Production and evaluation of immunoglobulin Y Anti-Brucella abortus (Vaccinal Strain B19)

Background: The immunoglobulin Y is a principal antibody current in the blood of hens, which are transferred from the maternal blood serum to the egg yolk. The extraction of IgY from the egg yolk apply animal welfare when compared to the extraction of IgG, reducing the number of animals and prevent a bleeding of hens through the extraction of the IgY from eggs, besides that IgY presenting high specificity for antigenic binding. The objective of this study was to produce specific polyclonal IgY antibodies anti-Brucella abortus by immunizing hens with B19 vaccine and evaluate their reactivity through Buffered Acidified Plate Antigen (BAPA), 2-Mercaptoethanol (2-ME) and indirect ELISA diagnostic tests.Materials, Methods & Results: Four 25-week-old White Leghorn hens were immunized, two of them comprising the control group (Group 1) with phosphate-buffered saline (PBS) with adjuvant, and the others two immunized with B19 vaccine (Brucella abortus vaccine strain B19), representing the Group 2. The immunizations occurred six times with a 15-day interval between each. Blood samples were taken biweekly (seven times); and daily, the eggs were collected for 13 weeks, the first collection of blood and eggs, performed one week before the first immunization of each group. The IgY was purified from egg yolk, using the method of dilution in acid water and precipitation with ammonium sulfate for delipidation. BAPA, 2-ME and ELISA tests performed to verify the specificity of IgY confirmed the reactivity of polyclonal antibodies specific to the antigen used both in blood serum samples and in the purified egg yolks. The hens from the control group did not present reactivity in the diagnostic tests used, which was already expected, since no antigen was used in any of their immunizations. Hens immunized with the Brucella abortus B19 vaccine produced detectable reactive antibodies in the three tests used on blood serum and IgY samples extracted from the egg yolk.[...]

Production and evaluation of immunoglobulin Y Anti-Brucella abortus (Vaccinal Strain B19)

Background: The immunoglobulin Y is a principal antibody current in the blood of hens, which are transferred from the maternal blood serum to the egg yolk. The extraction of IgY from the egg yolk apply animal welfare when compared to the extraction of IgG, reducing the number of animals and prevent a bleeding of hens through the extraction of the IgY from eggs, besides that IgY presenting high specificity for antigenic binding. The objective of this study was to produce specific polyclonal IgY antibodies anti-Brucella abortus by immunizing hens with B19 vaccine and evaluate their reactivity through Buffered Acidified Plate Antigen (BAPA), 2-Mercaptoethanol (2-ME) and indirect ELISA diagnostic tests.Materials, Methods & Results: Four 25-week-old White Leghorn hens were immunized, two of them comprising the control group (Group 1) with phosphate-buffered saline (PBS) with adjuvant, and the others two immunized with B19 vaccine (Brucella abortus vaccine strain B19), representing the Group 2. The immunizations occurred six times with a 15-day interval between each. Blood samples were taken biweekly (seven times); and daily, the eggs were collected for 13 weeks, the first collection of blood and eggs, performed one week before the first immunization of each group. The IgY was purified from egg yolk, using the method of dilution in acid water and precipitation with ammonium sulfate for delipidation. BAPA, 2-ME and ELISA tests performed to verify the specificity of IgY confirmed the reactivity of polyclonal antibodies specific to the antigen used both in blood serum samples and in the purified egg yolks. The hens from the control group did not present reactivity in the diagnostic tests used, which was already expected, since no antigen was used in any of their immunizations. Hens immunized with the Brucella abortus B19 vaccine produced detectable reactive antibodies in the three tests used on blood serum and IgY samples extracted from the egg yolk.[...](AU)

Frequência de lesões macroscópicas em carcaças de bovinos reagentes ao teste tuberculínico / Frequency of macroscopic lesions in cattle positive to the tuberculin skin test

O objetivo deste trabalho foi analisar a frequência de lesões macroscópicas sugestivas de tuberculose em carcaças de bovinos reagentes ao teste intradérmico de tuberculose. Os animais do estudo foram provenientes de rebanhos de exploração leiteira, localizados nos municípios de Perdizes, Patos de Minas, Lagoa Formosa e Uberlândia, Minas Gerais. Foram avaliadas 140 carcaças de bovinos positivos no teste cervical comparativo. Durante o abate sanitário foi realizada inspeção post mortem das carcaças, e as lesões macroscópicas sugestivas de tuberculose foram registradas. Foram avaliados os linfonodos mediastínicos, fígado, pulmão e carcaça. Dos 140 bovinos examinados, 78 (55%) apresentaram algum tipo de lesão macroscópica sugestiva de tuberculose, 38 (49%) ocorreram exclusivamente nos linfonodos mediastínicos, 22 (28%) no fígado e 11 (14%) no pulmão; 5 (6%) carcaças apresentaram lesões no fígado, pulmão e linfonodo mediastínico, e 2 (4%) tiveram lesões no pulmão e linfonodo. Concluem-se que as lesões não visualizadas em bovinos reagentes ao teste tuberculínico podem ocorrer e estariam relacionadas principalmente ao estágio de evolução da doença, tempo insuficiente na inspeção post mortempara detecção, bem como reações inespecíficas para outras micobactérias.(AU)

The aim of this study was to analyze the frequency of macroscopic lesions suggestive of tuberculosis in cattle reacting to the tuberculin test. Cattle of this study were from dairy herds located in the cities of Perdizes, Patos de Minas, Lagoa Formosa and Uberlândia, Minas Gerais, Brazil. We evaluated 140 cattle carcasses positive to the cervical comparative intradermal tuberculin test. During the slaughter a post-mortem inspection of carcasses was done, and the lesions suggestive of tuberculosis were recorded. We evaluated the mediastinal lymph nodes, liver, lung and carcass. Of the 140 cattle examined, 78 (55%) carcasses had some kind of macroscopic lesions suggestive of tuberculosis, 38 (49%) occurred only in the mediastinal lymph nodes, 22 (28%) in the liver and 11 (14%) in the lungs; 5 (6%) carcasses showed lesions in liver, lungs and lymph node, and 2 (4%) showed lesions in lung and lymph nodes. We concluded that lesions that were not visualized in bovine tuberculin skin test reagents may occur and are related mainly to the stage of the disease, insufficient time to detect the lesions, and nonspecific reactions to other mycobacteria.(AU)

Frequência de lesões macroscópicas em carcaças de bovinos reagentes ao teste tuberculínico / Frequency of macroscopic lesions in cattle positive to the tuberculin skin test

O objetivo deste trabalho foi analisar a frequência de lesões macroscópicas sugestivas de tuberculose em carcaças de bovinos reagentes ao teste intradérmico de tuberculose. Os animais do estudo foram provenientes de rebanhos de exploração leiteira, localizados nos municípios de Perdizes, Patos de Minas, Lagoa Formosa e Uberlândia, Minas Gerais. Foram avaliadas 140 carcaças de bovinos positivos no teste cervical comparativo. Durante o abate sanitário foi realizada inspeção post mortem das carcaças, e as lesões macroscópicas sugestivas de tuberculose foram registradas. Foram avaliados os linfonodos mediastínicos, fígado, pulmão e carcaça. Dos 140 bovinos examinados, 78 (55%) apresentaram algum tipo de lesão macroscópica sugestiva de tuberculose, 38 (49%) ocorreram exclusivamente nos linfonodos mediastínicos, 22 (28%) no fígado e 11 (14%) no pulmão; 5 (6%) carcaças apresentaram lesões no fígado, pulmão e linfonodo mediastínico, e 2 (4%) tiveram lesões no pulmão e linfonodo. Concluem-se que as lesões não visualizadas em bovinos reagentes ao teste tuberculínico podem ocorrer e estariam relacionadas principalmente ao estágio de evolução da doença, tempo insuficiente na inspeção post mortempara detecção, bem como reações inespecíficas para outras micobactérias.(AU)

The aim of this study was to analyze the frequency of macroscopic lesions suggestive of tuberculosis in cattle reacting to the tuberculin test. Cattle of this study were from dairy herds located in the cities of Perdizes, Patos de Minas, Lagoa Formosa and Uberlândia, Minas Gerais, Brazil. We evaluated 140 cattle carcasses positive to the cervical comparative intradermal tuberculin test. During the slaughter a post-mortem inspection of carcasses was done, and the lesions suggestive of tuberculosis were recorded. We evaluated the mediastinal lymph nodes, liver, lung and carcass. Of the 140 cattle examined, 78 (55%) carcasses had some kind of macroscopic lesions suggestive of tuberculosis, 38 (49%) occurred only in the mediastinal lymph nodes, 22 (28%) in the liver and 11 (14%) in the lungs; 5 (6%) carcasses showed lesions in liver, lungs and lymph node, and 2 (4%) showed lesions in lung and lymph nodes. We concluded that lesions that were not visualized in bovine tuberculin skin test reagents may occur and are related mainly to the stage of the disease, insufficient time to detect the lesions, and nonspecific reactions to other mycobacteria.(AU)

Padronização e validação do ELISA indireto para diagnostico de brucelose bovina utilizando como antigeno lipopolissacarideo e extrato protéico solúvel de Brucella abortus

A brucelose é uma zoonose de distribuição mundial, acarreta problemas sanitários importantes e prejuízos econômicos vultuosos a pecuária. A vacinação de fêmeas bovinas de 3 a 8 meses de idade e o sacrifício obrigatório de animais sororreagentes são importantes medidas de controle desta doença, descritas sob forma de lei através do Programa Nacional de Controle e Erradicação da Brucelose e Tuberculose (PNCEBT). Visto a obrigatoriedade da eliminação dos animais sororreagentes e a inexistência de um teste preciso para detecção da doença, objetivou-se padronizar e validar dois ensaios imunoenzimáticos indiretos (iELISA) para o diagnóstico da brucelose bovina, capaz de diferenciar animal recém-vacinado de naturalmente infectado, utilizando como antígeno Lipopolissacarideo (LPS) e Extrato Protéico Solúvel (EPS), ambos extraídos da cepa 1119-3 de Brucella abortus. Para padronização utilizou-se duas concentrações dos antígenos; diferentes diluições de um pool de amostras negativas para brucelose, positivas de fêmeas bovinas recém-vacinadas contra brucelose e outro de fêmeas bovinas naturalmente infectadas para brucelose; e duas diluições de anticorpo secundário. Após serem padronizados, os testes foram validados com 96 amostras de soros sanguíneos de bovinos previamente testados pelo Antígeno Acidificado Tamponado (AAT) e 2-Mercaptoetanol (2-ME), sendo 64 positivas (fêmeas bovinas naturalmente infectadas e recém-vacinadas) e 32 negativas. Os cálculos estatísticos foram feitos separando-se os grupos de amostras positivas de fêmeas bovinas naturalmente infectadas e de fêmeas bovinas recém-vacinadas. Para comparação entre os resultados dos testes foi usado o coeficiente kappa. Calculou-se a sensibilidade e a especificidade em relação ao 2-ME. Os testes iELISA/LPS e iELISA/EPS para amostras de soro de fêmeas bovinas naturalmente infectadas, e iELISA/LPS para amostras de soros de fêmeas bovinas recém-vacinadas, tiveram alta sensibilidade e especificidade, e concordância excelente com o 2-ME, porém não foi capaz de diferenciar animais recém-vacinados de naturalmente infectados, ao contrário do iELISA/EPS para amostras de soros de fêmeas bovinas recém-vacinadas, capaz de fazer esta diferenciação, porém com baixa sensibilidade e fraca concordância com o 2-ME. Constatou-se que o EPS pode se tornar um potencial antígeno para testes diagnósticos de brucelose.

The malasseziose is a major disease causing inflammation of the hearing of dogs and cats. Thus, the objective was to report the cases of a cat and a dog assisted in the Veterinary Hospital of the Federal University of Uberlândia, and diagnosed with otitis externa by Malassezia sp. from laboratory and subjected to treatment with Auritop®.

Padronização e validação do ELISA indireto para diagnostico de brucelose bovina utilizando como antigeno lipopolissacarideo e extrato protéico solúvel de Brucella abortus

A brucelose é uma zoonose de distribuição mundial, acarreta problemas sanitários importantes e prejuízos econômicos vultuosos a pecuária. A vacinação de fêmeas bovinas de 3 a 8 meses de idade e o sacrifício obrigatório de animais sororreagentes são importantes medidas de controle desta doença, descritas sob forma de lei através do Programa Nacional de Controle e Erradicação da Brucelose e Tuberculose (PNCEBT). Visto a obrigatoriedade da eliminação dos animais sororreagentes e a inexistência de um teste preciso para detecção da doença, objetivou-se padronizar e validar dois ensaios imunoenzimáticos indiretos (iELISA) para o diagnóstico da brucelose bovina, capaz de diferenciar animal recém-vacinado de naturalmente infectado, utilizando como antígeno Lipopolissacarideo (LPS) e Extrato Protéico Solúvel (EPS), ambos extraídos da cepa 1119-3 de Brucella abortus. Para padronização utilizou-se duas concentrações dos antígenos; diferentes diluições de um pool de amostras negativas para brucelose, positivas de fêmeas bovinas recém-vacinadas contra brucelose e outro de fêmeas bovinas naturalmente infectadas para brucelose; e duas diluições de anticorpo secundário. Após serem padronizados, os testes foram validados com 96 amostras de soros sanguíneos de bovinos previamente testados pelo Antígeno Acidificado Tamponado (AAT) e 2-Mercaptoetanol (2-ME), sendo 64 positivas (fêmeas bovinas naturalmente infectadas e recém-vacinadas) e 32 negativas. Os cálculos estatísticos foram feitos separando-se os grupos de amostras positivas de fêmeas bovinas naturalmente infectadas e de fêmeas bovinas recém-vacinadas. Para comparação entre os resultados dos testes foi usado o coeficiente kappa. Calculou-se a sensibilidade e a especificidade em relação ao 2-ME. Os testes iELISA/LPS e iELISA/EPS para amostras de soro de fêmeas bovinas naturalmente infectadas, e iELISA/LPS para amostras de soros de fêmeas bovinas recém-vacinadas, tiveram alta sensibilidade e especificidade, e concordância excelente com o 2-ME, porém não foi capaz de diferenciar animais recém-vacinados de naturalmente infectados, ao contrário do iELISA/EPS para amostras de soros de fêmeas bovinas recém-vacinadas, capaz de fazer esta diferenciação, porém com baixa sensibilidade e fraca concordância com o 2-ME. Constatou-se que o EPS pode se tornar um potencial antígeno para testes diagnósticos de brucelose.(AU)

The malasseziose is a major disease causing inflammation of the hearing of dogs and cats. Thus, the objective was to report the cases of a cat and a dog assisted in the Veterinary Hospital of the Federal University of Uberlândia, and diagnosed with otitis externa by Malassezia sp. from laboratory and subjected to treatment with Auritop®.(AU)