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1.
Anim. Reprod. (Online) ; 20(1): e20220076, 2023. tab, graf
Artigo em Inglês | VETINDEX | ID: biblio-1418557

Resumo

The establishment of epigenetic marks during the reprogramming window is susceptible to environmental influences, and stimuli during this critical stage can cause altered DNA methylation in offspring. In a previous study, we found that low levels of sulphur and cobalt (low S/Co) in the diet offered to oocyte donors altered the DNA methylome of bovine embryos. However, due to the extensive epigenetic reprogramming that occurs during embryogenesis, we hypothesized that the different methylation regions (DMRs) identified in the blastocysts may not maintain in adulthood. Here, we aimed to characterize DMRs previously identified in embryos, in the blood and sperm of adult progenies of two groups of heifers (low S/Co and control). We used six bulls and characterized the DNA methylation levels of KDM2A, KDM5A, KMT2D, and DOT1L genes. Our results showed that all DMRs analysed in both groups and tissues were hypermethylated unlike that noticed in the embryonic methylome profiles. These results suggest that embryo DMRs were reprogrammed during the final stages of de novo methylation during embryogenesis or later in development. Therefore, due to the highly dynamic epigenetic state during early embryonic development, we suggest that is essential to validate the DMRs found in embryos in adult individuals.(AU)


Assuntos
Animais , Bovinos/embriologia , Epigenômica
2.
Semina Ci. agr. ; 36(supl.2): 4365-4376, 2015.
Artigo em Inglês | VETINDEX | ID: vti-27152

Resumo

A variety of laboratory tests were developed to obtain more reliable results of sperm evaluation and increase the accuracy of sperm fertility predictions. These tests detected damage of sperm specific compartments or organelles, which cannot be detected in routine sperm analysis. The use of fluorescent probes and detection using fluorescent microscopy or flow cytometry is an important tool but a more precise and accurate laboratory test is needed. Propidium iodide and 6-carboxyfluorescein diacetate are used for evaluations of plasmatic membrane integrity. Fluorescein isothiocyanate, associated with conjugated lecithin Psium sativum or Arachis hypogaea, are used for evaluations of acrosome integrity. Two probes, MitoTracker or Rhodamine123, are generally used to measure the absence or presence of mitochondrial potential. However, a better option is 5,5; 6,6 - tetrachloro - 1,1; 3,3 -tetraetilbenzimidazolil-carbocyanine (JC-1) dye, which assesses not only the presence of mitochondrial potential and distinguished spermatozoa with poorly and highly functional mitochondria. Two techniques, TUNEL or COMETA, and the Acridine Orange Test (AOT) dye are used to evaluate chromatin integrity. A fluorescence technique based on chlortetracycline (CTC) or Merocyanine 540 is used to estimate whether sperm pass by or through the capacitation process. This review focuses on the fluorescent probes that are most widely used to evaluate plasma membrane integrity, capacitation, acrosome integrity, chromatin integrity and mitochondrial potential.(AU)


Diversos testes laboratoriais têm sido desenvolvidos com o intuito de obter resultados confiáveis nas avaliações espermáticas, aumentando a qualidade e a confiabilidade do sêmen utilizado em técnicas de reprodução assistida. Esses testes têm permitido detectar danos em compartimentos e organelas específicas da célula espermática, que não são detectados nas análises de rotina. Dentre esses testes, o uso de sondas fluorescentes e sua detecção em microscópio de epifluorescência ou citometria de fluxo se tornaram ferramenta importante quando uma avaliação mais acurada é necessária. Para a avaliação da integridade de membrana plasmática, pode ser utilizado o iodeto de propídio, associado ao diacetato de 6-carboxifluoresceína. As avaliações de integridade acrossomal podem ser feitas através do isotiocianato de fluoresceína, associado às lecitinas conjugadas, como a Psium sativum ou Arachis hypogaea. O potencial mitocondrial pode ser avaliado quanto à ausência ou presença através da sonda Mitotracker ou Rodamina 123. Outra opção ainda melhor pode ser observada utilizando o corante iodeto de 5,5; 6,6 tetracloro 1,1; 3,3 tetraetilbenzimidazolil-carbocianina (JC-1), este corante avalia a presença do potencial mitocondrial e avalia quanto à classificação do grau. Para avaliar a integridade de cromatina, pode ser empregado o uso de duas técnicas conhecidas como TUNEL ou COMETA, ou pode ser utilizado o corante Acridine Orange Test (AOT). Para avaliar se o espermatozoide está passando ou passou pelo processo de capacitação, pode ser utilizada a técnica de fluorescência a base de clortetraciclina, o CTC, quelante do cálcio, ou a Merocianina 540. Esta revisão enfatiza as principais sondas fluorescentes disponíveis para avaliar a integridade de membrana plasmática, capacitação, integridade acrossomal, integridade da cromatina, e potencial mitocondrial.(AU)


Assuntos
Animais , Corantes Fluorescentes/análise , Análise do Sêmen/veterinária , Criopreservação
3.
Semina ciênc. agrar ; 36(supl.2): 4365-4376, 2015.
Artigo em Inglês | VETINDEX | ID: biblio-1500198

Resumo

A variety of laboratory tests were developed to obtain more reliable results of sperm evaluation and increase the accuracy of sperm fertility predictions. These tests detected damage of sperm specific compartments or organelles, which cannot be detected in routine sperm analysis. The use of fluorescent probes and detection using fluorescent microscopy or flow cytometry is an important tool but a more precise and accurate laboratory test is needed. Propidium iodide and 6-carboxyfluorescein diacetate are used for evaluations of plasmatic membrane integrity. Fluorescein isothiocyanate, associated with conjugated lecithin Psium sativum or Arachis hypogaea, are used for evaluations of acrosome integrity. Two probes, MitoTracker or Rhodamine123, are generally used to measure the absence or presence of mitochondrial potential. However, a better option is 5,5; 6,6 - tetrachloro - 1,1; 3,3 -tetraetilbenzimidazolil-carbocyanine (JC-1) dye, which assesses not only the presence of mitochondrial potential and distinguished spermatozoa with poorly and highly functional mitochondria. Two techniques, TUNEL or COMETA, and the Acridine Orange Test (AOT) dye are used to evaluate chromatin integrity. A fluorescence technique based on chlortetracycline (CTC) or Merocyanine 540 is used to estimate whether sperm pass by or through the capacitation process. This review focuses on the fluorescent probes that are most widely used to evaluate plasma membrane integrity, capacitation, acrosome integrity, chromatin integrity and mitochondrial potential.


Diversos testes laboratoriais têm sido desenvolvidos com o intuito de obter resultados confiáveis nas avaliações espermáticas, aumentando a qualidade e a confiabilidade do sêmen utilizado em técnicas de reprodução assistida. Esses testes têm permitido detectar danos em compartimentos e organelas específicas da célula espermática, que não são detectados nas análises de rotina. Dentre esses testes, o uso de sondas fluorescentes e sua detecção em microscópio de epifluorescência ou citometria de fluxo se tornaram ferramenta importante quando uma avaliação mais acurada é necessária. Para a avaliação da integridade de membrana plasmática, pode ser utilizado o iodeto de propídio, associado ao diacetato de 6-carboxifluoresceína. As avaliações de integridade acrossomal podem ser feitas através do isotiocianato de fluoresceína, associado às lecitinas conjugadas, como a Psium sativum ou Arachis hypogaea. O potencial mitocondrial pode ser avaliado quanto à ausência ou presença através da sonda Mitotracker ou Rodamina 123. Outra opção ainda melhor pode ser observada utilizando o corante iodeto de 5,5; 6,6 tetracloro 1,1; 3,3 tetraetilbenzimidazolil-carbocianina (JC-1), este corante avalia a presença do potencial mitocondrial e avalia quanto à classificação do grau. Para avaliar a integridade de cromatina, pode ser empregado o uso de duas técnicas conhecidas como TUNEL ou COMETA, ou pode ser utilizado o corante Acridine Orange Test (AOT). Para avaliar se o espermatozoide está passando ou passou pelo processo de capacitação, pode ser utilizada a técnica de fluorescência a base de clortetraciclina, o CTC, quelante do cálcio, ou a Merocianina 540. Esta revisão enfatiza as principais sondas fluorescentes disponíveis para avaliar a integridade de membrana plasmática, capacitação, integridade acrossomal, integridade da cromatina, e potencial mitocondrial.


Assuntos
Animais , Análise do Sêmen/veterinária , Corantes Fluorescentes/análise , Criopreservação
4.
Semina Ci. agr. ; 36(6): 4365-4376, 2015.
Artigo em Inglês | VETINDEX | ID: vti-763127

Resumo

 A variety of laboratory tests were developed to obtain more reliable results of sperm evaluation and increase the accuracy of sperm fertility predictions. These tests detected damage of sperm specific compartments or organelles, which cannot be detected in routine sperm analysis. The use of fluorescent probes and detection using fluorescent microscopy or flow cytometry is an important tool but a more precise and accurate laboratory test is needed. Propidium iodide and 6-carboxyfluorescein diacetate are used for evaluations of plasmatic membrane integrity. Fluorescein isothiocyanate, associated with conjugated lecithin Psium sativum or Arachis hypogaea, are used for evaluations of acrosome integrity. Two probes, MitoTracker or Rhodamine123, are generally used to measure the absence or presence of mitochondrial potential. However, a better option is 5,5’; 6,6’ - tetrachloro - 1,1’; 3,3’ -tetraetilbenzimidazolil-carbocyanine (JC-1) dye, which assesses not only the presence of mitochondrial potential and distinguished spermatozoa with poorly and highly functional mitochondria. Two techniques, TUNEL or COMETA, and the Acridine Orange Test (AOT) dye are used to evaluate chromatin integrity. A fluorescence technique based on chlortetracycline (CTC) or Merocyanine 540 is used to estimate whether sperm pass by or through the capacitation process. This review focuses on the flu


Diversos testes laboratoriais têm sido desenvolvidos com o intuito de obter resultados confiáveis nas avaliações espermáticas, aumentando a qualidade e a confiabilidade do sêmen utilizado em técnicas de reprodução assistida. Esses testes têm permitido detectar danos em compartimentos e organelas específicas da célula espermática, que não são detectados nas análises de rotina. Dentre esses testes, o uso de sondas fluorescentes e sua detecção em microscópio de epifluorescência ou citometria de fluxo se tornaram ferramenta importante quando uma avaliação mais acurada é necessária. Para a avaliação da integridade de membrana plasmática, pode ser utilizado o iodeto de propídio, associado ao diacetato de 6-carboxifluoresceína. As avaliações de integridade acrossomal podem ser feitas através do isotiocianato de fluoresceína, associado às lecitinas conjugadas, como a Psium sativum ou Arachis hypogaea. O potencial mitocondrial pode ser avaliado quanto à ausência ou presença através da sonda Mitotracker ou Rodamina 123. Outra opção ainda melhor pode ser observada utilizando o corante iodeto de 5,5’; 6,6’ – tetracloro – 1,1’; 3,3’ – tetraetilbenzimidazolil-carbocianina (JC-1), este corante avalia a presença do potencial mitocondrial e avalia quanto à classificação do grau. Para avaliar a integridade de cromatina, pode ser empregado

5.
Semina Ci. agr. ; 36(6): 4365-4376, 2015.
Artigo em Inglês | VETINDEX | ID: vti-762484

Resumo

 A variety of laboratory tests were developed to obtain more reliable results of sperm evaluation and increase the accuracy of sperm fertility predictions. These tests detected damage of sperm specific compartments or organelles, which cannot be detected in routine sperm analysis. The use of fluorescent probes and detection using fluorescent microscopy or flow cytometry is an important tool but a more precise and accurate laboratory test is needed. Propidium iodide and 6-carboxyfluorescein diacetate are used for evaluations of plasmatic membrane integrity. Fluorescein isothiocyanate, associated with conjugated lecithin Psium sativum or Arachis hypogaea, are used for evaluations of acrosome integrity. Two probes, MitoTracker or Rhodamine123, are generally used to measure the absence or presence of mitochondrial potential. However, a better option is 5,5’; 6,6’ - tetrachloro - 1,1’; 3,3’ -tetraetilbenzimidazolil-carbocyanine (JC-1) dye, which assesses not only the presence of mitochondrial potential and distinguished spermatozoa with poorly and highly functional mitochondria. Two techniques, TUNEL or COMETA, and the Acridine Orange Test (AOT) dye are used to evaluate chromatin integrity. A fluorescence technique based on chlortetracycline (CTC) or Merocyanine 540 is used to estimate whether sperm pass by or through the capacitation process. This review focuses on the flu


Diversos testes laboratoriais têm sido desenvolvidos com o intuito de obter resultados confiáveis nas avaliações espermáticas, aumentando a qualidade e a confiabilidade do sêmen utilizado em técnicas de reprodução assistida. Esses testes têm permitido detectar danos em compartimentos e organelas específicas da célula espermática, que não são detectados nas análises de rotina. Dentre esses testes, o uso de sondas fluorescentes e sua detecção em microscópio de epifluorescência ou citometria de fluxo se tornaram ferramenta importante quando uma avaliação mais acurada é necessária. Para a avaliação da integridade de membrana plasmática, pode ser utilizado o iodeto de propídio, associado ao diacetato de 6-carboxifluoresceína. As avaliações de integridade acrossomal podem ser feitas através do isotiocianato de fluoresceína, associado às lecitinas conjugadas, como a Psium sativum ou Arachis hypogaea. O potencial mitocondrial pode ser avaliado quanto à ausência ou presença através da sonda Mitotracker ou Rodamina 123. Outra opção ainda melhor pode ser observada utilizando o corante iodeto de 5,5’; 6,6’ – tetracloro – 1,1’; 3,3’ – tetraetilbenzimidazolil-carbocianina (JC-1), este corante avalia a presença do potencial mitocondrial e avalia quanto à classificação do grau. Para avaliar a integridade de cromatina, pode ser empregado

6.
Semina ciênc. agrar ; 36(6): 4365-4376, 2015.
Artigo em Inglês | LILACS-Express | VETINDEX | ID: biblio-1500182

Resumo

 A variety of laboratory tests were developed to obtain more reliable results of sperm evaluation and increase the accuracy of sperm fertility predictions. These tests detected damage of sperm specific compartments or organelles, which cannot be detected in routine sperm analysis. The use of fluorescent probes and detection using fluorescent microscopy or flow cytometry is an important tool but a more precise and accurate laboratory test is needed. Propidium iodide and 6-carboxyfluorescein diacetate are used for evaluations of plasmatic membrane integrity. Fluorescein isothiocyanate, associated with conjugated lecithin Psium sativum or Arachis hypogaea, are used for evaluations of acrosome integrity. Two probes, MitoTracker or Rhodamine123, are generally used to measure the absence or presence of mitochondrial potential. However, a better option is 5,5’; 6,6’ - tetrachloro - 1,1’; 3,3’ -tetraetilbenzimidazolil-carbocyanine (JC-1) dye, which assesses not only the presence of mitochondrial potential and distinguished spermatozoa with poorly and highly functional mitochondria. Two techniques, TUNEL or COMETA, and the Acridine Orange Test (AOT) dye are used to evaluate chromatin integrity. A fluorescence technique based on chlortetracycline (CTC) or Merocyanine 540 is used to estimate whether sperm pass by or through the capacitation process. This review focuses on the flu


Diversos testes laboratoriais têm sido desenvolvidos com o intuito de obter resultados confiáveis nas avaliações espermáticas, aumentando a qualidade e a confiabilidade do sêmen utilizado em técnicas de reprodução assistida. Esses testes têm permitido detectar danos em compartimentos e organelas específicas da célula espermática, que não são detectados nas análises de rotina. Dentre esses testes, o uso de sondas fluorescentes e sua detecção em microscópio de epifluorescência ou citometria de fluxo se tornaram ferramenta importante quando uma avaliação mais acurada é necessária. Para a avaliação da integridade de membrana plasmática, pode ser utilizado o iodeto de propídio, associado ao diacetato de 6-carboxifluoresceína. As avaliações de integridade acrossomal podem ser feitas através do isotiocianato de fluoresceína, associado às lecitinas conjugadas, como a Psium sativum ou Arachis hypogaea. O potencial mitocondrial pode ser avaliado quanto à ausência ou presença através da sonda Mitotracker ou Rodamina 123. Outra opção ainda melhor pode ser observada utilizando o corante iodeto de 5,5’; 6,6’ – tetracloro – 1,1’; 3,3’ – tetraetilbenzimidazolil-carbocianina (JC-1), este corante avalia a presença do potencial mitocondrial e avalia quanto à classificação do grau. Para avaliar a integridade de cromatina, pode ser empregado

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