Coccidian parasites from birds at rehabilitation centers in Portugal, with notes on Avispora bubonis in Old World / Coccídios parasitas de aves em centros de reabilitação em Portugal, com notas sobre Avispora bubonis no Velho Mundo

Portugal has some rehabilitation centers for wild animals, which are responsible for the rehabilitation and reintroduction of birds, among other animals, into the wild. Coccidian parasites of these wild birds in rehabilitation centers are especially important because these centers can introduce coccidian species into new environments through the reintroduction of their respective hosts. In this context, the current study aimed to identify intestinal coccidia from wild birds at two rehabilitation centers for wild animals located in two municipalities of Portugal. Eighty-nine wild birds of 9 orders and 11 families were sampled, of which 22 (25%) were positive for Coccidia. Avispora spp. were found in raptors. Sporocysts of Sarcocystinae subfamily were recovered from owls. An Isospora sp. was found in Turdus merula Linnaeus, 1758, and an Eimeria sp. was found in Fulica atra Linnaeus, 1758. Among the coccidian species, Avispora bubonis (Cawthorn, Stockdale, 1981) can be highlighted. The finding of this species indicates that transmission of coccidians from the New World to the Old World may be occurring, potentially through dispersion by Bubo scandiacus (Linnaeus, 1758) through Arctic regions or by means of anthropic activities, and/or through other unknown mechanisms.(AU)

Portugal possui alguns centros de reabilitação de animais silvestres, responsáveis pela reabilitação e reintrodução de aves, entre outros animais, na natureza. Os coccídios parasitas dessas aves silvestres em centros de reabilitação são especialmente importantes porque esses centros podem introduzir espécies de coccídios em novos ambientes através da reintrodução de seus respectivos hospedeiros. Neste contexto, o presente estudo visou identificar coccídios intestinais de aves silvestres em dois centros de reabilitação de animais silvestres localizados em dois municípios de Portugal. Oitenta e nove aves silvestres de 9 ordens e 11 famílias foram amostradas, das quais 22 (25%) foram positivas para coccídios. Avispora spp. foram encontradas em aves de rapina. Esporocistos de coccídios da subfamilia Sarcocystinae foram encontrados em corujas. Uma Isospora sp. foi encontrada em Turdus merula Linnaeus, 1758 e uma Eimeria sp. foi encontrada em Fulica atra Linnaeus, 1758. Entre as espécies de coccídios, Avispora bubonis (Cawthorn, Stockdale, 1981) pode ser destacada. O encontro dessa espécie indica que a transmissão de coccídios do Novo Mundo para o Velho Mundo pode estar ocorrendo, potencialmente através da dispersão por Bubo scandiacus (Linnaeus, 1758) pelas regiões árticas ou por meio de atividades antrópicas, e/ou através de outros mecanismos desconhecidos.(AU)

Avispora mochogalegoi n. sp. (Apicomplexa: Sarcocystidae) in the little owl, Athene noctua (Strigiformes: Strigidae), in mainland Portugal / Avispora mochogalegoi n. sp. (Apicomplexa: Eimeriidae) no mocho-galego, Athene noctua (Strigiformes: Strigidae), em Portugal Continental

The little owl Athene noctua (Scopoli, 1769) is a small raptor that is widely distributed from northern to southern Portugal and several other countries in Europe, Asia and North Africa, and which has been introduced into New Zealand. In the current study, 18 fecal samples were collected from little owls kept at the Lisbon Center for Wild Animal Recovery, which is located in Monsanto Forest Park, Lisbon, Portugal. Twelve (67%) of them were found to be passing an undescribed species of Avispora in their feces. The oocysts of Avispora mochogalegoi n. sp. were ellipsoidal with a bilayered wall and measured 38.9 × 32.9 µm, with a shape index of 1.18. No micropyle, oocyst residuum or polar granule was present. The sporocysts were subspherical, measuring 21.1 × 20.1 µm. Stieda, sub-Stieda and para-Stieda bodies were absent. The sporocyst residuum was composed of a compact subspherical mass of granules. This is the fourth species of Avispora reported in Strigiformes.(AU)

O mocho-galego Athene noctua (Scopoli, 1769) é uma pequena ave de rapina amplamente distribuída de norte a sul de Portugal, em vários países da Europa, Ásia e norte da África, e foi introduzida na Nova Zelândia. No presente trabalho, 18 amostras de fezes foram coletadas de mochos-galegos mantidos no Centro de Recuperação de Animais Silvestres de Lisboa, localizado no Parque Florestal de Monsanto, Lisboa, Portugal. Doze (67%) deles eliminaram uma espécie não descrita de Avispora em suas fezes. Os oocistos de Avispora mochogalegoi n. sp. foram elipsóides, com parede de dupla camada, medindo 38,9 × 32,9 µm, e índice morfométrico de 1,18. A micrópila, resíduo do oocisto e grânulo polar foram ausentes. Os esporocistos foram subesféricos, medindo 21,1 × 20,1 µm. Corpos de Stieda, substieda e parastieda foram ausentes. O resíduo do esporocisto foi composto de uma massa subesférica compacta de grânulos. Esta é a quarta espécie Avispora relatada em Strigiformes.(AU)

Isospora albicollis (Apicomplexa: Eimeriidae) in thrushes Turdus spp. (Passeriformes: Turdidae), in southeastern Brazil / Isospora albicollis (Apicomplexa: Eimeriidae) em sabiás Turdus spp. (Passeriformes: Turdidae), no sudeste Brasileiro

The aim of the present study was to report and describe Isospora albicollis Lainson and Shaw, 1989 parasitizing a white-necked thrush Turdus albicollis Vieillot, 1818 and a pale-breasted thrush Turdus leucomelas Vieillot, 1818 in two different localities: the Itatiaia National Park and Cacaria, in southeastern Brazil. The oocysts identified were ovoidal, 24.4 × 19.7 m, with a smooth, bilayered wall, around 1.4 m thick. Oocyst residuum was absent, but a micropyle and a polar granule were present. The sporocysts were ellipsoidal, 15.4 × 10.1 m. The Stieda body was knob-like to rounded and the sub-Stieda body was prominent and wide. Sporocyst residuum was present, usually as a cluster of granules that appear to be membrane-bounded. The sporozoites were vermiform with one posterior refractile body and a centrally located nucleus. Besides recording the new host T. leucomelas, the identification of I. albicollis in the Itatiaia National Park and Cacaria, in southeastern Brazil, provide records of new localities for its parasitism, and reveals the wide distribution and dispersion of this coccidium in Brazil.(AU)

O objetivo do presente estudo foi relatar e descrever Isospora albicollis Lainson e Shaw, 1989, parasitando um sabiá-coleira Turdus albicollis Vieillot, 1818 e um sabiá-barranco Turdus leucomelas Vieillot 1818, em duas localidades diferentes: Parque Nacional do Itatiaia e Cacaria, no Sudeste do Brasil. Os oocistos identificados foram ovóides, 24,4 × 19,7 m, com uma parede lisa e dupla, com cerca de 1,4 m de espessura. Resíduo do oocisto foi ausente, mas uma micrópila e um grânulo polar foram presentes. Esporocistos elipsoidais, 15,4 × 10,1 m, corpo de Stieda em forma de botão a arredondado e corpo de sub-Stieda proeminente e largo. Resíduo do esporocisto presente, usualmente como um aglomerado de grânulos que parecem estar envolvidos por uma membrana. Esporozoítos vermiformes com um corpo refráctil posterior e um núcleo centralizado. Além de registrar o novo hospedeiro T. leucomelas, a identificação de I. albicollis no Parque Nacional de Itatiaia e Cacaria, no Sudeste do Brasil, fornece registros de novas localidades para seu parasitismo e revela a ampla distribuição e dispersão desse coccídio no Brasil.(AU)

Caryospora peneireiroi n. sp. (Apicomplexa: Eimeriidae) in the common kestrel, Falco tinnunculus (Falconiformes: Falconidae), in mainland Portugal / Caryospora peneireiroi n. sp. (Apicomplexa: Eimeriidae) no peneireiro, Falco tinnunculus (Falconiformes: Falconidae), em Portugal Continental

The common kestrel Falco tinnunculus Linnaeus, 1758, is a widespread raptor, native in Europe, Asia and Africa, and vagrant in the Americas. In the current work, 27 fecal samples were collected from common kestrels kept in the Lisbon Center for Wild Animal Recovery, located at Monsanto Forest Park, Lisbon, Portugal. Five (19%) of them were found to be passing an undescribed species of Caryospora in their feces. The oocysts of Caryospora peneireiroi n. sp. were ellipsoidal with a bilayered wall and measured 47.1 × 37.6 µm with a shape index of 1.25. No micropyle, oocyst residuum or polar granule was present. The sporocysts were subspherical, measuring 25.1 × 24.3 µm. Stieda, sub-Stieda and para-Stieda bodies were absent. The sporocyst residuum was composed of many homogenous globules scattered throughout the periphery of the sporocyst. This is the fourth caryosporan species reported from F. tinnunculus.(AU)

O peneireiro Falco tinnunculus Linnaeus, 1758, é uma ave de rapina com vasta distribuição geográfica, nativa da Europa, Ásia e África, e errante nas Américas. No presente trabalho, 27 amostras de fezes foram coletadas de peneireiros mantidos no Centro de Recuperação de Animais Silvestres de Lisboa, localizado no Parque Florestal de Monsanto, Lisboa, Portugal. Cinco (19%) deles eliminaram uma espécie não descrita de Caryospora em suas fezes. Os oocistos de Caryospora peneireiroi n. sp. foram elipsoides, com parede de dupla camada, medindo 47,1 × 37,6 µm, e índice morfométrico de 1,25. A micrópila, resíduo do oocisto e grânulo polar não foram evidenciados. Os esporocistos foram subesféricos, medindo 25,1 × 24,3 µm. Corpos de Stieda, substieda e parastieda não se manifestaram. Resíduo do esporocisto foi composto de muitos glóbulos homogêneos espalhados por toda a periferia do esporocisto. Essa é a quarta espécie Caryospora descrita de F. tinnunculus.(AU)

Co-infection by Tritrichomonas foetus and Pentatrichomonas hominis in asymptomatic cats / Co-infecção por Tritrichomonas foetus e Pentatrichomonas hominis em gatos assintomáticos

Tritrichomonas foetus, a parasite well known for its significance as a venereally transmitted pathogen in cattle, has been identified as a cause of chronic large bowel diarrhea in domestic cats in many countries of the world. In Brazil, several studies on the diagnosis of bovine trichomoniasis have been performed, but until now, no study was made regarding feline trichomoniasis. Thus, this is the first study to report the occurrence of T. foetus and Pentatrichomonas hominis in cats using morphological and molecular analysis. Feces from 77 cats were examined, four of which (5.2%) were positive for the presence of parabasalids. Morphological analysis of stained smears revealed piriform trophozoites showing the three anterior flagella, elongated nucleus and axostyle ending abruptly in fillet, characteristic of T. foetus. In scanning and transmission electron microscopy, identification characters similar to those previously reported for T. foetus were observed. The cultures containing trophozoites were submitted for molecular analysis, which resulted positive for T. foetus DNA using specific primers (TFR3 and TFR4), and all samples were positive and subjected to sequencing in which they showed 99.7-100% similarity with another isolate sequencing of T. foetus (JX960422). Although no trophozoite with consistent morphology of P. hominis has been visualized in the samples, differential diagnosis was performed using specific primers for P. hominis (TH3 and TH5) amplicon. In three of the four samples (3.89%) sequencing revealed 100% similarity when compared with another sequence of P. hominis deposited in Genbank (KC623939). Therefore, the present study revealed through the diagnostic techniques employed the simultaneous infection by T. foetus and P. hominis in the feces of cats. However, it was necessary to use more than one technique for the diagnosis of the co-infection[...](AU)

Tritrichomonas foetus, um parasito bem conhecido por seu significado como um agente patogênico transmitido venereamente em bovinos, também foi identificado como causa de diarreia crónica do intestino grosso em gatos domésticos em muitos países. No Brasil, vários estudos sobre o diagnóstico de tricomonose bovina foram realizados, mas até agora, não há informação disponível em relação à trichomonose felina. Assim, este é o primeiro estudo a relatar a ocorrência de T. foetus e Pentatrichomonas hominis em gatos por meio de análise morfológica e molecular. Fezes de 77 gatos foram examinadas, a partir da qual quatro (5,2%) foram positivas para a presença de parabasalídeos. A análise morfológica de esfregaços corados revelou trophozoitos piriformes com três flagelos anteriores, núcleo alongado e axóstilo cuja projeção termina abruptamente em formato de filete, características estas de identificação morfológica T. foetus. Além disso, microscopia eletrônica de varredura e transmissão, revelaram caracteres morfológicos semelhantes aos descritos na literatura para esta espécie. A análise molecular de culturas utilizando iniciadores específicos para trofozoítos de T. foetus (TFR3 e TFR4), mostrou que as quatro amostras foram positivas para este parasito e osequenciamento dos fragmentos amplificados demonstraram 99,7-100% de similaridade com seqüências depositadas no GeneBank de T. foetus. Nenhum trofozoíto com morfologia consistente com a descrição de P. hominis foi visualizado nas amostras. No entanto, a análise molecular, utilizando iniciadores específicos para esta espécie (TH3 e TH5) detectou que três das quatro amostras (75%) também foram positivas para P. hominis e o sequenciamento de nucleotideos revelou 100% de similaridade dos amplicons quando comparada com o mesmo fragmento de DNA de P. hominis depositado no GenBank. Como tal, o presente estudo relata a coinfecção de gatos com T. foetus e P. hominis e destacou a exigência de uma combinação de métodos[...](AU)

Studies on coccidian oocysts (Apicomplexa: Eucoccidiorida) / Estudos sobre oocistos de coccídios (Apicomplexa: Eucoccidiorida)

The oocysts of the coccidia are robust structures, frequently isolated from the feces or urine of their hosts, which provide resistance to mechanical damage and allow the parasites to survive and remain infective for prolonged periods. The diagnosis of coccidiosis, species description and systematics, are all dependent upon characterization of the oocyst. Therefore, this review aimed to the provide a critical overview of the methodologies, advantages and limitations of the currently available morphological, morphometrical and molecular biology based approaches that may be utilized for characterization of these important structures. It has become apparent that no single methodology is sufficient to fully characterize these structures and the majority of researchers favor the use of combinational or polyphasic approaches.

Os oocistos de coccídios são estruturas robustas, frequentemente isoladas das fezes ou urina de seus hospedeiros, os quais oferecem resistência a danos mecânicos e permitem que os parasitas sobrevivam e permaneçam infecciosos por períodos prolongados. O diagnóstico da coccidiose, descrição das espécies e sistemática são dependentes da caracterização do oocisto. Portanto, esta revisão teve como objetivo fornecer uma visão crítica das metodologias, vantagens e limitações dos métodos morfológicos, morfométricos e moleculares que podem ser utilizados para a caracterização destas estruturas importantes. Tornou-se evidente que nenhuma metodologia única é suficiente para caracterizar completamente essas estruturas e que a maioria das pesquisas favorecem o uso de metodologias combinadas ou polifásicas.

Oocyst shedding by green-winged-saltator (Saltator similis) in the diagnostic of coccidiosis and Isospora similisi n. sp. (Apicomplexa: Eimeriidae) / Eliminação de oocistos por trinca-ferro-verdadeiro (Saltator similis) no diagnóstico da coccidiose e Isospora similisi n. sp. (Apicomplexa: Eimeriidae)

Diurnal periodicity is a phenomenon that has been observed in coccidian of Isospora parasites of passerines, which have been eliminated great number of oocysts at dusk. The objective of this study was to evaluate the occurrence of periodicity of oocysts presence in the green-winged-saltator Saltator similis, and its use in the diagnosis of coccidiosis in wild birds in captivity. A total of 220 fecal samples were collected from birds, apprehended from illegal trading and kept in quarantine in CETAS∕IBAMA, in the morning and late afternoon, from May to November 2010. It was observed that 1.82% of the samples collected in the morning were positive, while 31.36% of samples were positive in the late afternoon. In addition, the number of oocysts shed was greater in the afternoon. Therefore, it was concluded that the sampling in the late afternoon provided greater reliability for the diagnosis of coccidiosis in green-winged-saltators. Moreover, in this study a new isosporoid coccidian parasite from the green-winged-saltator S. similis was observed and is herein described. Isospora similisi n. sp. oocysts are spheroidal to sub-spheroidal, 27.5 × 25.9 µm, with a smooth and bi-layered wall, ∼1.2 mm. Micropyle and oocyst residuum are absent, but splinter-like or comma-like granules are present. Sporocysts are ellipsoidal or slightly ovoidal, 17.4 × 12.2 mm. A stieda body and substieda body are present. The sporocyst residuum is composed of granules of different sizes. Sporozoites are vermiform with a single refractile body and a nucleus. This is the fourth description of an isosporoid coccidium infecting S. similis and the sixth description from Cardinalidae.

A periodicidade diurna é um fenômeno que tem sido observado em coccídios do gênero Isosporaparasitas de pássaros, os quais eliminam uma maior quantidade de oocistos ao entardecer. O objetivo deste estudo foi determinar a periodicidade de eliminação de oocistos pelas fezes no trinca-ferro-verdadeiro Saltator similis, e sua utilização no diagnóstico da coccidiose. Foram colhidas 220 amostras fecais de aves oriundas de apreensões do tráfico de animais silvestres e mantidas na quarentena do CETAS∕IBAMA, nos períodos da manhã e ao entardecer, de maio a novembro de 2010. Observou-se que 1,82% das amostras colhidas no período da manhã foram positivas, enquanto que 31,36% das amostras colhidas foram positivas ao entardecer, onde o maior número de oocistos foi observado no período da tarde. Portanto, concluiu-se que a colheita de amostras ao entardecer oferece maior confiabilidade para o diagnóstico da coccidiose. Além disso, descreve-se um novo coccídio do trinca-ferro-verdadeiro S. similis. Isospora similisi n. sp. possui oocistos esféricos a subesféricos, 27,5 × 25,9 µm, com parede dupla e lisa, ∼1,2 µm. A micrópila e o resíduo do oocisto estão ausentes, porém pequenos grânulos estão presentes. Os esporocistos são elipsóides ou levemente ovóides, 17,4 × 12,2 µm. Os corpos de Stieda e substieda estão presentes. O resíduo do esporocisto está presente e os esporozoítos possuem um corpo refrátil posterior e um núcleo. Esta é a quarta espécie isosporóide descrita de S. similise a sexta descrição na família Cardinalidae.

Intestinal protozoa in apprehended New World nonhuman primates / Protozoários intestinais em primatas não-humanos apreendidos

The objective of this study was to identify intestinal protozoa in fecal samples of illegally commercialized New World nonhuman primates apprehended by governmental authorities and sent to a Wildlife Screening Center in the municipality of Seropédica, State of Rio de Janeiro, under the administration of Instituto Brasileiro de Meio Ambiente e Recursos Naturais. Feces from marmosets (crossbreeding among Callithrix jacchus and C. penicillata) and brown howler monkeys (Alouatta fusca) were collected and submitted to Richties formaldehyde-ether sedimentation technique. Smears were made with the sediment and submitted to safranin-methylene blue and Wheatleys modified trichrome stainings. Phenol-auramine staining was used in order to compare positive smears for Cryptosporidiumoocysts stained with safranin-methylene blue technique. Three (100%)fecal samples of brown howler monkeys and eight of common marmosets (88.9%) were positive for Cryptosporidium oocysts.Blastocystis hominis-like forms were observed in all samples of brownhowler monkeys and in 66.7% (6/9) of marmosets. New World nonhuman primates Callithrix crossbreed species and A. fusca can harbor forms similarly identified as potential zoonotic organisms.The strict contact between monkeys and humans can represent risks for both by mutual transmission of pathogens. It is unknown if monkey species studied in the present work are either infected with these parasites in natural environment or acquire it when submitted to human contact. Stressing is also a factor that deserves attention on animals submitted to capture, apprehension and transport to Wildlife Screening Centers.(AU)

O objetivo deste estudo foi identificar protozoários intestinais em amostras fecais de primatas neotropicais não-humanos, comercializados ilegalmente, apreendidos por autoridades governamentais, e enviados para um centro de triagem de animais silvestres no município de Seropédica, Estado do Rio de Janeiro, sob a administração do Instituto Brasileiro de Meio Ambiente e Recursos Naturais. Fezes de micos-saguí (cruzamento entre Callithrix jacchus e C. penicillata) e bugios marrons (Alouatta fusca) foram coletados e submetidos à técnica de centrifugo-sedimentação de Ritchie. Esfregaços foram confeccionados com o sedimento e submetidos à coloração pelas técnicas da safranina-azul de metileno e Tricrômio modificada de Wheatley. Três (100%) amostras fecais de bugios marrons e oito (88,9%) de micos-saguí foram positivos para oocistos de Cryptosporidium. Formas de Blastocystis homonis-simile foram observadas em todas as amostras de bugios marrons e em 66,7% (6/9) de micos-saguí. Primatas neotropicais não-humanos como os micos-saguí originados do cruzamento de espécies de Callithrix e a espécie A. fusca podem abrigar formas similarmente identificadas como organismos com potencial zoonótico. O contato estrito entre macacos e humano pode representar riscos para ambos por transmissão mútua de patógenos. Não está esclarecida se as espécies de macacos estudadas no presente trabalho são também infectadas com estes parasitos em ambiente natural ou adquirem estes quando submetidos ao contato humano. Estresse é também um fator que merece atenção para os animais submetidos à captura, apreensão e transporte para o centro de triagem de animais silvestres.(AU)

Distribuição do Toxoplasma gondii Nicolle & Manceaux, 1909 (Apicomplexa: Toxoplasmatinae) em órgãos de camundongos albinos inoculados com uma amostra acistogênica: dados preliminares / Distribution of acystogenic Toxoplasma gondii Nicolle & Manceaux, 1909 (Apicomplexa: Toxoplasmatinae) in organs of albino mice: preliminary data

Vinte camundongos albinos fêmeas foram inoculados por via sub-cutânea com 10³ taquizoítas de Toxoplasma gondii. Quarenta outros animais foram usados como controles, sendo 20 como controle alimentar e 20 como controle negativo. Taquizoítas foram observados em um dos animais inoculados no 5º dia após infecção (DAl), caracterizando-se como formas finas e pequenas. Do 11º ao 13º DAl, taquizoítas finos e largos foram observados em esfregaços do fígado, baço, pulmões, rins e coração. Os animais controles foram negativos para T. gondii.

Twenty female albino mice were inoculated subcuta-neously wich 10³ Toxoplasma gondii tachizoites. Fourty mice were used as contrais, 20 were used as per fed and 20 were negative ones. Tachizoites were observed in one of the inoculated animais at the 5th day after infection (DAl) and they were characterized as slender and small forms. At 11th to 13th DAl, slender and wide tachizoites were observed in tissues smears of liver, spleen, lungs, kidneys, and heart. The contrai animais remained negative for T. gondii.