TSST-1, enterotoxin and bacteriocin-like substance production by Staphylococcus aureus isolated from foods / TSST-1, enterotoxinas e substâncias tipo bacteriocina produzidas por Staphylococcus aureus isolados de alimentos

The production of Toxic Shock Syndrome Toxin-1 (TSST-1), enterotoxins and bacteriocin-like substances was evaluated in 95 strains of Staphylococcus aureus recovered from raw bovine milk (n=31) and from food samples involved in staphylococcal food poisoning (n=64). Enterotoxigenicity tests with the membrane over agar associated to optimal sensibility plate assays were performed and showed that 96.77% of strains recovered from milk and 95.31% from food samples produced enterotoxins A, B, C, D or TSST-1. Reference strains S. epidermidis, Bacillus cereus, Listeria monocytogenes, Lactobacillus casei, Pseudomonas aeruginosa, S. aureus, Salmonella Typhimurium, Escherichia coli, Enterococcus faecalis and Bacteroides fragilis were used as indicator bacteria in the antagonistic assays, the first five being sensitive to antagonistic substances. Brain heart infusion agar, in pH values ranging from 5.0 to 7.0 in aerobic atmosphere showed to be the optimum condition for antagonistic activity as evaluated with the best producer strains against the most sensitive indicator bacterium, L. monocytogenes. Sensitivity to enzymes confirmed the proteinaceous nature of these substances. Neither bacteriophage activity nor fatty acids were detected and the antagonistic activity was not due to residual chloroform. Results did not establish a positive correlation between the bacteriocinogenic profile and toxigenicity in the tested S. aureus strains.(AU)

Avaliou-se a produção de toxina-1 da síndrome do choque tóxico (TSST-1), enterotoxinas e substâncias antagonistas tipo bacteriocina em 95 amostras de Staphylococcus aureus recuperadas de leite bovino in natura (n=31) e de alimentos envolvidos em surto de intoxicação (n=64). Testes de enterotoxigenicidade pelo método da membrana sobre ágar, associado à técnica da sensibilidade ótima em placa, revelaram que 96,77% das amostras do leite e 95,31% daquelas dos alimentos produziram enterotoxinas estafilocócicas tipos A, B, C, D ou TSST-1. Nos ensaios de antagonismo, foram utilizadas como reveladoras amostras de referência de S. epidermidis, Bacillus cereus, Listeria monocytogenes, Lactobacillus casei, Pseudomonas aeruginosa, S. aureus, Salmonella typhimurium, Escherichia coli, Enterococcus faecalis e Bacteroides fragilis, sendo as cinco primeiras sensíveis às substâncias produzidas. As condições ótimas para a atividade antagonista, avaliadas com as melhores produtoras contra a indicadora mais sensível, L. monocytogenes, foram observadas em aerobiose, em ágar infuso de cérebro-coração, nos valores de pH entre 5,0 e 7,0. A sensibilidade a enzimas confirmou a natureza proteica destas substâncias. Não foram detectadas atividades de bacteriófagos nem de ácidos graxos, e a atividade antagonista não foi devido ao clorofórmio residual. Os resultados não mostraram correlação entre o perfil bacteriocinogênico e a toxigenicidade nas amostras de Staphylococcus testadas.(AU)

The use of mice as animal model for testing acute toxicity (LD-50) of toxic shock syndrome toxin / Utilização de camundongos como modelo animal para a verificação da toxicidade aguda da toxina-1 da síndrome do choque tóxico

Acute toxicity test (LD-50) using toxic shock syndrome toxin (TSST-1) was tested in BALB/c, C57BL/6 and Swiss mice. Animals (n = 10) were intraperitoneally injected with TSST-1 (0.01-10.0µg/mouse) followed 4h later by potentiating dose of lipopolysaccharide (75.0µg of LPS - E. coli O111:B4) and cumulative mortality was recorded over 72h. Control animals received either TSST-1 or LPS alone. The data were submitted to qui-Square test and acute toxicity test was calculated by probit analysis (confidence limits expressed as µg toxin/kg). BALB/c mice was the most sensitive (20.0µg/kg, 95 percent confidence limits: 9.0-92.0) followed by C57BL/6 (38.5µg/kg, 95 percent confidence limits: 9.11- 401.6). Data from Swiss mice was not conclusive, indicating only low sensitivity. Selection of the animal model and standardization of the experiment are fundamental for the development of serum neutralization tests used for final quality control of vaccine production.(AU)

A toxicidade aguda (DL-50) da toxina da síndrome do choque tóxico (TSST-1) foi testada em linhagens de camundongos BALB/c, C57BL/6 e Suíça. Os animais (n=10) inoculados intraperitoneal com doses crescentes de toxina (0,01 - 10,0µg/animal) receberam 4h após 75µg de LPS (E. coli O111: B4). A toxicidade aguda (DL50) foi observada por um período de 72h e os dados submetidos ao teste de qui- quadrado. Os resultados e os limites de confiança foram expressos em µg de toxina/kg. A linhagem BALB/c apresentou maior sensibilidade (20µg/kg - limite de confiança a 95 por cento entre 9,0- 92,0), seguida da C57BL/6 (38,5µg/kg - limite de confiança a 95 por cento entre 9,11 - 401,6). A amplitude dos limites de confiança deve-se à natureza da toxina, ao mecanismo de ação, a via de inoculação e ao animal utilizado. A seleção do modelo animal e a padronização do experimento são fundamentais para o desenvolvimento de testes de soro neutralização para fins de controle de qualidade do processo de produção de vacinas.(AU)

Cinética do fósforo em tecidos de ovinos em crescimento alimentados com diferentes fontes de cálcio / Kinetics of phosphorus in tissues of lambs fed different sources of calcium

Foram utilizados 12 cordeiros machos, inteiros, com peso médio de 31,6kg. Os cordeiros foram alimentados com dietas à base de milho e farelo de soja, suplementadas com diferentes fontes de cálcio: calcário calcítico (CC), feno de alfafa (FA), polpa cítrica (PC) e farinha de conchas de ostras (FCO). Os animais receberam injeção de 7,4 MBq do radiofósforo (32P) e após sete dias foram abatidos para posteriores análises. Utilizou-se o delineamento em blocos ao acaso, com quatro tratamentos e três repetições. A taxa de retenção de 32P, as atividades específicas relativas e padronizadas, e a quantidade de P inorgânico nos tecidos foram iguais para todos os tratamentos (P>0,05). A comparação entre os tecidos mostrou que a concentração de P inorgânico e a taxa de retenção de 32P (P<0,01) foram mais altas nos ossos em relação aos tecidos moles (P<0,01). A retenção de 32P apresentou a seguinte ordem decrescente: rins, fígado, coração, músculos e ossos (P<0,01). A reabsorção óssea de P foi maior que a deposição de P, levando ao balanço negativo do elemento para a maioria dos animais. Concluiu-se que as diferentes fontes de cálcio não interferiram na cinética do P e que a quantidade de P ingerida não atendeu às exigências de P dos animais.(AU)

Sixteen growing rams, averaging 31.6kg were studied. They were fed diets based on corn and soya meal, supplemented with different sources of calcium: limestone (CC), alfalfa hay (FA), citrus pulp (PC) and oyster shell meal (OSM). The animals received an injection of 7.4 MBq of radioactive P (32P) and after 7 days they were slaughtered for further analyses. Experimental measurements were analyzed as a completely randomized design with four treatments and three repetitions. The rate of 32P retention, the relative specific activity, the standardized specific activity and the inorganic P in tissue were similar for all treatments (P>0.05). The comparison between tissues showed that the concentration of inorganic P and rate of 32P retention was greater in bone (P<0.01) than in soft tissue. The 32P retention presented the following decreasing order: kidney, liver, heart, muscle and bone (P<0.01). P resorption in bone was higher than P accreted in bone, leading to a negative balance of P in bone for the majority of animals. The means for P accreted in bone were 1.56, 3.29, 2.74 and 2.06g/animal and the means for P resorption in bone were 2.82, 4.51, 4.09 and 3.05g/animal for limestone (CC), alfalfa hay (FA), citrus pulp (PC) and oyster shell meal (OSM), respectively. P resorption values were higher than P accretion in bone leading to a negative balance of P for the majority of animals. It was concluded that the different sources of calcium did not interfere in the kinetics of phosphorus and the amount of P absorbed did not attend P demands of the animals.(AU)