Serological diagnosis and molecular characterization of Leptospira spp. in the blood and urine of bovine females from refrigerated slaughterhouses / Diagnóstico sorológico e caracterização molecular de Leptospira spp. em sangue e urina de fêmeas bovinas de matadouros-frigoríficos

Leptospirosis is an important socioeconomic disease in humans, as well as in domestic and wild animals, being caused by Leptospira spp. Bovine animals are considered reservoirs of this disease, because they intermittently disseminate the bacteria into the environment through their urine. In this way, the cattle an important source of Leptospira infection. The objective of this study was to detect Leptospira spp. antibodies and DNA in bovine females from two refrigerated slaughterhouses in the microregion of Umuarama, Paraná, Brazil. In particular, blood and urine samples from 52 crossbred bovine females older than 36 months from the two slaughterhouses were used. The microscopic agglutination test (MAT) was used to detect leptospiral antibodies, and the polymerase chain reaction (PCR) and subsequent sequencing were used to detect Leptospira DNA. The MAT yielded 22 (42.3%) serum samples considered reagent, while the nested PCR test resulted in one amplified sample (1.9%)of 289 bp. This single sample was then amplified again using primers for the SecY gene (549 bp). Sequencing of this gene characterized the bacteria as L. borgpetersenii that were similar to the serovar Hardjo of the genotype Hardjobovis. This is the first molecular confirmation of Hardjobovis-like L.borgpetersenii in the urine of crossbred bovine females older than 36 months from slaughterhouses in the microregion of Umuarama. This studys results show that it is important to combine serological and molecular diagnosis in the detection of Leptospira spp. Therefore, both methods were used to improve our understanding of the epidemiology of this disease in bovine animals from the microregion of Umuarama. In addition, the analysis informed the subsequent adoption of preventive measures and educational One Health actions to prevent economic losses related to the herd, as well as social losses related to workers and the environment.(AU)

A leptospirose é uma importante doença sócio-econômica acarretada pela Leptospira spp. que afeta homens e animais domésticos ou selvagens. Os bovinos são considerados reservatórios desta enfermidade, sendo importante fonte de infecção por eliminar a bactéria pela urina de forma intermitente no meio ambiente. O objetivo deste trabalho foi detectar anticorpos e DNA de Leptospira spp. em fêmeas bovinas provenientes de dois matadouro-frigoríficos da microrregião de Umuarama, Paraná, Brasil. Neste trabalho foram utilizadas amostras de sangue e urina de 52 fêmeas bovinas mestiças com idade superior a 36 meses provenientes de dois matadouros-frigoríficos. Para detecção de anticorpo anti-Leptospira spp. foi realizada a prova de Soroaglutinação Microscópica (SAM), e para a detecção de DNA foi realizada a reação em cadeia pela polimerase (PCR) e posterior sequenciamento. Na SAM,22 (42,30%) amostras de soro foram consideradas reagentes e na nested PCR uma (1,92%) amostra amplificou 289 pb, e posteriormente, a mesma amostra amplificada novamente para o gene sec Y com 549pb. O sequenciamento do gene Sec Y caracterizou o produto obtido como L. borgpetersenii semelhante ao sorovar Hardjo genótipo Hardjobovis. Esta é a primeira confirmação molecular semelhante ao genótipo Hardjobovis pertencente à espécie L. borgpetersenii em urina de fêmeas bovinas mestiças com idade superior a 36 meses proveniente de matadouros-frigoríficos localizados na microrregião de Umuarama no estado do Paraná. Os resultados deste trabalho evidenciam a importância da associação do diagnostico sorológico e molecular para a detecção de Leptospira spp. Isto é importante para o entendimento da epidemiologia desta enfermidade em bovinos da microrregião de Umuarama e adoção de medidas de prevenção e ações de educação em saúde na esfera da Saúde Única, evitando assim perdas econômicas relacionado ao rebanho e sociais relacionadas a trabalhadores e meio ambiente.(AU)

Serological and molecular findings in diagnosis of leptospirosis serovar hardjo in a dairy bovine herd / Acompanhamento sorológico e molecular do sorovar hardjo no diagnóstico de leptospirose em um rebanho bovino leiteiro

The cattle are considered hosts of the Hardjo serovar, causing economic damages due to the reproductive failures like abortions and infertility. The serovar Hardjo usually remains in the reproductive tract and also in the renal tubules where it is eliminated intermittently in the urine for months. Placental remnants, the aborted fetus and contaminated urine promote the permanence of this bacterium within the herd for years. Thus, the objective of this study was to monitor for prolonged period, cows naturally infected with Leptospira ssp. through microbiological culture, serological examination and DNA detection of the pathogen in the urine. The dairy herd was composed of 50 breeding cows with a history of abortion and infertility, without leptospirosis vaccine and located in the northern region of Paraná. Blood and urine samples were collected and laboratorial diagnosis were performed five times at intervals of four months. Blood samples were collected from the all 50 animals and the serum was submitted to the microscopic agglutination test (MAT) for the detection of anti-leptospira antibodies. Of the total cows, 20 showed antibody titres ≥ 1: 100 in MAT and urine samples were collected from only those animals with higher titers to perform nested-PCR (n-PCR) and bacterial isolation per culture. In addition, two urine samples from five animals with antibody titers < 1: 100 were collected in MAT for n-PCR. Serovar Hardjo wasconsidered the most frequent during the serological monitoring of the animals evaluated. The n-PCRtechnique was able to detect leptospiral DNA in the urine of animals with MAT ≥ 1: 100 antibody titersand urine from animals whose titers were < 1: 100. Sequencing of the leptospiral amplicons shared100% nucleotide sequence identity with the Leptospira interrogans species. Positive n-PCR resultsfrom animals with titers of < 1: 100 suggest that the cut-off of MAT is could be not sufficient to detectrenal carriers, so it is also important to...(AU)

Os bovinos são considerados hospedeiros do sorovar Hardjo, causando prejuízos econômicos devido aos problemas reprodutivos como abortos e infertilidade. O sorovar Hardjo costuma permanecer no trato reprodutivo e também nos túbulos renais onde é eliminado de forma intermitente na urina por meses. Restos placentários, o feto abortado e a urina contaminada favorecem a permanência dessa bactéria dentro do rebanho por anos. Assim, o objetivo deste estudo foi monitorar por período prolongado, vacas naturalmente infectadas por Leptospira ssp. através de cultura microbiológica, exame sorológico e detecção de DNA do patógeno na urina. O rebanho leiteiro estudado era constituído por 50 vacas reprodutoras com histórico de abortos e infertilidade, sem uso de vacina contra a leptospirose e localizada na região Norte do Paraná. As amostras de sangue e urina foram coletadas e submetidas a análises laboratoriais em cinco vezes em intervalos espaçados de quatro meses. As amostras de sangue foram coletadas dos 50 animais e o soro foi submetido ao teste de soroaglutinação microscópica (SAM) para detecção de anticorpos anti-leptospira. Do total vacas, 20 demonstraram títulos de anticorpos ≥ 1: 100 na SAM e foram coletadas amostras de urina apenas destes animais com maiores título para realizar a nested-PCR (n-PCR) e isolamento bacteriano por cultura. Adicionalmente, foram coletadas duas amostras de urina de cinco animais com títulos de anticorpos < 1: 100 na SAM para n-PCR. OSorovar Hardjo foi considerado como sendo o mais frequente durante o monitoramento sorológico dosanimais avaliados. A técnica de n-PCR foi capaz de detectar DNA leptospiral na urina de animais comtítulos de anticorpos ≥ 1: 100 e na urina de animais cujos títulos eram < 1:100. O sequenciamento dosamplicons leptospíricos compartilhou 100% de identidade da sequência de nucleotídeos com a espécieLeptospira interrogans. Os resultados positivos da n-PCR dos animais com títulos < 1: 100 sugerem quea...(AU)

A serological survey of agents causing leptospirosis and toxoplasmosis in Rattus rattus in the city of Umuarama, northwest Paraná, Brazil / Inquérito sorológico de agentes causadores de leptospirose e toxoplasmose em Rattus rattus da cidade de Umuarama, Noroeste do Paraná, Brasil

Synanthropic rodents, present in both urban and rural areas, are responsible for the zoonotic transmission of several diseases to humans as well as for significant economic losses. They act as reservoirs for important viral diseases, bacterial diseases such as leptospirosis, and parasitic diseases such as toxoplasmosis and leishmaniasis. The aim of the present study was to assess the seropositivity of synanthropic rodents in Umuarama city, located in the northwestern region of Paraná State, Brazil, to agents causing leptospirosis and toxoplasmosis. The microscopic agglutination technique (MAT) was used to detect anti-Leptospira antibodies, and the indirect immunofluorescence reaction (IIFR) was used to detect anti-Toxoplasma gondii antibodies. Of 178 animals collected, four (2.24%) were seropositive for Leptospira spp. and ten (5.62%) for Toxoplasma gondii. Ninety-five (53.38%) of the collected animals were male and 83 (46.62%) were female, and two (1.23%) originated from urban areas while 176 (98.87%) originated from peri-urban areas. Serological results showed that the synanthropic rodents examined here had low seroreactivity for agents causing both leptospirosis and toxoplasmosis, in both urban and peri-urban regions of Umuarama city. This could be associated with the high Human Development Index for the study area. However, preventative measures must continue to be observed, as rodents are important reservoirs for, and disseminators of, disease causing agentes.(AU)

Os roedores sinantrópicos determinam grandes prejuízos econômicos, e são responsáveis pela transmissão de várias zoonoses ao homem tanto em áreas urbanas quanto nas rurais, atuando como reservatórios de importantes doenças que incluem a leptospirose, toxoplasmose, leishmaniose e algumas de etiologia viral. O presente trabalho investigou a sororeatividade para leptospirose e toxoplasmose em roedores sinantrópicos da cidade de Umuarama, cidade localizada na região noroeste do estado do Paraná, Brasil. A técnica Soroaglutinação Microscópica (SAM) foi utilizada para a detecção de anticorpos anti-Leptospira spp e a Reação de Imunofluorescência Indireta (RIFI) para a detecção de anticorpos anti-Toxoplasma gondii. Dos 178 animais examinados, quatro (2,24%) foram reagentes para Leptospira spp. e 10 (5,62%) para o Toxoplasma gondii. Destes animais, 95 (53,38%) eram machos e 83 (46,62%) fêmeas, dois (1,23%) eram provenientes da área urbana e 176 (98,87%) da área periurbana. Os resultados obtidos demonstraram que os roedores sinantrópicos examinados apresentaram baixa freqüência de sororeatividade para as duas zoonoses investigadas, tanto na região urbana como na periurbana da cidade de Umuarama, fato que pode estar associado ao alto Índice de Desenvolvimento Humano encontrado, contudo, as medidas preventivas devem ser mantidas, pois os roedores são importantes elos na cadeia epidemiológica das doenças analisadas.(AU)

Cross-sectional study of Leptospira spp. and Brucela abortus in goat herds from Paraná state, Brazil

Background: Leptospirosis and brucellosis are zoonosis worldwide distributed that have great economic importance, especially in goats. This study aimed to carry out a cross-sectional study to determine the prevalence of anti-Leptospira spp. and anti-Brucella abortus antibodies and to determine epidemiological variables associated to infection by these ethiological agents in goats. Materials, Methods & Results: Serum samples were collected from 1055 goats of 95 properties distributed in 18 regional centers of Paraná State from April to August of 2010. Collected samples were submitted to microscopic agglutination test (MAT) for the detection of anti-Leptospira spp. antibodies with 22 reference serovars: Australis, Bratislava, Autumnalis, Butembo, Castellonis, Bataviae, Canicola, Fortbragg, Whitcombi, Cynopteri, Grippotyphosa, Hebdomadis, Copenhageni, Icterohaemorrhagiae, Panama, Pomona, Pyrogenes, Hardjo, Wolffi, Shermani, Tarassovi and Londrina 1 (L1). The samples were also submitted to buffered acidified plate antigen test (BAPA) and 2-mercaptoethanol test (2-ME) to detect anti-Brucella abortus antibodies. The results obtained from epidemiological and serological study were analysed by Epi Info 3.5.3. We observed 9.9% (104/1055) of goats reagents in at least one serovar of Leptospira spp. and no reagent animal to Brucella abortus. The variables that were statistically [...](AU)

Toxoplasmosis, leptospirosis, and brucellosis seroepidemiology in veterinary medical students and their relation with unique health / Soroepidemiologia da toxoplasmose, leptospirose e brucelose em acadêmicos de medicina veterinária e sua relação com a saúde única

Toxoplasmosis, leptospirosis, and brucellosis are global zoonoses, with humans as accidental participants in their transmission cycles. The can also be considered occupational diseases, because certain professionals are at greater risk of contact and infection by such zoonoses. These three diseases have different epidemiological characteristics because of the distinct environmental, social, cultural, and economic conditions where these pathogens circulate. Because of the importance of these diseases and their associations with specific occupations, we performed a seroepidemiological survey of Toxoplasma, Leptospira, and Brucella antibodies, with an analysis of the association between positive serum and certain occupational and environmental variables, in students of a veterinary medicine course (1st, 2nd, 3rd, 4th, and 5th year) in a university in the northwestern region in the state of Paraná, Brazil. From May to November 2014, blood samples were collected from 157 volunteers by professionals trained in nursing and biomedicine from the same university as the veterinary students. At the time of blood collection, the students did not present any clinical signs of the three diseases of interest. To detect antiToxoplasma gondii, anti-Leptospira spp., and anti-Brucella antibodies, indirect immunofluorescence test (IIF), microscopic agglutination test (MAT), fast agglutination test (a screening test), and enzymelinked immunosorbent assay (ELISA) were performed. To determine variables associated with these infections, the students were interviewed to complete an epidemiological questionnaire with environmental, behavioral, and occupational information. The associations between these variables and infections were assess by chi-square or Fischer’s exact tests, with a 5% significance level (α)...

A toxoplasmose, leptospirose e a brucelose são zoonoses de ampla distribuição mundial, tendo o homem como participante acidental da sua cadeia epidemiológica, entretanto, podem se apresentar como doenças ocupacionais, em diferentes categorias profissionais, despertando grande preocupação, por estarem constantemente expostos ao risco de contato e contagio com essas zoonoses. Estas três enfermidades possuem características epidemiológicas distintas, como reflexo das diferenças ambientais, sociais, culturais e econômicas encontradas em cada localidade. Considerando a importâncias destas três enfermidades e sua relação com o aspecto ocupacional o objetivo deste trabalho foi realizar um levantamento soroepidemiológico para toxoplasmose, leptospirose e brucelose e identificar variáveis ocupacionais e ambientais relacionadas a estas três enfermidades em acadêmicos do curso de medicina veterinária de uma universidade da região noroeste do estado do Paraná, Brasil. No período de maio a novembro de 2014, foram coletadas amostras de sangue de forma voluntária de 157 acadêmicos do curso de Medicina Veterinária (1°, 2°, 3°, 4° e 5° ano). A coleta de sangue foi realizada por profissionais habilitados da área de enfermagem e da biomedicina da respectiva universidade. No momento da coleta de sangue, os acadêmicos não apresentavam manifestação de qualquer sinal clínico das enfermidades deste estudo. Para detectar anticorpos anti-Toxoplasma gondii, anti-Leptospira spp. e anti-Brucella foram realizadas as técnicas de imunofluorescência indireta (RIFI), aglutinação microscópica (SAM), aglutinação rápida (triagem) e ensaio imunoenzimático (ELISA) respectivamente e para a detecção de variáveis associadas às infecções, os acadêmicos foram entrevistados, respondendo a um questionário epidemiológico com informações ambientais, comportamentais e ocupacionais relacionadas às enfermidades...

Cross-sectional study of Leptospira spp. and Brucela abortus in goat herds from Paraná state, Brazil

Background: Leptospirosis and brucellosis are zoonosis worldwide distributed that have great economic importance, especially in goats. This study aimed to carry out a cross-sectional study to determine the prevalence of anti-Leptospira spp. and anti-Brucella abortus antibodies and to determine epidemiological variables associated to infection by these ethiological agents in goats. Materials, Methods & Results: Serum samples were collected from 1055 goats of 95 properties distributed in 18 regional centers of Paraná State from April to August of 2010. Collected samples were submitted to microscopic agglutination test (MAT) for the detection of anti-Leptospira spp. antibodies with 22 reference serovars: Australis, Bratislava, Autumnalis, Butembo, Castellonis, Bataviae, Canicola, Fortbragg, Whitcombi, Cynopteri, Grippotyphosa, Hebdomadis, Copenhageni, Icterohaemorrhagiae, Panama, Pomona, Pyrogenes, Hardjo, Wolffi, Shermani, Tarassovi and Londrina 1 (L1). The samples were also submitted to buffered acidified plate antigen test (BAPA) and 2-mercaptoethanol test (2-ME) to detect anti-Brucella abortus antibodies. The results obtained from epidemiological and serological study were analysed by Epi Info 3.5.3. We observed 9.9% (104/1055) of goats reagents in at least one serovar of Leptospira spp. and no reagent animal to Brucella abortus. The variables that were statistically [...]

Toxoplasmosis, leptospirosis, and brucellosis seroepidemiology in veterinary medical students and their relation with unique health / Soroepidemiologia da toxoplasmose, leptospirose e brucelose em acadêmicos de medicina veterinária e sua relação com a saúde única

Toxoplasmosis, leptospirosis, and brucellosis are global zoonoses, with humans as accidental participants in their transmission cycles. The can also be considered occupational diseases, because certain professionals are at greater risk of contact and infection by such zoonoses. These three diseases have different epidemiological characteristics because of the distinct environmental, social, cultural, and economic conditions where these pathogens circulate. Because of the importance of these diseases and their associations with specific occupations, we performed a seroepidemiological survey of Toxoplasma, Leptospira, and Brucella antibodies, with an analysis of the association between positive serum and certain occupational and environmental variables, in students of a veterinary medicine course (1st, 2nd, 3rd, 4th, and 5th year) in a university in the northwestern region in the state of Paraná, Brazil. From May to November 2014, blood samples were collected from 157 volunteers by professionals trained in nursing and biomedicine from the same university as the veterinary students. At the time of blood collection, the students did not present any clinical signs of the three diseases of interest. To detect antiToxoplasma gondii, anti-Leptospira spp., and anti-Brucella antibodies, indirect immunofluorescence test (IIF), microscopic agglutination test (MAT), fast agglutination test (a screening test), and enzymelinked immunosorbent assay (ELISA) were performed. To determine variables associated with these infections, the students were interviewed to complete an epidemiological questionnaire with environmental, behavioral, and occupational information. The associations between these variables and infections were assess by chi-square or Fischers exact tests, with a 5% significance level (α)...(AU)

A toxoplasmose, leptospirose e a brucelose são zoonoses de ampla distribuição mundial, tendo o homem como participante acidental da sua cadeia epidemiológica, entretanto, podem se apresentar como doenças ocupacionais, em diferentes categorias profissionais, despertando grande preocupação, por estarem constantemente expostos ao risco de contato e contagio com essas zoonoses. Estas três enfermidades possuem características epidemiológicas distintas, como reflexo das diferenças ambientais, sociais, culturais e econômicas encontradas em cada localidade. Considerando a importâncias destas três enfermidades e sua relação com o aspecto ocupacional o objetivo deste trabalho foi realizar um levantamento soroepidemiológico para toxoplasmose, leptospirose e brucelose e identificar variáveis ocupacionais e ambientais relacionadas a estas três enfermidades em acadêmicos do curso de medicina veterinária de uma universidade da região noroeste do estado do Paraná, Brasil. No período de maio a novembro de 2014, foram coletadas amostras de sangue de forma voluntária de 157 acadêmicos do curso de Medicina Veterinária (1°, 2°, 3°, 4° e 5° ano). A coleta de sangue foi realizada por profissionais habilitados da área de enfermagem e da biomedicina da respectiva universidade. No momento da coleta de sangue, os acadêmicos não apresentavam manifestação de qualquer sinal clínico das enfermidades deste estudo. Para detectar anticorpos anti-Toxoplasma gondii, anti-Leptospira spp. e anti-Brucella foram realizadas as técnicas de imunofluorescência indireta (RIFI), aglutinação microscópica (SAM), aglutinação rápida (triagem) e ensaio imunoenzimático (ELISA) respectivamente e para a detecção de variáveis associadas às infecções, os acadêmicos foram entrevistados, respondendo a um questionário epidemiológico com informações ambientais, comportamentais e ocupacionais relacionadas às enfermidades...(AU)

Leptospirosis and brucellosis seroepidemiology in sheep and dogs from non-mechanized rural properties in the northwestern region in the state of Paraná / Soroepidemiologia da leptospirose e brucelose em ovinos e cães de propriedades rurais não tecnificadas da região noroeste do estado do Paraná

Sheep breeding has been important in agribusiness, transforming the Brazilian productive scenario. However, it is still deficient due to the damages caused by infectious diseases. Leptospirosis is a severe disease with global distribution, caused by bacteria from the Leptospira genre affecting both humans and animals. The general infection is unapparent, or its clinical signs, when present, are similar to other infections. Brucellosis is an infectious disease caused by bacteria from the Brucella genre responsible for reproductive disorders in animals, especially ruminants. The purpose of this paper was to seroepidemiological study of Leptospira spp. and Brucella ovis in sheep and dogs from nonmechanized rural properties from the northwestern region in the state of Paraná, Brazil. In order to detect anti-Leptospira antibodies, microscopic agglutination (MAT) was performed. For anti-Brucella antibodies, the agar gel immunodiffusion assay (AGID) was performed. From the total 542 samples from sheep sera analyzed, 11.25% were considered reagent to Leptospira spp. and 18.26% to Brucella ovis. From the 36 dog samples, 25% were reagent to MAT and AGID. From the 32 properties analyzed, 75% were considered positive for leptospirosis and 56.25% for brucellosis. Antibodies against the most probable serovars were Hardjo (34.42%) and Butembo (44.44%) in sheep and dogs, respectively, and the variable exchange of animals among properties was associated to leptospiric infection (p=0.028) in sheep. Leptospirosis and brucellosis are present in the sheep herd and dogs in the rural properties studied, and such result is a warning of the zoonotic importance and the need to establish sanitary programs directed to these animal species.

A ovinocultura tem se destacado no agronegócio, transformando o cenário produtivo do Brasil, porém ainda possui uma deficiência devido aos danos causados por doenças infecciosas. A leptospirose é uma doença grave de distribuição mundial causada por bactérias do gênero Leptospira que afeta o homem e os animais. A infecção geralmente é inapetente, ou os sinais clínicos, quando presentes, são similares aos de outras infecções. A brucelose é uma enfermidade infecciosa causada por bactérias do gênero Brucella responsáveis por desordens reprodutivas nos animais, especialmente nos ruminantes. O objetivo deste trabalho foi realizar um estudo soroepidemiológico de Leptospira spp. e Brucella ovis ovinos e cães de propriedades rurais não tecnificadas da região noroeste do estado do Paraná, Brasil. Para detecção de anticorpos anti-Leptospira foi realizada a soroaglutinação microscópica (SAM), e para anticorpos anti-Brucella, a prova de imunodifusão em gel de ágar (IDGA). Das 542 amostras de soro ovino analisadas, foram consideradas reagentes 11,25% para Leptospira spp. e 18,26% para Brucella ovis. Das 36 amostras de cães, 25% foram regentes a SAM e IDGA. Das 32 propriedades, 75% foram consideradas positivas para leptospirose e 56,25% para brucelose. Os anticorpos contra os sorovares mais prováveis foram Hardjo (34,42%) e Butembo (44,44%) em ovinos e cães respectivamente, e a variável troca de animais entre propriedades foi associada à infecção leptospírica (p=0,028) nos ovinos. A leptospirose e a brucelose estão presentes no rebanho ovino e nos cães das propriedades rurais estudadas, e este resultado serve de alerta à sua importância zoonótica e a necessidade de estabelecer programas sanitários direcionados a esta espécie animal.

Leptospirosis and brucellosis seroepidemiology in sheep and dogs from non-mechanized rural properties in the northwestern region in the state of Paraná / Soroepidemiologia da leptospirose e brucelose em ovinos e cães de propriedades rurais não tecnificadas da região noroeste do estado do Paraná

Sheep breeding has been important in agribusiness, transforming the Brazilian productive scenario. However, it is still deficient due to the damages caused by infectious diseases. Leptospirosis is a severe disease with global distribution, caused by bacteria from the Leptospira genre affecting both humans and animals. The general infection is unapparent, or its clinical signs, when present, are similar to other infections. Brucellosis is an infectious disease caused by bacteria from the Brucella genre responsible for reproductive disorders in animals, especially ruminants. The purpose of this paper was to seroepidemiological study of Leptospira spp. and Brucella ovis in sheep and dogs from nonmechanized rural properties from the northwestern region in the state of Paraná, Brazil. In order to detect anti-Leptospira antibodies, microscopic agglutination (MAT) was performed. For anti-Brucella antibodies, the agar gel immunodiffusion assay (AGID) was performed. From the total 542 samples from sheep sera analyzed, 11.25% were considered reagent to Leptospira spp. and 18.26% to Brucella ovis. From the 36 dog samples, 25% were reagent to MAT and AGID. From the 32 properties analyzed, 75% were considered positive for leptospirosis and 56.25% for brucellosis. Antibodies against the most probable serovars were Hardjo (34.42%) and Butembo (44.44%) in sheep and dogs, respectively, and the variable exchange of animals among properties was associated to leptospiric infection (p=0.028) in sheep. Leptospirosis and brucellosis are present in the sheep herd and dogs in the rural properties studied, and such result is a warning of the zoonotic importance and the need to establish sanitary programs directed to these animal species.(AU)

A ovinocultura tem se destacado no agronegócio, transformando o cenário produtivo do Brasil, porém ainda possui uma deficiência devido aos danos causados por doenças infecciosas. A leptospirose é uma doença grave de distribuição mundial causada por bactérias do gênero Leptospira que afeta o homem e os animais. A infecção geralmente é inapetente, ou os sinais clínicos, quando presentes, são similares aos de outras infecções. A brucelose é uma enfermidade infecciosa causada por bactérias do gênero Brucella responsáveis por desordens reprodutivas nos animais, especialmente nos ruminantes. O objetivo deste trabalho foi realizar um estudo soroepidemiológico de Leptospira spp. e Brucella ovis ovinos e cães de propriedades rurais não tecnificadas da região noroeste do estado do Paraná, Brasil. Para detecção de anticorpos anti-Leptospira foi realizada a soroaglutinação microscópica (SAM), e para anticorpos anti-Brucella, a prova de imunodifusão em gel de ágar (IDGA). Das 542 amostras de soro ovino analisadas, foram consideradas reagentes 11,25% para Leptospira spp. e 18,26% para Brucella ovis. Das 36 amostras de cães, 25% foram regentes a SAM e IDGA. Das 32 propriedades, 75% foram consideradas positivas para leptospirose e 56,25% para brucelose. Os anticorpos contra os sorovares mais prováveis foram Hardjo (34,42%) e Butembo (44,44%) em ovinos e cães respectivamente, e a variável troca de animais entre propriedades foi associada à infecção leptospírica (p=0,028) nos ovinos. A leptospirose e a brucelose estão presentes no rebanho ovino e nos cães das propriedades rurais estudadas, e este resultado serve de alerta à sua importância zoonótica e a necessidade de estabelecer programas sanitários direcionados a esta espécie animal.(AU)

First record of Borrelia burgdorferi sensu lato antibodies in stray dogs in the northwest region of Parana state, Brazil / Primeira detecção de anticorpos anti-Borrelia burgdorferi sensu lato em cães errantes da região noroeste do estado do Paraná, Brasil

The aim of this study was to determine the occurrence of B. burgdorferi sensu lato s.l. antibodies in stray dogs of the urban area of Umuarama Town, localized in the northwest region of Parana state, Brazil. Serum samples from 168 dogs were tested using indirect immunofluorescence assay (IFA) and Western Blot (WB) in order to detect anti-Borrelia burgdorferi s.l. antibodies. The IFI analysis was used as screening test and positive results were confirmed employing the WB technique. Sixty-five (38.69%) of 168 serum samples were positive in the IFI; 54 of them (83.07%) were confirmed by the WB. The overall data analysis confirmed the presence of anti-B. burgdorferi s.l. antibodies in 32.14% (54/168) dogs, what suggests that northwest region of Parana State may constitute a risk area for Lyme disease. Further studies are necessary to determine the epidemiological characteristics of this disease in the region studied.(AU)

O objetivo deste estudo foi determinar a ocorrência de anticorpos anti-B. burgdorferi sensu lato sl em cães errantes da área urbana da cidade de Umuarama, localizado na região noroeste do estado do Paraná, Brasil. Amostras de soro de 168 cães foram testados utilizando imunofluorescência indireta (IFI) e Western Blot (WB), a fim de detectar anticorpos anti-Borrelia burgdorferi sl. A IFI foi utilizada como teste de triagem e os resultados positivos foram confirmados empregando a técnica de WB. Sessenta e cinco (38,69%) de 168 amostras de soro foram positivas na IFI; 54 deles (83,07%) foram confirmados pela WB. A análise geral dos dados confirmaram a presença de anticorpos anti-B. burgdorferi sl em 32,14% (54/168) dos cães, o que sugere que a região noroeste do Estado do Paraná, pode constituir uma área de risco para a doença de Lyme. Mais estudos são necessários para determinar as características epidemiológicas da doença na região estudada.(AU)

Zoonoses em cães e gatos atendidos em Projeto de Controle de Natalidade: Toxoplasma gondii, Leishmania spp. e Leptospira spp., sorodiagnóstico e epidemiologia / Zoonosis in dogs and cats attended by the Birth Control Project: Toxoplasma gondii, Leishmania spp. and Leptospira spp., serodiagnosis and epidemiology

A proximidade da relação homem-animal tem aumentado o risco de transmissão de doenças de caráter zoonótico. O objetivo desse trabalho foi determinar a prevalência de anticorpos IgG anti-Toxoplasma gondii, anti- Leishmania spp. e anti- Leptospira spp. nos cães e gatos atendidos pelo Projeto Controle de Natalidade (PCN) nos anos de 2004 a 2012 e verificar a significância estatística de variáveis ambientais e da população de estudo à presença dos agentes infecciosos. Amostras de sangue de 271 cães e 415 gatos foram colhidas por venopunção jugular ou cefálica para a posterior obtenção dos soros. Estes foram submetidos à técnica de imunofluorescência indireta para detecção de anticorpos IgG anti-T. gondii e anti-Leishmania spp. e à técnica de soroaglutinação microscópica para detecção de anticorpos anti- Leptospira spp. A tabulação dos dados foi realizada utilizando-se o pacote estatístico EpiInfo (3.4.3). Dos soros caninos examinados, 20,6% (56/271), 1,3% (3/236) e 21,6% (51/236) foram positivos para T. gondii, Leishmania spp. e Leptospira spp., respectivamente. Encontrou-se maior prevalência de anticorpos anti- T. gondii em cães sem raça definida (p=0, 0009), em cães alimentados com carne crua ou mal cozida (p= 0,0101) e naqueles que não receberam vacina polivalente (p= 0,0147). Não houve associação estatística entre as variáveis avaliadas no questionário epidemiológico para leishmaniose e leptospirose. Dos soros felinos analisados, 20,9% (87/415) foram positivos para T. gondii. Maiores prevalências foram observadas nos felinos com hábito de caçar roedores (p= 0,0388) e que não recebem água tratada (p= 0,0294). Os resultados obtidos confirmam a importância dos fatores de risco ingestão de carne crua ou mal cozida, ingestão de água não tratada e predação de roedores para infecção por T. gondii. Demonstrou-se baixa prevalência ao sorodiagnostico para Leishmania spp. Os sorovares de Leptospira spp. mais frequentes foram Copenhageni, Canicola e Butembo.(AU)

Increasing human-animal proximity has also increased risks of zoonotic disease transmission. This study measured the prevalence of anti-Toxoplasma gondii, anti-Leishmania spp. and anti-Leptospira spp. IgG antibodies in dogs and cats attended by the Birth Control Project (BCP) from 2004 to 2012 to determine which environmental variables were significantly associated with infectious agents in the study population. Blood samples from 271 dogs and 415 cats were collected by jugular or cephalic venipuncture for serological analysis. Indirect immunofluorescence assays were used to detect anti-T. gondii and anti-Leishmania spp. IgG antibodies and microscopic serum-agglutination tests were used to detect anti- Leptospira spp. antibodies. Data tabulation and statistical analyses were performed using EpiInfo (3.4.3). Among canine sera samples, 20.6% (56/271), 1.3% (3/236), and 21.6% (51/236) were positive for T. gondii, Leishmania spp., and Leptospira spp., respectively. Higher T. gondii prevalence was found in dogs of unknown breeding history (p=0.0009), those fed raw or undercooked meat (p=0.0101), and those that did not receive the polyvalent vaccine (p=0.0147). There was no statistically significant association between leishmaniosis and leptospirosis and variables evaluated in the epidemiological questionnaire. Among feline sera samples, 20.9% (87/415) were positive for T. gondii. The highest prevalence rates were observed in felines that hunted rodents (p=0.0388) and that consumed untreated water (p=0.0294). These results confirmed that ingestion of raw or undercooked meat, drinking untreated water, and predation of rodents were important risk factors for T. gondii infection. A low Leishmania spp. serodiagnostic prevalence was observed. The most frequent Leptospira spp. serovars were Copenhageni, Canicola, and Butembo.(AU)

Prevalência de anticorpos contra Chlamydophila abortus em ovinos da região de Londrina, Paraná, Brasil / Prevalence of antibodies to Chlamydophila abortus in ovines in the Londrina area of Paraná state, Brazil

O objetivo deste trabalho foi estimar a prevalência de anticorpos anti-Chlamydophila abortus em ovinos de propriedades localizadas na região de Londrina, estado do Paraná. A prova de fixação de complemento foi realizada em 267 amostras de soro sanguíneo de ovinos adultos, provenientes de oito propriedades e foram considerados positivos os soros com títulos ? 32. Em sete (87,50%) propriedades foram detectados 19 (7,11%) animais positivos, sendo 17 com títulos de 32, um com 64 e outro com 128. Nestas propriedades, os sinais clínicos descritos foram abortamentos, natimortalidade, nascimento de crias fracas e repetição de cio. A elevada frequência de propriedades com pelo menos um animal positivo e a ocorrência de 19 (7,11%) animais positivos na prova de fixação de complemento sugerem a presença de Chlamydophila abortus nos animais das propriedades estudadas. (AU)

The aim of this paper was to estimate the prevalence of antibodies to Chlamydophila abortus in ewes from the Londrina region of Paraná state. Blood samples from 267 adult ewes from eight herds were submitted to complement fixation testing. Tests were considered positive when the titers ? 32. Nineteen animals (7.11%) in 7 (87.50%) herds tested positive for antibodies against C. abortus. The titers were 32 in 17 animals and were 64 and 128 in the other two animals. The clinical signs recorded were abortion, stillbirth, weak newborns and heat repetition. The high frequency of herds with at least one positive animal and a seroprevalence of 7.11% suggest the presence of Chlamydophila abortus in the animals of studied herds.(AU)

First record of Borrelia burgdorferi B31 strain in Dermacentor nitens ticks in the northern region of Parana (Brazil)

The aim of this study was to investigate the presence of DNA of Borrelia burgdorferi sensu lato (s.l.) in ticks that feed on horses used for animal traction in rural Jataizinho, Parana, Brazil. Between February and June 2008, a total of 224 ticks was collected of which 75% were identified as Dermacentor nitens and 25% as Amblyomma cajenense. To amplify B. burgdorferi s.l. DNA, the intergenic space region (ISR) between the 5S (rrf) 23S (rrl) rRNA genes was used as targets for nested-PCR. Two ticks of the D. nitens species were positive for B. burgdorferi s.l. Both species showed a fragment of 184 bp, but the sequencing revealed 99.9% homology with the B. burgdorferi sensu stricto (s.s.) strain B31. These results showed, for the first time, the presence of spirochete DNA infecting ticks that parasitize horses used for animal traction, in the rural municipality mentioned. In conclusion, this study opens up promising prospects for determining the infection rate of B. burgdorferi s.s. genospecies or other species in the equine population, as well as the impact of the infection rate on Lyme disease in the state of Parana.(AU)

Toxoplasmosis, leptospirosis and brucellosis in stray dogs housed at the shelter in Umuarama municipality, Paraná, Brazil

Background : Leptospirosis, toxoplasmosis and brucellosis are diseases with worldwide distribution. Among stray dogs, these zoonoses are facilitated by direct contact with other animal species, by the habit of scavenging garbage and hunting in search of food, drinking standing water, smelling other animals' urine, licking female genitalia and the sexual act itself. The objective of this study was to detect antibodies anti-Toxoplasma gondii, anti-Leptospira spp., anti-Brucella canis and anti-Brucella abortus in stray dogs housed in shelters at Umuarama city, Paraná, Brazil. In order to detect toxoplasmosis, indirect immunofluorescence assay (IFA) was performed, agglutination microscopic (MAT) test for leptospirosis and agar gel immunodiffusion (AGID) and buffered acidified antigen (BAA) tests for brucellosis. Results : Of the 175 serum samples analyzed, 70.85% were considered positive for toxoplasmosis by IFA, 20% by MAT for leptospirosis and 2.85% by AGID for Brucella canis. Conclusions : The serological results of this study showed that stray dogs housed at the private shelter are potential carriers of these three different zoonoses and contribute to the spread and maintenance of these etiologic agents in the urban area of Umuarama (PR), Brazil.(AU)

Zoonoses in humans from small rural properties in Jataizinho, Parana, Brazil

The aim of this study was to conduct a serological survey for Lyme diseases, brucellosis, leptospirosis and toxoplasmosis and identify the risk variables related to these zoonoses in humans living in the rural area of Jataizinho, state of Parana, Brazil. A total of 63 rural properties were surveyed. Additionally, 207 serum samples collected from these rural area inhabitants were tested for indirect immunofluorescence (IFI) and western blots (WB) were performed to detect Borrelia burgdorferi (sensu lato); a tamponated acidified antigen test (AAT) and 2-mercaptoethanol (2-ME) were used to detect antibodies of Brucella abortus; the microscopic agglutination test (MAT) was carried out to detect antibodies anti-Leptospira spp. and IFI was used to find antibodies of Toxoplasma gondii. Two of the samples (0.96%) were reactive for Lyme borreliosis, three (1.4%) for brucellosis, 25 (12.1%) for leptospirosis and 143 (69.1%) for toxoplasmosis. Although the town of Jataizinho has a human development index (IDH) that was considered to be average (0.733) in the state of Parana, the low social, economic and cultural conditions of the population from small rural properties have resulted in lack of basic information on animal health and direct or indirect contact with the various species of domestic animals, wildlife and ticks have probably contributed to the prevalence levels found. These results show the need for additional regional studies in order to determine the epidemiological characteristics of these diseases as well as their respective vectors and reservoirs so that effective prophylaxis can be administered in the human population.(AU)

Toxoplasmosis, leptospirosis and brucellosis in stray dogs housed at the shelter in Umuarama municipality, Paraná, Brazil

Background : Leptospirosis, toxoplasmosis and brucellosis are diseases with worldwide distribution. Among stray dogs, these zoonoses are facilitated by direct contact with other animal species, by the habit of scavenging garbage and hunting in search of food, drinking standing water, smelling other animals' urine, licking female genitalia and the sexual act itself. The objective of this study was to detect antibodies anti-Toxoplasma gondii, anti-Leptospira spp., anti-Brucella canis and anti-Brucella abortus in stray dogs housed in shelters at Umuarama city, Paraná, Brazil. In order to detect toxoplasmosis, indirect immunofluorescence assay (IFA) was performed, agglutination microscopic (MAT) test for leptospirosis and agar gel immunodiffusion (AGID) and buffered acidified antigen (BAA) tests for brucellosis. Results : Of the 175 serum samples analyzed, 70.85% were considered positive for toxoplasmosis by IFA, 20% by MAT for leptospirosis and 2.85% by AGID for Brucella canis. Conclusions : The serological results of this study showed that stray dogs housed at the private shelter are potential carriers of these three different zoonoses and contribute to the spread and maintenance of these etiologic agents in the urban area of Umuarama (PR), Brazil.

Occurrence of Ehrlichia canis and Anaplasma platys in household dogs from northern Parana / Ocorrência de Ehrlichia canis e Anaplasma platys em cães domiciliados da região norte do Paraná

Canine monocytic ehrlichiosis caused primarily by Ehrlichia canis and canine thrombocytic anaplasmosis induced by Anaplasma platys are important emerging zoonotic tick-borne diseases of dogs. There is evidence that these pathogens can also affect humans. This study evaluated the presence of E. canis and A. platys in blood samples collected from 256 domiciled dogs in the municipality of Jataizinho, located in north region of the State of Parana, Brazil, by PCR assay. The occurrence of E. canis and A. platys was 16.4% (42/256) and 19.4% (49/256), respectively; while 5.47% (14/256) of the dogs evaluated were co-infected by these two organisms. The presence of E. canis and A. platys was not significantly associated with the variables evaluated (sex, age, outdoor access, and presence of ticks during blood collection). Infection of dogs by E. canis was associated with anemia and thrombocytopenia, while infection induced by A. platys was related only to thrombocytopenia. Canine monocytic ehrlichiosis and canine thrombocytic anaplasmosis should be included in the differential diagnoses when these hematological alterations are observed during routine laboratory evaluation of dogs.(AU)

Erliquiose monocítica canina, causada principalmente por Ehrlichia canis, e anaplasmose trombocítica canina, devida a infecção com Anaplasma platys, são importantes doenças transmitidas por carrapatos que acometem os cães, com evidências que podem também acometer o homem. O presente estudo avaliou a ocorrência desses agentes em amostras de sangue de 256 cães domiciliados na cidade de Jataizinho, na região Norte do Paraná, Brasil, utilizando a técnica da Reação em Cadeia da Polimerase (PCR). A ocorrência de E. canis e A. platys foi de 16,4% (42/256) e 19,4% (49/256), respectivamente, com 5,47% (14/256) dos animais apresentando coinfecção. Não foi observada associação significativa com as variáveis sexo, idade, acesso à rua e presença de carrapatos no momento da coleta de sangue. A infecção por E. canis teve relação com anemia e com trombocitopenia, enquanto a infecção por A. platys apresentou relação apenas com trombocitopenia. Com base nos resultados obtidos, reforçou-se a necessidade de que erliquiose e anaplasmose canina devem estar entre os diagnósticos diferenciais, quando da detecção de anemia e trombocitopenia em exames laboratoriais.(AU)

Ocorrência de carrapatos (acari: ixodidae) parasitando equinos no município de Jataizinho, Paraná / Ocurrencia de garrapatas (acari: ixodidae) parasitando equinos en el municipio de Jataizinho, Paraná / Occurence of ticks (acari: ixodidae) parasiting equines in the municipality of Jataizinho, Paraná

Devido a suspeita de anticorpos contra Borrelia burgdorferi sensu lato (s.l) em moradores da área rural do município de Jataizinho (PR), foram coletados, entre fevereiro a junho de 2008, ixodídeos adultos parasitando equinos de 21 propriedades rurais deste município. Os 224 ixodídeos adultos de equinos foram identificados como Amblyomma cajennense (25%) e Dermacentor nitens (75%). Nas áreas de coleta desta pesquisa, o parasitismo humano por carrapatos era frequentemente relatado pelos moradores rurais. O estudo dos ixodídeos parasitando equinos em relação à doença de Lyme é um assunto pouco explorado e entendido no Brasil. No estado do Paraná (PR) é a primeira vez que a doença de Lyme está sendo pesquisada, o que ressalta a importância deste estudo nos ixodídeos capturados em equinos, para o entendimento da epidemiologia desta enfermidade transmitida pelo carrapato em outras regiões do Brasil. (AU)

Due to the possibility of antibodies against Borrelia burgdorferi sensu lato (sl) in the rural area of Jataizinho (PR), adult ixodids parasitizing horses 21 farms in this municipality were collected between February and June 2008. 224 adult ixodid horses were identified as Amblyomma cajennense (25%) and Dermacentor nitens (75%). In the collection areas of this research, human infestation by ticks are frequently reported by rural residents. The study of ixodid parasites of horses in relation to Lyme disease is a little explored and understood subject in Brazil. In the state of Paraná (PR) it is the first time that Lyme disease is being studied empahsizing the importance of this study in ixodid from horses to understand the epidemiology of this disease transmitted by ticks in other regions of Brazil.(AU)

Debido a sospecha de anticuerpos contra Borrelia burgdorferi sensu lato (s.l) en moradores del área rural del municipio de Jataizinho (PR), se colectó entre febrero a junio de 2008, ixodídeos adultos parasitando equinos de 21 propiedades rurales de este municipio. Los 224 ixodídeos adultos de equinos fueron identificados como Amblyomma cajennense (25%) y Dermacentor nitens (75%). En las áreas de coleta de esta investigación, el parasitismo humano por garrapatas era frecuentemente relatado por los moradores rurales. El estudio de los ixodídeos parasitando equinos en relación a la enfermedad de Lyme es un asunto poco explotado y entendido en Brasil. En el estado de Paraná es la primera vez que la enfermedad de Lyme está siendo investigada, lo que resalta la importancia de este estudio en los ixodídeos capturados en equinos, para el entendimiento de la epidemiología de esta enfermedad transmitida por garrapata en otras regiones de Brasil.(AU)

Leptospirose em cão errante da região noroeste do Estado do Paraná - relato de caso / Leptospirosis in a stray dog in the northwestern region of Paraná State - case report / Leptospirosis en perro callejero de la région noroeste del estado de Paraná - relato de caso

A leptospirose é uma doença de caráter zoonótico, provocada pela Leptospira spp. Na área urbana, os cães errantes possuem 3,59 vezes mais risco de se infectar com esta enfermidade, pelo fato de formarem grupos quando fêmeas estão no cio, além da exposição com água empoçada e revirar lixos à procura de restos de alimentos que podem estar contaminados com urina de roedores ou animais infectados. O objetivo deste trabalho foi detectar anticorpos contra Leptospira spp. em um cão errante assintomático para avaliar seu potencial zoonótico. Foi coletado sangue de um cão errante assintomático de um canil privado da região Noroeste do estado do Paraná para a pesquisa de anticorpos contra Leptospira spp. pela SAM. A amostra foi considerada reagente, apresentando anticorpos contra o sorovar Canicola com título de 3.200. O resultado encontrado neste trabalho sugere a presença da Leptospira spp., entre os cães assintomáticos do referido abrigo, demonstrando a importância de se conhecer a ocorrência desta enfermidade que é uma zoonose de importância para saúde pública.(AU)

Leptospirosis is a zoonotic disease caused by Leptospira spp. In urban areas, stray dogs have 3.59 times higher risk of becoming infected with this disease because they form groups when females are in heat besides their exposure to still water and trash when looking for food scraps that may be contaminated by urine of infected rodents or animals. The objective of this study was to detect antibodies against assymptomatic Leptospira spp. in a stray dog ??to evaluate its zoonotic potential. Blood was collected from an asymptomatic stray dog of a private shelter in the northwest of Paraná state for antibodies against Leptospira spp. by SAM. The sample was considered reactive, with antibodies against serovar Canicola title with 3.200. The findings of this study show the presence of Leptospira spp. among asymptomatic dogs of that shelter, demonstrating that knowing the occurrence of this disease is a zoonosis of public health importance. (AU)

La leptospirosis es una enfermedad de carácter zoonótico, provocada por Leptospira spp. En el área urbana, los perros callejeros poseen 3,59 más riesgo de infectarse con esta enfermedad, por el hecho de estar en grupos cuando las hembras están en celo, además de la exposición en agua estancada y revolver basuras en búsqueda de alimentos que pueden estar contaminados con orina de roedores o animales infectados. El objeto de esta investigación fue detectar anticuerpos contra Leptospira spp., en un perro callejero asintomático para evaluar su potencial zoonótico. La sangre fue colectada de un perro callejero asintomático en una perrera privada de la región Noroeste del Estado de Paraná para investigación de anticuerpos contra Leptospira spp., por la SAM. La muestra fue considerada reactiva, presentando anticuerpos contra el serovar Canicola con título de 3.200. El resultado encontrado en esta investigación sugiere la presencia de Leptospira spp., entre los perros asintomáticos del referido abrigo, demostrando la importancia en conocer la ocurrencia de esta enfermedad que es una zoonosis de importancia para la salud pública.(AU)

Fatores de risco associados à mastite bovina causada por Prototheca zopfii / Risk factors associated with bovine mastitis caused by Prototheca zopfii

Este trabalho teve como objetivo o estudo de fatores de risco associados à mastite bovina causada por Prototheca zopfii. Foram analisadas 13 propriedades leiteiras dos Estados do Paraná e de São Paulo, segundo os seguintes critérios de seleção: confirmação prévia de casos de mastite por Prototheca spp., triagem pela pesquisa de Prototheca spp. em tanques de expansão e latões e rebanhos com contagem de células somáticas acima de 5x105cel mL-1. As amostras coletadas consistiram de: leite, água, solo, fezes e swab de teteiras. Prototheca spp. foi isolada de amostras de leite dos quartos mamários com mastite clínica ou subclínica em uma propriedade e de amostras de leite e do ambiente em quatro propriedades, nas quais foi isolada em amostras de: água de bebedouro, abastecimento, esgoto, empoçada no piso de estábulo e sala de ordenha, solo de piquete e pasto, teteiras, fezes de bezerros e suínos. Do total de 383 vacas examinadas, Prototheca spp. foi isolada em 20 (5,2 por cento) vacas, sendo caracterizada como P. zopfii em 18. Os fatores de risco associados à mastite causada por P. zopfii foram: criação das vacas a pasto, alimentação dos animais com pasto e silagem, realização de ordenha mecânica em estábulo, permanência das vacas após ordenha em piquete sem alimento, criação de suínos próxima às instalações dos bovinos, existência de cães, gatos e roedores, falta de higienização dos tetos com água, pré-imersão dos tetos em aplicador com retorno e sem a troca do anti-séptico, alimentação dos bezerros com leite de vacas com mastite clínica e serem as vacas da raça holandesa.(AU)

This research had as objective the study of risk factors associated with bovine mastitis caused by Prototheca zopfii. Thirteen dairy herds in Paraná and São Paulo states were analyzed and selected according to the following criteria: previous confirmation of Prototheca spp. mastitis cases, screening of Prototheca spp. in bulk tanks and milk cans, and herds with somatic cells count over 5x105cel mL-1. The samples collected consisted of: milk, water, soil, manure and swabs of teat cup rubbers. Prototheca spp. was isolated from mammary quarters with clinical and subclinical mastitis of milk samples in one herd and from the environment and cows in four herds. Out of 383 cows examined, Prototheca spp. was isolated in 20 (5.2 percent) cows with mastitis, and 18 of them were characterized as P. zopfii. In four herds when Prototheca spp. was identified from mammary quarters and environment the agent was isolated from the following samples: water in the waterers, puddled water in the stalls and the milking parlour, supply, sewage, cow pen and pasture soil, teat cup rubbers and manure from calves and swines. The risk factors associated with P. zopfii mastitis consisted of: pasture system, pasture and silage feeding, use of milking machine in stalls, cow pen without fresh feed after milking, raising of swines near bovine housing, existence of dogs, cats and rodents, absence of teats hygienization with water, use of pre-immersion devices with return and without change of antiseptic, calves fed with milk of clinical mastitis cases and the Holstein breed.(AU)