AVALIAÇÃO DA QUALIDADE, FERTILIDADE E PROTEÔMICA DE OVOS DE CASCA VÍTREA DE REPRODUTORAS PESADAS

Objetivou-se avaliar a influência do tipo de casca (normal e vítrea) sobre os parâmetros de fertilidade, qualidade interna e externa de ovos, além da proteômica das estruturas da casca de reprodutoras pesadas. Para avaliação dos parâmetros de qualidade dos ovos, o experimento foi dividido em duas fases. No experimento 1 foram avaliados 240 ovos (120 de casca normal e 120 de casca vítrea), no prazo máximo de 24 horas após a postura, coletados igualmente entre quatro lotes de avós de frangos de corte da linhagem Ross, de duas linhas (macho e fêmea) e duas idades (38 e 46 semanas). No experimento 2 foram utilizadas 5 bandejas de 162 ovos de casca normal e a mesma quantidade para casca vítrea, de um lote de avós da linha macho da genética Cobb, com 40 semanas de idade. Para a análise proteômica foram utilizados ovos de quatro lotes de avós de frangos de corte (mesmos lotes do experimento 1 de qualidade), sendo selecionados 80 ovos, 20 de cada lote (pool de 10 ovos de casca normal e 10 ovos de casca vítrea) pela característica externa da casca. De cada lote foram coletados fragmentos da estrutura da casca (cascas e membranas das cascas), triturados manualmente, homogeneizados e depois selecionado 1 grama de cada pool para formar a análise final. Ovos de casca normal apresentaram maiores médias que ovos de casca vítrea para as variáveis Porcentagem de Albúmen, Índice de Gema, Índice de Albúmen e unidades Haugh, e menor média para Porcentagem de Magnésio na casca. A perda de umidade na incubação foi maior para os ovos de casca vítrea, em comparação com ovos de casca normal. Por proteômica, foram identificadas 309 proteínas (2989 peptídeos) diferentes nas 8 amostras avaliadas das estruturas da casca. Após análise estatística comparando todos os lotes e proteínas, foi identificada diferença somente para duas proteínas (ATPase- A0A1Y4CB63 e OVA fragmentos idêntica à OvoalbuminaA0A2H4Y8Q2), sendo que as diferenças entre as proporções foram significativamente maiores para casca vítrea. Dentre as proteínas encontradas destacam-se: Ovotransferrina, Ovalbumina, proteína OVA fragmentos, Proteína Y relacinado à Ovoalbumina, Serotransferrina, Ovomucóide, 2-c-methyl glycerol 4-phosphate cytidylytransferase, SERPIN, Proteína Não Caracterizada (Gene Ovostatina), Aplha-1-acid glycoprotein, ATPase e Proteína Não Caracterizada (Gene B5G11_16010). Ovos de casca vítrea têm qualidade interna inferior em relação aos de casca normal, além de perderem mais umidade na incubação (provavelmente por alterações na matéria orgânica/proteica na casca). A partir dos achados proteômicos é possível especular alguma alteração de expressão gênica no útero, que pode levar a superexpressões proteicas (por exemplo proteína OVA/ Ovoalbumina), com aumento do conteúdo orgânico da matriz e desarranjos nas camadas biomineralizadas de ovos de casca vítrea. Portanto, sugere-se novas pesquisas de perfil molecular entre as diferentes estruturas dos dois tipos de casca, além de estudos de manejos diferenciados a nível de campo e incubatório para ovos de casca vítrea.

The objective was to evaluate the influence of the eggshell type (normal and vitreous) on the parameters of fertility, internal and external quality of eggs, in addition to the proteomics of eggshell structures of broiler breeders. To evaluate the egg quality parameters, the experiment was divided into two phases. In experiment 1, 240 eggs (120 of normal shell and 120 of vitreous shell) were evaluated, within a maximum of 24 hours after laying, collected equally between four lots of Ross broilers, two lines (male and female) and two ages (38 and 46 weeks). In experiment 2, five trays of 162 eggs with normal eggshell and the same amount for vitreous eggshell were used, from a lot of grandparents of the male line of the Cobb genetics, at 40 weeks of age. For the proteomic analysis, eggs from four lots of broiler grandparents (same lots from experiment 1 of quality) were used, with 80 eggs selected, 20 from each lot (pool of 10 eggs with normal shell and 10 eggs with vitreous shell) by the external characteristic of the shell. Fragments of the shell structure (shells and shells membranes) were collected from each lot, manually crushed, homogenized and then selected 1 g from each pool to form the final analysis. Normal shell eggs showed higher averages than vitreous shell eggs for the variables Albumin Percent, Yolk Index, Albumin Index and Haugh units, and lower average for Magnesium Percent in the shell. The loss of humidity in the incubation was higher for eggs with vitreous shell, compared with eggs with normal shell. By proteomics, 309 different proteins (2989 peptides) were identified in the 8 samples evaluated from the shell structures. After statistical analysis comparing all lots and proteins, a difference was identified only for two proteins (ATPase- A0A1Y4CB63 and OVA fragments identical to OvoalbuminA0A2H4Y8Q2), and the differences between the proportions were significantly higher for vitreous shell. Among the proteins found, we highlight: Ovotransferrin, Ovalbumin, OVA protein fragments, Protein Y related to Ovoalbumin, Serotransferrin, Ovomucoid, 2-c-methyl glycerol 4-phosphate cytidylytransferase, SERPIN, Uncharacterized Protein (Ovostatin Gene), Aplha-1 -acid glycoprotein, ATPase and Uncharacterized Protein (Gene B5G11_16010). Vitreous shell eggs have a lower internal quality than normal shell eggs, in addition to losing more humidity during incubation (probably due to changes in the organic / protein matter in the shell). From the proteomic findings it is possible to speculate some alteration of gene expression in the uterus, which can lead to protein overexpression (for example OVA / Ovoalbumin protein), with an increase in the organic content of the matrix, and breakdowns in the biomineralized layers of vitreous shell eggs. Therefore, we suggest new researches of molecular profile between the different structures of the two types of shell, in addition to studies of different field and hatchery managements for vitreous shell eggs.

Alterações biomecânicas da coluna vertebral e injurias vertebrais em cães atendidos no hospital veterinário da Universidade Federal de Uberlândia

Todo movimento é um evento mecânico que implica em uma força sobre a coluna. Sempre que tal força exceder a tolerância da coluna lesões irão ocorrer, podendo ser de diferentes magnitudes. Foram analisadas radiografias de 33 cães com suspeita clínica de alteração vertebral, atendidos no Hospital Veterinário da Universidade Federal de Uberlândia entre janeiro de 2007 e setembro de 2010. Notou-se que 20 animais (60,60 %) apresentaram alterações no perfil anátomo-funcional da coluna vertebral (colunas em cifose, lordose ou excessivamente retilíneas). Com relação à presença de lesões, foi verificado que 30 cães (90,90%) tiveram diagnóstico positivo para algum processo patológico. Os resultados não apresentaram diferença (p > 0,05). Concluiu-se que alterações morfológicas da coluna vertebral são contundentes para o desenvolvimento de distúrbios biomecânicos e posteriores manifestações clínicas, pois levam a um aumento na magnitude, estresse e freqüência de cargas aplicadas, com consequente comprometimento na síntese dos tecidos, sendo associadas às mudanças nas estruturas dos discos intervertebrais.

Every movement is a mechanical event that requires a force on the spine. Whenever this force exceeds the tolerance of the spine, injuries will occur, and may be of different magnitudes. From it were analyzed radiographs of 33 dogs with clinical suspicion of vertebral change, consulted in Veterinary Hospital of the Federal University of Uberlândia between january 2007 and september 2010. It was noted that 20 animals (60.60%) showed changes in anatomical and functional profile of the spine (columns in kyphosis, lordosis or too straight). With respect to lesions, it was found that 30 dogs (90.90%) had a positive diagnosis for any disease process. These results showed no differences (p > 0.05). Therefore, the morphology of the spine are remarkable for the development of biomechanical changes and subsequent clinical manifestations, since they lead to an increase in the magnitude, frequency and stress of applied loads, with consequent changes in tissues synthesis, being associated with changes in structures of intervertebral discs.

Alterações biomecânicas da coluna vertebral e injurias vertebrais em cães atendidos no hospital veterinário da Universidade Federal de Uberlândia

Todo movimento é um evento mecânico que implica em uma força sobre a coluna. Sempre que tal força exceder a tolerância da coluna lesões irão ocorrer, podendo ser de diferentes magnitudes. Foram analisadas radiografias de 33 cães com suspeita clínica de alteração vertebral, atendidos no Hospital Veterinário da Universidade Federal de Uberlândia entre janeiro de 2007 e setembro de 2010. Notou-se que 20 animais (60,60 %) apresentaram alterações no perfil anátomo-funcional da coluna vertebral (colunas em cifose, lordose ou excessivamente retilíneas). Com relação à presença de lesões, foi verificado que 30 cães (90,90%) tiveram diagnóstico positivo para algum processo patológico. Os resultados não apresentaram diferença (p > 0,05). Concluiu-se que alterações morfológicas da coluna vertebral são contundentes para o desenvolvimento de distúrbios biomecânicos e posteriores manifestações clínicas, pois levam a um aumento na magnitude, estresse e freqüência de cargas aplicadas, com consequente comprometimento na síntese dos tecidos, sendo associadas às mudanças nas estruturas dos discos intervertebrais.(AU)

Every movement is a mechanical event that requires a force on the spine. Whenever this force exceeds the tolerance of the spine, injuries will occur, and may be of different magnitudes. From it were analyzed radiographs of 33 dogs with clinical suspicion of vertebral change, consulted in Veterinary Hospital of the Federal University of Uberlândia between january 2007 and september 2010. It was noted that 20 animals (60.60%) showed changes in anatomical and functional profile of the spine (columns in kyphosis, lordosis or too straight). With respect to lesions, it was found that 30 dogs (90.90%) had a positive diagnosis for any disease process. These results showed no differences (p > 0.05). Therefore, the morphology of the spine are remarkable for the development of biomechanical changes and subsequent clinical manifestations, since they lead to an increase in the magnitude, frequency and stress of applied loads, with consequent changes in tissues synthesis, being associated with changes in structures of intervertebral discs.(AU)

PROTEÔMICA DA MATRIZ NUCLEAR ESPERMÁTICA SUÍNA

Objetivou-se com este estudo realizar o isolamento e identificação das proteínas da matriz nuclear espermática de um reprodutor suíno. Foi utilizado sêmen de suíno pré-diluído resfriado, obtido de um reprodutor aparentemente saudável, com testes de morfologia e de condensação de cromatina normais, da linha comercial landrace X large White X pietran, com 22 semanas de idade, utilizado normalmente em uma central de inseminação artificial de suínos localizada em Uberlândia, Minas Gerais. O sêmen foi processado para separação das cabeças dos espermatozoides, extração da cromatina e matriz nuclear, quantificação de proteínas e análise por espectrometria de massas (Aparelho LTQ-Orbitrap Elite). A família de proteínas mais abundantes correspondeu às ribossomais (18%), seguida pelas não caracterizadas (15,6%), citoesqueleto (11,4%), histonas (3,8%), subunidades proteossomais (2,8%) e heat shock (1,9%). As outras proteínas foram agrupadas em outras famílias e corresponderam a 46,5% do total de proteínas descritas. Foram identificadas 211 proteínas diferentes na amostra, e destas 149 (70,7%) foram previamente descritas como presentes no núcleo espermático ou somático de outras espécies, 29 (13,7%) não têm presença nuclear previamente descrita e 33 (15,6%) foram não caracterizadas. A protamina 2 foi identificada pela primeira vez na espécie suína, no entanto a protamina 1 não foi descrita. Conclui-se que o isolamento das proteínas da matriz nuclear de espermatozoides suíno foi satisfatório, demonstrando que o protocolo utilizado foi eficiente. Algumas famílias de proteínas foram identificadas e descritas. Contudo não foi possível identificar algumas estruturas proteicas. Desta forma este estudo vem contribuir com um catálogo de estruturas proteicas que podem ser úteis em futuros estudos proteômicos.

The objective of this study was to perform the isolation and identification of proteins of sperm nuclear matrix of a pig breeder. It was used pre-chilled diluted boar semen obtained from an apparently healthy breeder boar, with normal morphology and chromatin condensation tests, from a commercial line landrace X large white X pietran, with 22 weeks of age, usually used in an artificial insemination central, located in Uberlândia, Minas Gerais. The semen was processed to separate the sperm heads, extraction of chromatin and nuclear matrix, protein quantification and analysis by mass spectrometry (Equipment LTQ-Orbitrap Elite). The most abundant family corresponded of ribosomal proteins (18%), followed by uncharacterized (15,6%), cytoskeleton (11,4%), histones (3,8%), proteasome subunits (2,8% ) and heat shock (1,9%). The other proteins were grouped into other families and corresponded to 46,5% of total proteins described. Were identified 211 different proteins in the sample and 149 of these (70,7%) have been described previously as present in the somatic or sperm nucleus of other species, 29 (13,7%) did not have nuclear presence previously described and 33 (15,6%) have not been characterized. Protamine 2 was first identified in swine, however protamine 1 has not been described. It follows that the proteins isolation of the nuclear matrix of swine spermatozoid was satisfactory, showing that the protocol used was efficient. Some protein families have been identified and described. However it was not possible to identify some protein structures. Therefore this study contributes to a catalog of protein structures that may be useful in future proteomics studies.