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1.
Arq. bras. med. vet. zootec. (Online) ; 68(5): 1292-1300, set.-out. 2016. tab, ilus
Artigo em Inglês | VETINDEX | ID: vti-17133

Resumo

This study aimed to isolate cells from the Wharton's jelly of umbilical cord (WJUC) of sheep collected during natural parturition using different culture media, in addition to reporting for the first time the permissiveness of these cells to in vitro infection by small ruminant lentiviruses. Ten umbilical cords were collected from healthy sheep. Each cord explants were grown in different media consisting of MEM, low glucose DMEM, M199, and RPMI-1640. The permissiveness of infection of sheep cells from WJUC was tested with CAEV-Cork and MVV-K1514 strains, inoculating 0.1 MOI of each viral strain. Four supernatants from each strain were obtained from WJUC sheep cell cultures infected in different media. The results demonstrated the presence of cytopathic effect after the in vitro infection by CAEV-Cork and MVV-K1514 with all of the tested culture media. Nested-PCR detected proviral DNA in all supernatants. Supernatants containing CAEV-Cork viruses had TCID 50/ml titres of 10 5.5 in MEM, 10 4.0 in low glucose DMEM, 105.0 in M199, and 10 5.7 in RPMI-1640. Supernatants containing the MVV-K1514 virus had TCID 50/ml titres of 10 4.3 in MEM, 10 3.5 in low-glucose DMEM, 10 4.7 in M199, and 10 3.5 in RPMI-1640. Sheep cells from WJUC are permissive to in vitro infection by small ruminant lentivirus.(AU)


O objetivo deste estudo foi isolar células da geleia de Wharton do cordão umbilical (GWCU) ovino coletado por ocasião do parto natural, utilizando-se diferentes meios de cultivo, além de relatar, pela primeira vez, sua permissividade à infecção in vitro por lentivírus de pequenos ruminantes (LVPRs). Dez cordões umbilicais foram coletados de ovelhas hígidas e soronegativas para LVPRs pelo teste de imunodifusão em gel de agarose (IDGA). De cada cordão, explantes foram cultivados em quatro meios distintos que consistiram em MEM, DMEM baixa glicose, meio 199 e RPMI-1640, todos acrescidos de 10% de soro fetal bovino em estufa com atmosfera úmida e 5% de CO2 a 37ºC. A permissividade de infecção das células GWCU ovino foi testada frente às cepas CAEV-Cork e MVV-K1514, inoculando-se 0,1 MOI de cada cepa viral e corando as monocamadas com May Grunwald Giemsa para visualização do efeito citopático. Foram obtidos quatro sobrenadantes CAEV-Cork e quatro MVV-K1514, provenientes do cultivo de células GWCU ovino infectadas por 21 dias em meios distintos, dos quais foram realizadas titulação em membrana sinovial caprina e extração do DNA pró-viral para realização de nested-PCR e eletroforese em gel de agarose a 2%. Os resultados demonstraram a presença de efeito citopático na infecção in vitro tanto por CAEV-Cork como por MVV-K1514 em todos os meios de cultivo, sendo visualizados sincícios e lise celular em microscópio invertido. A nested-PCR detectou o DNA pró-viral tanto do CAEV-Cork como do MVV-K1514 em todos os sobrenadantes. Os sobrenadantes contendo o vírus CAEV-Cork apresentaram títulos em TCID50/mL de 10 5,5 em MEM, 10 4,0 em DMEM baixa glicose, 10 5,0 em meio 199 e 10 5,7 em RPMI-1640. Os sobrenadantes contendo o vírus MVV-K1514 apresentaram título em TCID 50/mL de 10 4,3 em MEM, 10 3,5 em DMEM baixa glicose, 10 4,7 em meio 199 e 10 3,5 em RPMI-1640. Células GWCU ovino são permissivas à infecção in vitro pelos lentivírus de pequenos ruminantes CAEV-Cork e MVV-K1514.(AU)


Assuntos
Animais , Células-Tronco Mesenquimais/patologia , Técnicas In Vitro/veterinária , Ruminantes , Vírus da Artrite-Encefalite Caprina , Infecções/veterinária , Lentivirus Ovinos-Caprinos , Reação em Cadeia da Polimerase/veterinária
2.
Arq. bras. med. vet. zootec ; 68(5): 1292-1300, set.-out. 2016. tab, ilus
Artigo em Inglês | LILACS, VETINDEX | ID: biblio-827885

Resumo

This study aimed to isolate cells from the Wharton's jelly of umbilical cord (WJUC) of sheep collected during natural parturition using different culture media, in addition to reporting for the first time the permissiveness of these cells to in vitro infection by small ruminant lentiviruses. Ten umbilical cords were collected from healthy sheep. Each cord explants were grown in different media consisting of MEM, low glucose DMEM, M199, and RPMI-1640. The permissiveness of infection of sheep cells from WJUC was tested with CAEV-Cork and MVV-K1514 strains, inoculating 0.1 MOI of each viral strain. Four supernatants from each strain were obtained from WJUC sheep cell cultures infected in different media. The results demonstrated the presence of cytopathic effect after the in vitro infection by CAEV-Cork and MVV-K1514 with all of the tested culture media. Nested-PCR detected proviral DNA in all supernatants. Supernatants containing CAEV-Cork viruses had TCID 50/ml titres of 10 5.5 in MEM, 10 4.0 in low glucose DMEM, 105.0 in M199, and 10 5.7 in RPMI-1640. Supernatants containing the MVV-K1514 virus had TCID 50/ml titres of 10 4.3 in MEM, 10 3.5 in low-glucose DMEM, 10 4.7 in M199, and 10 3.5 in RPMI-1640. Sheep cells from WJUC are permissive to in vitro infection by small ruminant lentivirus.(AU)


O objetivo deste estudo foi isolar células da geleia de Wharton do cordão umbilical (GWCU) ovino coletado por ocasião do parto natural, utilizando-se diferentes meios de cultivo, além de relatar, pela primeira vez, sua permissividade à infecção in vitro por lentivírus de pequenos ruminantes (LVPRs). Dez cordões umbilicais foram coletados de ovelhas hígidas e soronegativas para LVPRs pelo teste de imunodifusão em gel de agarose (IDGA). De cada cordão, explantes foram cultivados em quatro meios distintos que consistiram em MEM, DMEM baixa glicose, meio 199 e RPMI-1640, todos acrescidos de 10% de soro fetal bovino em estufa com atmosfera úmida e 5% de CO2 a 37ºC. A permissividade de infecção das células GWCU ovino foi testada frente às cepas CAEV-Cork e MVV-K1514, inoculando-se 0,1 MOI de cada cepa viral e corando as monocamadas com May Grunwald Giemsa para visualização do efeito citopático. Foram obtidos quatro sobrenadantes CAEV-Cork e quatro MVV-K1514, provenientes do cultivo de células GWCU ovino infectadas por 21 dias em meios distintos, dos quais foram realizadas titulação em membrana sinovial caprina e extração do DNA pró-viral para realização de nested-PCR e eletroforese em gel de agarose a 2%. Os resultados demonstraram a presença de efeito citopático na infecção in vitro tanto por CAEV-Cork como por MVV-K1514 em todos os meios de cultivo, sendo visualizados sincícios e lise celular em microscópio invertido. A nested-PCR detectou o DNA pró-viral tanto do CAEV-Cork como do MVV-K1514 em todos os sobrenadantes. Os sobrenadantes contendo o vírus CAEV-Cork apresentaram títulos em TCID50/mL de 10 5,5 em MEM, 10 4,0 em DMEM baixa glicose, 10 5,0 em meio 199 e 10 5,7 em RPMI-1640. Os sobrenadantes contendo o vírus MVV-K1514 apresentaram título em TCID 50/mL de 10 4,3 em MEM, 10 3,5 em DMEM baixa glicose, 10 4,7 em meio 199 e 10 3,5 em RPMI-1640. Células GWCU ovino são permissivas à infecção in vitro pelos lentivírus de pequenos ruminantes CAEV-Cork e MVV-K1514.(AU)


Assuntos
Animais , Vírus da Artrite-Encefalite Caprina , Técnicas In Vitro/veterinária , Células-Tronco Mesenquimais/patologia , Ruminantes , Infecções/veterinária , Lentivirus Ovinos-Caprinos , Reação em Cadeia da Polimerase/veterinária
3.
Arq. Inst. Biol ; 79(3): 443-452, jul.-set. 2012.
Artigo em Português | VETINDEX | ID: biblio-1462167

Resumo

Mycobacterium avium subesp. paratuberculosis (MAP) é o agente etiológico da paratuberculose em ruminantes domésticos e silvestres. Em caprinos e ovinos causa uma enterite granulomatosa crônica com emagrecimento progressivo seguido de morte, raramente a diarreia é observada. Nesse aspecto, a doença é considerada uma ameaça mundial aos rebanhos, pois pode permanecer no estádio subclínico por anos, manifestando perdas indiretas na produção animal e na dissemina-ção do agente. Além disso, existem relatos da possível relação de MAP com a doença de Crohn, determinando, assim, a sua relevância na saúde pública. O Brasil não dispõe de dados quantificando as reais perdas produtivas nos rebanhos acometidos pela doença, e poucas informações do comprometimento de caprinos e ovinos no país são relatadas. Assim, este artigo busca revisar a paratuberculose em pequenos ruminantes domésticos.


PARATUBERCULOSIS IN SMALL DOMESTIC RUMINANTS. Mycobacterium avium subsp. paratuberculosis (MAP) is the causative agent of paratuberculosis in domestic and wild ruminants. In sheep and goats it causes a chronic granulomatous enteritis with progressive emaciation and death, diarrhea rarely being observed. In this aspect, the disease is considered a worldwide threat to livestock, as it may remain subclinical for years, with indirect losses in production and agent dissemination. In addition, there are reports of a possible relationship with the agent of Crohn’s disease, so it is also of relevance to public health. Brazil does not have any data quantifying the actual production losses in herds affected by the disease, and few details of the involvement of goats and sheep in the country have been reported. Thus, this paper aims to review the occurrence of paratuberculosis in flocks of domestic small ruminants.


Assuntos
Animais , Diarreia/veterinária , Morte , Paratuberculose/parasitologia , Redução de Peso/fisiologia , Ruminantes , Cabras/classificação , Ovinos/classificação
4.
Arq. Inst. Biol. ; 79(3): 443-452, jul.-set. 2012.
Artigo em Português | VETINDEX | ID: vti-5372

Resumo

Mycobacterium avium subesp. paratuberculosis (MAP) é o agente etiológico da paratuberculose em ruminantes domésticos e silvestres. Em caprinos e ovinos causa uma enterite granulomatosa crônica com emagrecimento progressivo seguido de morte, raramente a diarreia é observada. Nesse aspecto, a doença é considerada uma ameaça mundial aos rebanhos, pois pode permanecer no estádio subclínico por anos, manifestando perdas indiretas na produção animal e na dissemina-ção do agente. Além disso, existem relatos da possível relação de MAP com a doença de Crohn, determinando, assim, a sua relevância na saúde pública. O Brasil não dispõe de dados quantificando as reais perdas produtivas nos rebanhos acometidos pela doença, e poucas informações do comprometimento de caprinos e ovinos no país são relatadas. Assim, este artigo busca revisar a paratuberculose em pequenos ruminantes domésticos. (AU)


PARATUBERCULOSIS IN SMALL DOMESTIC RUMINANTS. Mycobacterium avium subsp. paratuberculosis (MAP) is the causative agent of paratuberculosis in domestic and wild ruminants. In sheep and goats it causes a chronic granulomatous enteritis with progressive emaciation and death, diarrhea rarely being observed. In this aspect, the disease is considered a worldwide threat to livestock, as it may remain subclinical for years, with indirect losses in production and agent dissemination. In addition, there are reports of a possible relationship with the agent of Crohns disease, so it is also of relevance to public health. Brazil does not have any data quantifying the actual production losses in herds affected by the disease, and few details of the involvement of goats and sheep in the country have been reported. Thus, this paper aims to review the occurrence of paratuberculosis in flocks of domestic small ruminants. (AU)


Assuntos
Animais , Paratuberculose/parasitologia , Ruminantes , Redução de Peso/fisiologia , Morte , Diarreia/veterinária , Cabras/classificação , Ovinos/classificação
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