Isolation of Saprolegnia aenigmatica oomycetes and protocol for experimental infection of pacu (Piaractus mesopotamicus) / Isolamento do oomiceto Saprolegnia aenigmatica e protocolo de infecção experimental em pacu (Piaractus mesopotamicus)

Successful disease treatment depends on molecular studies under indoor conditions with experimental infection protocols that facilitate understanding the disease and the drug`s efficacy. The internal transcribed spacer (ITS) region was sequenced from three isolates, which were identified as Saprolegnia aenigmatica. Subsequently, healthy fish were immunosuppressed with dexamethasone (1.2 mg kg-1) and descaled to the skin using a sharp scalpel. These individuals were isolated in individual aquariums maintained at 22°C. Individuals in one group were subcutaneously inoculated with 9,000 zoospores (DDZ treatment), a second group was exposed to oomycetes in water with three colonized baits (DDB), a third group was maintained in water without zoospores (DD), and a control group (C) consisted of healthy animals. After 48 and 96 hours, two animals from each group were euthanized for fungal reisolation. The fish from groups DD and C did not show clinical signs, and no oomycetes were isolated. The animals from the DDZ and DDB groups showed cotton-wool-like masses on the skin, and S. aenigmatica was re-isolated. Thus, for infection using zoospores or baits parasitized by S. aenigmatica, an immunosuppressor (dexamethasone) and a sharp scalpel can be used effectively to establish an experimental infection in P. mesopotamicus.

O sucesso do tratamento de uma enfermidade depende do estudo de moléculas em condições de laboratório por meio de protocolos de infecção experimental que viabilizam a compreensão da doença e da eficácia dos fármacos. Pela sequência ITS foram identificadas três cepas de Saprolegnia aenigmatica. Dessa forma, pacus sadios foram submetidos à imunossupressão com dexametasona (1,2 mg kg-1), esfoliados com auxílio de bisturi e distribuídos em aquários a 22ºC. Após este procedimento, um grupo de animais foi inoculado com 9.000 zoósporos/peixe subcutâneo (DEZ), a outro foram adicionadas três iscas colonizadas com o oomiceto na água (DEI), um terceiro grupo foi mantido sem contato com o oomiceto (DE) e um quarto grupo, de animais sadios, representaram o controle (C). Após 48 e 96h deste procedimento, foram eutanaziados animais de cada grupo para reisolamento. Os animais do grupo DE e C não apresentaram sinais clínicos e não foi reisolado o oomiceto. Porém, tanto os animais do grupo DEZ quanto como os animais do grupo DEI apresentaram micélio branco na pele e foi reisolado Saprolegnia aenigmatica. Assim, a infecção com zoósporos ou com iscas colonizadas por S. aenigmatica, com o uso de dexametasona e abrasivo epitelial são formas eficazes de infecção experimental em P. mesopotamicus.

Isolation of Saprolegnia aenigmatica oomycetes and protocol for experimental infection of pacu (Piaractus mesopotamicus) / Isolamento do oomiceto Saprolegnia aenigmatica e protocolo de infecção experimental em pacu (Piaractus mesopotamicus)

Successful disease treatment depends on molecular studies under indoor conditions with experimental infection protocols that facilitate understanding the disease and the drug`s efficacy. The internal transcribed spacer (ITS) region was sequenced from three isolates, which were identified as Saprolegnia aenigmatica. Subsequently, healthy fish were immunosuppressed with dexamethasone (1.2 mg kg-1) and descaled to the skin using a sharp scalpel. These individuals were isolated in individual aquariums maintained at 22°C. Individuals in one group were subcutaneously inoculated with 9,000 zoospores (DDZ treatment), a second group was exposed to oomycetes in water with three colonized baits (DDB), a third group was maintained in water without zoospores (DD), and a control group (C) consisted of healthy animals. After 48 and 96 hours, two animals from each group were euthanized for fungal reisolation. The fish from groups DD and C did not show clinical signs, and no oomycetes were isolated. The animals from the DDZ and DDB groups showed cotton-wool-like masses on the skin, and S. aenigmatica was re-isolated. Thus, for infection using zoospores or baits parasitized by S. aenigmatica, an immunosuppressor (dexamethasone) and a sharp scalpel can be used effectively to establish an experimental infection in P. mesopotamicus.(AU)

O sucesso do tratamento de uma enfermidade depende do estudo de moléculas em condições de laboratório por meio de protocolos de infecção experimental que viabilizam a compreensão da doença e da eficácia dos fármacos. Pela sequência ITS foram identificadas três cepas de Saprolegnia aenigmatica. Dessa forma, pacus sadios foram submetidos à imunossupressão com dexametasona (1,2 mg kg-1), esfoliados com auxílio de bisturi e distribuídos em aquários a 22ºC. Após este procedimento, um grupo de animais foi inoculado com 9.000 zoósporos/peixe subcutâneo (DEZ), a outro foram adicionadas três iscas colonizadas com o oomiceto na água (DEI), um terceiro grupo foi mantido sem contato com o oomiceto (DE) e um quarto grupo, de animais sadios, representaram o controle (C). Após 48 e 96h deste procedimento, foram eutanaziados animais de cada grupo para reisolamento. Os animais do grupo DE e C não apresentaram sinais clínicos e não foi reisolado o oomiceto. Porém, tanto os animais do grupo DEZ quanto como os animais do grupo DEI apresentaram micélio branco na pele e foi reisolado Saprolegnia aenigmatica. Assim, a infecção com zoósporos ou com iscas colonizadas por S. aenigmatica, com o uso de dexametasona e abrasivo epitelial são formas eficazes de infecção experimental em P. mesopotamicus.(AU)

Sensitivity of aquatic organisms to ethanol and its potential use as bioindicators / Sensibilidade de organismos aquaticos ao etanol e seu potencial uso como bioindicadores

The aim of this research was to evaluate the feasibility for the use of the organisms Lemna minor, Azolla caroliniana, Hyphessobrycon eques, Pomacea canaliculata and Daphnia magna as exposure bioindicators for ethanol (lethal and effective concentration 50% - LC50(I)/EC50(I)). Thus, the following concentrations were used 5.0; 10.0; 20.0; 30.0; 40.0 and 50.0 mg L-1 ethanol on L. minor; 25.0; 50.0; 75.0; 100.0; 150.0 and 200.0 mg L-1 on A. caroliniana; 0.3; 0.5; 1.0; 2.0 and 3.0 mg L-1 on H. eques; 0.05; 0.10; 0.20; 0.40 and 0.80 mg L-1 on P. canaliculata; and 40.0; 60.0; 80.0; 100.0; 120.0 and 140.0 mg L-1 on D. magna. An untreated control was also kept for all organisms, with three repetitions. The increase in the ethanol concentration elevated the electrical conductivity and decreased the water dissolved oxygen and pH. The ethanol LC50 for L. minor and A. caroliniana were 12.78 and 73.11 mg L-1, respectively, and was classified as slightly toxic; 1.22 mg L-1 for H. eques (moderately toxic); 0.39 mg L-1 for P. canaliculata (highly toxic) and 98.85 mg L-1 for D. magna (slightly toxic). Thus, H. eques and P. canaliculata have showed good potential for the use as ethanol exposure bioindicators on water bodies.(AU)

O objetivo deste estudo foi avaliar a viabilidade do uso dos organismos teste Lemna minor, Azolla caroliniana, Hyphessobrycon eques, Pomacea canaliculata e Daphnia magna como bioindicadores de exposição ao etanol (concentração letal e efetiva 50% - CL50(I)/CE50(I)). Assim, foram utilizadas as seguintes concentrações: 5,0; 10,0; 20,0; 30,0; 40,0 e 50,0 mg L-1 de etanol para L. minor; 25,0; 50,0; 75,0; 100,0; 150,0 e 200,0 mg L-1 (A. caroliniana); 0,3; 0,5; 1,0; 2,0 e 3,0 mg L-1 (H. eques); 0,05; 0,10; 0,20; 0,40 e 0,80 mg L-1 (P. canaliculata) e 40,0; 60,0; 80,0; 100,0; 120,0 e 140,0 mg L-1 para D. magna, todos com controle em triplicata. O aumento da concentração do etanol elevou a condutividade elétrica e diminuiu o oxigênio dissolvido e o pH da água. A CL50 do etanol para as macrófitas L. minor e A. caroliniana foi 12,78 e 73,11 mg L-1, respectivamente, sendo classificado como ligeiramente tóxico; para o H. eques, foi de 1,22 mg L-1 (moderadamente tóxico); 0,39 mg L-1 para o P. canaliculata (altamente tóxico) e 98,85 mg L-1 para D. magna (ligeiramente tóxico). Assim, o H. eques e o P. canaliculata apresentaram potencial para uso como organismos bioindicadores de exposição do etanol em corpos hídricos.(AU)

Histopathological evaluation of seven Amazon species of freshwater ornamental armored catfish / Avaliação histopatológica em sete especies de cascudos ornamentais amazônicos

Fish commonly known as acaris or plecos are freshwater armored catfish economically important as a food resource and as ornamental fish. Most of these species are captured in the Amazon region. However, despite its economic importance, there is a lack of knowledge about their biological aspects. Thus, this study aimed to characterize and evaluate the histopathological aspects of important organs as gills, liver, integument and kidney of seven species of armored freshwater ornamental catfish fromGuamáRiver,Pará State,Brazil. All organs showed typical characteristics of organs of other teleosts. In some species, gills and liver showed slight histopathological changes: telangiectasis, edema and morphological changes related to the presence of parasites (Monogenea and Digenea) in the gills, and changes in the arrangement of hepatocytes rows, and vacuolation of hepatocytes in the liver. Thus, the knowledge of the normal structure of organs and changes found can be used as tools for environmental and health monitoring of animals.(AU)

Os peixes conhecidos como Acaris ou Cascudos são siluriformes de água doce com o corpo revestido por placas ósseas, economicamente importantes como fonte de alimento e peixes ornamentais. A maioria destas espécies é capturada na região amazônica. Contudo, apesar de sua importância econômica, há desconhecimento sobre os aspectos biológicos desses peixes. Assim, o objetivo deste trabalho foi caracterizar e avaliar histologicamente órgãos importantes (brânquias, fígado, rim e tegumento) de sete espécies de peixes ornamentais de água doce do rio Guamá, Pará, Brasil. Todos os órgãos observados apresentaram as características típicas dos órgãos de teleósteos. Em algumas espécies, as brânquias e o fígado mostraram pequenas alterações histopatológicas: edema, telangiectasias e alterações morfológicas relacionadas com a presença de parasitas (Monogenea e Digenea) nas brânquias, e modificações no arranjo de linhas de cordões de hepatócitos e vacuolização destas células foram também observadas. Assim, o conhecimento da estrutura dos órgãos e as alterações encontradas podem ser utilizados como ferramentas para o monitoramento ambiental e sanitário dos animais.(AU)

Copper sulfate acute ecotoxicity and environmental risk for tropical fish / Ecotoxicidade aguda e risco ambiental do sultado de cobre para peixes tropicais

The aim of this study was to estimate copper sulfate acute toxicity and to determine death percentage and environmental risk on guppy fish (Phallocerus caudimaculatus), zebrafish (Brachydanio rerio), mato grosso (Hyphessobrycon eques), and pacu (Piaractus mesopotamicus). Fish were exposed to 0.01, 0.03, 0.05, 0.07, 0.10, and 0.30 mg L-1 (guppy), 0.05, 0.07, 0.10, and 0.30 mg L-1 (zebrafish), 0.07, 0.10, 0.20, and 0.30 mg L-1 (mato grosso) and 9.5, 10.0, 10.5, 11.0, 11.5, and 12.0 mg L-1 (pacu) of copper sulfate, with triplicate control. The estimated 50% average lethal concentrations (LC50; 96 hours) were 0.05 (guppy), 0.13 (zebrafish); 0.16 (mato grosso) and 10.36 mg L-1 (pacu). Copper sulfate was extremely toxic for guppy, highly toxic for zebrafish and mato grosso and lightly toxic for pacu and presents environmental risk of high adverse effects on the guppy, zebrafish and mato grosso and moderate adverse effect to the pacu. Therefore, the guppy fish, zebrafish, and mato grosso are important alternatives for copper sulfate toxicity evaluation in waterbodies.(AU)

O objetivo deste estudo foi estimar a toxicidade aguda, determinar a porcentagem de mortalidade e o risco ambiental do sulfato de cobre para o peixe guaru (Phallocerus caudimaculatus), zebrafish (Brachydanio rerio), mato grosso (Hyphessobryconeques) e pacu (Piaractus mesopotamicus). Para realização dos ensaios com sulfato de cobre foram utilizados: 0,01; 0,03; 0,05; 0,07; 0,10 e 0,30 mg L-1 (guaru), 0,05; 0,07; 0,10 e 0,30 mg L-1 (paulistinha), 0,07; 0,10; 0,20 e 0,30 mg L-1 (mato grosso) e 9,5; 10,0; 10,5; 11,0; 11,5 e 12,0 mg L-1 (pacu) como controle em triplicata. A concentração letal média 50% (CL50; 96h) estimada para o guaru foi de 0,05, para o paulistinha foi de 0,13 para o mato grosso foi de 0,16 e para o pacu foi de 10,36 mg L-1. O sulfato de cobre foi classificado como extremamente tóxico para o guaru, altamente tóxico para o paulistinha e mato grosso e ligeiramente tóxico para o pacu e apresenta risco ambiental de elevado efeito adverso para o guaru, paulistinha e mato grosso e moderado efeito adverso para o pacu. Assim, conclui-se que o guaru, paulistinha e mato grosso são importantes alternativas para avaliação da toxicidade do sulfato de cobre em corpos hídricos.(AU)

Histologia do fígado de tilápia do Nilo (Oreochromis niloticus) alimentados com dietas contendo silagem biológica de pescado / Histology liver in Nile tilapia (Oreochromis niloticus) fed diets with fish silage

Este estudo teve como objetivo avaliar as possíveis alterações histopatológicas hepática de tilápias do Nilo alimentadas com dietas contendo silagem biológica de pescado com diferentes concentrações protéicas. Foram utilizados 180 juvenis alimentados com dietas contendo três níveis de proteína (20, 24 and 28% PB), e duas proporções de silagem biológica (» e ½) durante 75 dias. Os fragementos de fígado foram fixados em Bouin e inclusos em Histosec®. Posteriorente foram cortados em microtomo com espessura de 2 a 5µm. O método utilizado para coloração foi hematoxilina/eosina e PAS. Os cortes histológicos foram analisados em microscopio de luz. O desarranjo na morfologia do fígado dos peixes alimentados com silagem biológica foi influenciado pelos altos níveis protéicos, e pelo aumento ½ de proporções de proteínas de origem animal das dietas. Foi observado que a variação dos hepatócitos está diretamente ligada com o tipo da dieta fornecida para os peixes. Nos peixes alimentados com as dietas contendo 28% PB, o fígado apresentou desarranjo da estrutura cordonal dos hepatócitos, pontos de necrose e deslocamento do núcleo para periferia. Níveis elevados de silagem biológica de pescado provoca alterações deletérias no fígado. O nível de proteína adequado para manter o desenvolvimento associado à saúde do peixe é de 24%PB.(AU)

This study aimed to evaluate possible histopathological liver of tilapia fed diets containing fish silage and level protein. Sample of 180 fed with tilapia fingerlings fed with diets containing three protein levels (20, 24 and 28% CP), and Proportions residue fermented silage of tilapia (» and ½) of were analyzed during 75 days. The tissue fragments were fixed in Bouin and included in Histosec®. After that, between 2 to 5µm slices were done in a rotation microtome. The methods used for tissue analysis were hematoxilin/eosin and PAS. The histological slices were examined under light microscope (Olympus BX-50). The disarray in the morphology of the liver of fish fed biological silage was influenced by high protein levels, and increased proportions of ½ of animal protein diets. It was observed that the variation of hepatocytes is directly related to the type of diet for fish. In fish fed diets containing 28% CP, the liver showed disruption of the structure cordon of hepatocytes, necrosis and shifting points of the core to the periphery. Elevated levels of biological fish silage cause deleterious changes in the liver. The level of protein required to maintain the health of the associated development fish is 24% crude protein.(AU)

Bioindicadores neotropicais de ecotoxicidade e risco ambiental de fármacos de interesse para aquicultura / Neotropical bioindicators of ecotoxicity and environmental risk of drugs with aquaculture interest

The aims of this research were to evaluate the acute toxicity (LC/EC50) and the environmental risk of toltrazuril (TOL) and florfenicol (FFC) for plant Lemna minor, snail Pomacea canalicuta, fish Piaractus mesopotamicus and Hyphessobrycon eques and the microcrustace an Daphnia magna. The organisms were acclimated in room bioassay with controlled temperature according to standard to each one. They were exposed at nominal concentrations in static system. For environmental risk (RQ) was used the estimated environmental concentration (EEC) that is the dosage indicate to treatment and the lethal or effective concentration (LC/CE50) from each drug in acute exposure. FFC showed LC50; 7d of 97.03 mg L-1 for L. minor; >100.0 mg L-1 for P. mesopotamicus and H. eques and EC50; 48h > 100.0 mg L-1 for P. canaliculata and D. magna, and it was classified low risk (RQ =0.01) for all bioindicators. TOL howed LC50; 7d >100.0 mg L-1 for L. minor, 3.72 mg L-1 for P. mesopotamicus; 6.22 mg L-1 for H. eques and CE50;48h of 7.59 mg L-1 for P. canaliculata and 18.57mg L-1 for D. magna, and it was classified low risk (RQ = 0.01) for L. minor and high risk for P. mesopotamicus (RQ= 2.68), H. eques (RQ= 6.22), P. canaliculata (RQ= 1.31)and D. magna (RQ=0.53). Lemnaminor was the bioindicator indicating of FFC toxicity and H. eques, bioindicator of the TOL. FFC is safety however and the use of TOL necessaries cautions to treat the wastewaterbefore discard on the environment.(AU)

Os objetivos deste estudo foram avaliar a toxicidade aguda(CL/CE50)e o risco ambientaldo toltrazuril (TOL) e doflorfenicol(FFC)paraa planta aquática Lemna minor,o caramujo Pomacea canalicuta,os peixes Piaractus mesopotamicuseHyphessobrycon equeseo microcrustáceo Daphnia magna.Os organismos foram aclimatados em salas de bioensaiode acordo com as normas vigentes para cada organismo. Estesforam expostos àsconcentrações nominaisem sistema estático. Para a avaliação do risco ambiental (RQ) foiutilizadaa concentração ambiental estimada (CAE),concentraçãoindicada para tratamentoe a concentração letal ou efetiva (CL/CE50) de cada fármacoem exposição aguda.OFFC apresentouCL50;7dde97,03 mgL-1para L. minor; >100,0mgL-1 para P. mesopotamicuse H. equeseCE50;48h > 100,0mgL-1para P. canaliculatae paraD. magna, e causabaixo risco (RQ = 0,01)para os bioindicadores.O TOL apresentou CL50;7d >100,0mgL-1para L. minor, 3,72 mgL-1para P. mesopotamicus;6,22 mg L-1para o H. equese CE50;48h de 7,59 mgL-1para P. canaliculatae 18,57 mgL-1 para D. magna,ecausabaixo risco (RQ =0,01)para L. minore alto risco para P. mesopotamicus(RQ= 2,68); para H. eques (RQ= 6,22), para P. canaliculata(RQ= 1,31)epara D. magna(RQ= 0,53). Lemnaminoré o melhor bioindicador da toxicidade do FFC e H. eques,bioindicador do TOL. O FFC é seguropara uso na aquicultura, porém oTOL causa risco para os bioindicadores.(AU)

Bioindicadores neotropicais de ecotoxicidade e risco ambiental de fármacos de interesse para aquicultura / Neotropical bioindicators of ecotoxicity and environmental risk of drugs with aquaculture interest

The aims of this research were to evaluate the acute toxicity (LC/EC50) and the environmental risk of toltrazuril (TOL) and florfenicol (FFC) for plant Lemna minor, snail Pomacea canalicuta, fish Piaractus mesopotamicus and Hyphessobrycon eques and the microcrustace an Daphnia magna. The organisms were acclimated in room bioassay with controlled temperature according to standard to each one. They were exposed at nominal concentrations in static system. For environmental risk (RQ) was used the estimated environmental concentration (EEC) that is the dosage indicate to treatment and the lethal or effective concentration (LC/CE50) from each drug in acute exposure. FFC showed LC50; 7d of 97.03 mg L-1 for L. minor; >100.0 mg L-1 for P. mesopotamicus and H. eques and EC50; 48h > 100.0 mg L-1 for P. canaliculata and D. magna, and it was classified low risk (RQ =0.01) for all bioindicators. TOL howed LC50; 7d >100.0 mg L-1 for L. minor, 3.72 mg L-1 for P. mesopotamicus; 6.22 mg L-1 for H. eques and CE50;48h of 7.59 mg L-1 for P. canaliculata and 18.57mg L-1 for D. magna, and it was classified low risk (RQ = 0.01) for L. minor and high risk for P. mesopotamicus (RQ= 2.68), H. eques (RQ= 6.22), P. canaliculata (RQ= 1.31)and D. magna (RQ=0.53). Lemnaminor was the bioindicator indicating of FFC toxicity and H. eques, bioindicator of the TOL. FFC is safety however and the use of TOL necessaries cautions to treat the wastewaterbefore discard on the environment.

Os objetivos deste estudo foram avaliar a toxicidade aguda(CL/CE50)e o risco ambientaldo toltrazuril (TOL) e doflorfenicol(FFC)paraa planta aquática Lemna minor,o caramujo Pomacea canalicuta,os peixes Piaractus mesopotamicuseHyphessobrycon equeseo microcrustáceo Daphnia magna.Os organismos foram aclimatados em salas de bioensaiode acordo com as normas vigentes para cada organismo. Estesforam expostos àsconcentrações nominaisem sistema estático. Para a avaliação do risco ambiental (RQ) foiutilizadaa concentração ambiental estimada (CAE),concentraçãoindicada para tratamentoe a concentração letal ou efetiva (CL/CE50) de cada fármacoem exposição aguda.OFFC apresentouCL50;7dde97,03 mgL-1para L. minor; >100,0mgL-1 para P. mesopotamicuse H. equeseCE50;48h > 100,0mgL-1para P. canaliculatae paraD. magna, e causabaixo risco (RQ = 0,01)para os bioindicadores.O TOL apresentou CL50;7d >100,0mgL-1para L. minor, 3,72 mgL-1para P. mesopotamicus;6,22 mg L-1para o H. equese CE50;48h de 7,59 mgL-1para P. canaliculatae 18,57 mgL-1 para D. magna,ecausabaixo risco (RQ =0,01)para L. minore alto risco para P. mesopotamicus(RQ= 2,68); para H. eques (RQ= 6,22), para P. canaliculata(RQ= 1,31)epara D. magna(RQ= 0,53). Lemnaminoré o melhor bioindicador da toxicidade do FFC e H. eques,bioindicador do TOL. O FFC é seguropara uso na aquicultura, porém oTOL causa risco para os bioindicadores.

Efeitos tóxicos de surfactantes fitossanitários para o peixe matogrosso (Hyphessobrycon eques) / Toxic effects of phytosanitary surfactants for jewel tetra(Hyphessobrycon eques)

Os surfactantes são moléculas anfipáticas que reduzem a tensão superficial daágua e fazem parte dos componentes inertes das formulações de produtos fitossanitários.Assim, os objetivos deste trabalho foram: estimar a concentração letal (CL(I)(50;96h));classificar e avaliar a qualidade da água durante os testes de toxicidade aguda dossurfactantes: Agral®, Aterbane® BR, Ag-Bem®, Energic®, Fixade® e Gotafix® para o peixemato grosso (Hyphessobrycon eques); e os sinais de intoxicação nos animais. Para tanto, ospeixes foram aclimatados por dez dias em sala de bioensaio. Os animais foram expostos aossurfactantes em DIC com três repetições. A CL(I)(50;96h) do surfactante Agral® foi 3,29mg L-1; do Aterbane® BR, 8,21 mg L-1; do Energic®, 2,34 mg L-1; do Gotafix®, 4,37 mg L-1;do Fixade®, 3,38 mg L-1 e do Ag-Bem®, 34,95 mg L-1. As variáveis de qualidade da água nãoforam alteradas. Os peixes apresentaram aumento do batimento opercular após a exposição;4 e 24h, perda da capacidade de arfagem; 48h, batimento opercular lento e 72 e 96h,recuperação. Os surfactantes Energic®, Agral®, Gotafix®, Aterbane® BR e Fixade® podem serclassificados como moderadamente tóxicos e o Ag-Bem® como pouco tóxico para H. eques e esteorganismo apresenta sinais de intoxicação semelhantes para todos os surfactantes.(AU)

Surfactants are amphipatic molecules that reduce the surfacetension of water and make up the inert components of pesticide formulations. Thus, theobjectives of this study were: to estimate the lethal concentration (LC(I)50;96h); classifyand evaluate water quality during testing of the following surfactants: Agral®, Aterbane®BR,Ag-bem®, Energic®, Fixade® and Gotafix® for jewel tetra (Hyphessobrycon eques); and thesigns of intoxication in the animals. For this, the fish were acclimated for ten days in thebioassay room. The animals were exposed to the surfactants in an entirely randomizeddesign with three replications. The LC(I)(50;96h) of surfactant Agral® was 3.29 mg L-1;Aterbane® BR 8.21 mg L-1; Energic® 2.34 mg L-1; Gotafix® 4.37 mg L-1; Fixade® 3.38 mg L-1;and Ag-bem® 34.95 mg L-1. The variables of water quality were unchanged. The fishshowed an increase in the opercular beating after exposure; 4 and 24 hours, loss of gaspingability; 48 hours, slow opercular beating; and 72 and 96 hours later, recovery. Thesurfactants Energic®, Agral®, Gotafix®, Aterbane® BR and Fixade® can be classified asmoderately toxics, and Ag-Bem® as slightly toxic for H. eques; this organism shows similarintoxication signs for all surfactants.(AU)

Histologia e histoquímica do intestino anterior de tilápia do Nilo (Oreochromis niloticus) alimentadas com dietas contendo silagem de peixe / Histology and histochemical the medium intestine in Nile tilapia (Oreochromis niloticus) fed diets with fish silage

O objetivo deste trabalho foi avaliar a histologia e a histoquímica do intestino anterior de tilápia do Nilo alimentadas com dietas contendo farinha de peixe ou silagem de peixe como fonte de proteína de origem animal. A espessura da vilosidade intestinal dos peixes alimentados com silagem fermentada de resíduo de tilápia foi influenciada pelos teores proteicos, independente das proporções de proteína de origem animal das dietas. Observou-se que a variação da intensidade de secreção de glicoproteínas pelas células caliciformes está diretamente ligada com o tipo de dieta fornecida aos animais. O intestino médio de Oreochromis niloticus apresentou diferenças no padrão de secreção de muco glicoproteico neutro, glicoproteínas ácidas e glicoconjugados, dependendo da origem da proteína e da porcentagem utilizada na dieta, demonstrando que esta espécie pode adaptar seu sistema de secreção para a proteção do aparelho digestório durante a absorção de diferentes fontes proteicas.(AU)

This work was carried out to evaluate the action of the fermented fish silage and fish meal in the histochemical of the middle intestine of O. niloticus. A great epithelium intestinal was present in fishes fed with fish silage, independent of the animal origin protein proportions in diets. It was observed that the variation of the goblet cells secretion glicoproteic intensity is linked directly to the diet supplied to animals. The middle intestine of Oreochromis niloticus showed differences in the neutral mucus glicoproteic, acid glicoproteic and glicoconjugated secretion pattern, depending on the protein origin and the percentage used in the diet, demonstrating that this species can adapt its secretion system for the protection of the digesting apparatus during the absorption of different protein sources.(AU)

Análise de efluente e histologia da pele, fígado e rim de pacus (Piaractus mesopotamicus) suplementados com cromo trivalente / Analysis of effluents and histology of skin, liver and kidney the of pacus (Piaractus mesopotamicus) supplemented with trivalent chromium

O objetivo do trabalho foi avaliar histologicamente a pele, o fígado e o rim de pacus jovens submetidos à alimentação suplementada com cromo trivalente e avaliar a presença de resíduo de cromo na água efluente. Para tanto, foram utilizados pacus com peso médio de 100 g distribuídos num delineamento inteiramente casualizado (DIC), em esquema fatorial 4x2, sendo quatro níveis de cromo (0, 6, 12, 18 mg/L), duas densidades de estocagem (4 e 20 kg/m3), com quatro repetições, durante 90 dias. Histologicamente ocorreu aumento do número de células caliciformes e células clava na epiderme dos pacus suplementados com 18 mg de cromo/kg, em qualquer densidade de estocagem. No fígado observou-se o mesmo efeito da alta densidade que ocorreu na epiderme, sendo que na densidade mais alta (20 kg/m3) as alterações já ocorreram no nível de 6 mg/kg de inclusão de cromo, inicialmente com congestão do sinusóide e agravando no nível de 18 mg/kg com necrose. O rim não apresentou alterações morfológicas visíveis quando suplementados e submetidos às densidades de estocagem. Porém, a concentração de cromo no efluente produzido estava abaixo do recomendado pelas normas brasileiras. Assim, podemos concluir que o nível de 18 mg/kg de suplementação não se mostrou benéfico e que a densidade de estocagem devido ao possível estresse provocado, acelera o processo de alteração histológica dos tecidos.(AU)

The objective of this work was to evaluate the skin, liver and kidney histology of young pacus supplemented in diet with trivalent chromium and to evaluate the residue of chromium in water effluent.

Randomised delineation byusing factorial scheme 4x2, with four levels of chromium (0, 6, 12, 18 mg/L), two stocking densities (4 and 20 kg/m3), and four repetitions were used. Pacus with 100 g were used, for 90 days. An increase of the number of mucus cells and club cells in the epidermis of the pacus supplemented with 18 chromium mg/kg was observed in any stocking density. The same effect was observed in the liver, and in the highest density(20 kg/m3) the alterations already occurred at the level of 6 mg/kg with the inclusion of chromium, initially with congestion of sinusoids and getting worse at the level of 18 mg/kg with necrosis. The kidneydidnt present visible morphologic alterations when supplemented and submitted to the stocking densities. The concentration of chromium in the effluent of pacus was 3.27 μg/L in the higher level of supplementation (18 mg/L). In conclusion the level of 18 supplement mg/kg was not shown beneficial to the growth of pacus and the stocking density, due to the possible stress, accelerated the alteration histologyprocess of tissues.(AU)

Análise de efluente e histologia da pele, fígado e rim de pacus (Piaractus mesopotamicus) suplementados com cromo trivalente / Analysis of effluents and histology of skin, liver and kidney the of pacus (Piaractus mesopotamicus) supplemented with trivalent chromium

O objetivo do trabalho foi avaliar histologicamente a pele, o fígado e o rim de pacus jovens submetidos à alimentação suplementada com cromo trivalente e avaliar a presença de resíduo de cromo na água efluente. Para tanto, foram utilizados pacus com peso médio de 100 g distribuídos num delineamento inteiramente casualizado (DIC), em esquema fatorial 4x2, sendo quatro níveis de cromo (0, 6, 12, 18 mg/L), duas densidades de estocagem (4 e 20 kg/m3), com quatro repetições, durante 90 dias. Histologicamente ocorreu aumento do número de células caliciformes e células clava na epiderme dos pacus suplementados com 18 mg de cromo/kg, em qualquer densidade de estocagem. No fígado observou-se o mesmo efeito da alta densidade que ocorreu na epiderme, sendo que na densidade mais alta (20 kg/m3) as alterações já ocorreram no nível de 6 mg/kg de inclusão de cromo, inicialmente com congestão do sinusóide e agravando no nível de 18 mg/kg com necrose. O rim não apresentou alterações morfológicas visíveis quando suplementados e submetidos às densidades de estocagem. Porém, a concentração de cromo no efluente produzido estava abaixo do recomendado pelas normas brasileiras. Assim, podemos concluir que o nível de 18 mg/kg de suplementação não se mostrou benéfico e que a densidade de estocagem devido ao possível estresse provocado, acelera o processo de alteração histológica dos tecidos.

The objective of this work was to evaluate the skin, liver and kidney histology of young pacus supplemented in diet with trivalent chromium and to evaluate the residue of chromium in water effluent.

Randomised delineation byusing factorial scheme 4x2, with four levels of chromium (0, 6, 12, 18 mg/L), two stocking densities (4 and 20 kg/m3), and four repetitions were used. Pacus with 100 g were used, for 90 days. An increase of the number of mucus cells and club cells in the epidermis of the pacus supplemented with 18 chromium mg/kg was observed in any stocking density. The same effect was observed in the liver, and in the highest density(20 kg/m3) the alterations already occurred at the level of 6 mg/kg with the inclusion of chromium, initially with congestion of sinusoids and getting worse at the level of 18 mg/kg with necrosis. The kidneydidn’t present visible morphologic alterations when supplemented and submitted to the stocking densities. The concentration of chromium in the effluent of pacus was 3.27 μg/L in the higher level of supplementation (18 mg/L). In conclusion the level of 18 supplement mg/kg was not shown beneficial to the growth of pacus and the stocking density, due to the possible stress, accelerated the alteration histologyprocess of tissues.

Eficácia do paration metílico e do extrato aquoso de folhas secas de Nim no controle de Anacanthorus penilabiatus (Monogenoidea) em Pacu (Piaractus mesopotamicus) / Efficacy of the methyl parathion and the aqueous extract of dry Neem leaves in the control of Anacanthorus penilabiatus (Monogenoidea) In pacu (Piaractus mesopotamicus)

O objetivo do trabalho foi avaliar a eficácia do inseticida paration metílico e do pesticida natural azadiractina contido no extrato aquoso de folhas secas de nim (EAFSN) no controle do Anacanthorus penilabiatus (Monogenoidea) em pacu (Piaractus mesopotamicus). A eficácia do paration metílico foi avaliada em um experimento com seis tratamentos (0,0; 3,0; 4,0; 5,0; 6,0; e 7,0 mg de paration metílico/L de água) e cinco tempos de exposição (2; 4; 8; 16; e 24h). A eficácia da azadiractina contida no EAFSN foi avaliada em um experimento com sete tratamentos (0,0; 25; 50; 75; 100; 125; e 150 mL de extrato aquoso de nim/L) e cinco tempos de exposição (24; 48; 72; 96; e 120h). A eficácia do paration metílico foi maior com o aumento da concentração e do tempo de exposição. No tratamento com 7 mg/L de paration metílico ocorreu a maior eficácia de controle em todos os tempos de exposição. Neste tratamento, as maiores eficácias ocorreram nos tempos de 16 e 24 horas de exposição, com 96,2 e 97,0% de controle. Para o EAFSN, a maior eficácia de controle (89,2%) foi com a concentração de 2,9 mg/L, após 120h de exposição. A eficácia nos tratamentos com 1,47 mg/L foi de 83,9% de controle e com 1,18 mg/L, 82,5% após 120h de exposição. O paration metílico apresentou maior eficácia de controle do A. penilabiatus que o EAFSN. O EAFSN foi moderadamente efetivo no controle do parasito.(AU)

This work determined the efficacy of the insecticide methyl parathion and the natural pesticide azadirachtin present in the aqueous extract of dry neem leaves (AEDNL) to Anacanthorus penilabiatus (Monogenoidea) control in pacu (Piaractus mesopotamicus). The efficacy of methyl parathion was evaluated in an experiment consisting of six treatments (0.0, 3.0, 4.0, 5.0, 6.0 and 7.0 mg methyl parathion/L water) and five exposure times (2, 4, 8, 16 and 24 h). The efficacy of azadirachtin present in AEDNL was assessed in an experiment consisting of seven treatments (0,0; 25; 50; 75; 100; 125; e 150 mL/L water) and five exposure times (24, 48, 72, 96 and 120 h). The efficacy of methyl parathion increased with increasing concentration and exposure time. The highest control efficacy was obtained with a concentration of 7 mg methyl parathion/L at all exposure times. In this treatment, the highest efficacies were observed at 16 and 24 h of exposure, with a control rate of 96.2 and 97.0%, respectively. For the AEDNL, the highest control efficacy (89.2%) was obtained with a concentration of 2.9 mg/L after 120 h of exposure. The efficacy in the treatments employing 1.47 and 1.18 mg/L was 83.9 and 82.5%, respectively, after 120 h of exposure. Methyl parathion presented a higher efficacy in the control of A. penilabiatus than the AEDNL. The AEDNL was moderately effective in the control of the parasite.(AU)

Eficácia do paration metílico e do extrato aquoso de folhas secas de Nim no controle de Anacanthorus penilabiatus (Monogenoidea) em Pacu (Piaractus mesopotamicus) / Efficacy of the methyl parathion and the aqueous extract of dry Neem leaves in the control of Anacanthorus penilabiatus (Monogenoidea) In pacu (Piaractus mesopotamicus)

O objetivo do trabalho foi avaliar a eficácia do inseticida paration metílico e do pesticida natural azadiractina contido no extrato aquoso de folhas secas de nim (EAFSN) no controle do Anacanthorus penilabiatus (Monogenoidea) em pacu (Piaractus mesopotamicus). A eficácia do paration metílico foi avaliada em um experimento com seis tratamentos (0,0; 3,0; 4,0; 5,0; 6,0; e 7,0 mg de paration metílico/L de água) e cinco tempos de exposição (2; 4; 8; 16; e 24h). A eficácia da azadiractina contida no EAFSN foi avaliada em um experimento com sete tratamentos (0,0; 25; 50; 75; 100; 125; e 150 mL de extrato aquoso de nim/L) e cinco tempos de exposição (24; 48; 72; 96; e 120h). A eficácia do paration metílico foi maior com o aumento da concentração e do tempo de exposição. No tratamento com 7 mg/L de paration metílico ocorreu a maior eficácia de controle em todos os tempos de exposição. Neste tratamento, as maiores eficácias ocorreram nos tempos de 16 e 24 horas de exposição, com 96,2 e 97,0% de controle. Para o EAFSN, a maior eficácia de controle (89,2%) foi com a concentração de 2,9 mg/L, após 120h de exposição. A eficácia nos tratamentos com 1,47 mg/L foi de 83,9% de controle e com 1,18 mg/L, 82,5% após 120h de exposição. O paration metílico apresentou maior eficácia de controle do A. penilabiatus que o EAFSN. O EAFSN foi moderadamente efetivo no controle do parasito.

This work determined the efficacy of the insecticide methyl parathion and the natural pesticide azadirachtin present in the aqueous extract of dry neem leaves (AEDNL) to Anacanthorus penilabiatus (Monogenoidea) control in pacu (Piaractus mesopotamicus). The efficacy of methyl parathion was evaluated in an experiment consisting of six treatments (0.0, 3.0, 4.0, 5.0, 6.0 and 7.0 mg methyl parathion/L water) and five exposure times (2, 4, 8, 16 and 24 h). The efficacy of azadirachtin present in AEDNL was assessed in an experiment consisting of seven treatments (0,0; 25; 50; 75; 100; 125; e 150 mL/L water) and five exposure times (24, 48, 72, 96 and 120 h). The efficacy of methyl parathion increased with increasing concentration and exposure time. The highest control efficacy was obtained with a concentration of 7 mg methyl parathion/L at all exposure times. In this treatment, the highest efficacies were observed at 16 and 24 h of exposure, with a control rate of 96.2 and 97.0%, respectively. For the AEDNL, the highest control efficacy (89.2%) was obtained with a concentration of 2.9 mg/L after 120 h of exposure. The efficacy in the treatments employing 1.47 and 1.18 mg/L was 83.9 and 82.5%, respectively, after 120 h of exposure. Methyl parathion presented a higher efficacy in the control of A. penilabiatus than the AEDNL. The AEDNL was moderately effective in the control of the parasite.

Structural and ultrastructural characteristics of the spermatogenesis of the grey armored catfish Liposarcus anisitsi (Holmberg, 1893) (Teleostei, Siluriformes) / Características estruturais e ultraestruturais da espermatogênese do cascudo-cinza Liposarcus anisitsi (Holmberg, 1893) (Teleostei, Siluriformes)

Liposarcus anisitsi é um teleósteo de água doce da ordem Siluriforme, com fertilização externa, possui um processo de espematogênese cística com estrutura espermatogonial lobular irrestrita dos testículos. Nesta espécie, a espermatogônia primária intracística ou isolada é considerada como a stem cell da linhagem espermatogenética. Então, como consequência do processo da espermatogênese cística de Liposarcus anisitsi todas as três células germinativas são observadas no interior de cistos espermatogenéticos específicos, desde as espermatogônias primárias e secundárias até os espermatócitos e espermátides jovens e maduras. A espermatogônia possui forma esférica, com núcleo central e grande quantidade de mitocôndrias redondas e retículo endoplasmático, principalmente do tipo rugoso, em seu citoplasma. Os espermatócitos primários se inter-relacionam através de pontes citoplasmáticas e são claramente identificados pela presença de complexos sinaptonêmicos no interior de seus núcleos. Espermátides jovens no início da fase maturacional, tanto quanto as espermátides maduras tendem a exibir núcleos esféricos, um modelo variável de progressiva condensação cromatínica durante o estágio final da espermiogênese. Nestes estágios finais, as espermátides maduras mostra uma fossa nuclear formada para a fixação do flagelo. O espermatozóide de Liposarcus anisitsi possui cabeça redonda, núcleo redondo, cromatina densa, ausência de acrossoma, curta peça intermediária e longa cauda (peças principal e terminal do flagelo). (AU)

Structural features of the epididymal region of the domestic duck (Anas plathyrynchos) / Características estruturais da região epididimária do pato doméstico (Anas plathyrynchos)

The epididymal region of the domestic duck is composed by efferent ductules, whose histotopology was characterized by the proximal and distal ductules and sequentially by the epididymal duct. The epithelial lining of the efferent ductules was ciliated pseudostratified and formed by columnar cells. Also the ducts epididymidis epithelium was pseudostratified but non-ciliated. Concerning the histomorphometric analysis, the epithelial height mean was significantly greater in the distal efferent ductules, differing from the lower epithelium height mean observed in proximal efferent ductules and epididymal duct. The maximum and minimum diameter mean were significantly greater in the proximal efferent ductules, comparatively to the same diameter means of the other ductules. (AU)

A região epididimária do pato doméstico era composta pelos ductúlos eferentes, os quais hitotopologicamente foram caracterizados como dúctulos eferentes proximal e distal e, sequencialmente, pelo ducto epididimal. O epitélio dos dúctulos eferentes era pseudo-estratificado, formado por células colunares. O epitélio dos ductos epididimários mostrou-se também pseudo-estratificado, mas não ciliado. De acordo com as análises histomorfométricas, a média da altura epitelial foi significativamente maior nos dútulos esferentes distais, diferindo das baixas médias de altura epitelial observadas nos dúctulos eferentes proximais e ducto epididimal. A média dos diâmetros máximos e mínimos foi significativamente maior nos dúctulos eferentes proximais, comparativamente as médias dos mesmos diâmetros dos outros dúctulos. (AU)

Características morfológicas do miocárdio ventricular de Tambaqui (Colossoma macropomun; Characidae, Cuvier, 1818) / Morphological characteristics of the ventricular myocardium of Tambaqui (Colossoma macropomun; Characidae, Cuvier, 1818)

O Colossoma macropomun, peixe teleósteo com hábito natatório intenso, apresentou ventrículo cardíaco com forma piramidal e miocárdio com estrutura mista, sendo formada por uma camada compacta externa e outra esponjosa interna. Esta estrutura bilaminar diferenciada, atualmente, tem sido correlacionada com o hábito natatório e com a morfologia ventricular.(AU)

The neotropical teleost fish Colossoma macropomun an active swimming species showed cardiac ventricle with pyramidal shape and myocardium with mixed structure. The myocardium presented an outer compact layer and an inner spongy layer whose particular bilaminar structure hitherto has been correlated to swimmer habit as well as to ventricular shape.(AU)