Establishment of an anesthetic protocol for semen collection by electroejaculation in six-banded armadillos (Euphractus sexcinctus Linnaeus, 1758) / Estabelecimento de um protocolo anestésico para coleta de sêmen por eletroejaculação em tatus-peba (Euphractus sexcinctus Linnaeus, 1758)

The aim was to verify the effects of different anesthetic protocols used during electroejaculation (EEJ) in six-banded armadillos (Euphractus sexcinctus). Four sexually matured animals were physically restrained and subjected to semen collection by the EEJ following three treatments: The control group consisted of no use of anesthesia; in the others, the anesthetic combinations xylazine/ketamine/propofol or butorphanol/ ketamine/propofol were administered. For each group, twelve procedures were conducted for EEJ. Semen was evaluated for volume, color, aspect, motility, sperm concentration, morphology, viability, and functional membrane integrity. The highest efficiency (100% ejaculates) was achieved when the control group was used; the xylazine/ketamine/propofol association provided only 11 ejaculates from a total of 12 attempts (91.6% efficiency), while only 4 ejaculates (33% efficiency) were obtained with butorphanol/ketamine/propofol (P<0.05). Both protocols provided rapid induction and relaxation enough to perform the EEJ. In the use of butorphanol/ketamine/propofol, the animals recovered at 16.5±1.5min, a time shorter than in the use of xylazine/ketamine/propofol protocol, 20.7±1.0min (P>0.05). The semen volume and sperm concentration obtained in the use of xylazine/ketamine/propofol association were significantly higher than those verified for butorphanol/ketamine/propofol protocol. In conclusion, the xylazine/ketamine/propofol association is indicated for anesthesia of six-banded armadillos submitted to EEJ.(AU)

Objetivou-se verificar os efeitos de diferentes protocolos anestésicos usados durante a eletroejaculação (EEJ) em tatus-peba (Euphractus sexcinctus). Quatro animais sexualmente maduros foram contidos fisicamente e submetidos à coleta de sêmen por EEJ, seguindo três tratamentos: o grupo controle consistiu do não uso de anestesia; nos outros, foram administradas combinações anestésicas de xilazina/cetamina/propofol, ou butorfanol/cetamina/propofol. Para cada grupo, foram conduzidos 12 procedimentos de EEJ. O sêmen foi avaliado para volume, cor, aspecto, motilidade, concentração de espermatozoides, morfologia, viabilidade e integridade funcional da membrana. A mais alta eficiência (100% de ejaculados) foi alcançada quando o grupo controle foi utilizado; a associação de cetamina/xilazina/propofol forneceu apenas 11 ejaculados de um total de 12 tentativas (de eficiência 91,6%), enquanto apenas quatro ejaculados (eficiência de 33%) foram obtidos com butorfanol/cetamina/propofol (P<0,05). Ambos os protocolos forneceram rápida indução e relaxamento suficientes para executar a EEJ. Na utilização de butorfanol/cetamina/propofol, os animais se recuperaram em 16,5±1,5min, um tempo mais curto do que no uso de xilazina/cetamina/protocolo de propofol, 20,7±1,0min (P>0,05). O volume de sêmen e a concentração espermática obtidos no uso da associação xilazina/cetamina/propofol foram significativamente maiores do que os verificados para o protocolo butorfanol/cetamina/propofol. Em conclusão, a associação de cetamina/xilazina/propofol é indicada para anestesia de tatus-peba submetidos à EEJ.(AU)

Establishment of an anesthetic protocol for semen collection by electroejaculation in six-banded armadillos (Euphractus sexcinctus Linnaeus, 1758) / Estabelecimento de um protocolo anestésico para coleta de sêmen por eletroejaculação em tatus-peba (Euphractus sexcinctus Linnaeus, 1758)

The aim was to verify the effects of different anesthetic protocols used during electroejaculation (EEJ) in six-banded armadillos (Euphractus sexcinctus). Four sexually matured animals were physically restrained and subjected to semen collection by the EEJ following three treatments: The control group consisted of no use of anesthesia; in the others, the anesthetic combinations xylazine/ketamine/propofol or butorphanol/ ketamine/propofol were administered. For each group, twelve procedures were conducted for EEJ. Semen was evaluated for volume, color, aspect, motility, sperm concentration, morphology, viability, and functional membrane integrity. The highest efficiency (100% ejaculates) was achieved when the control group was used; the xylazine/ketamine/propofol association provided only 11 ejaculates from a total of 12 attempts (91.6% efficiency), while only 4 ejaculates (33% efficiency) were obtained with butorphanol/ketamine/propofol (P<0.05). Both protocols provided rapid induction and relaxation enough to perform the EEJ. In the use of butorphanol/ketamine/propofol, the animals recovered at 16.5±1.5min, a time shorter than in the use of xylazine/ketamine/propofol protocol, 20.7±1.0min (P>0.05). The semen volume and sperm concentration obtained in the use of xylazine/ketamine/propofol association were significantly higher than those verified for butorphanol/ketamine/propofol protocol. In conclusion, the xylazine/ketamine/propofol association is indicated for anesthesia of six-banded armadillos submitted to EEJ.(AU)

Objetivou-se verificar os efeitos de diferentes protocolos anestésicos usados durante a eletroejaculação (EEJ) em tatus-peba (Euphractus sexcinctus). Quatro animais sexualmente maduros foram contidos fisicamente e submetidos à coleta de sêmen por EEJ, seguindo três tratamentos: o grupo controle consistiu do não uso de anestesia; nos outros, foram administradas combinações anestésicas de xilazina/cetamina/propofol, ou butorfanol/cetamina/propofol. Para cada grupo, foram conduzidos 12 procedimentos de EEJ. O sêmen foi avaliado para volume, cor, aspecto, motilidade, concentração de espermatozoides, morfologia, viabilidade e integridade funcional da membrana. A mais alta eficiência (100% de ejaculados) foi alcançada quando o grupo controle foi utilizado; a associação de cetamina/xilazina/propofol forneceu apenas 11 ejaculados de um total de 12 tentativas (de eficiência 91,6%), enquanto apenas quatro ejaculados (eficiência de 33%) foram obtidos com butorfanol/cetamina/propofol (P<0,05). Ambos os protocolos forneceram rápida indução e relaxamento suficientes para executar a EEJ. Na utilização de butorfanol/cetamina/propofol, os animais se recuperaram em 16,5±1,5min, um tempo mais curto do que no uso de xilazina/cetamina/protocolo de propofol, 20,7±1,0min (P>0,05). O volume de sêmen e a concentração espermática obtidos no uso da associação xilazina/cetamina/propofol foram significativamente maiores do que os verificados para o protocolo butorfanol/cetamina/propofol. Em conclusão, a associação de cetamina/xilazina/propofol é indicada para anestesia de tatus-peba submetidos à EEJ.(AU)

Alternativas para o aperfeiçoamento dos protocolos de criopreservação de sêmen de animais selvagens / Alternatives for the improvement of semen cryopreservation in wild animals

A criopreservação de sêmen é uma biotécnica importante para a reprodução e manutenção dadiversidade genética de animais selvagens. Apesar dos avanços já alcançados, evidencia-se a necessidade denovos estudos vislumbrando o uso de novas substâncias que possam oferecer maior proteção à célulaespermática. Para tanto, este trabalho apresenta uma revisão no tocante às inovações a serem incorporadas comoalternativas, no intuito de aprimorar os protocolos de criopreservação de sêmen de animais selvagens.(AU)

The semen cryopreservation is an important biotechnique for the reproduction and maintaining of thegenetic diversity in wild animals. Despite the improvements reached in the use of this biotechnique, there is ahighlighted need for studies that show the use of new substances, which could contribute to sperm protection.Thus, this study presents a review about innovations that could be incorporated as alternatives for theimprovement of protocols for semen cryopreservation in wild animals.(AU)

Alternativas para o aperfeiçoamento dos protocolos de criopreservação de sêmen de animais selvagens / Alternatives for the improvement of semen cryopreservation in wild animals

A criopreservação de sêmen é uma biotécnica importante para a reprodução e manutenção dadiversidade genética de animais selvagens. Apesar dos avanços já alcançados, evidencia-se a necessidade denovos estudos vislumbrando o uso de novas substâncias que possam oferecer maior proteção à célulaespermática. Para tanto, este trabalho apresenta uma revisão no tocante às inovações a serem incorporadas comoalternativas, no intuito de aprimorar os protocolos de criopreservação de sêmen de animais selvagens.

The semen cryopreservation is an important biotechnique for the reproduction and maintaining of thegenetic diversity in wild animals. Despite the improvements reached in the use of this biotechnique, there is ahighlighted need for studies that show the use of new substances, which could contribute to sperm protection.Thus, this study presents a review about innovations that could be incorporated as alternatives for theimprovement of protocols for semen cryopreservation in wild animals.

Short-term preservation of Pecari tajacu ovarian preantral follicles using phosphate buffered saline (PBS) or powdered coconut water (ACP(r)) media / Preservação de folículos ovarianos pré-antrais de Pecari tajacu por curtos períodos utilizando meios à base de solução salina fosfatada tamponada (PBS) ou água de coco em pó (ACP(r))

We compare protocols for the short-term preservation of collared peccarie's ovarian preantral follicles (PFs) by using phosphate buffered saline- (PBS) or powdered coconut water- (ACP(r)) based medium. For morphology analysis each pair of ovaries collected from six females was divided into nine fragments. One fragment was destined for morphology analysis (histology and transmission electron microscopy - TEM), constituting the control group and the other fragments were placed in tubes with PBS or ACP(r), packed in 5 L Styrofoam boxes, stored for 4h, 12h, 24h, and 36h, and then analyzed. For viability analysis a pair of ovaries from two additional females was divided into nine fragments; one fragment was immediately destined for viability analysis (Trypan blue test) and the other fragments were stored as previously described, until 24h and then analyzed. After 4h storage in ACP(r) medium, the follicular integrity was similar to control (87.8% vs 94.4%, respectively); however, ultrastructural analyses revealed swollen mitochondria as the first signals of PF degeneration. It was observed that ACP(r) (66.7%) was more efficient than PBS (49.4%) to preserve the morphological integrity after 36h storage (P<0.05); however, no differences were observed on follicular viability (P>0.05). In conclusion, the use of the ACP(r) is recommended for the short-term preservation of Pecari tajacu preantral follicles.(AU)

Compararam-se protocolos para a preservação por curtos períodos de folículos ovarianos pré-antrais (PFs) de catetos, utilizando meios à base de solução salina tamponada (PBS) ou água de coco em pó (ACP(r)). Para a análise morfológica, cada par de ovários coletados de seis fêmeas foi dividido em nove fragmentos. Um fragmento foi destinado para a análise da morfologia (histologia e microscopia eletrônica de transmissão - MET), constituindo o grupo controle, e os demais fragmentos foram colocados em tubos contendo PBS ou ACP(r), acondicionados em caixas térmicas de poliestireno expandido de 5L, armazenados durante quatro, 12, 24 e 36 horas, e, então, analisados. Para a análise da viabilidade, pares de ovários de duas fêmeas adicionais foram divididos em nove fragmentos; um deles foi imediatamente destinado à análise da viabilidade (teste com azul de Trypan), os outros fragmentos foram armazenados como descrito previamente até 24h e, então, foram analisados. Após quatro horas de armazenamento em meio ACP(r), a integridade folicular foi similar ao grupo controle (87,8% vs. 94,4%, respectivamente); contudo, a análise ultraestrutural revelou mitocôndrias edemaciadas como os primeiros sinais de degeneração dos PFs. Foi observado que o ACP(r) (66,7%) foi mais eficiente do que o PBS (49.4%) em preservar a integridade morfológica após 36h (p<0,05); entretanto, nenhuma diferença foi observada para a viabilidade folicular (P>0,05). Em conclusão, o uso da ACP(r) é recomendado para a preservação por curtos períodos de folículos pré-antrais de Pecari tajacu.(AU)

Criopreservação de sêmen canino em diluente Tris adicionado de dodecil sulfato de sódio / Cryopreservation of canine semen in Tris extender added by sodium dodecyl sulfate

O objetivo deste estudo foi avaliar o efeito do dodecil sulfato de sódio (SDS) na criopreservação do sêmen canino. Dez ejaculados foram obtidos de cinco cães machos adultos. O sêmen fresco foi avaliado subjetivamente e criopreservado. Os tratamentos consistiram em um grupo-controle, formado pelo diluente Tris-gema (20%) e pelo glicerol, e os grupos-teste, sendo o mesmo diluente acrescido de 0,1 ou 0,2% de SDS. Após a descongelação, o sêmen foi avaliado subjetivamente e por meio da análise computadorizada (CASA). Observou-se uma redução significativa da qualidade espermática após a descongelação. Entretanto, não houve diferenças entre os tratamentos e o controle (P > 0,05) para nenhum dos parâmetros seminais avaliados. Conclui-se que a adição do SDS nas concentrações de 0,1 e 0,2% ao diluente Tris-gema-glicerol não influencia a qualidade do sêmen canino após a descongelação. (AU)

The aim of this study was to evaluate the effect of sodium dodecyl sulfate (SDS) on the cryopreservation of canine semen. Ten ejaculates were obtained from five mature dogs were used. The fresh semen was subjectively evaluated and cryopreserved. The treatments consisted in a control group formed by Tris-based extender plus egg yolk (20%) and glycerol (6%); the testing groups were formed by the same extender plus 0.1 or 0.2% SDS. After thawing, semen was evaluated through light microscopy and computer-assisted analysis (CASA). A significant reduction in semen quality was verified after thawing. However, there were no differences between treatments and control for any sperm characteristic (P > 0.05). In conclusion the addition of 0.1 or 0.2% SDS to Tris-based extender does not influence the quality of the canine semen after thawing.(AU)

Criopreservação de sêmen canino em diluente Tris adicionado de dodecil sulfato de sódio / Cryopreservation of canine semen in Tris extender added by sodium dodecyl sulfate

O objetivo deste estudo foi avaliar o efeito do dodecil sulfato de sódio (SDS) na criopreservação do sêmen canino. Dez ejaculados foram obtidos de cinco cães machos adultos. O sêmen fresco foi avaliado subjetivamente e criopreservado. Os tratamentos consistiram em um grupo-controle, formado pelo diluente Tris-gema (20%) e pelo glicerol, e os grupos-teste, sendo o mesmo diluente acrescido de 0,1 ou 0,2% de SDS. Após a descongelação, o sêmen foi avaliado subjetivamente e por meio da análise computadorizada (CASA). Observou-se uma redução significativa da qualidade espermática após a descongelação. Entretanto, não houve diferenças entre os tratamentos e o controle (P > 0,05) para nenhum dos parâmetros seminais avaliados. Conclui-se que a adição do SDS nas concentrações de 0,1 e 0,2% ao diluente Tris-gema-glicerol não influencia a qualidade do sêmen canino após a descongelação.

The aim of this study was to evaluate the effect of sodium dodecyl sulfate (SDS) on the cryopreservation of canine semen. Ten ejaculates were obtained from five mature dogs were used. The fresh semen was subjectively evaluated and cryopreserved. The treatments consisted in a control group formed by Tris-based extender plus egg yolk (20%) and glycerol (6%); the testing groups were formed by the same extender plus 0.1 or 0.2% SDS. After thawing, semen was evaluated through light microscopy and computer-assisted analysis (CASA). A significant reduction in semen quality was verified after thawing. However, there were no differences between treatments and control for any sperm characteristic (P > 0.05). In conclusion the addition of 0.1 or 0.2% SDS to Tris-based extender does not influence the quality of the canine semen after thawing.

Recuperação de espermatozóides epidimários de gatos domésticos (Felis catus) utilizando soluções à base de Tris ou água de coco em pó / Recovery of epididymal sperm from domestic cats (Felis Catus) using Tris - or powdered coconut water-based solutions

Objetivou-se comparar a eficiência de soluções a base de Tris e água de coco (ACP-117®) utilizadas para a recuperação de espermatozoides epididimários de gatos domésticos (Felis catus) pelo método da flutuação. Treze gatos foram orquiectomizados e seus complexos testículos-epidídimos foram transportados ao laboratório, onde foram dissecados e lavados com solução fisiológica (37°C). A cauda do epidídimo foi fatiada, sendo os espermatozoides obtidos pelo método de flutuação, comparando-se duas soluções: Tris e ACP®. Após a recuperação dos espermatozoides foi realizada a avaliação da motilidade, vigor, concentração, morfologia e viabilidade espermática, e integridade de membrana. A técnica de flutuação permitiu a obtenção de espermatozoides em todos os gatos. As soluções foram equivalentes quanto a qualidade dos espermatozoides recuperados, com exceção da motilidade espermática, a qual foi significativamente superior no uso da solução a base de Tris (P < 0,05) que apresentou valores de 73,1 ± 4,8%, enquanto apenas 44,7 ± 8,9% de espermatozoides móveis foram obtidos com o ACP®. Conclui-se que a recuperação de espermatozoides epididimários de gatos domésticos pelo método de flutuação permite obter espermatozoides de boa qualidade, sendo recomendado o uso do diluente Tris.

The aim was to compare the efficiency of the Tris-and coconut water-based (ACP-117®) solutions on the recovering of epididymal sperm from domestic cats (Felis catus) through the fluctuation method. Thirteen cats were submitted to orchiectomies and the testicle-epididymis complexes were transported to the laboratory, dissected and washed with saline (37 ºC). The epididymis tail was sliced and the sperm were recovered by the fluctuation method by comparing two solutions: Tris and ACP®. After recovering, sperm were evaluated for motility, vigor, concentration, morphology, viability and membrane integrity. The fluctuation technique presented 100% efficiency, allowing the sperm recovery from all the toms. Both solutions were equivalent concerning to the quality of the recovered sperm, except for the sperm motility, that was significantly higher in the use of the Tris-based solution (P < 0.05) with values of 73.1 ± 4.8%, while 44.7 ± 8.9% motile sperm were obtained in the use of ACP®. In conclusion, the recovery of epididymal sperm from domestic cats through the fluctuation method allows the obtaining of good quality sperm, and the use of Tris is suggested as the extender.

Recuperação de espermatozóides epidimários de gatos domésticos (Felis catus) utilizando soluções à base de Tris ou água de coco em pó / Recovery of epididymal sperm from domestic cats (Felis Catus) using Tris - or powdered coconut water-based solutions

Objetivou-se comparar a eficiência de soluções a base de Tris e água de coco (ACP-117®) utilizadas para a recuperação de espermatozoides epididimários de gatos domésticos (Felis catus) pelo método da flutuação. Treze gatos foram orquiectomizados e seus complexos testículos-epidídimos foram transportados ao laboratório, onde foram dissecados e lavados com solução fisiológica (37°C). A cauda do epidídimo foi fatiada, sendo os espermatozoides obtidos pelo método de flutuação, comparando-se duas soluções: Tris e ACP®. Após a recuperação dos espermatozoides foi realizada a avaliação da motilidade, vigor, concentração, morfologia e viabilidade espermática, e integridade de membrana. A técnica de flutuação permitiu a obtenção de espermatozoides em todos os gatos. As soluções foram equivalentes quanto a qualidade dos espermatozoides recuperados, com exceção da motilidade espermática, a qual foi significativamente superior no uso da solução a base de Tris (P < 0,05) que apresentou valores de 73,1 ± 4,8%, enquanto apenas 44,7 ± 8,9% de espermatozoides móveis foram obtidos com o ACP®. Conclui-se que a recuperação de espermatozoides epididimários de gatos domésticos pelo método de flutuação permite obter espermatozoides de boa qualidade, sendo recomendado o uso do diluente Tris.(AU)

The aim was to compare the efficiency of the Tris-and coconut water-based (ACP-117®) solutions on the recovering of epididymal sperm from domestic cats (Felis catus) through the fluctuation method. Thirteen cats were submitted to orchiectomies and the testicle-epididymis complexes were transported to the laboratory, dissected and washed with saline (37 ºC). The epididymis tail was sliced and the sperm were recovered by the fluctuation method by comparing two solutions: Tris and ACP®. After recovering, sperm were evaluated for motility, vigor, concentration, morphology, viability and membrane integrity. The fluctuation technique presented 100% efficiency, allowing the sperm recovery from all the toms. Both solutions were equivalent concerning to the quality of the recovered sperm, except for the sperm motility, that was significantly higher in the use of the Tris-based solution (P < 0.05) with values of 73.1 ± 4.8%, while 44.7 ± 8.9% motile sperm were obtained in the use of ACP®. In conclusion, the recovery of epididymal sperm from domestic cats through the fluctuation method allows the obtaining of good quality sperm, and the use of Tris is suggested as the extender.(AU)

Estratégias para a conservação do germoplasma de catetos (Tayassu tajacu Linnaeus, 1758) no bioma caatinga / Strategies for the conservation of collared peccaries (Tayassu tajacu Linnaeus, 1758) germplasm in the caatinga biome

O Brasil é um dos mais ricos países em termos de biodiversidade em todo o mundo. Dentre os seus diferentes biomas, a caatinga constitui aquele mais alterado pela ação humana, embora seja habitada por inúmeras espécies. Os catetos (Tayassu tajacu) estão entre as espécies mais caçadas tanto devido aos hábitos alimentares das comunidades locais quanto ao valor comercial de sua carne e pele no mercado internacional. Devido a esse fato, os catetos foram incluidos, recentemente, entre os animais que correm risco de extinção na Caatinga. Assim, o presente trabalho tem por objetivo descrever as estratégias para a conservação de material genético oriundo de catetos criados em cativeiro no bioma caatinga. Abordam-se os aspectos ecológicos da espécie, bem como sua fisiologia reprodutiva e os resultados de diferentes pesquisas voltadas para a conservação de seu germoplasma.(AU)

The Brazil is one of the richest countries in terms of biodiversity worldwide. Among its various biomes, the Caatinga is the more modified one by human action, although it is inhabited by numerous species. The collared peccary (Tayassu tajacu ) is one of the most hunted species both because the dietary habits of the local communities, and by the commercial value of its meat and pelts on the international market. Due to this fact, the collared peccary recently were included among the animals that are under risk of extinction. Thus, this work aims to describe the strategies for the conservation of genetic material from collared peccary bred in captivity in the Caatinga. The ecological aspects of the species, as well as its reproductive physiology and the results of various surveys focused on the conservation of its germplasm are discussed.(AU)

Estratégias para a conservação do germoplasma de catetos (Tayassu tajacu Linnaeus, 1758) no bioma caatinga / Strategies for the conservation of collared peccaries (Tayassu tajacu Linnaeus, 1758) germplasm in the caatinga biome

O Brasil é um dos mais ricos países em termos de biodiversidade em todo o mundo. Dentre os seus diferentes biomas, a caatinga constitui aquele mais alterado pela ação humana, embora seja habitada por inúmeras espécies. Os catetos (Tayassu tajacu) estão entre as espécies mais caçadas tanto devido aos hábitos alimentares das comunidades locais quanto ao valor comercial de sua carne e pele no mercado internacional. Devido a esse fato, os catetos foram incluidos, recentemente, entre os animais que correm risco de extinção na Caatinga. Assim, o presente trabalho tem por objetivo descrever as estratégias para a conservação de material genético oriundo de catetos criados em cativeiro no bioma caatinga. Abordam-se os aspectos ecológicos da espécie, bem como sua fisiologia reprodutiva e os resultados de diferentes pesquisas voltadas para a conservação de seu germoplasma.

The Brazil is one of the richest countries in terms of biodiversity worldwide. Among its various biomes, the Caatinga is the more modified one by human action, although it is inhabited by numerous species. The collared peccary (Tayassu tajacu ) is one of the most hunted species both because the dietary habits of the local communities, and by the commercial value of its meat and pelts on the international market. Due to this fact, the collared peccary recently were included among the animals that are under risk of extinction. Thus, this work aims to describe the strategies for the conservation of genetic material from collared peccary bred in captivity in the Caatinga. The ecological aspects of the species, as well as its reproductive physiology and the results of various surveys focused on the conservation of its germplasm are discussed.