Clinical safety of zafirlukast treatment during acute inflammatory reaction in nile tilapia (Oreochromis niloticus) / Segurança clínica do tratamento com zafirlucaste durante a reação inflamatória aguda em tilápia do nilo (Oreochromis niloticus)

Little is known about the toxicity of immune modulators in fish. Zafirlukast is an anti-inflammatory that antagonizes cysteine leukotriene receptors (CysLTR1). Aiming to study immunomodulatory treatments on fish health, this study evaluated the clinical safety of oral zafirlukast treatment, through biochemical and hematological analyzes during acute inflammatory reaction in Nile tilapia (Oreochromis niloticus), induced by Aeromonas hydrophila bacterins. 72 young tilapias were randomly divided in 9 aquariums (100 L each, n=8) to compose the following treatments: T0 (control), T1 (Treatment with 250 µg zafirlukast) and T2 (Treatment with 500 µg zafirlukast). Eight animals were evaluated per treatment in three periods: six, 24 and 48 hours post-inoculation (HPI), blood collection was performed for hematological and serum biochemical evaluation. The study of hepatic and renal functionality revealed that treatment with both doses of zafirlukast did not result in changes in the circulating values of aspartate aminotransferase (AST), alanine aminotransferase (ALT), alkaline phosphatase, creatinine, triglycerides, cholesterol, and total protein, suggesting that the drug has not presented hepatotoxicity, as well as compromised liver and kidney functions. Tilapia submitted to treatment with 500 µg showed adverse hematological effects characterized by polycythemia associated with microcytosis. Therefore, oral treatment with zafirlukast has demonstrated clinical safety at a therapeutic dose of 250 µg in tilapia during acute aerocystitis, although hematological changes were observed in tilapia treated with overdose of this leukotriene blocker

Pouco se sabe sobre a toxicidade de imunomoduladores em peixes. Zafirlukast é um anti-inflamatório que antagoniza os receptores de leucotrienos cisteínicos (CysLTR1). Com o objetivo de estudar o efeito de tratamentos imunomoduladores sobre a saúde dos peixes, este estudo avaliou a segurança clínica do tratamento com zafirlucaste oral, por meio de análises bioquímicas e hematológicas durante reação inflamatória aguda em tilápia do Nilo (Oreochromis niloticus), induzida por bacterinas de Aeromonas hydrophila. Para tal, 72 tilápias jovens foram divididas aleatoriamente em 9 aquários (100 L cada, n=8) para compor os seguintes tratamentos: T0 (controle), T1 (Tratamento com 250 µg de zafirlucaste) e T2 (Tratamento com 500 µg de zafirlucaste). Oito animais foram avaliados por tratamento em três períodos: seis, 24 e 48 horas pós-inoculação (HPI), foi realizada coleta de sangue para avaliação hematológica e bioquímica sérica. O estudo da funcionalidade hepática e renal revelou que o tratamento com ambas as doses de zafirlucaste não resultou em alterações nos valores circulantes de aspartato aminotransferase (AST), alanina aminotransferase (ALT), fosfatase alcalina, creatinina, triglicerídeos, colesterol e proteína total, sugerindo que a droga não comprometeu as funções hepáticas e renais. As tilápias tratadas com 500 µg apresentaram efeitos hematológicos adversos caracterizados por policitemia associada a microcitose. Portanto, o tratamento oral com zafirlucaste demonstrou segurança clínica na dose de 250 µg em tilápias durante aerocistite aguda, embora alterações hematológicas tenham sido observadas em tilápias tratadas com sobredosagem deste bloqueador de leucotrieno.

Clinical safety of zafirlukast treatment during acute inflammatory reaction in nile tilapia (Oreochromis niloticus) / Segurança clínica do tratamento com zafirlucaste durante a reação inflamatória aguda em tilápia do nilo (Oreochromis niloticus)

Little is known about the toxicity of immune modulators in fish. Zafirlukast is an anti-inflammatory that antagonizes cysteine leukotriene receptors (CysLTR1). Aiming to study immunomodulatory treatments on fish health, this study evaluated the clinical safety of oral zafirlukast treatment, through biochemical and hematological analyzes during acute inflammatory reaction in Nile tilapia (Oreochromis niloticus), induced by Aeromonas hydrophila bacterins. 72 young tilapias were randomly divided in 9 aquariums (100 L each, n=8) to compose the following treatments: T0 (control), T1 (Treatment with 250 µg zafirlukast) and T2 (Treatment with 500 µg zafirlukast). Eight animals were evaluated per treatment in three periods: six, 24 and 48 hours post-inoculation (HPI), blood collection was performed for hematological and serum biochemical evaluation. The study of hepatic and renal functionality revealed that treatment with both doses of zafirlukast did not result in changes in the circulating values of aspartate aminotransferase (AST), alanine aminotransferase (ALT), alkaline phosphatase, creatinine, triglycerides, cholesterol, and total protein, suggesting that the drug has not presented hepatotoxicity, as well as compromised liver and kidney functions. Tilapia submitted to treatment with 500 µg showed adverse hematological effects characterized by polycythemia associated with microcytosis. Therefore, oral treatment with zafirlukast has demonstrated clinical safety at a therapeutic dose of 250 µg in tilapia during acute aerocystitis, although hematological changes were observed in tilapia treated with overdose of this leukotriene blocker(AU)

Pouco se sabe sobre a toxicidade de imunomoduladores em peixes. Zafirlukast é um anti-inflamatório que antagoniza os receptores de leucotrienos cisteínicos (CysLTR1). Com o objetivo de estudar o efeito de tratamentos imunomoduladores sobre a saúde dos peixes, este estudo avaliou a segurança clínica do tratamento com zafirlucaste oral, por meio de análises bioquímicas e hematológicas durante reação inflamatória aguda em tilápia do Nilo (Oreochromis niloticus), induzida por bacterinas de Aeromonas hydrophila. Para tal, 72 tilápias jovens foram divididas aleatoriamente em 9 aquários (100 L cada, n=8) para compor os seguintes tratamentos: T0 (controle), T1 (Tratamento com 250 µg de zafirlucaste) e T2 (Tratamento com 500 µg de zafirlucaste). Oito animais foram avaliados por tratamento em três períodos: seis, 24 e 48 horas pós-inoculação (HPI), foi realizada coleta de sangue para avaliação hematológica e bioquímica sérica. O estudo da funcionalidade hepática e renal revelou que o tratamento com ambas as doses de zafirlucaste não resultou em alterações nos valores circulantes de aspartato aminotransferase (AST), alanina aminotransferase (ALT), fosfatase alcalina, creatinina, triglicerídeos, colesterol e proteína total, sugerindo que a droga não comprometeu as funções hepáticas e renais. As tilápias tratadas com 500 µg apresentaram efeitos hematológicos adversos caracterizados por policitemia associada a microcitose. Portanto, o tratamento oral com zafirlucaste demonstrou segurança clínica na dose de 250 µg em tilápias durante aerocistite aguda, embora alterações hematológicas tenham sido observadas em tilápias tratadas com sobredosagem deste bloqueador de leucotrieno.(AU)

Determinação da concentração inibitória mínima e bactericida da amoxicilina para bactéria S. agalactiae isolada de tilápia do nilo

Uma qualidade desejada do antimicrobiano é que este apresente eficácia na menor concentração possível do princípio ativo. Devemos atentarmos que quanto menor a concentração do fármaco a ser utilizado menor será resíduo ambiental. Como fase inicial do estudo de eficácia há necessidade de verificar a sensibilidade ao princípio ativo. Neste sentido, utilizou-se 10 concentrações do fármaco amoxicilina com redução progressiva da concentração na razão de 2: 11,98; 5,99; 2,99; 1,49; 0,74; 0,37; 0,18; 0,09, 0,045 e 0,022 μg.mL

Ativação de células de memória na produção de anticorpos e na expressão de células IgM positivas no baço de tilápias-do-nilo / Activation of memory cells in the antibody production and the expression of IgM positive cells in Nile tilapia spleen

O presente trabalho avaliou o papel do baço no armazenamento e na reativação das linhagens de células B, representadas por células IgM positivas imunomarcadas no tecido esplênico, bem como a funcionalidade dessas células, sobre a cinética dos linfócitos e na produção sistêmica de anticorpos em tilápias-do-nilo (Oreochromis niloticus). Foram separados dois grupos: grupo memória, constituído por peixes previamente imunizados com hemácia de carneiro a 2,5%, para a geração da memória imune, e o grupo naive, que recebeu o mesmo volume de solução salina a 0,65%. Após 32 dias, os dois grupos foram submetidos a uma nova dose do antígeno na mesma concentração, volume e via de inoculação. A reativação dos clones de memória foi evidenciada pelo aumento do número de células IgM positivas no baço do grupo memória no dia zero/pré-imune. Além disso, o mesmo grupo apresentou aumento dos títulos de anticorpos séricos no 14º dia e no número absoluto de linfócitos no 21º dia em relação ao grupo naive. Esses resultados sugerem que o baço não seja apenas um local de armazenamento, mas também de reativação de células B de memória em tilápia-do-nilo.(AU)

This work aimed to evaluate the role of the spleen in storage and reactivation of the memory B cells, represented by IgM positive cells and the systemic production of sheep antibodies anti-red cell in Nile tilapia (Oreochromis niloticus). Two groups were established: the memory group, containing fish previously immunized with a 2,5% sheep anti-red cell, to generate the immune memory; and the naive group, containing fish that received a 0,65% saline solution. After 32 days, both groups were subjected to a new dose of the same antigen at the same concentration, volume, and inoculation via. The memory clones reactivation was correlated to the increase of the IgM positive cells in the spleen in the memory group at 0 day. The memory group showed an increase in the absolute number of lymphocytes at 21 days and an increase in the antibodies at 14 days after inoculation when compared to the naive group. The results suggest that the spleen may be a storage and reactivation place of memory B cells in Nile tilapia.(AU)

Determinação da concentração inibitória mínima e bactericida da amoxicilina para bactéria S. agalactiae isolada de tilápia do nilo

Uma qualidade desejada do antimicrobiano é que este apresente eficácia na menor concentração possível do princípio ativo. Devemos atentarmos que quanto menor a concentração do fármaco a ser utilizado menor será resíduo ambiental. Como fase inicial do estudo de eficácia há necessidade de verificar a sensibilidade ao princípio ativo. Neste sentido, utilizou-se 10 concentrações do fármaco amoxicilina com redução progressiva da concentração na razão de 2: 11,98; 5,99; 2,99; 1,49; 0,74; 0,37; 0,18; 0,09, 0,045 e 0,022 μg.mL <->1. Para cada teste, foram ensaiados 3 tubos por concentração e o teste foi repetido 4 vezes. O meio utilizado foi caldo Mueller-Hinton com cátions ajustados suplementado com sangue lisado de cavalo a 5%. Para cada tubo teste havia a concentração final de 2,0 x 10 UFC de bactéria de Streptococcus agalactiae. Os mesmos foram incubados a 28°C por 48 horas. Após este período, uma alíquota de 100 μL de cada tubo foi dispersa em superfície em placa de petri com ágar sangue seletivo para S. agalactiae, incubados nas mesmas condições dos tubos. Realizado após 48 horas a contagem de unidades formadoras de colônia por mL (UFC.mL-1. Assim, os resultados para CIM 99,9% para todas as repetições realizadas oscilou de 0,09 a 0,18 μg.mL-1 e o CBM 100% oscilou entre 1,5 a 2 ,5 μg.mL-1. A média encontrada para controle positivo foi de 1,04 x 107 UFC.mL-1 e os tubos pertencentes ao controle negativo não apresentaram nenhuma multiplicação bacteriana. Em comparação a literatura de referência, amoxicilina triidratada apresentou para o isolado de S. agalactiae um valor de CIM e CBM baixo, considerando assim sensível e adequado para o ensaio.(AU)

Ativação de células de memória na produção de anticorpos e na expressão de células IgM positivas no baço de tilápias-do-nilo / Activation of memory cells in the antibody production and the expression of IgM positive cells in Nile tilapia spleen

O presente trabalho avaliou o papel do baço no armazenamento e na reativação das linhagens de células B, representadas por células IgM positivas imunomarcadas no tecido esplênico, bem como a funcionalidade dessas células, sobre a cinética dos linfócitos e na produção sistêmica de anticorpos em tilápias-do-nilo (Oreochromis niloticus). Foram separados dois grupos: grupo memória, constituído por peixes previamente imunizados com hemácia de carneiro a 2,5%, para a geração da memória imune, e o grupo naive, que recebeu o mesmo volume de solução salina a 0,65%. Após 32 dias, os dois grupos foram submetidos a uma nova dose do antígeno na mesma concentração, volume e via de inoculação. A reativação dos clones de memória foi evidenciada pelo aumento do número de células IgM positivas no baço do grupo memória no dia zero/pré-imune. Além disso, o mesmo grupo apresentou aumento dos títulos de anticorpos séricos no 14º dia e no número absoluto de linfócitos no 21º dia em relação ao grupo naive. Esses resultados sugerem que o baço não seja apenas um local de armazenamento, mas também de reativação de células B de memória em tilápia-do-nilo.(AU)

This work aimed to evaluate the role of the spleen in storage and reactivation of the memory B cells, represented by IgM positive cells and the systemic production of sheep antibodies anti-red cell in Nile tilapia (Oreochromis niloticus). Two groups were established: the memory group, containing fish previously immunized with a 2,5% sheep anti-red cell, to generate the immune memory; and the naive group, containing fish that received a 0,65% saline solution. After 32 days, both groups were subjected to a new dose of the same antigen at the same concentration, volume, and inoculation via. The memory clones reactivation was correlated to the increase of the IgM positive cells in the spleen in the memory group at 0 day. The memory group showed an increase in the absolute number of lymphocytes at 21 days and an increase in the antibodies at 14 days after inoculation when compared to the naive group. The results suggest that the spleen may be a storage and reactivation place of memory B cells in Nile tilapia.(AU)

Transferência passiva de soro hiperimune anti-Streptococcus agalactiae e seu efeito profilático em tilápias-do-nilo infectadas experimentalmente: sobrevivência e títulos de anticorpos / Passive transfer of hyperimmune serum anti Streptococcus agalactiae and its prophylactic effect on Nile tilapia experimentally infected

A bactéria Streptococcus agalactiae é um potente agente causador de surtos por doenças bacterianas em peixes. O estresse provocado pelo manejo zootécnico e pela má qualidade ambiental torna a tilápia susceptível às infecções por essa bactéria. O objetivo do presente trabalho foi avaliar a resistência de tilápias-do-nilo imunizadas com soro hiperimune anti-S. agalactiae, posteriormente desafiadas com cepa homóloga da mesma bactéria. Após determinação da DL 50 de S. agalactiae, 36 tilápias foram distribuídas em quatro aquários, dois para o grupo controle e dois para inoculação celomática para produção de anticorpos anti-S. agalactiae. No 21° e 28° dias, foi coletado sangue para obtenção de soro hiperimune utilizado na transferência passiva. Em seguida, 30 tilápias foram distribuídas em três aquários e submetidas a três tratamentos: GI: controle; GII: imunizadas com o soro inativado; GIII: imunizadas com soro ativo. Após 48 horas e sete, 14, 21, 28 e 35 dias, foram realizadas coletas de sangue para titulação de anticorpos anti-S. agalactiae utilizando-se o teste de aglutinação direta. Para avaliar a taxa de sobrevivência, outras 30 tilápias foram distribuídas em três aquários e submetidas a três tratamentos (GI: controle; GII: imunizadas com soro inativado; GIII: imunizadas com soro ativo). Após 48 horas da imunização, as tilápias foram desafiadas via celomática com 100µL de S. agalactiae e avaliadas duas vezes ao dia, pelo período de 35 dias. Os resultados dos títulos séricos de anticorpos foram detectados pela aglutinação direta até o 21° dia pós-transferência passiva, e, no mesmo período, houve proteção de 80% entre os grupos imunizados com soro inativado e soro ativo contendo anticorpos anti-S. agalactiae. Ao final, os grupos soro inativado e soro ativo apresentaram 60 e 80% de proteção, respectivamente, enquanto no grupo controle 100% dos peixes adoeceram, apresentando sinais graves da infecção, e foram eutanasiados. Não houve diferença estatística significativa na taxa de proteção entre os grupos imunizados.(AU)

The Streptococcus agalactiae bacteria is a potent agent which causes outbreaks of bacterial diseases in fish. The stress caused by management and poor environmental quality makes tilapia susceptible to infections, including by bacterium. The aim of this study was to evaluate the resistance of the Nile tilapia immunized with hyperimmune serum against S. agalactiae subsequently challenged with homologous strain of the same bacteria. After determining the DL 50 of S. agalactiae, 36 tilapias were distributed in 4 aquariums, 2 for the control group and 2 for the group via coelomic, inoculated with the DL 50 for anti-S. agalactiae antibodies production. On the 21st and 28th day blood was collected for the obtainment of hiperimmune serum used in passive transference. Then, 30 tilapias were distributed in 3 aquariums submitted to 3 treatments (GI: control; GII: immunized with inactivated-serum; GIII: immunized with non-inactivated serum). After 48 hours, 7, 14, 21, 28 and 35 days blood collections were done for anti-S. agalactiae antibodies titration using the direct agglutination test. For survival evaluation 30 tilapias were distributed in 3 aquariums and submitted to 3 treatments (GI: control; GII: immunized with inactivated-serum; GIII: immunized with non-inactivated serum). After 48 hours of inoculation tilapias were challenged with 100µL of S. agalactiae and monitored twice a day for 35 days. The results showed that titers of antibodies were detected by direct agglutination until the 21st day after passive transference and during the same period the protection between the groups immunized with inactivated serum and non-inactivated serum contending anti-S. agalactiae antibodies was of 80% after challenge with S. agalactiae. In the end, the serum-inactivated serum and active groups had 60 and 80% protection, respectively, while 100% of the fish in the control group developed severe signs of infection and were euthanized. There was no statistical difference in the survival rate between the immunized groups.(AU)

Effect of inoculation route on the production of antibodies and histological characteristics of the spleen in laying hens

Recent studies have reported the use of IgY antibody in the prevention or treatment of diseases in animals. IgY can be obtained in large amounts from the yolk of chicken eggs through a low-cost process. This study evaluated the effect of different routes of inoculation on antibody production and spleen morphological characteristics of laying hens (White Leghorn) inoculated with sheep red blood cells. The analysis of the results showed that the intramuscular route is the most efficient for total antibody production in the primary immune response, while the intravenous route is the most efficient in producing IgY antibodies in the secondary immune response. No histological changes were observed in the spleen of laying hens. This study could be useful for developing protocols of antigen inoculation in laying hens for IgY antibody production.(AU)

CLINICAL SAFETY OF ZAFIRLUKAST TREATMENT DURING ACUTE INFLAMMATORY REACTION IN NILE TILAPIA (OREOCHROMIS NILOTICUS) / CLINICAL SAFETY OF ZAFIRLUKAST TREATMENT DURING ACUTE INFLAMMATORY REACTION IN NILE TILAPIA (OREOCHROMIS NILOTICUS)

Little is known about the toxicity of immune modulators in fish. Zafirlukast is an anti-inflammatory that antagonizes cysteine leukotriene receptors (CysLTR1). Aiming to study immunomodulatory treatments on fish health, this study evaluated the clinical safety of oral zafirlukast treatment, through biochemical and hematological analyzes during acute inflammatory reaction in Nile tilapia (Oreochromis niloticus), induced by Aeromonas hydrophila bacterins. 72 young tilapias were randomly divided in 9 aquariums (100 L each, n=8) to compose the following treatments: T0 (control), T1 (Treatment with 250 µg zafirlukast) and T2 (Treatment with 500 µg zafirlukast). Eight animals were evaluated per treatment in three periods: six, 24 and 48 hours post-inoculation (HPI), blood collection was performed for hematological and serum biochemical evaluation. The study of hepatic and renal functionality revealed that treatment with both doses of zafirlukast did not result in changes in the circulating values of aspartate aminotransferase (AST), alanine aminotransferase (ALT), alkaline phosphatase, creatinine, triglycerides, cholesterol, and total protein, suggesting that the drug has not presented hepatotoxicity, as well as compromised liver and kidney functions. Tilapia submitted to treatment with 500 µg showed adverse hematological effects characterized by polycythemia associated with microcyt

Little is known about the toxicity of immune modulators in fish. Zafirlukast is an anti-inflammatory that antagonizes cysteine leukotriene receptors (CysLTR1). Aiming to develop strategies for the sanitary management of fish farms, this study evaluated the clinical safety of oral zafirlukast treatment, through biochemical and hematological analyzes during acute inflammatory reaction in Nile tilapia (Oreochromis niloticus), induced by Aeromonas hydrophila bacterins. 72 young tilapias were randomly divided in 9 aquariums (100 L each, n=8) to compose the following treatments: T0 (control), T1 (Treatment with 250 µg zafirlukast) and T2 (Treatment with 500 µg zafirlukast). Eight animals were evaluated per treatment in three periods: six, 24 and 48 hours post-inoculation (HPI), blood collection was performed for hematological and serum biochemical evaluation. The study of hepatic and renal functionality revealed that treatment with both doses of zafirlukast did not result in changes in the circulating values of aspartate aminotransferase (AST), alanine aminotransferase (ALT), alkaline phosphatase, creatinine, triglycerides, cholesterol, and total protein, suggesting that the drug has not compromised liver and kidney functions. Tilapia submitted to treatment with 500 µg showed adverse hematological effects characterized by polycythemia associated with microcytosis and hypochromia. The