Resumo
ABSTRACT There are few numbers of biochemical tests for specie classification in the genus Malassezia and these can to fail in the identification of the atypical isolates. In this study, typical and atypical isolates were analysed by random amplification of polymorphic DNA (RAPD) to compare with biochemical-physiological characteristics of the Malassezia species from bovine and canine ears. RAPD band patterns using OPA4 primer clustered all isolates according its biochemicalphysiological characteristics in the species from cattle and dog. Malassezia nana and M. sympodialis isolates were sub-clustered in separated sub-branches and both were from a different branch of the other species. The DNA pattern of the two atypical lipid-dependent M. pachydermatis strains was similar with of other typical strains but it did not show the one specific band of 200bp. Future studies in the specific RAPD bands of genetic profiles can be important to corroborate the identification of typical and atypical isolates of the genus Malassezia.
RESUMO Existem poucos testes para a identificação das espécies do gênero Malassezia e estes podem ser insuficientes para a correta identificação de isolados atípicos. O objetivo deste estudo foi caracterizar isolados típicos e atípicos dessas leveduras, comparando características bioquímicas e fisiológicas com a análise do DNA polimórfico amplificado aleatoriamente (RAPD). Foram analisados 30 isolados provenientes do ouvido de bovinos e de cão. Utilizando o iniciador OPA4, os padrões de RAPD foram agrupados de acordo com suas características bioquímicas e fisiológicas. Isolados da nova espécie M. nana e de M. sympodialis foram subagrupados em dois diferentes sub-ramos, pertencentes a um grupo distinto das outras espécies. Os padrões de RAPD de duas cepas atípicas lipo-dependentes de M. pachydermatis foram similares com os de outras cepas típicas dessa espécie, entretanto não apresentaram uma banda específica de 200 pb. Em futuros estudos a caracterização e a análise de sequências de bandas específicas podem corroborar na correta identificação de isolados atípicos e típicos pertencentes ao gênero Malassezia.
Resumo
A molecular study of Malassezia strains isolated from cattle with or without otitis was carried out by random amplified polymorphic DNA analysis (RAPD). DNA was extracted and purified from nine strains of Malassezia sympodialis and fourteen of Malassezia furfur. These microorganisms were collected from eight different bovine herds in Minas Gerais state, Brazil. The RAPD analysis and phenograms did not show the formation of genetically distinct groups among the strain isolated from cattle with or without otitis raised in the same herds. Genetic heterogeneity was observed among Malassezia strains from different geographic origins. These data suggest that genetically similar M. sympodialis and M. furfur strains found as members of the normal ear microbiota could become opportunistically active in the inflammatory process in cattle.(AU)
A caracterização molecular de amostras de Malassezia spp., isoladas de bovinos com e sem otite, foi realizada por meio da técnica do DNA polimórfico amplificado ao acaso (RAPD). DNAs de nove amostras de Malassezia sympodialis e quatorze de M. furfur foram extraídos e purificados. Essas amostras foram provenientes de oito diferentes rebanhos bovinos no estado de Minas Gerais, Brasil. A análise de RAPD e os fenogramas não revelaram a formação de grupos geneticamente distintos entre amostras isoladas de bovinos, criados no mesmo rebanho, com ou sem otite. Heterogeneidade genética foi observada entre amostras de diferentes origens geográficas. Os dados sugerem que isolados geneticamente semelhantes e membros da microbiota normal do ouvido podem participar, como oportunistas, no processo inflamatório do conduto auditivo externo de bovinos.(AU)