Detection by multiplex PCR of Staphylococcus aureus, S. intermedius and S. hyicus in artificially contaminated milk / Detecção de Staphylococcus aureus, S. intermedius e S. hyicus em leite contaminado artificialmente por multiplex PCR

This research aimed to detect coagulase-positive Staphylococcus (CPS) directly in samples of artificially contaminated milk, using multiplex PCR (mPCR). Standard and isolated bacterial strains of S. aureus, S. epidermidis, S. hyicus, S. intermedius, Listeria monocytogenes and Escherichia coli species were used, evaluating the specificity and detection limit of mPCR, for artificially contaminated UHT milk. Primers specific for the nuc gene (NUC1-NUC2 were used for S. aureus, NUC3-NUC4 for S. hyicus and NUC5-NUC6 for S. intermedius). It was possible to detect the three target species by mPCR, directly from bovine whole milk, with adequate specificity and acceptable detention limit for identification of coagulase-positive Staphylococcus (CPS) in foods. The specificity was determined by the amplification of species-specific fragments, and the detection limit was assessed by the detection thresholds obtained for the three species (103 CFU mL-1). From these results, the mPCR described, with the proposed set of primers, has the potential for use in precise identification and differentiation between CPSs in milk samples.(AU)

Esta pesquisa teve como objetivo detectar diretamente em amostras de leite contaminado artificialmente Staphylococcus coagulase positiva (ECP) por multiplex PCR (mPCR). Cepas padrão e isolados de S. aureus, S. epidermidis, S. hyicus, S. intermedius, Listeria monocytogenes e Escherichia coli foram utilizados no estudo. Foram utilizados primers específicos para o gene nuc (NUC1-NUC2 para o S. aureus, NUC3-NUC4 para o S. hyicus e NUC5-NUC6 para o S. intermedius ). Foi possível detectar as três espécies-alvo por mPCR, formar diretamente nas amostras de leite integral bovino, com especificidade adequada e limite de detecção aceitável para identificação de espécies de Staphylococcus coagulase positiva (ECP) em alimentos. A especificidade foi determinada por meio da amplificação de fragmentos específicos das espécies e o limite de detecção foi avaliado pelos limiares de detecção obtidos para as três espécies (103 UFC mL-1 para as espécies presentes nas amostras de leite contaminadas artificialmente).(AU)

Genetic Analysis of Izoenzymes Polymorphisms in Silkworm (Bombyx mori L. ) Strains / Análise genética de polimorfismos bioquímicos em linhagens do bicho da seda (Bombyx mori L. )

This work carried out to evaluates the polymorhism in the silkworm of different lineages using the isoenzymes electrophoresis to detect biochemical markers and to investigate the genetics of populations for those lineages. They were used as samples individual extracts of silk glands of second day old larvas of the fifth instar, originating from seven Japanese lineages and eight pure Chinese lineages maintained by the Cocamar-Cooperativa Agroindustrial de Maringل. The isozymes acid phosphatase (ACP), alkaline phosphatase (AKP) and carbonic anhydrase (CA) they were submitted to the electrophoresis in starch gels 14%. The esterases (EST) were analyzed in polyacrylamide gels to 10% and stained with and â-naphtyl acetate. The total of 21 loci was detected, and 04 (19.05%) they are polymorphic, Est-11, Acp, Akp, Ca. The fixation index (Fis) for the analyzed isozymes it was 0.0751, indicating excess of homozygotes. The value of Fst (0.6128) it shows that the lineages are well differentiated. The dendrogram obtained with the values of genetic distance didn"t separate the Chinese and Japanese lineages analyzed totally. That preliminary evaluation of the lineages of B. mori shows that they present genetic material that it can be used in breeding programs that have the purpose of producing hybrid for silk production.(AU)

Este trabalho teve como objetivo avaliar o polimorfismo em lagartas do bicho-da-seda de diferentes linhagens utilizando a eletroforese de isoenzimas para detectar marcadores bioquيmicos e investigar a genética de populaçُes para essas linhagens. Foram utilizados como amostras extratos individuais de glândulas sericيgenas de lagartas do segundo dia da quinta idade, de sete linhagens japonesas e oito linhagens chinesas puras mantidas pela Cocamar-Cooperativa Agroindustrial de Maringل. As isozimas fosfatase لcida (ACP), fosfatase alcalina (AKP) e anidrase carbônica (CA) foram avaliadas por meio de eletroforese em géis de amido de milho a 14%. As esterases (EST) foram analisadas por meio de eletroforese vertical em géis de poliacrilamida a 10% e coloraçمo com ل e â-naftil acetato. Foram observados 21 locos, dentre os quais quatro (19.05%) sمo polimَrficos, Est-11, Acp, Akp, Ca. O يndice de fixaçمo (Fis) para as isozimas analisadas foi 0.0751, indicando excesso de homozigotos. O valor de Fst (0.6128) permite sugerir que as linhagens estمo bem diferenciadas. O dendograma obtido a partir dos valores de distância genética nمo separou totalmente as linhagens chinesas e japonesas analisadas. Essa avaliaçمo preliminar das linhagens de B. mori mostra que elas apresentam material genético que pode ser utilizado em programas de cruzamentos que tenham a finalidade de produzir hيbridos para prara produção de seda.(AU)

A influência de cultivares de amoreiras adubadas sobre características biológicas e produtivas do bicho-da-seda (Bombyx mori L) / The influence of mulberry cultivation with fertilizers on biological characteristics and production performance in silkworm (Bombyx mori L) / La influencia de los cultivares de moreras con abono bajo características biológicas y productivas del gusano de seda (Bombyx mori L)

A cultura da amoreira (Morus alba L.) é essencial para a manutenção dos barracões de criação do bicho-da-seda (Bombyx mori L.). A qualidade nutricional das folhas relaciona-se diretamente com a produção dos casulos, e consequentemente na renda final do produtor. Este artigo tem como objetivo avaliar a influência da adubação química e orgânica, sobre o desenvolvimento das plantas de amora de três diferentes genótipos quanto a caracteres biológicos e produtivos de bicho-daseda. Para isso, foi aplicado adubo químico NPK, esterco de galinha e uma testemunha para cada um dos genótipos avaliados. Foram coletadas informações referentes à biomassa fresca, biomassa seca das amoreiras, peso e comprimento da lagarta, peso da glândula sericígena, peso e teor de seda dos casulos. A cultivar FM 86 apresentou maior desempenho produtivo, independentemente do tipo de adubação. Os caracteres biológicos e produtivos foram influenciados pelos tratamentos, no entanto, a variável que apresenta maior importância econômica, o teor líquido de seda nos casulos obteve médias estatisticamente semelhantes entre os genótipos de amoreiras submetidas aos diferentes tratamentos.(AU)

The mulberry culture (Morus alba L.) is essential to silkworm rearing (Bombyx mori L.). The nutritional quality of the leaves relates directly in the cocoons production and, consequently in the final income of the producer. This work aims to evaluate the influence of the chemical and organic manure on the development from three mulberry genotypes and, consequently, the importance of each genotype on the biological and productive characters of the commercial hybrid silkworm. For this, it was used chemical fertilizer NPK, chicken manure and a witness for each one of the evaluated genotypes. The collected data were: fresh biomass and dry biomass of the mulberry, the silkworm mature larval weight and corporal size, silk gland and cocoon weight and raw silk percentage. The genotype FM 86 was the most productive with both, chemical and organic fertilizer. The silkworm biological and productive characters were influenced by the treatments; however, the most important economically variable, the raw silk percentage, did not show averages statically significant among the different cultivars and or the treatments.(AU)

El cultivo de morera (Morus alba L.) es esencial para el mantenimiento de los barracones de creación del gusano de seda (Bombyx mori L.). La calidad nutricional de las hojas se relaciona directamente con la producción de los capullos, y consecuentemente en la renta final del productor. Esta investigación tiene por objeto evaluar la influencia de la fertilización orgánica y química, sobre el desarrollo de las plantas de morera de tres genotipos diferentes cuanto a rasgos biológicos y productivos del gusano de seda. Para eso, se aplicó el fertilizante NPK, estiércol de pollo y un control para cada uno de los genotipos evaluados. Hemos recopilado informaciones sobre la biomasa fresca, biomasa seca de las moreras, peso y longitud de la oruga, peso de la glándula sericígena, peso y contenido de los capullos de seda. La cultivar FM 86 presentó mayor desempeño productivo, independientemente del tipo de fertilización. Rasgos biológicos y productivos se han influenciados por los tratamientos, sin embargo, la variable que presenta mayor importancia económica es el contenido líquido de seda en los capullos, que obtuvo porcentaje estadísticamente similar entre los genotipos de moreras sometidas a diferentes tratamientos.(AU)

Amplificação por PCR da Região Controle do DNA Mitocondrial de Raças de Bombyx mori / Bombyx mori mitocondrial DNA control region amplification by PCR / Amplificación por PCR de la región control del DNA mitocondrial de razas de Bombyx mori

A sericicultura é uma importante atividade agroindustrial no Brasil, sendo o Estado do Paraná responsável por aproximadamente 90% de toda a produção nacional. A localização de marcadores genéticos para o bicho-da-seda (Bombyx mori L.) é importante para a diferenciação intra e interespecífica e para o uso em melhoramento genético da espécie, sendo o DNA mitocondrial (DNAmt) um dos marcadores genéticos mais utilizados no estudo de insetos. O objetivo deste trabalho foi amplificar a região controle do DNA mitocondrial de quatro raças de Bombyx mori, pela técnica de Polymerase Chain Reaction (PCR). Obteve-se a amplificação de um fragmento de aproximadamente 750 pb referente à região controle, demonstrando a eficiência da metodologia empregada para a amplificação desta região específica do DNAmt de Bombyx mori(AU)

Sericulture is an important agro industrial activity in Brazil, mainly in Paraná State, that is responsible for 90% of the national production. For the genetic improvement of silkworm (Bombyx mori L.), it is necessary to develop techniques to amplify molecular markers in order to use it on genetic analysis. Mitochondrial DNA (mtDNA) has been widely used as a molecular marker for insects and provides suitable markers for studies on genetic variability and molecular characterization. The control region is the major non-coding region of animal mtDNA and has been responsible for providing important evolutionary data about many insect groups. The aim of this paper was to amplify the mtDNA control region of four Bombyx mori strains by polymerase chain reaction (PCR). A 750 bp fragment including the control region was amplified showing the efficiency of the methodology to amplify specific regions of the Bombyx mori mtDNA(AU)

La sericicultura es una importante actividad agroindustrial en Brasil, siendo el Estado del Paraná responsable por aproximadamente 90% de toda la producción nacional. La localización de marcadores genéticos para el gusano de seda (Bombyx mori L.) es importante para la diferenciación intra e interespecífica y para el uso en mejoramiento genético de la especie, siendo el DNA mitocondrial (DNAmt) uno de los marcadores genéticos más utilizados en el estudio de insectos. El objetivo de esta investigación fue amplificar la región control del DNA mitocondrial de cuatro razas de Bombyx mori, por la técnica de Polymerase Chain Reaction (PCR). Se obtuvo la amplificación de un fragmento de aproximadamente 750 pb referente a la región control, demostrando la eficiencia de la metodología empleada para la amplificación de esta región específica del DNAmt de Bombyx mori(AU)