Resumo
O objetivo do presente estudo foi avaliar os efeitos nutracêuticos do oleorresina de copaíba (ORC) (Copaifera officinalis) e o óleo de coco virgem (OCV) (Cocccus nucifera L). Para tanto foram realizados três experimentos: No experimento 1 avaliou-se os efeitos in vitro do oleorresina de copaíba sobre os seguintes patógenos: fungo Saprolegnia parasitica (teste 1); bactérias gram negativas Aeromonas hydrophila, Aeromonas jandaei, Vibrio parahaemolyticus, Citrobacter sp., e Klebsiella pneumoniae, as bacterias gram positivas Micrococcus luteus e Streptococcus agalactiae; (teste 2), e protozoário Ichthyophthirius multifiliis (teste 3). Para todos os testes in vitro foi realizado uma emulsão de ORC, para facilitar a diluição em meio de cultura. Para os testes 1 e 3 foram utilizados nove tratamentos: (0; 50,6; 101,2; 202,4; 404,7; 607,1; 809,4 e 1011,8 mg ORC/litro) e Tween 80 na maior concentração utilizada. Para o teste 2 foram utilizados dez tratamentos (0, 50,6; 101,2, 202,36; 404,72; 607,08; 809,44 e 1011,8 mg/L), um controle positivo contendo 3mg/L de enrofloxacina e um contendo Tween 80 na maior concentração utilizada. Nesses experimentos in vitro, os halos de crescimento ou inibição foram medidos, e os experimentos tiveram duração de 96h para fungo, 24 h para bactérias e 4 h para o protozoário. No experimento 2, avaliou-se in vivo, os efeitos da suplementação de ORC e OCV em dietas para juvenis de Colossoma macropomum. Para esses experimentos foi realizado um delineamento em fatorial 4x2 sendo quatro níveis de ORC (0, 500, 2.000, 3.500 mg/kg de ração) e dois níveis de substituição de óleo de soja pelo óleo de coco (0 ou 50%) por 90 dias, onde foram avaliados mensalmente, os parâmetros zootécnicos e ao final do experimento, os parâmetros sanguíneos e histológicos. No experimento 3, avaliou-se a resistência de C. macropomum suplementados com ORC e OCV contra a infecção por A. hydrophila, realizado em delineamento contendo 8 tratamentos: T1= ração sem suplementação; T2= 0% OCV + 500 mg ORC; T3= 0% OCV + 2.000 mg ORC; T4= 0% OCV + 3.500 mg ORC; T5= 50% OCV + 0 ORC; T6= 50% OCV + 500 mg ORC; T7= 50% OCV + 2.000 mg ORC; T8´= 50% OCV + 3.500 ORC, mais um controle injetado com solução de cloreto de sódio estéril, que foram alimentados por 90 dias. Após o período de suplementação, os peixes foram desafiados com Aeromonas hydrophila, na concentração de 1 x 106 UFC.g-1. O uso de ORC reduziu o crescimento micelial de S. parasitica quando em concentrações superiores a 50,6 mg/L, e teve efeito inibitório no crescimento de S. agalactiae, M. luteus e K. pneumoniae, a partir de 202,4 mg/L. Além disso, apresentou eficácia de 80% contra I. multifiliis em concentrações superiores a 101,2 mg ORC/litro. Dietas com diferentes concentrações de óleo, tiveram efeitos nos parâmetros zootécnicos durante 60 dias de suplementação. No entanto, após os 90 dias de suplementação dietária com óleos houve aumento do peso total e da biomassa dos peixes. Dietas contendo 2.000 e 3.500 de mg/kg ORC aumentaram o número de linfócitos e leucócitos totais, enquanto a dieta suplementada com 50% de OCV causou aumento do número de linfócitos. Houve efeito sinergico entre os óleos, com aumento de neutrófilos e monócitos. O aumento das concentrações de ORC resultou em alterações hepáticas que podem estar relacionados a um efeito hepatóxico. O aumento da suplementação conjunta do ORC e OCV tende a reduzir os sinais clínicos da aeromoniose, reduzindo assim, as taxas de mortalidade, apesar disso os efeitos da infecção por A. hydrophila causaram uma alta hemolização do sangue que impossibilitando as análises hematimétricas e leucocitárias. A avaliação histológica corroborou o observado pela taxa de mortalidade, onde em conjunto, os óleos reduziram os efeitos proporcionados pela infecção por A. hydrophila. Em conclusão, o ORC apresenta grande potencial para substituição de quimioterápicos na aquicultura, atuando contra importantes patógenos e sua aplicação na alimentação de C. macropomum promoveu, ao longo prazo, o aumento do desempenho, melhorias hematológicas e resistência a Aeromonas hydrophila quando incluída a 2000mg/kg ração em conjunto com OCV. Apesar disso, mais pesquisas devem ser realizadas para avaliar possíveis efeitos hepatotóxicos de altas concentrações de ORC e seus compostos isolados na alimentação de peixes.
The aim of the present study was to evaluate the nutraceutical effects of copaiba oleoresin (ORC) (Copaifera officinalis) and virgin coconut oil (OCV) (Cocccus nucifera L). For that, three experiments were carried out: In experiment 1, the in vitro effects of copaiba oleoresin on the following pathogens were evaluated: the fungus Saprolegnia parasitica (test 1); gram negative bacteria Aeromonas hydrophila, Aeromonas jandaei, Vibrio parahaemolyticus, Citrobacter sp., and Klebsiella pneumoniae, the gram positive bacteria Micrococcus luteus and Streptococcus agalactiae; (test 2), and protozoan Ichthyophthirius multifiliis (test 3). For all in vitro tests, an ORC emulsion was performed to facilitate dilution in culture medium. For tests 1 and 3, nine treatments were used: (0; 50.6; 101.2; 202.4; 404.7; 607.1; 809.4 and 1011.8 mg ORC/liter) and Tween 80 in the highest concentration used. For test 2, ten treatments were used (0, 50.6; 101.2, 202.36; 404.72; 607.08; 809.44 and 1011.8 mg/L), a positive control containing 3mg/L of enrofloxacin and one containing Tween 80 at the highest concentration used. In these in vitro experiments, the growth or inhibition halos were measured, and the experiments lasted 96 h for fungus, 24 h for bacteria and 4 h for the protozoan. In experiment 2, the in vivo effects of ORC and OCV supplementation in diets for Colossoma macropomum juveniles were evaluated. For these experiments, a 4x2 factorial design was carried out, with four levels of ORC (0, 500, 2,000, 3,500 mg/kg of feed) and two levels of replacement of soybean oil by coconut oil (0 or 50%) for 90 days, where the zootechnical parameters were monthly evaluated and, at the end of the experiment, the blood and histological parameters. In experiment 3, the resistance of C. macropomum supplemented with ORC and OCV against A. hydrophila infection was evaluated, carried out in a design containing 8 treatments: T1= feed without supplementation; T2= 0% OCV + 500 mg ORC; T3= 0% OCV + 2000 mg ORC; T4= 0% OCV + 3500 mg ORC; T5= 50% OCV + 0 ORC; T6= 50% OCV + 500 mg ORC; T7= 50% OCV + 2000 mg ORC; T8´= 50% OCV + 3,500 ORC, plus a control injected with sterile sodium chloride solution, which were fed for 90 days. After the supplementation period, the fish were challenged with Aeromonas hydrophila, at a concentration of 1 x 106 CFU.g-1. The use of ORC reduced the mycelial growth of S. parasitica when at concentrations above 50.6 mg/L, and had an inhibitory effect on the growth of S. agalactiae, M. luteus and K. pneumoniae, from 202.4 mg /L. In addition, it showed 80% efficacy against I. multifiliis at concentrations above 101.2 mg ORC/liter. Diets with different oil concentrations had effects on zootechnical parameters during 60 days of supplementation. However, after 90 days of dietary supplementation with oils, there was an increase in the total weight and biomass of the fish. Diets containing 2000 and 3500 mg/kg ORC increased the number of lymphocytes and total leukocytes, while the diet supplemented with 50% OCV caused an increase in the number of lymphocytes. There was a synergistic effect between the oils, with an increase in neutrophils and monocytes. The increase in ORC concentrations resulted in hepatic changes that may be related to a hepatoxic effect. The increase in the joint supplementation of ORC and OCV tends to reduce the clinical signs of aeromoniosis, thus reducing the mortality rates, although the effects of the infection by A. hydrophila caused a high hemolysis of the blood that made it impossible to analyze hematimetric and leukocytes. The histological evaluation corroborated what was observed by the mortality rate, where together, the oils reduced the effects provided by the infection by A. hydrophila. In conclusion, ORC has great potential for replacing chemotherapeutic agents in aquaculture, acting against important pathogens and its application in C. macropomum feeding promoted, in the long term, increased performance, hematological improvements and resistance to Aeromonas hydrophila when included at 2000mg /kg feed together with OCV. Despite this, more research should be carried out to evaluate possible hepatotoxic effects of high concentrations of ORC and its isolated compounds in fish feed.
Resumo
O acará-severo (Heros severus) é uma espécie nativa da bacia amazônica possuindo grande potencial para piscicultura ornamental, pois apresenta cores exuberantes além de um valor econômico atrativo no mercado de organismos aquáticos ornamentais. Entretanto há poucas informações científicas sobre as condições ideais de criação para a espécie desde reprodução, larvicultura, nutrição e alimentação. Neste contexto um dos grandes entraves da produção em cativeiro de organismos aquáticos ornamentais é a falta de conhecimento sobre a exigência e manejo nutricional das espécies produzidas. Desta forma o presente trabalho teve como objetivo determinar as frequências e taxas de alimentação na larvicultura e alevinagem de acará-severo, além de estratégias de manejo alimentar a partir ciclos de privação alimentar. O estudo foi dividido em três experimentos onde: o primeiro objetivou-se determinar a taxa e a frequência alimentar ideal para larvas de H. severus, sendo que o experimento foi realizado em um esquema fatorial 4x2 com quatro taxas de alimentação (100, 150, 200, 250 náuplios de artemia por larva.dia-1) e duas frequências de alimentação (2 ou 4x ao dia) durante 15 dias (período de larvicultura) e outro experimento para a determinação da densidade de estocagem (1, 5, 10, 15 ou 20 larvas L-1); no segundo experimento foi avaliado o desempenho produtivo e higidez de alevinos de acará-severo submetidos a ciclos de privação alimentar: 7/0 sete dias de alimentação sem dias de privação; 6/1 seis dias de alimentação e um dia de privação; 5/2 cinco dias de alimentação e dois dias de privação e ALT alimentação em dias alternados, durante 90 dias com alimentação ad libitum oferecida quatro vezes ao dia; e no terceiro experimento foram avaliadas taxa e frequência de alimentação para alevinos de acará severo produzidos em sistemas de recirculação, constituindo-se em um experimento em esquema fatorial 3x2 com três taxas de alimentação (3, 6, 9% PV.dia-1) e duas frequências alimentares (2 ou 4 alimentações ao dia) durante 90 dias. Ao fim dos experimentos foi realizado a avaliação dos parâmetros zootécnicos e avaliação sanitária (experimentos 2 e 3) pela avaliação hematológica. Os resultados apontaram que larvas de acará-severo devem ser alimentadas com 250 náuplios de Artemia divididos em quatro alimentações diárias e em densidade de 10 larvas L-1. Na alevinagem, os peixes desta espécie podem ser submetidos a privação alimentar de 1 dia promovendo economia de 10% de ração e 14% na mão de obra, sem que afete desempenho produtivo, o grau de higidez e a sobrevivência dos peixes. A melhor taxa de alimentação para alevinos é de 6% da biomassa e pode ser fornecida duas vezes ao dia sem comprometer os índices zootécnicos e hematológicos.
The banded cichlid (Heros severus) is a native species from Amazon basin, which has great potential for ornamental fish farming, presenting exuberant colors, and an attractive economic value in ornamental fish market. However, there is little scientific information for its ideal captivity conditions, since breeding, larviculture, nutrition and feeding management. In this context, the major obstacles to captive production of ornamental aquatic organisms is the lack of knowledge about the nutritional and feed management. In this way, the objective of the present work was to determine the ideal frequencies and feeding rates for larvae and fry of banded cichlid besides strategies of feeding management from feed deprivation cycles for fingerlings. For that, three experiments were performed. The first experiment aimed to determine the rate and feeding frequency of H. severus larvae. The experiment was carried out in factorial scheme 4x2: four feeding rates (100, 150, 200, 250 Artemia nauplii per Larvae. day-1) and two feeding frequencies (2 or 4x per day) for 15 days (larval period) And another experiment for the determination of storage density (1, 5, 10, 15 or 20 larvae L-1). The second experiment evaluated the productive performance and health of banded cichlid fry subjected to food deprivation cycles. The experiment was conducted in a completely randomized design containing 4 treatments: 7/0 seven days of feeding and without feed deprivation; 6/1 six days of feeding and one day of feed deprivation; 5/2 five days of feeding and two days of deprivation and ALT feeding on alternate days for 90 days fed ad libitum four times a day. The third experiment evaluated the feeding rate and frequency for banded cichlid fingerlings in recirculation systems. The experiment was carried out in factorial scheme 3x2 with three feeding rates (3, 6, 9% LW.day-1) and two frequencies (2 or 4 meals a day) for 90 days. At the end of the experiments, the zootechnical and health parameters (experiments 2 and 3) were evaluated. The results were submitted to the test of Tukey at 5% to means comparisons. The results indicated that banded cichlid larvae should be feeding with 250 Artemia nauplii divided into four daily feeds In density of 10 larvae L-1. The fingerlings of this species can be subjected to one day of feed deprivation, saving 10% of ration and 14% of labor day without affecting productive performance, health and survival. The best feeding rate for fingerlings is 6% of the biomass.day-1 distributed twice a day without compromising zootechnical and hematological indices.