as Enterococcus faecium. Thus, the isolated E. faecium bacteria, may be recommended as for probiotic use in farming the M. macrocephalus.

O presente estudo visou isolar, identificar e aplicar testes in vitro em bactérias com potencial probiótico, autóctones, isoladas de 15 espécimes saudáveis de Megaleporinus macrocephalus. As cepas foram selecionadas do trato intestinal dos peixes e inoculadas em placas de Petri contendo Man Rogosa Sharped Agar (MRS), por 48 horas, a 35ºC. Foram isoladas com base em teste de catalase, coloração de Gram, tolerância a diferentes gradientes de NaCl (1, 2 e 3%), valores de pH (4, 5, 6, 8 e 9) e sais biliares (2,5 e 5%), além do halo de inibição contra patógenos. Das 42 cepas isoladas, ST1 e ST9 apresentaram maiores valores (P<0,05) para células viáveis totais (31,80±0,07 e 32,51±0,05 UFC/mL × 108), respectivamente. Nos testes de resistência, as cepas ST1 e ST9 apresentaram os melhores resultados, com destaque para ST9 nos gradientes de pH, altos valores de sais biliares e maiores halos de inibição contra Aeromonas hydrophila e Aeromonas jandaei. As cepas com melhores resultados nos testes, ST1 e ST9, foram identificadas pelo método de MALDI-TOF-MS como Enterococcus faecium. Assim, a bactéria isolada Enterococcus faecium, pode ser recomendada para uso probiótico na criação do M. macrocephalus.

In vitro bacterial probiotic selection from Nannostomus beckfordi, an Amazon ornamental fish / [Seleção in vitro de bactérias probióticas do peixe ornamental Amazônico Nannostomus beckfordi]

This study aimed to isolate and select in vitro bacteria with probiotic potential for the Amazon ornamental fish Nannostomus beckfordi. For isolate, twelve fish underwent surgery procedure to remove their intestinal tract, macerate and then inoculate in the plate petri containing de Man Rugosa Sharped Agar (MRS). After bacterial growth (48 hours at 35ºC), selected strains were inoculated in MRS broth and submitted to resistance test with NaCl (0.5, 1.0, 1.5, 2.0, 2.5 and 3.0%), pH (4, 5, 6, 8 and 9) and bile salts (5% w/v). Inhibition test against pathogenic bacteria Aeromonas hydrophila, Pseudomonas aeroginosa, Streptococcus agalactiae and Aeromonas Jandaei was also performed. Within the isolated strains group (23 strains), only six (S1, S2, S3, S4, S5 and S6) showed probiotic potential. Strains S1 and S6 showed the greater resistance for NaCl (0.5% and 1%) and pH (5 and 6), but only S1 obtained better results to resist the bile salts. Even against pathogenic bacteria, the S1 showed the best results with inhibition halos greater than 9 mm. In the end, this bacterial strain (S1) was identified as Enterococcus faecium 11037CHB. Thus, this is the first report regarding isolated autochthonous bacterium E. faecium with probiotic potential of N. beckfordi.

O objetivo deste estudo foi isolar e selecionar in vitro bactérias com potencial probiótico do peixe ornamental Amazônico Nannostomus beckfordi. Para o isolamento, retirou-se o intestino de 12 espécimes, que foram macerados, homogeneizados e semeados em placa de petri contento Ágar Man Rogosa e Sharpe (MRS). Posteriormente ao crescimento bacteriano (48 horas a 35ºC), as cepas selecionadas foram mantidas em caldo MRS e submetidas a testes de resistência a NaCl (0,5, 1,0, 1,5, 2,0 e 2,5 e 3,0%), pH (4, 5, 6, 8 e 9) e sais biliares (5% p/v). O antagonismo foi realizado frente as bactérias patogênicas Aeromonas hydrophila, Pseudomonas aeroginosa, Streptococcus agalactiae e Aeromonas jandaei. Das cepas isoladas (23 cepas), apenas seis (C1, C2, C3, C4, C5 e C6) apresentaram potencial probiótico. As cepas C1 e C6 tiveram maior resistência (p<0,05) para o NaCl (0,5 e 1%) e pH (5 a 6), na presença de sais biliares somente a C1 teve a melhor resistência de crescimento. Para o antagonismo frente as bactérias patogênicas, a C1 apresentou halo de inibição maior que 9 mm. Sendo esta cepa bactéria (C1) identificada como Enterococcus faecium 11037 CHB. Portanto, este é o primeiro relato do isolamento da bactéria autóctone E. faecium em N. beckfordi com potencial probiótico.

Growth and survival of the native oyster Crassostrea gasar cultured under different stocking densities in two grow-out systems in tropical climate / [Crescimento e sobrevivência da ostra nativa Crassostrea gasar cultivada em diferentes densidades em dois sistemas em clima tropical]

Survival and growth of the native oyster Crassostrea gasar along the juvenile and adult phases were evaluated in three different stocking densities [low (D), medium (2D) and high (3D)] and in two grow-out systems (fixed and floating system). The fixed system consisted of a rack made with PVC, fixed from the bottom with wood sticks. The floating system consisted of floating bags suspended by a rack made with PVC and maintained submerged from the seawater surface by eight floats. Survival and shell height of oysters cultured after 30, 60 and 90 days were registered in each phase and in each grow-out system. Results showed that the grow-out system did not affect survival and growth of C. gasar in the juvenile and adult phases. The tested densities affected the survival of oysters cultured over time in both phases but did not affect oyster growth. At times analyzed, it was observed positive growth in juvenile oysters grow after 90 days of culture. However, in the adult phase, no growth was observed after 90 days of culture. Oyster yield was higher in the density 3D, in both juvenile and adult phases. These findings contributed to the development of the oyster C. gasar culture.(AU)

A sobrevivência e o crescimento da ostra nativa Crassostrea gasar nas fases juvenil e adulta foram avaliados sob três diferentes densidades de estocagem [baixa (D), média (2D) e alta (3D)] e dois sistemas de engorda (fixo e flutuante). O sistema fixo consistiu em uma mesa de PVC, fixada na parte inferior com varas de madeira. O sistema flutuante consistiu em travesseiros flutuantes suspensos por uma mesa de PVC e mantidas submersas da superfície da água do mar por oito flutuadores. Registraram-se sobrevivência e altura da concha de ostras cultivadas após 30, 60 e 90 dias, em cada fase (juvenil e adulta) e em cada sistema (fixo e flutuante). Os resultados mostraram que o sistema de engorda não afetou a sobrevivência e o crescimento de C. gasar nas fases juvenil e adulta. As densidades testadas afetaram a sobrevivência das ostras ao longo do tempo, em ambas as fases, mas não afetaram o crescimento em altura. Nos tempos analisados, ostras juvenis apresentaram crescimento após 90 dias de cultivo. Porém, na fase adulta, não foi observado crescimento após 90 dias de cultivo. A produção de ostras, foi maior na densidade 3D, nas fases juvenil e adulta. Os presentes achados contribuíram para o desenvolvimento do cultivo da ostra C. gasar.(AU)