Occurrence and diversity of ciliated protozoa in the most commonly consumed leafy greens in Brazil: a qualitative study / Ocorrência e diversidade de protozoários ciliados nos vegetais folhosos mais consumidos no Brasil: um estudo qualitativo

Ciliated protozoa are an ubiquitous group of eukaryotes that have been poorly reported on leafy greens. The present study aimed to verify the occurrence and diversity of ciliated protozoa in the leaves and roots of three of the most commonly consumed leafy greens in Brazil – lettuce, rocket and coriander. The vegetable samples were washed by manual agitation (3 minutes) in two different media (mineral water and Page ́s Amoeba Saline solution). After washing, the contents were incubated in Petri dishes and aliquots were removed for microscopic identification and in vivo observation. A total of 21 ciliated protozoa species were found, most of which were bacterivorous. Leafy greens have commonly been associated with foodborne outbreaks and ciliated protozoa, which although they are not a Public Health concern, can act as “Trojan Horses” harboring bacteria, viruses and other protozoa cysts and oocysts and can suggest a new route towards microbiological quality related to the food chain. This is the first report of ciliated protozoa on leafy greens consumed in Brazil.

Os protozoários ciliados constituem um grupo onipresente de eucariotos pouco relatados em vegetais folhosos. O presente estudo teve como objetivo verificar a ocorrência e a diversidade de protozoários ciliados nas folhas e raízes de três dos vegetais folhosos mais consumidos no Brasil - alface, rúcula e coentro. As amostras de vegetais foram lavadas por agitação manual (3 minutos) em dois meios diferentes (água mineral e Solução Salina para Ameba). Após a lavagem, o conteúdo foi incubado em placas de Petri e alíquotas foram retiradas para identificação microscópica e observação in vivo dos organismos. Um total de 21 espécies de protozoários ciliados foi encontrado, a maioria das quais era bacterívora. Tais hortaliças têm sido comumente associadas a surtos transmitidos por alimentos e os protozoários ciliados que, embora não sejam um problema de saúde pública, podem atuar como “Cavalos de Tróia” ao abrigar bactérias, vírus além de cistos e oocistos de protozoários o que pode sugerir uma nova rota para a avaliação da qualidade microbiológica relacionada à cadeia alimentar. Este é o primeiro relato de protozoários ciliados em folhas verdes consumidas no Brasil.

Occurrence and diversity of ciliated protozoa in the most commonly consumed leafy greens in Brazil: a qualitative study / Ocorrência e diversidade de protozoários ciliados nos vegetais folhosos mais consumidos no Brasil: um estudo qualitativo

Ciliated protozoa are an ubiquitous group of eukaryotes that have been poorly reported on leafy greens. The present study aimed to verify the occurrence and diversity of ciliated protozoa in the leaves and roots of three of the most commonly consumed leafy greens in Brazil lettuce, rocket and coriander. The vegetable samples were washed by manual agitation (3 minutes) in two different media (mineral water and Page ́s Amoeba Saline solution). After washing, the contents were incubated in Petri dishes and aliquots were removed for microscopic identification and in vivo observation. A total of 21 ciliated protozoa species were found, most of which were bacterivorous. Leafy greens have commonly been associated with foodborne outbreaks and ciliated protozoa, which although they are not a Public Health concern, can act as “Trojan Horses” harboring bacteria, viruses and other protozoa cysts and oocysts and can suggest a new route towards microbiological quality related to the food chain. This is the first report of ciliated protozoa on leafy greens consumed in Brazil.(AU)

Os protozoários ciliados constituem um grupo onipresente de eucariotos pouco relatados em vegetais folhosos. O presente estudo teve como objetivo verificar a ocorrência e a diversidade de protozoários ciliados nas folhas e raízes de três dos vegetais folhosos mais consumidos no Brasil - alface, rúcula e coentro. As amostras de vegetais foram lavadas por agitação manual (3 minutos) em dois meios diferentes (água mineral e Solução Salina para Ameba). Após a lavagem, o conteúdo foi incubado em placas de Petri e alíquotas foram retiradas para identificação microscópica e observação in vivo dos organismos. Um total de 21 espécies de protozoários ciliados foi encontrado, a maioria das quais era bacterívora. Tais hortaliças têm sido comumente associadas a surtos transmitidos por alimentos e os protozoários ciliados que, embora não sejam um problema de saúde pública, podem atuar como “Cavalos de Tróia” ao abrigar bactérias, vírus além de cistos e oocistos de protozoários o que pode sugerir uma nova rota para a avaliação da qualidade microbiológica relacionada à cadeia alimentar. Este é o primeiro relato de protozoários ciliados em folhas verdes consumidas no Brasil.(AU)

Checklist of ciliated protozoa from surface water and sediment samples of Atibaia River, Campinas, São Paulo (Southeast Brazil)

The knowledge of the diversity of ciliated protozoa in an aquatic ecosystem is an important information that can serve as a tool in the environmental quality management. A survey of the ciliated protozoa of the Atibaia River, Campinas, São Paulo was done during 24 months. Surface water and sediment samples were collected monthly from two sampling points. Qualitative analyses of ciliates were performed in vivo and by protargol staining. A total of 66 taxa belonging to 55 genera were identified. This is the first study in Atibaia River and, as this is an impacted water body, these informations can be very useful for conservation.(AU)

Checklist of ciliated protozoa from surface water and sediment samples of Atibaia River, Campinas, São Paulo (Southeast Brazil)

The knowledge of the diversity of ciliated protozoa in an aquatic ecosystem is an important information that can serve as a tool in the environmental quality management. A survey of the ciliated protozoa of the Atibaia River, Campinas, São Paulo was done during 24 months. Surface water and sediment samples were collected monthly from two sampling points. Qualitative analyses of ciliates were performed in vivo and by protargol staining. A total of 66 taxa belonging to 55 genera were identified. This is the first study in Atibaia River and, as this is an impacted water body, these informations can be very useful for conservation.

Ocorrência de oocistos de Cryptosporidium spp. E cistos de Giárdia spp. em diferentes pontos do processo de tratamento de água, em Campinas, São Paulo, Brasil / Occurrence of oocistos of Cryptosporidium spp. And cistos of Giárdia spp. in peculiar points of the water treatment, in Campinas, São Paulo, Brazil

Os protozoários Cryptosporidium spp. e Giárdia spp. são parasitos intestinais que podem ser transmitidos pela água. São responsáveis pela ocorrência de vários surtos de diarréia, em diversos países, sendo que oocistos e cistos exibem acentuada resistência às condições ambientais e aos processos de tratamento da água, apresentando grande relevância em Saúde pública. Considerando que estes protozoários já foram detectados em amostras de água bruta do rio Atibaia, o presente estudo investigou a ocorrência de oocistos e cistos, parâmetros físico-químicos e bacteriológicos, nas principais etapas do sistema da estação de tratamento de água 3 e 4 de Campinas. Foram realizados dois experimentos: um no período de seis meses, e outro, em dias consecutivos, respectivamente. No processamento das amostras foi utilizada a técnica de filtração em membrana, seguida por eluição, centrífuco-concentração, imunofluorescência direta e teste confirmatório empregando corante fluorogênico (DAPI). Os demais parâmetros foram determinados de acordo com os procedimentos do ôStandard Methods, 1998õ. A positividade de Giárdia na água bruta captada no experimento I e II foi de 90 por cento e 100 por cento, respectivamente; Cryptosporidium não foi detectado. Cistos e oocistos não foram detectados em todas as amostras colhidas após as etapas de filtração e decantação. As análises físico-químicas e bacteriológicas atestaram a qualidade da água nas diversas etapas e a degradação da qualidade da água bruta. Os resultados obtidos fornecem uma indicação da eficiência na remoção deste organismo pelo sistema convencional da estação de tratamento da água analisada.(AU)

The protozoa Cryptosporidium spp. and Giardia spp. are intestinal parasites that may be waterborne. They are responsible for the occurrence of several outbreaks of diarrhea in many countries, mainly due to oocyst and cyst resistance to the water treatment processes and in the environment; the presence of these parasites has great Public Health significance. Considering that these protozoa have already been detected in raw water samples from the Atibaia River, the present study investigated the occurrence of oocysts and cysts, bacteriological, physical and chemical parameters in the main steps of the water treatment system 3 e 4 in the city of Campinas, state of São Paulo, Brazil. Two experiments were carried out: one in a period of six months and another on consecutive days, respectively. The sample processing utilizedthe membrane filtration technique followed by elution, centrifugation for concentration, direct immunofluorescence and confirmatory test using fluorogenic vital dye (DAPI). The further parameters were determined according to the Standard Methods, 1998 procedure. Giardia was present in 90% of the raw water samples in test I and in 100% in test II, while Cryptosporidium was not detected. Cysts and oocysts were not detected in any of the samples collected after the filtration and decantation steps. Physical, chemical and bacteriological analysis showed the water quality in all steps and the degradation of the raw water. The results obtained are an indication of efficiency in removal of this organism through the conventional system at the analyzed water treatment plant. (AU)