Resumo
In beef cattle, fixed time artificial insemination (FTAI) provides a method to inseminate large numbers of females in a specific time, which result in economical gains due, among others, to a more uniform calf crop. However, FTAI requires frequent manipulation of animals in order to inject hormones and for clinical examination. Consequently, animals seemed stressed in less or higher extent at the time of insemination. This can be a problem because it has been demonstrated that application of an acute stress treatment (electric shock, confinement, restraint and rotation) twice a day during the follicular phase of the oestrous cycle prevents the pre-ovulatory LH surge. This study aimed to evaluate if FTAI efficiency of Nellore cows is affected by the degree of stress observed at time of AI. Nellore cows (n=92) were treated (Day 0) with a progesterone intravaginal devise (Primer®, Tecnopec, São Paulo, Brazil) containing 1 g of progesterone and injected with estradiol benzoate (2mg EB, Estrogin, AUSA, Brazil). Primer was removed on Day 8 (08:00 AM) and administered one injection of cloprostenol (125 mcg, Prolise®, Tecnopec, São Paulo, Brazil). Twenty-four hours later, cows received 2 mg EB and insemination (semen from one sire) was done on the afternoon (14:00 to 16:00 PM) of day 10. At time of FTAI, the stress condition was classified as 1 (low), 2 (moderate) or 3 (high) according
ês.
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The aim of this study was to compare ovarian response and embryo production of superovulated Bos indicus and Bos taurus cows adapted to the environmental conditions from São Paulo State, Brazil. Ninety non-lactating cows from Caracu ( Bos taurus, n=40) and Nelore (Bos indicus, n=50) were treated with an intravaginal device containing progesterone (1.38 mg; CIDRB ®, Pfizer Animal Health, Montreal, Québec, Canada) and 2.5 mg, intramuscularly (IM), of estradiol benzoate (Estrogin®, Farmavet, São Paulo, Brazil). Four days later, all animals were treated with multiple IM injections of 400 IU of FSH (Pluset®, Calier, Spain) in decreasing doses (7575; 7550; 5025, and 2525 IU) at 12-h intervals over 4 days. On the seventh day, CIDR-B device was removed and cows received, IM, 150 ìg of cloprostenol (Veteglan®, Calier, Spain). Cows were then inseminated 48 and 62 h after cloprostenol treatment and embryos were recovered non-surgically seven days after first insemination. Differences in the number of corpora lutea (CL) number, total number of structures (ova/embryos), and number of transferable embryos were analyzed by Student t test. There was no difference (P > 0.05) in the average number of CL, total ova/embryos and transferable embryos of Caracu (11.4 ± 3.3; 8.6 ± 2.6 e 6.0 ± 2.4) and Nelore (12.0 ± 4.1; 9.0 ± 4.3 e 5.1 ± 2.9) cows, respectively. These results suggest that Cara
O objetivo do presente estudo foi comparar a resposta ovariana e produção de embriões de vacas Bos t. indicus e Bos t. taurus, adaptadas às condições ambientais do estado de São Paulo, Brasil, submetidas ao tratamento de superovulação. Noventa vacas das raças Caracu (Bos taurus, n=40) e Nelore (Bos indicus, n=50) recém desmamadas de suas crias, foram tratadas com um dispositivo vaginal contendo 1,38 g de progesterona (CIDR-B®, Pfizer, Brasil) e injeção, IM, de 2,5 mg de benzoato de estradiol (Estrogin®, Farmavet, Brasil). No quarto dia, iniciou-se o tratamento de superovulação utilizando 400 UI de pFSH (Pluset®, Calier, Espanha) IM em doses decrescentes (75-75; 75-50; 50-25; 25-25 IU) com intervalos de 12 horas. No sétimo dia foi retirado o CIDR-B e aplicados, IM, 150 mcg de cloprostenol (Veteglan®, Calier, Espanha). As vacas foram inseminadas duas vezes, 48 e 62 horas após o cloprostenol e a coleta não cirúrgica de embriões foi realizada sete dias após a primeira inseminação. As diferenças no número de corpos lúteos (CL), total de estruturas (ovócitos/embriões) e de embriões transferíveis foram analisadas pelo teste t de Student. Não houve diferença (P > 0,05) no número de CL, total de estruturas e de embriões transferíveis das vacas Caracu (11,4 ± 3,3; 8,6 ± 2,6 e 6,0 ± 2,4) e Nelore (12,0 ± 4,1; 9,0 ± 4,3 e 5,1 ± 2,9), respectivamente. Esses resultados são indicativos que
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The aim of this article was to review the researches on ruminant reproduction carried out by the Instituto de Zootecnia between 1970 and 2008. A bibliographic search of articles was made and selected the most relevant concerning the physiology and technology of reproduction. It was evidenced that, more that produce basic information for the advancement of knowledge, the Instituto de Zootecnia has been able to improve reproductive methodologies related to artificial insemination and embryo transfer technologies in Brazil.
A presente revisão objetivou analisar os resultados das pesquisas desenvolvidas pelo Instituto de Zootecnia na área de reprodução dos ruminantes no período de 1970 a 2008. Para tanto, foi realizado um levantamento bibliográfico dos artigos publicados nessa área por pesquisadores do Instituto de Zootecnia e selecionados aqueles que contribuíram com destaque para o avanço do conhecimento da fisiologia reprodutiva e tecnologias da reprodução. Foi evidenciado que, mais que gerar informações na fronteira do conhecimento, o IZ tem contribuído significativamente para a validação de tecnologias reprodutivas, com destaque para as relacionadas com as áreas de inseminação artificial e transferência de embriões no Brasil.
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A single injection of FSH applied by subcutaneous (sc) route induces superovulation in bovines. However, sc injection results in a brief surge in FSH plasmatic levels. Therefore, we speculate that FSH may be necessary to instigate the final development of some follicle. This study was done to evaluate the ovarian response of heifers treated with a intramuscular (im) subidose of FSH 48 hours after the initial sc injection. Fifteen crossbreed heifers were treated with a progestagen vaginal implant (CIDR-B) and injected im with 2.5 mg estradiol benzoate. Four days later, heifers were assigned randomly in 3 groups of 5 animals each and superovulated with pFSH as follows: group 1 and 2 received a sc injection of 400IU and 380 IU, respectively, while group 3 received 400 IU injected im in decreasing sub-doses (80-80; 60-60; 40-40 e 20-20UI) at 12- hour intervals during four consecutive days. The CIDR-B was withdrawn forty-eight hours after the initial FSH injection and heifers were injected im with 150-mcg of cloprostenol. Additionally, group 2 was injected im with 80 IU of pFSH. Heifers from all groups were inseminated 48 and 62 hours after the cloprostenol injection. Evolutions of follicular growth and pFSH plasmatic levels were monitored daily during the superovulation process. Embryo collection and corpora lutea (CL) estimation were done seven days after insemination. Data were s
A injeção única de FSH, aplicada por via subcutânea (sc) é suficiente para induzir uma superovulação em bovinos. No entanto, a injeção sc aumenta as concentrações plasmáticas de FSH somente durante um curto período, de forma que uma parte dos folículos estimulados podem parar seu crescimento na ausência de níveis adequados de FSH na etapa final de maturação. Objetivou-se com este estudo avaliar a resposta ovariana de novilhas tratadas com uma sub-dose intramuscular (im) de FSH 48 horas após a injeção sc inicial. Quinze novilhas mestiças foram tratadas com um dispositivo intravaginal contendo progesterona (CIDR B), juntamente com uma injeção im de 2,5mg de benzoato de estradiol. Quatro dias após, os animais foram distribuídos aleatoriamente em grupos de 5 animais e receberam os seguintes tratamentos: injeção sc de FSH suína (pFSH) na dosagem de 400 (grupo 1) e 320 (grupo 2) UI ou injeções im em doses decrescentes (80-80; 60-60; 40-40 e 20-20UI) durante 4 dias consecutivos (grupo 3). Três dias após, retirou-se o CIDR-B, aplicou-se uma injeção im de 150 mcg de cloprostenol e o grupo 2 recebeu, adicionalmente, uma injeção im de 80UI de pFSH. A inseminação foi realizada em todos os grupos 48 e 62 horas após a injeção do cloprostenol. Durante o período da superovulação foram monitoradas, diariamente, o crescimento folicular e as concentração plasmática do pFSH. No dia 7 após a IA rea
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This study evaluated pregnancy rate, gestation length, calving rate, and also sex proportion and birth weight of calves derived from in vitro reconstructed bovine demi-embryos. Recovered embryos (grade I morulae) from superovulated cows were bisected with a steel blade and transferred to recipient heifers either immediately (group 1, n=38) or after a 24h period in culture medium (EARLE + 10% FCS) at 38.5 C and 5% CO2 (group 2, n=34) when showed a reconstituted appearance. Intact, uncultured embryos immediately transferred to recipients after collection (group 3, n=36) were used as control. Data were analyzed by ANOVA and Chi-square test. In vitro cultured demi-embryos that developed from morulae to blastocyst (78%, 44/56) were considered viable. Pregnancy rate at day 45 was 47.4%, 52.9%, and 52.8% for groups 1, 2, and 3 respectively (P> 0.05). Calving rate reached 26.3% in group 1. 29.4% in group 2, and 30.6% in group 3 (P> 0.05). No difference was found regarding pregnancy length (280.8 ± 1.8, 285.5 ± 1.7 and 285.3 ± 1.7 days), male proportion (60%, 50% and 54.5%) and birth weight of calves (38 ± 4.2, 32.4 ± 2.5 and 36.2 ± 2.6 kg) among groups 1, 2 and 3, respectively. It was concluded that even though in vitro reconstructed demi-embryos transfer can be of some utility to select the viability of demi-embryos, this procedure is not able to improve pregnancy rates since i
O presente estudo objetivou avaliar a taxa de prenhez, a duração da prenhez e a taxa de parição após a transferência de embriões bipartidos e reconstituídos in vitro, bem como algumas características (proporção de sexo e peso ao nascimento) dos bezerros produzidos. Embriões (mórulas grau 1) recuperados de vacas superovuladas foram bipartidos com uma lâmina metálica e transferidos em novilhas receptoras logo em seguida (grupo 1, n=38) ou após 24 horas de cultivo (meio EARLE + 10% SFB) a 38,5C e atmosfera de 5% de CO2 (grupo 2, n=34). Como controle foram utilizados embriões intactos, não cultivados, transferidos logo após a coleta (grupo 3, n=36). Os dados foram analisados utilizando ANOVA e teste de x2. Os hemi-embriões cultivados que evoluíram ao estágio de blastocisto (78%, 44/56) foram considerados viáveis. A taxa de prenhez no dia 45 após a transferência foi de 47,4%, 52,9% e 52,8% para os grupos 1, 2 e 3, respectivamente (P> 0,05). A taxa de parição foi de 26,3% no grupo 1, 29,4% no grupo 2 e 30,6% no grupo 3 (P> 0,05). Não houve diferença (P>0,05) na duração da prenhez (280,8 ± 1,8, 285,5 ± 1,7 e 285,3 ± 1,7 dias), na proporção de machos (60,0%, 50,0% e 54,5%) e no peso dos bezerros ao nascimento (38,0 ± 4,2, 32,4 ± 2,5 e 36,2 ± 2,6kg) entre os grupos 1, 2 e 3, respectivamente. Foi concluído que o cultivo in vitro dos hemi-embriões durante 24 horas pode ser uma b
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Low quality embryos (Grade 3) represent a considerable proportion of all the embryos produced after collection of superovulated cows. Usually, those embryos are rarely transferred into recipients because the pregnancy rate is low. The aim of this study was to evaluate if blastocysts arising from in vitro culture of Grade 3 bovine morulae produced in vivo can promote acceptable pregnancy rates when transferred into recipients. Embryos (morulae and blastocysts Grades 1, 2 and 3) were recovered from superovulated B. taurus and B. indicus donors and transferred immediately into recipient heifers. Grade 3 morulae were cultured in either phosphate buffered saline (PBS added of 10% bovine fetal serum) or in Holding PlusTM media for 24 hours at 38 oC. The resulting blastocysts were morphologically classified (Grades 1, 2 and 3) and transferred into recipients. Pregnancy diagnosis was carried out 60 days after transfer and data were analyzed by logistic regression. Quality of the embryo was the only variable showing significant effect on the pregnancy rate. Blastocysts-derived from Grade 3 morulae showed a pregnancy rate (45.7%) higher (P 0.05) than Grade 3 morulae (17.7%) transferred after collection. Pregnancy rate of Grade 1 and Grade 2 cultured blastocist was 75.0% and 57.9% respectively, while those classified as Grade 3 was 21.0% (P 0.05). It was concluded that low quality m
Os embriões de baixa qualidade (Grau 3) representam uma considerável percentagem do total de embriões recuperados de vacas superovuladas. Esses embriões são raramente transferidos em receptoras, pois a taxa de prenhez é baixa. O presente estudo objetivou avaliar se blastocistos originados de mórulas Grau 3 cultivadas in vitro podem promover índices aceitáveis de prenhez quando transferidos em receptoras. Embriões (mórulas e blastocistos Graus 1, 2 e 3) foram recuperados de doadoras B. taurus taurus e B. taurus indicus superovuladas e transferidos em receptoras imediatamente após a coleta. Mórulas Grau 3 foram cultivadas nos meios PBS (adicionado de 10% de soro fetal bovino) ou Holding PlusTM durante 24 horas a 38 oC. Os blastocistos originados neste período foram igualmente transferidos em receptoras. O diagnóstico de prenhez foi realizado 60 dias após a transferência e os dados foram analisados por regressão logística. A qualidade do embrião foi a única variável que mostrou efeito significativo (P 0,05) no índice de prenhez. Blastocistos originados de mórulas Grau 3 apresentaram taxa de prenhez de 45,7% contra 17,7% de mórulas Grau 3 transferidas imediatamente após a coleta (P 0,05). A taxa de prenhez dos blastocistos cultivados classificados como Grau 1 e 2 foi de 75,0% e 57,9% respectivamente, enquanto que os classificados como Grau 3 foi de 21,0% (P 0,05). Foi conc
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Bovine embryos produced in vitro (IVF) have a high incidence of chromosomal anomalies. However, such occurrence still was not determined in zebu embryos. The aim of the present study was to evaluate the frequency of chromosomal alterations of IVF zebu embryos. It was used IVF embryos of 2; 4; 8; 16 cells and compacted morulae derived from oocytes collected from ovaries of slaughtered Nelore cows. Morulae recovered from superovulated Nelore cows (IVP) were used as control. Embryonic cells were submitted to conventional procedures (Giemsa staining) and karyotype reading with an optical microscope. Differences between normal and abnormal karyotype was established using 2 test. It was found chromosomal anomalies in 29.9% (32/107) of IVF embryos and 13.0% (3/23) of IVP embryos (P>0.05). Also, incidence of chromosomal anomalies was not influenced by the stage of development of IVF embryos. Mixoploidy and polyploidy were the only chromosomal anomalies present in both, IVF and IVP embryos.From IVF embryos that showed chromosomal anomalies, 40.6% and 59.4% were male and female embryos, respectively (P>0.05). It was concluded that about one third IVF zebu embryos at early stages of development present chromosomal anomalies and their incidence is not related to a specific period of embryonic development.
Embriões bovinos produzidos in vitro (FIV) apresentam uma alta incidência de anomalias cromossômicas. Porém, ainda não foi determinado se esse quadro acontece em embriões zebuínos. O presente trabalho objetivou avaliar a freqüência de alterações cromossômicas de embriões FIV, de origem zebuína. Foram utilizados embriões FIV nos estágios de 2; 4; 8; 16 células e mórulas, produzidos a partir de oócitos coletados de ovários de vacas Nelore abatidas. Como controle foram utilizadas mórulas recuperadas de vacas Nelore superovuladas (PIV). A leitura do cariótipo foi realizada em microscópio ótico após preparo das amostras pelo método de coloração convencional (Giemsa) e as diferenças foram estabelecidas pelo teste de 2 ou 2 com correção de Yates. Foram encontradas anomalias cromossômicas em 29,9% (32/107) dos embriões FIV e 13,0% (3/23) dos embriões PIV analisados (P>0,05). Igualmente, a incidência de anomalias cromossômicas não foi influenciada pelo estágio de desenvolvimento dos embriões. As alterações cromossômicas encontradas, tanto nos embriões FIV como nos PIV, foram mixoploidias e poliploidias. Dos embriões FIV que apresentaram anomalias cromossômicas, 59,4% eram do sexo feminino e 40,6% do masculino (P>0,05). Concluiu-se que aproximadamente um terço dos embriões zebuínos FIV apresenta anomalias cromossômicas e sua incidência não está associada a um estágio de desenvolv
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The aim of this article was to review the researches on ruminant reproduction carried out by the Instituto de Zootecnia between 1970 and 2008. A bibliographic search of articles was made and selected the most relevant concerning the physiology and technology of reproduction. It was evidenced that, more that produce basic information for the advancement of knowledge, the Instituto de Zootecnia has been able to improve reproductive methodologies related to artificial insemination and embryo transfer technologies in Brazil.
A presente revisão objetivou analisar os resultados das pesquisas desenvolvidas pelo Instituto de Zootecnia na área de reprodução dos ruminantes no período de 1970 a 2008. Para tanto, foi realizado um levantamento bibliográfico dos artigos publicados nessa área por pesquisadores do Instituto de Zootecnia e selecionados aqueles que contribuíram com destaque para o avanço do conhecimento da fisiologia reprodutiva e tecnologias da reprodução. Foi evidenciado que, mais que gerar informações na fronteira do conhecimento, o IZ tem contribuído significativamente para a validação de tecnologias reprodutivas, com destaque para as relacionadas com as áreas de inseminação artificial e transferência de embriões no Brasil.
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The separation of sperm that bear the X or the Y chromosomic sexual complement represents an extremely interesting alternative in animal production industry, due to the possibility of economic gains and management enhancement by choosing the sex of the offspring. However, in spite of considerable advances in cell separation technologies, results must be improved in order to render possible its commercial use. This review describes the current knowledge about the principal techniques employed for Y- and X-sperm separation, based on the physical and/or chemical differences between these two cellular populations. Among the reviewed separation techniques (immunological, electrophoretical, swim-down in viscous media, centrifusion in density gradients, etc.), flow-cytometry appears the most promising, due to its high accuracy and the acceptable viability of sperm separated by these means. For the artificial insemination industry, the control of a simple and reliable sperm separation technology aiming the sex selection of domestic animal offspring, would suppose an impact comparable to that obtained when semen cryopreservation control techniques were attained.
A separação dos espermatozóides portadores do complemento cromossômico sexual masculino (Y) e do feminino (X) constitui uma alternativa extremamente interessante para a indústria de produção animal devido à possibilidade de ganho econômico e gerencial, decorrente da escolha programada do sexo dos descendentes. Contudo, apesar de avanços consideráveis nas técnicas de separação dessas células, os resultados devem ainda ser aprimorados para tornar seu uso comercialmente viável. A presente revisão descreve o estado atual dos conhecimentos, incluindo as vantagens e desvantagens, das principais técnicas utilizadas para separar os espermatozóides Y e X, baseadas nas diferenças físicas e/ou químicas existentes entre ambas populações celulares. Das técnicas analisadas (imunológicas, eletroforéticas, de motilidade em meios viscosos, centrifugação em gradientes de densidade, entre outras), a citometria de fluxo aparece como a mais promissora devido ao alto grau de precisão de detecção e a viabilidade dos espermatozóides submetidos ao processo de separação. Para a indústria da inseminação artificial, o domínio da tecnologia de separação dos espermatozóides, visando a seleção do sexo dos animais domésticos, pode representar um impacto comparável ao obtido com o domínio da tecnologia de criopreservação do sêmen.
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Identifying the sex of the embryo before transferring it, enables a more rational use of receptor females. Besides, being able to choose the sex of the offspring in a programmed way, sex determination offers alternatives of economic and management profit. This review, describes the present state of knowledge about current techniques employed to identify the sex of bovine embryos at early stages of development.
A identificação do sexo do embrião, antes da transferência, possibilita o uso mais racional das receptoras, além de oferecer alternativas de ganho, econômico e gerencial, decorrente da escolha programada do sexo dos descendentes. A presente revisão descreve o estado atual dos conhecimentos das principais técnicas utilizadas para identificar o sexo do embrião bovino no seu estágio inicial de desenvolvimento.
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The separation of sperm that bear the X or the Y chromosomic sexual complement represents an extremely interesting alternative in animal production industry, due to the possibility of economic gains and management enhancement by choosing the sex of the offspring. However, in spite of considerable advances in cell separation technologies, results must be improved in order to render possible its commercial use. This review describes the current knowledge about the principal techniques employed for Y- and X-sperm separation, based on the physical and/or chemical differences between these two cellular populations. Among the reviewed separation techniques (immunological, electrophoretical, swim-down in viscous media, centrifusion in density gradients, etc.), flow-cytometry appears the most promising, due to its high accuracy and the acceptable viability of sperm separated by these means. For the artificial insemination industry, the control of a simple and reliable sperm separation technology aiming the sex selection of domestic animal offspring, would suppose an impact comparable to that obtained when semen cryopreservation control techniques were attained.
A separação dos espermatozóides portadores do complemento cromossômico sexual masculino (Y) e do feminino (X) constitui uma alternativa extremamente interessante para a indústria de produção animal devido à possibilidade de ganho econômico e gerencial, decorrente da escolha programada do sexo dos descendentes. Contudo, apesar de avanços consideráveis nas técnicas de separação dessas células, os resultados devem ainda ser aprimorados para tornar seu uso comercialmente viável. A presente revisão descreve o estado atual dos conhecimentos, incluindo as vantagens e desvantagens, das principais técnicas utilizadas para separar os espermatozóides Y e X, baseadas nas diferenças físicas e/ou químicas existentes entre ambas populações celulares. Das técnicas analisadas (imunológicas, eletroforéticas, de motilidade em meios viscosos, centrifugação em gradientes de densidade, entre outras), a citometria de fluxo aparece como a mais promissora devido ao alto grau de precisão de detecção e a viabilidade dos espermatozóides submetidos ao processo de separação. Para a indústria da inseminação artificial, o domínio da tecnologia de separação dos espermatozóides, visando a seleção do sexo dos animais domésticos, pode representar um impacto comparável ao obtido com o domínio da tecnologia de criopreservação do sêmen.
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Identifying the sex of the embryo before transferring it, enables a more rational use of receptor females. Besides, being able to choose the sex of the offspring in a programmed way, sex determination offers alternatives of economic and management profit. This review, describes the present state of knowledge about current techniques employed to identify the sex of bovine embryos at early stages of development.
A identificação do sexo do embrião, antes da transferência, possibilita o uso mais racional das receptoras, além de oferecer alternativas de ganho, econômico e gerencial, decorrente da escolha programada do sexo dos descendentes. A presente revisão descreve o estado atual dos conhecimentos das principais técnicas utilizadas para identificar o sexo do embrião bovino no seu estágio inicial de desenvolvimento.
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The efficiency of an embryo transfer program was evaluated with sheep on farm conditions. After a 12 days medroxiprogesterone intravaginal devise treatment for oestrus sincronization, ten Ideal ewes were superovulated with HMG (Human Menopausic Gonadotrophin) or PMSG (Pregnant Mare Serum Gonadotrophin), five in each treatment. Seven days after the matting, the embryos were cirurgically recovered. The following mean results were observed per donor: 8.1 corpora lutea, 1.4 follicles, and 4.8 total embryos from which 2.1 were of good quality. The rate of good embryos from the HMG treatment was greater than the PMSG treatment (62.5% and 17.8%, respectively). Seven crossbred Suffolk ewes received cirurgically one or two embryos from which four (57.1%) pregnancies were obtained.
Foi avaliada a eficácia de um programa de transferência de embriões ovinos a nível de campo. Dez ovelhas da raça Ideal, divididas em dois lotes de cinco animais, foram superovuladas com HMG (gonadotrolina da mulher na menopausa) ou PMSG (gonadotrofina sérica de égua prenhe) respectivamente e cobertas no cio induzido após um tratamento de sincronização utilizando esponjas vaginais de medroxiprogesterona durante doze dias. A coleta de embriões foi realizada pela via cirúrgica sete dias após a cobertura. Em média foram observados 8,1 corpos lúteos; 1,4 folículos e recuperados 4,8 embriões, dos quais 2,1 embriões viáveis por doadora coletada. A taxa de embriões viáveis do tratamento HMG (62,5%) foi maior que a observada no tratamento PMSG (17,8%). Sete ovelhas mestiças suffolk receberam cirurgicamente um ou dois embriões, tendo obtido quatro (57,1%) gestações.
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The efficiency of an embryo transfer program was evaluated with sheep on farm conditions. After a 12 days medroxiprogesterone intravaginal devise treatment for oestrus sincronization, ten Ideal ewes were superovulated with HMG (Human Menopausic Gonadotrophin) or PMSG (Pregnant Mare Serum Gonadotrophin), five in each treatment. Seven days after the matting, the embryos were cirurgically recovered. The following mean results were observed per donor: 8.1 corpora lutea, 1.4 follicles, and 4.8 total embryos from which 2.1 were of good quality. The rate of good embryos from the HMG treatment was greater than the PMSG treatment (62.5% and 17.8%, respectively). Seven crossbred Suffolk ewes received cirurgically one or two embryos from which four (57.1%) pregnancies were obtained.
Foi avaliada a eficácia de um programa de transferência de embriões ovinos a nível de campo. Dez ovelhas da raça Ideal, divididas em dois lotes de cinco animais, foram superovuladas com HMG (gonadotrolina da mulher na menopausa) ou PMSG (gonadotrofina sérica de égua prenhe) respectivamente e cobertas no cio induzido após um tratamento de sincronização utilizando esponjas vaginais de medroxiprogesterona durante doze dias. A coleta de embriões foi realizada pela via cirúrgica sete dias após a cobertura. Em média foram observados 8,1 corpos lúteos; 1,4 folículos e recuperados 4,8 embriões, dos quais 2,1 embriões viáveis por doadora coletada. A taxa de embriões viáveis do tratamento HMG (62,5%) foi maior que a observada no tratamento PMSG (17,8%). Sete ovelhas mestiças suffolk receberam cirurgicamente um ou dois embriões, tendo obtido quatro (57,1%) gestações.
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Low quality embryos (Grade 3) represent a considerable proportion of all the embryos produced after collection of superovulated cows. Usually, those embryos are rarely transferred into recipients because the pregnancy rate is low. The aim of this study was to evaluate if blastocysts arising from in vitro culture of Grade 3 bovine morulae produced in vivo can promote acceptable pregnancy rates when transferred into recipients. Embryos (morulae and blastocysts Grades 1, 2 and 3) were recovered from superovulated B. taurus and B. indicus donors and transferred immediately into recipient heifers. Grade 3 morulae were cultured in either phosphate buffered saline (PBS added of 10% bovine fetal serum) or in Holding PlusTM media for 24 hours at 38 oC. The resulting blastocysts were morphologically classified (Grades 1, 2 and 3) and transferred into recipients. Pregnancy diagnosis was carried out 60 days after transfer and data were analyzed by logistic regression. Quality of the embryo was the only variable showing significant effect on the pregnancy rate. Blastocysts-derived from Grade 3 morulae showed a pregnancy rate (45.7%) higher (P 0.05) than Grade 3 morulae (17.7%) transferred after collection. Pregnancy rate of Grade 1 and Grade 2 cultured blastocist was 75.0% and 57.9% respectively, while those classified as Grade 3 was 21.0% (P 0.05). It was concluded that low quality m
Os embriões de baixa qualidade (Grau 3) representam uma considerável percentagem do total de embriões recuperados de vacas superovuladas. Esses embriões são raramente transferidos em receptoras, pois a taxa de prenhez é baixa. O presente estudo objetivou avaliar se blastocistos originados de mórulas Grau 3 cultivadas in vitro podem promover índices aceitáveis de prenhez quando transferidos em receptoras. Embriões (mórulas e blastocistos Graus 1, 2 e 3) foram recuperados de doadoras B. taurus taurus e B. taurus indicus superovuladas e transferidos em receptoras imediatamente após a coleta. Mórulas Grau 3 foram cultivadas nos meios PBS (adicionado de 10% de soro fetal bovino) ou Holding PlusTM durante 24 horas a 38 oC. Os blastocistos originados neste período foram igualmente transferidos em receptoras. O diagnóstico de prenhez foi realizado 60 dias após a transferência e os dados foram analisados por regressão logística. A qualidade do embrião foi a única variável que mostrou efeito significativo (P 0,05) no índice de prenhez. Blastocistos originados de mórulas Grau 3 apresentaram taxa de prenhez de 45,7% contra 17,7% de mórulas Grau 3 transferidas imediatamente após a coleta (P 0,05). A taxa de prenhez dos blastocistos cultivados classificados como Grau 1 e 2 foi de 75,0% e 57,9% respectivamente, enquanto que os classificados como Grau 3 foi de 21,0% (P 0,05). Foi conc
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Thirty mediterranean buffaloes were subjected to superovulation using folliclestimulating hormone (FSH-P) or pregnant mare serum gonadotrophin (PMSG). The dosage used was 36 mg of FSH-P (n = 15) and 2500 U.1. of PMSG (n =15). Only 40% of the treated animais responded to the treatments with more than 2 corpus luteum. The rate of positive responses of the treatment PMSG was of 53.3% while the rate of the FSH-P treatment was 26.6% (P 0.01). The cominon factor of both treatments was the great variability of ovarian response and the low recovery rate of embryos, considering the number of corpus luteum determined in situ and by rectal palpation. Eight embryos were recovered nonsurgically from five animais showing posirive response and four embryos from three female with one or two corpus luteuin.
Trinta búfalas mediterrâneas foram submetidas ao processo de superovulação utilizando hormônio folículo estimulante de origem hipofisiário (FSH-P) ou gonadotrofina sérica de égua prenhe (PMSG). A dosagem utilizada foi de 36 mg de FSH-P (n=15) e de 2500 U.I. de PMSG (n =15). Apenas 40% dos animais responderam aos tratamentos de superovulação com mais de 2 corpos lúteos. O número de boas respostas foi maior no tratamento com PMSG (53,3%) em relação ao tratamento FSH-P (26,6%) (P 0,01). O fator comum de ambos os tratamentos foi a grande variabilidade na resposta ovariana e a baixa taxa de recuperação de embriões em relação ao número de corpos lúteos deterininados in situ e por palpação retal. No total, foram recuperados pela via não cirúrgica, oito embriões de cinco animais que apresentaram boa resposta e quatro embriões de três animais que apresentaram um ou dois corpos lúteos.
Resumo
The aim of this study was to produce antibodies against steroid-free Bos taurus var. indicus follicular fluid (FF) in Bos taurus var. taurus and Ovis aries. Six steers and six ovariectomized ewes were immunized subcutaneously with 3 ml FF emulsified in 2 ml of Freunds adjuvant. Two control animais from each species were injected with the adjuvant associated to bovine serum albumin. Five booster injections were given at 15 days interval replacing the complete by the incomplete Freunds adjuvant. Blood samples were taken regularly to test the immunological and biological reaction using the Ouchterlony test and a mice model of inhibition of ovulation, respectively. Serum of steers did not show immunological nor biological reaction. Five out of the 6 immunized ewes showed the development of typical antigen-antibody reaction after the second booster. The anti-bFF was capable of inhibiting the block of ovulation in the mice model. These data showed that antibodies against Bos taurus var. indicus FF can be raised in Ovis ariesbut not in Bos taurus var. taurus.
O presente trabalho teve como objetivo avaliar a produção de anticorpos contra líquido folicular (LF) de origem zebuína (Bos taurus var. indicus) nas espécies Bos taurus var. taurus e Ovis aries. Seis novilhos castrados e 6 ovelhas ovariectomizadas foram imunizadas por via subcutânea com 3 ml de LF emulsionado em 2 ml de adjuvante de Freund. Dois animais de cada espécie, tratados unicamente com adjuvante e albumina sérica bovina, serviram como controle. Cinco injeções de reforço foram administradas com intervalo de 15 dias, substituindo o adjuvante completo de Freund pelo incompleto. Amostras de sangue foram coletadas periodicamente para avaliar a atividade imunológica (teste de Ouchterlony) e biológica (inibição da ovutação em camundongos). O soro recuperado dos novilhos não mostrou reação aos testes imunológicos ou biológicos. Por sua vez, cinco das seis ovelhas imunizadas apresentaram uma reação de precipitação característica a partir do segundo reforço. O soro obtido das ovelhas que apresentaram a reação imunológica foi eficaz em bloquear a inibição da ovulação em camundongos. Esses resultados indicam que, diferentemente da espécie Bos taurus var. taurus, a espécie Ovis aries pode ser utilizada para produzir anticorpos contra o LF proveniente da espécie Bos taurus var. indicus.
Resumo
The aim of the present study was to evaluate the ovarian response of cows superovulated with reduced dose of FSH following passive immunization against bovine follicular fluid. Eighteen Nelore cows were used in a cross over design with the following treatments: iv injection of 80 ml of ovine anti- bovine follicular fluid (treatment 1) or ovine non immune serum (treatment 2 and 3). Six h later, cows were superovulated with 200 (treatment 1 and 2) or 400 UI (treatment 3) FSH-LH hormone (Pluset, Lab. Serono) administered in decreasing doses during 4 days. On the third day, the animais received a luteolitic dose of cloprostenol (Veteglan, Lab. Serono) and w"ere inseminated on the induced estrus. The ovarian response was evaluated 6 to 8 days after insemination by counting the corpora lutea (CL) with ultrasound scanning and by evaluation of the embryos recovered using standard techniques of cervical embryo collect. The rate of good response to superovulation (>3CL) of the treatments 1 (94.4%) and 3 (83.3%) was higher and statistically different (P 0.05) from treatment 2 (50.0%). Likewise, tlie mean number of embryos recovered from treatments 1 (4.1 ± 0.9) and 3 (5.2 ± 0.9) was higher and statistically different (P 0.05) from treatment 2 (2.1 ± 0.5). From these results, it can be concluded that passive immunization against bovine follicular fluid increase the ovarian sensiti
O presente estudo objetivou avaliar a resposta ovariana de vacas Nelore supcrovuladas com dose reduzida de FSH após imunização passiva contra líquido folicular bovino. Em um ensaio de reversão, 18 vacas Nelore receberam os seguintes tratamentos: injeção intravenosa de 80 ml de anti-líquido folicular bovino produzido cm ovelhas castradas (tratamento 1) ou soro ovino não imune (tratamentos 2 e 3). Seis horas após, os animais receberam 200 (tratamentos 1 e 2) ou 400 (tratamento 3) UI de FSH-LH (Pluset, Lab. Serono) administradas em doses decrescentes durante 4 dias. No terceiro dia, os animais receberam uma dose luteolítica de cloprostenol (Veteglan, Lab. Serono) e foram inseminados no cio induzido. A resposta ovariana foi avaliada entre os dias 6 e 8 após a inseminação pela discriminação dos corpos lúteos (C"L) utilizando ultra-sonografia e pelo número de embriões recuperados após lavagem dos cornos uterinos utilizando o método cervical convencional. A taxa de animais que responderam com mais de 3 CL ao tratamento de superovulação foi maior (P 0,05) nos tratamentos 1 (94,4%) e 3 (83,3%) que no tratamento 2 (50,0%). Igualmente, o número médio de embriões recuperados foi maior (P 0,05) nos tratamentos 1 (4.1 ± 0.9) e 3 (5,2 + 0,9) que no tratamento 2 (2.1 ± 0,5). Em função desses resultados pode-se concluir que, em vacas Nelore, a imunização passiva contra líquido folicular a
Resumo
The aim of the present study was to evaluate the ovarian response of cows superovulated with reduced dose of FSH following passive immunization against bovine follicular fluid. Eighteen Nelore cows were used in a cross over design with the following treatments: iv injection of 80 ml of ovine anti- bovine follicular fluid (treatment 1) or ovine non immune serum (treatment 2 and 3). Six h later, cows were superovulated with 200 (treatment 1 and 2) or 400 UI (treatment 3) FSH-LH hormone (Pluset, Lab. Serono) administered in decreasing doses during 4 days. On the third day, the animais received a luteolitic dose of cloprostenol (Veteglan, Lab. Serono) and w"ere inseminated on the induced estrus. The ovarian response was evaluated 6 to 8 days after insemination by counting the corpora lutea (CL) with ultrasound scanning and by evaluation of the embryos recovered using standard techniques of cervical embryo collect. The rate of good response to superovulation (>3CL) of the treatments 1 (94.4%) and 3 (83.3%) was higher and statistically different (P 0.05) from treatment 2 (50.0%). Likewise, tlie mean number of embryos recovered from treatments 1 (4.1 ± 0.9) and 3 (5.2 ± 0.9) was higher and statistically different (P 0.05) from treatment 2 (2.1 ± 0.5). From these results, it can be concluded that passive immunization against bovine follicular fluid increase the ovarian sensiti
O presente estudo objetivou avaliar a resposta ovariana de vacas Nelore supcrovuladas com dose reduzida de FSH após imunização passiva contra líquido folicular bovino. Em um ensaio de reversão, 18 vacas Nelore receberam os seguintes tratamentos: injeção intravenosa de 80 ml de anti-líquido folicular bovino produzido cm ovelhas castradas (tratamento 1) ou soro ovino não imune (tratamentos 2 e 3). Seis horas após, os animais receberam 200 (tratamentos 1 e 2) ou 400 (tratamento 3) UI de FSH-LH (Pluset, Lab. Serono) administradas em doses decrescentes durante 4 dias. No terceiro dia, os animais receberam uma dose luteolítica de cloprostenol (Veteglan, Lab. Serono) e foram inseminados no cio induzido. A resposta ovariana foi avaliada entre os dias 6 e 8 após a inseminação pela discriminação dos corpos lúteos (C"L) utilizando ultra-sonografia e pelo número de embriões recuperados após lavagem dos cornos uterinos utilizando o método cervical convencional. A taxa de animais que responderam com mais de 3 CL ao tratamento de superovulação foi maior (P 0,05) nos tratamentos 1 (94,4%) e 3 (83,3%) que no tratamento 2 (50,0%). Igualmente, o número médio de embriões recuperados foi maior (P 0,05) nos tratamentos 1 (4.1 ± 0.9) e 3 (5,2 + 0,9) que no tratamento 2 (2.1 ± 0,5). Em função desses resultados pode-se concluir que, em vacas Nelore, a imunização passiva contra líquido folicular a
Resumo
In beef cattle, fixed time artificial insemination (FTAI) provides a method to inseminate large numbers of females in a specific time, which result in economical gains due, among others, to a more uniform calf crop. However, FTAI requires frequent manipulation of animals in order to inject hormones and for clinical examination. Consequently, animals seemed stressed in less or higher extent at the time of insemination. This can be a problem because it has been demonstrated that application of an acute stress treatment (electric shock, confinement, restraint and rotation) twice a day during the follicular phase of the oestrous cycle prevents the pre-ovulatory LH surge. This study aimed to evaluate if FTAI efficiency of Nellore cows is affected by the degree of stress observed at time of AI. Nellore cows (n=92) were treated (Day 0) with a progesterone intravaginal devise (Primer®, Tecnopec, São Paulo, Brazil) containing 1 g of progesterone and injected with estradiol benzoate (2mg EB, Estrogin, AUSA, Brazil). Primer was removed on Day 8 (08:00 AM) and administered one injection of cloprostenol (125 mcg, Prolise®, Tecnopec, São Paulo, Brazil). Twenty-four hours later, cows received 2 mg EB and insemination (semen from one sire) was done on the afternoon (14:00 to 16:00 PM) of day 10. At time of FTAI, the stress condition was classified as 1 (low), 2 (moderate) or 3 (high) according
ês.