Toll-like receptor 9 polymorphisms in brazilian patients with systemic lupus erythematosus: a pilot study / Polimorfismos do receptor toll-like 9 em pacientes brasileiros com lúpus eritematoso sistêmico: um estudo piloto

Toll-like receptor 9 (TLR9) is an important component of the innate immune system and have been associated with several autoimmune diseases, such as Systemic Lupus Erythematosus (SLE). The aim of this study was to investigate polymorphisms in TLR9 gene in a Brazilian SLE patients group and their association with clinical manifestation, particularly Jaccoud’s arthropathy (JA). We analyzed DNA samples from 204 SLE patients, having a subgroup of them presenting JA (n=24). A control group (n=133) from the same city was also included. TLR9 single nucleotide polymorphisms (SNPs) (−1237 C>T and +2848 G>A) were identified by sequencing analysis. The TLR9 gene genotype frequency was similar both in SLE patients and the control group. In the whole SLE population, an association between the homozygosis of allele C at position −1237 with psychosis and anemia (p < 0.01) was found. Likewise, the homozygosis of allele G at position +2848 was associated with a discoid rash (p < 0.05). There was no association between JA and TLR9 polymorphisms. These data show that TLR9 polymorphisms do not seem to be a predisposing factor for SLE in the Brazilian population, and that SNPs are not associated with JA.

O receptor Toll-like 9 (TLR9) é um componente importante do sistema imunológico inato e tem sido associado a várias doenças autoimunes, como o Lúpus Eritematoso Sistêmico (LES). O objetivo deste estudo foi investigar polimorfismos no gene TLR9 em um grupo de pacientes brasileiros com LES e sua associação com a manifestação clínica, particularmente a artropatia de Jaccoud (JA). Foram analisadas amostras de DNA de 204 pacientes com LES, e um subgrupo com JA (n=24). Um grupo de controle (n=133) da mesma cidade também foi incluído. Os polimorfismos de nucleotídeos únicos TLR9 (SNPs) (−1237 C>T e +2848 G>A) foram identificados pela análise de sequenciamento. A frequência do genótipo genético TLR9 foi semelhante tanto em pacientes com LES quanto no grupo controle. Em toda a população de LES, foi encontrada associação entre a homozigose do alelo C na posição −1237 com psicose e anemia (p < 0,01). Da mesma forma, a homozigose do alelo G na posição +2848 foi associada a uma erupção cutânea discoide (p < 0,05). Não houve associação entre polimorfismos JA e TLR9. Esses dados mostram que os polimorfismos TLR9 não parecem ser um fator predisponível para o LES na população brasileira, e que os SNPs não estão associados ao JA.

Toll-like receptor 9 polymorphisms in brazilian patients with systemic lupus erythematosus: a pilot study

Abstract Toll-like receptor 9 (TLR9) is an important component of the innate immune system and have been associated with several autoimmune diseases, such as Systemic Lupus Erythematosus (SLE). The aim of this study was to investigate polymorphisms in TLR9 gene in a Brazilian SLE patients group and their association with clinical manifestation, particularly Jaccouds arthropathy (JA). We analyzed DNA samples from 204 SLE patients, having a subgroup of them presenting JA (n=24). A control group (n=133) from the same city was also included. TLR9 single nucleotide polymorphisms (SNPs) (1237 C>T and +2848 G>A) were identified by sequencing analysis. The TLR9 gene genotype frequency was similar both in SLE patients and the control group. In the whole SLE population, an association between the homozygosis of allele C at position 1237 with psychosis and anemia (p 0.01) was found. Likewise, the homozygosis of allele G at position +2848 was associated with a discoid rash (p 0.05). There was no association between JA and TLR9 polymorphisms. These data show that TLR9 polymorphisms do not seem to be a predisposing factor for SLE in the Brazilian population, and that SNPs are not associated with JA.

Resumo O receptor Toll-like 9 (TLR9) é um componente importante do sistema imunológico inato e tem sido associado a várias doenças autoimunes, como o Lúpus Eritematoso Sistêmico (LES). O objetivo deste estudo foi investigar polimorfismos no gene TLR9 em um grupo de pacientes brasileiros com LES e sua associação com a manifestação clínica, particularmente a artropatia de Jaccoud (JA). Foram analisadas amostras de DNA de 204 pacientes com LES, e um subgrupo com JA (n=24). Um grupo de controle (n=133) da mesma cidade também foi incluído. Os polimorfismos de nucleotídeos únicos TLR9 (SNPs) (1237 C>T e +2848 G>A) foram identificados pela análise de sequenciamento. A frequência do genótipo genético TLR9 foi semelhante tanto em pacientes com LES quanto no grupo controle. Em toda a população de LES, foi encontrada associação entre a homozigose do alelo C na posição 1237 com psicose e anemia (p 0,01). Da mesma forma, a homozigose do alelo G na posição +2848 foi associada a uma erupção cutânea discoide (p 0,05). Não houve associação entre polimorfismos JA e TLR9. Esses dados mostram que os polimorfismos TLR9 não parecem ser um fator predisponível para o LES na população brasileira, e que os SNPs não estão associados ao JA.

Toll-like receptor 9 polymorphisms in brazilian patients with systemic lupus erythematosus: a pilot study / Polimorfismos do receptor toll-like 9 em pacientes brasileiros com lúpus eritematoso sistêmico: um estudo piloto

Abstract Toll-like receptor 9 (TLR9) is an important component of the innate immune system and have been associated with several autoimmune diseases, such as Systemic Lupus Erythematosus (SLE). The aim of this study was to investigate polymorphisms in TLR9 gene in a Brazilian SLE patients group and their association with clinical manifestation, particularly Jaccoud's arthropathy (JA). We analyzed DNA samples from 204 SLE patients, having a subgroup of them presenting JA (n=24). A control group (n=133) from the same city was also included. TLR9 single nucleotide polymorphisms (SNPs) (−1237 C>T and +2848 G>A) were identified by sequencing analysis. The TLR9 gene genotype frequency was similar both in SLE patients and the control group. In the whole SLE population, an association between the homozygosis of allele C at position −1237 with psychosis and anemia (p < 0.01) was found. Likewise, the homozygosis of allele G at position +2848 was associated with a discoid rash (p < 0.05). There was no association between JA and TLR9 polymorphisms. These data show that TLR9 polymorphisms do not seem to be a predisposing factor for SLE in the Brazilian population, and that SNPs are not associated with JA.

Resumo O receptor Toll-like 9 (TLR9) é um componente importante do sistema imunológico inato e tem sido associado a várias doenças autoimunes, como o Lúpus Eritematoso Sistêmico (LES). O objetivo deste estudo foi investigar polimorfismos no gene TLR9 em um grupo de pacientes brasileiros com LES e sua associação com a manifestação clínica, particularmente a artropatia de Jaccoud (JA). Foram analisadas amostras de DNA de 204 pacientes com LES, e um subgrupo com JA (n=24). Um grupo de controle (n=133) da mesma cidade também foi incluído. Os polimorfismos de nucleotídeos únicos TLR9 (SNPs) (−1237 C>T e +2848 G>A) foram identificados pela análise de sequenciamento. A frequência do genótipo genético TLR9 foi semelhante tanto em pacientes com LES quanto no grupo controle. Em toda a população de LES, foi encontrada associação entre a homozigose do alelo C na posição −1237 com psicose e anemia (p < 0,01). Da mesma forma, a homozigose do alelo G na posição +2848 foi associada a uma erupção cutânea discoide (p < 0,05). Não houve associação entre polimorfismos JA e TLR9. Esses dados mostram que os polimorfismos TLR9 não parecem ser um fator predisponível para o LES na população brasileira, e que os SNPs não estão associados ao JA.

Toll-like receptor 9 polymorphisms in brazilian patients with systemic lupus erythematosus: a pilot study / Polimorfismos do receptor toll-like 9 em pacientes brasileiros com lúpus eritematoso sistêmico: um estudo piloto

Toll-like receptor 9 (TLR9) is an important component of the innate immune system and have been associated with several autoimmune diseases, such as Systemic Lupus Erythematosus (SLE). The aim of this study was to investigate polymorphisms in TLR9 gene in a Brazilian SLE patients group and their association with clinical manifestation, particularly Jaccouds arthropathy (JA). We analyzed DNA samples from 204 SLE patients, having a subgroup of them presenting JA (n=24). A control group (n=133) from the same city was also included. TLR9 single nucleotide polymorphisms (SNPs) (−1237 C>T and +2848 G>A) were identified by sequencing analysis. The TLR9 gene genotype frequency was similar both in SLE patients and the control group. In the whole SLE population, an association between the homozygosis of allele C at position −1237 with psychosis and anemia (p < 0.01) was found. Likewise, the homozygosis of allele G at position +2848 was associated with a discoid rash (p < 0.05). There was no association between JA and TLR9 polymorphisms. These data show that TLR9 polymorphisms do not seem to be a predisposing factor for SLE in the Brazilian population, and that SNPs are not associated with JA.(AU)

O receptor Toll-like 9 (TLR9) é um componente importante do sistema imunológico inato e tem sido associado a várias doenças autoimunes, como o Lúpus Eritematoso Sistêmico (LES). O objetivo deste estudo foi investigar polimorfismos no gene TLR9 em um grupo de pacientes brasileiros com LES e sua associação com a manifestação clínica, particularmente a artropatia de Jaccoud (JA). Foram analisadas amostras de DNA de 204 pacientes com LES, e um subgrupo com JA (n=24). Um grupo de controle (n=133) da mesma cidade também foi incluído. Os polimorfismos de nucleotídeos únicos TLR9 (SNPs) (−1237 C>T e +2848 G>A) foram identificados pela análise de sequenciamento. A frequência do genótipo genético TLR9 foi semelhante tanto em pacientes com LES quanto no grupo controle. Em toda a população de LES, foi encontrada associação entre a homozigose do alelo C na posição −1237 com psicose e anemia (p < 0,01). Da mesma forma, a homozigose do alelo G na posição +2848 foi associada a uma erupção cutânea discoide (p < 0,05). Não houve associação entre polimorfismos JA e TLR9. Esses dados mostram que os polimorfismos TLR9 não parecem ser um fator predisponível para o LES na população brasileira, e que os SNPs não estão associados ao JA.(AU)

Análise microbiológica de fatiadores de frios como ferramenta para capacitação em boas práticas de higiene de equipamentos para manipuladores de alimentos / Microbiological analysis of deli slicer as a tool for training good hygiene practices in equipments for food handlers

O objetivo deste estudo foi avaliar a condição microbiológica de fatiadores de frios a fim de subsidiar ações educativas em boas práticas de higiene de equipamentos para manipuladores de alimentos. O estudo ocorreu nos setores de panificação de dois supermercados de Piraquara, Paraná, por meio da quantificação microbiológica de microrganismos aeróbios mesófilos (Contagem Padrão em Placas - CPP), coliformes totais e pesquisa de Listeria monocytogenes. Foram realizadas três coletas com intervalos de quinze dias e, antes da última, foi realizada uma ação educativa baseando-se na metodologia da problematização sobre higienização de equipamentos. Apesar de observada redução bacteriana, constatada por meio da CPP, os resultados mantiveram-seacima dos limites preconizados. Não houve detecção de coliformes totais e na pesquisa de Listeria monocytogenes. As análises microbiológicas foram importantes para a avaliação da higienização dos fatiadores, subsidiando práticas educativas eficazes na consolidação de aprendizado.

The objective of this study was to evaluate microbiological of slicers to support educative activities to food handlers on good hygienic practices for equipment. The study occurred in the bakery of two supermarkets in Piraquara, Paraná, through the microbiological couting of aerobic mesophilic microorganisms (Standard Plate Count - SPC), total coliforms and Listeria monocytogenes research. Three collections were made with a 15-day interval and, before the last one, a educative activity was made based in problematization methodology about equipment hygienization. Despite the reduction in bacterial counting, verified by the CPP, the results remained above the recommended limits. There was no detection of total coliforms and in the investigation of Listeria monocytogenes. The microbiological analyses were important for the evaluation of the hygiene of the slicers, supporting effective educational practices in the learning consolidation.

Análise microbiológica de fatiadores de frios como ferramenta para capacitação em boas práticas de higiene de equipamentos para manipuladores de alimentos / Microbiological analysis of deli slicer as a tool for training good hygiene practices in equipments for food handlers

O objetivo deste estudo foi avaliar a condição microbiológica de fatiadores de frios a fim de subsidiar ações educativas em boas práticas de higiene de equipamentos para manipuladores de alimentos. O estudo ocorreu nos setores de panificação de dois supermercados de Piraquara, Paraná, por meio da quantificação microbiológica de microrganismos aeróbios mesófilos (Contagem Padrão em Placas - CPP), coliformes totais e pesquisa de Listeria monocytogenes. Foram realizadas três coletas com intervalos de quinze dias e, antes da última, foi realizada uma ação educativa baseando-se na metodologia da problematização sobre higienização de equipamentos. Apesar de observada redução bacteriana, constatada por meio da CPP, os resultados mantiveram-seacima dos limites preconizados. Não houve detecção de coliformes totais e na pesquisa de Listeria monocytogenes. As análises microbiológicas foram importantes para a avaliação da higienização dos fatiadores, subsidiando práticas educativas eficazes na consolidação de aprendizado.(AU)

The objective of this study was to evaluate microbiological of slicers to support educative activities to food handlers on good hygienic practices for equipment. The study occurred in the bakery of two supermarkets in Piraquara, Paraná, through the microbiological couting of aerobic mesophilic microorganisms (Standard Plate Count - SPC), total coliforms and Listeria monocytogenes research. Three collections were made with a 15-day interval and, before the last one, a educative activity was made based in problematization methodology about equipment hygienization. Despite the reduction in bacterial counting, verified by the CPP, the results remained above the recommended limits. There was no detection of total coliforms and in the investigation of Listeria monocytogenes. The microbiological analyses were important for the evaluation of the hygiene of the slicers, supporting effective educational practices in the learning consolidation.(AU)

Melittin-induced metabolic changes on the Madin-Darby Bovine Kidney cell line / [Mudanças metabólicas induzidas por melitina em células da linhagem Madin-Darby Bovine Kidney]

In this study, the toxic effects of melittin on Madin-Darby Bovine Kidney cells (MDBK) were analyzed with respect to mitochondrial functionality by reduction of MTT and flow cytometry, apoptosis potential, necrosis, oxygen reactive species (ROS) production, lipid peroxidation, and DNA fragmentation using flow cytometry and cell membrane destabilization by confocal microscopy. The toxicity presented dose-dependent characteristics and mitochondrial activity was inhibited by up to 78.24 ±3.59% (P<0.01, n = 6) in MDBK cells exposed to melittin (10µg/mL). Flow cytometry analysis revealed that melittin at 2µg/mL had the highest necrosis rate (P<0.05) for the cells. The lipoperoxidation of the membranes was also higher at 2µg/mL of melittin (P<0.05), which was further confirmed by the microphotographs obtained by confocal microscopy. The highest ROS production occurred when the cells were exposed to 2.5µg/mL melittin (P<0.05), and this concentration also increased DNA fragmentation (P<0.05). There was a significative and positive correlation between the lipoperoxidation of membranes with ROS (R=0.4158), mitochondrial functionality (R=0.4149), and apoptosis (R=0.4978). Thus, the oxidative stress generated by melittin culminates in the elevation of intracellular ROS that initiates a cascade of toxic events in MDBK cells.(AU)

Neste estudo, os efeitos tóxicos da melitina em células Madin-Darby Bovine Kidney (MDBK) foram analisados quanto à funcionalidade mitocondrial, por redução de MTT e citometria de fluxo, potencial de apoptose, necrose, produção de espécies reativas de oxigênio (ROS), peroxidação lipídica e fragmentação de DNA, utilizando-se citometria de fluxo e desestabilização da membrana celular, por microscopia confocal. A toxicidade apresentou características dose-dependentes e a atividade mitocondrial foi inibida até 78,24±3,59% (P<0,01, n = 6) em células MDBK expostas à melitina (10µg/mL). Análises por citometria de fluxo revelaram que a melitina a 2µg/mL apresentou o maior índice necrótico celular (P<0,05). A maior lipoperoxidação de membranas também foi na concentração de 2µg/mL de melitina (P<0,05), o que foi posteriormente confirmado por microscopia confocal. A maior produção de ROS aconteceu quando as células foram expostas a 2,5µg/mL de melitina (P<0,05), e essa concentração também aumentou a fragmentação de DNA (P<0,05). Houve uma significativa correlação positiva entre a lipoperoxidação de membranas e a produção de ROS (R=0,4158), funcionalidade mitocondrial (R=0,4149) e apoptose (R=0,4978). Portanto, o estresse oxidativo gerado pela melitina culminou na elevação de ROS intracelular, que inicia uma cascata de eventos tóxicos nas células MDBK.(AU)

Evaluation of the immunomodulatory activity of thalidomide on tumor-associated macrophages in the 4T1 murine metastatic breast cancer model / [Avaliação do efeito imunomodulador da talidomida em macrófagos associados a tumores no modelo murino de câncer de mama metastático 4T1]

The present work evaluated the immunomodulatory effect of thalidomide (Thal) at different doses on tumor-associated macrophages (TAMs) using a mouse model of human breast cancer. Mice were inoculated with 4T1 cells in the left flank and treated with Thal once a day at concentrations of 50, 100, and 150mg/kg body weight from the 5th day until the 28th day of tumor inoculation. The tumors were sized, proliferation index and TAMs count were evaluated in primary tumors and metastatic lungs. In addition, the metastasis rate was evaluated in the lungs. Thal at 150mg/kg significantly decreased tumor growth, proliferation index, and TAMs infiltration in primary tumors. Conversely, a higher number of TAMs and lower proliferation index were observed in metastatic lungs in mice treated with 150mg/kg of Thal. Furthermore, Thal at 150mg/kg significantly decreased the metastatic nodules in the lungs. Our findings demonstrated that Thal treatment considerably decreased the primary tumor and lung metastasis in mice associated with different TAM infiltration effects in these sites.(AU)

No presente trabalho, foi avaliado o efeito imunomodulador de diferentes doses de talidomida em macrófagos associados ao tumor (TAMs), em um modelo murino de câncer de mama. Camundongos foram inoculados com células 4T1, na região do flanco esquerdo, e tratados com talidomida, uma vez ao dia, nas doses de 50, 100 e 150mg/k, por massa corporal, do quinto dia ao 28º dia de inoculação tumoral. Os tumores foram medidos, o índice de proliferação celular e a contagem de TAMs foram avaliados nos tumores primários e nos pulmões com metástases. Além disso, a taxa de metástases pulmonares também foi avaliada. A talidomida na dose de 150mg/kg diminuiu significativamente o crescimento tumoral, o índice de proliferação celular e a infiltração de TAMs nos tumores primários. Por outro lado, maior número de TAMs e menor índice de proliferação celular foram observados nos pulmões metastáticos, em camundongos tratados com 150mg/kg de talidomida. Ademais, a talidomida na dose de 150mg/kg diminuiu significativamente os nódulos metastáticos nos pulmões. Os resultados demonstraram que o tratamento com talidomida diminuiu o crescimento tumoral e as metástases pulmonares em camundongos, associado com diferentes efeitos na infiltração de TAMs nesses locais.(AU)

interferência do hematócrito sobre o desempenho de dois glicosímetros veterinários em cães / interference of haematocrit in the performance of two veterinary glucometers in dogs

Os glicosímetros (GT) são uma ferramenta muito utilizada no monitoramento da glicemia em cães e o hematócrito (HT) é um dos fatores que pode alterar sua acurácia, possivelmente devido a modificação da viscosidade do sangue, ao impedimento da reação com o plasma na superfície da tira, à alteração da cinética de difusão e/ou da modificação do volume plasmático, resultando em volume insuficiente de plasma para o teste dos GT. Este estudo avaliou o efeito do HT sobre o desempenho de dois GT veterinários para uso em cães em comparação a dois métodos laboratoriais de referência: glicose hexoquinase (Hx) e glicose oxidase (GOx). Ambos os GT apresentaram boa performance em amostras com HT inferior à 37%: GT1 r=0,90 com MLab Hx e r=0,94para GOx. Por sua vez, GT2 apresentou r=0,84 tanto para Hx quanto para GOx. Entretanto, apenas GT1 demonstrou desempenho adequado em amostras com HT (entre 37% e 55% (r=0,90 para Hx) e nenhum GT ofereceu atuação apropriada em amostras com HT superior à 55%. Conclui-se que o resultado apresentado por ambos GT altera de acordo com o hematócrito do animal. Deve-se considerar que pacientes com disglicemias estão frequentemente expostos às alterações clínico-patológicas, e a adoção destes GT específicos como estratégia de monitoramento pode não ser adequada, por isso a importância de outros procedimentos de medição da glicose serem empregados.

Glucometers (GT) are widely used as tools for monitoring blood glucose in dogs and hematocrit (HT) is one of the factors that can change its accuracy, possibly due to the change in blood viscosity, preventing the reaction with plasma on the surface of the strip, alteration of the diffusion kinetics and / or modification of the plasma volume, resulting in insufficient plasma volume for the GT test. This study evaluated the effect of HT on the performance of two veterinary GT for use in dogs compared to two reference laboratory methods (MLab): glucose hexokinase (Hx) and glucose oxidase (GOx). Both GT showed good performance in samples with HT below 37%: GT1 r = 0.90 with MLab Hx and r = 0.94 for GOx. In turn, GT2 presented r = 0.84 for both Hx and GOx. However, only GT1 demonstrated adequate performance in samples with HT between 37% and 55% (r = 0.90 for Hx) and no GT offered adequate performance in samples with HT greater than 55%. It can be concluded that the result presented by both GT changes according to the animal's hematocrit. It should be considered that patients with dysglycemias are frequently exposed to clinical-pathological changes, and the adoption of these specific GT as a monitoring strategy may not be adequate, so the importance of other procedures glucose measurement devices are employed.

interferência do hematócrito sobre o desempenho de dois glicosímetros veterinários em cães / interference of haematocrit in the performance of two veterinary glucometers in dogs

Os glicosímetros (GT) são uma ferramenta muito utilizada no monitoramento da glicemia em cães e o hematócrito (HT) é um dos fatores que pode alterar sua acurácia, possivelmente devido a modificação da viscosidade do sangue, ao impedimento da reação com o plasma na superfície da tira, à alteração da cinética de difusão e/ou da modificação do volume plasmático, resultando em volume insuficiente de plasma para o teste dos GT. Este estudo avaliou o efeito do HT sobre o desempenho de dois GT veterinários para uso em cães em comparação a dois métodos laboratoriais de referência: glicose hexoquinase (Hx) e glicose oxidase (GOx). Ambos os GT apresentaram boa performance em amostras com HT inferior à 37%: GT1 r=0,90 com MLab Hx e r=0,94para GOx. Por sua vez, GT2 apresentou r=0,84 tanto para Hx quanto para GOx. Entretanto, apenas GT1 demonstrou desempenho adequado em amostras com HT (entre 37% e 55% (r=0,90 para Hx) e nenhum GT ofereceu atuação apropriada em amostras com HT superior à 55%. Conclui-se que o resultado apresentado por ambos GT altera de acordo com o hematócrito do animal. Deve-se considerar que pacientes com disglicemias estão frequentemente expostos às alterações clínico-patológicas, e a adoção destes GT específicos como estratégia de monitoramento pode não ser adequada, por isso a importância de outros procedimentos de medição da glicose serem empregados.(AU)

Glucometers (GT) are widely used as tools for monitoring blood glucose in dogs and hematocrit (HT) is one of the factors that can change its accuracy, possibly due to the change in blood viscosity, preventing the reaction with plasma on the surface of the strip, alteration of the diffusion kinetics and / or modification of the plasma volume, resulting in insufficient plasma volume for the GT test. This study evaluated the effect of HT on the performance of two veterinary GT for use in dogs compared to two reference laboratory methods (MLab): glucose hexokinase (Hx) and glucose oxidase (GOx). Both GT showed good performance in samples with HT below 37%: GT1 r = 0.90 with MLab Hx and r = 0.94 for GOx. In turn, GT2 presented r = 0.84 for both Hx and GOx. However, only GT1 demonstrated adequate performance in samples with HT between 37% and 55% (r = 0.90 for Hx) and no GT offered adequate performance in samples with HT greater than 55%. It can be concluded that the result presented by both GT changes according to the animal's hematocrit. It should be considered that patients with dysglycemias are frequently exposed to clinical-pathological changes, and the adoption of these specific GT as a monitoring strategy may not be adequate, so the importance of other procedures glucose measurement devices are employed.(AU)

The occurrence of diseases and their relationship with passive immune transfer in Holstein dairy calves submitted to individual management in southern Brazil / Ocorrência de doenças e sua relação com a transferência de imunidade passiva em bezerras Holandês criadas em sistema individual no sul do Brasil

Calves are extremely dependent on colostrum intake for the acquisition of passive immunity. This study aimed to determine the occurrence of diarrhea and respiratory diseases and the impact of Failure of Passive Immune Transfer (FPIT) on the health and zootechnical performance of Holstein dairy calves in individual management. This study has been carried out in five commercial farms in Rio Grande do Sul State, Brazil, from March 2017 to January 2018. In this study, 131 calves were followed from birth to 60 days of age. Total Plasmatic Protein (TPP) has been performed to determine passive immune transfer quality in 53 calves (53/131). A daily clinical follow-up has been accomplished aiming at diagnosing diseases and their incidences, and zootechnical measures such as withers height, width of the croup and weight have been evaluated. FPIT rate was 32.07%, diarrhea occurrence and respiratory diseases were 77.9% and 49.6%, respectively. FPIT increased the chances of calves presenting diarrhea and developing respiratory diseases, but no differences on zootechnical performance were found. The frequency of FPIT is still high and is a factor that corroborated the increased risk for diarrhea and respiratory disease but did not influence the performance of calves in the preweaning phase.(AU)

Bezerras são extremamente dependentes da ingestão de colostro para adquirir imunidade passiva. Este estudo teve o objetivo de determinar os índices de ocorrência de diarreia e de doença respiratória, assim como o impacto da falha na transferência de imunidade passiva (FTIP) no desenvolvimento de doenças e no desempenho zootécnico de bezerras Holandês criadas em sistema individual. O estudo foi desenvolvido em cinco propriedades comerciais no Rio Grande do Sul, Brasil, entre março de 2017 e janeiro de 2018. Assim, 131 bezerras foram acompanhadas, do nascimento aos 60 dias de idade. Em 53 animais, foi realizada avaliação de proteínas plasmáticas totais para determinar a qualidade na transferência de imunidade passiva. Acompanhamento clínico diário foi realizado, a fim de diagnosticar doenças e suas incidências, assim como avaliações zootécnicas, como altura de cernelha, largura de garupa, perímetro torácico e peso. O percentual de FTIP foi 32,07%, a ocorrência de diarreias e de doenças respiratórias foi, respectivamente, 77,9% e 49,6%. A FTIP aumentou as chances de as bezerras apresentarem diarreia e doenças respiratórias, mas não alterou o desempenho zootécnico. Conclui-se que a frequência na FTIP ainda é elevada, fator que corroborou o aumento do risco para as diarreias e doença respiratória. Apesar disso, a FTIP não influenciou no desenvolvimento das bezerras na fase de aleitamento.(AU)

Apamin-induced alterations in J774 1. 6 macrophage metabolism / [Alterações induzidas por apamina no metabolismo de macrófagos J774 1. 6]

Among the immune system cells, macrophages have an important role. Apamin, a bee venom constituent, is important in the defense of these insects. Thus, we aimed to evaluate the metabolism of J774 1.6 macrophage cell line when exposed to isolated and purified apamin, using cytotoxicity tests by MTT reduction and analysis by flow cytometry (apoptosis / necrosis, production of reactive oxygen species (ROS), membranous lipoperoxidation (LPO), electrical potential of the mitochondrial membrane (mMP) and DNA fragmentation). None of the tested concentrations (10 to 100µg/mL) were cytotoxic according to MTT reductions. Apoptosis rates decreased at concentrations of 2.5, 5.0, and 10.0µg/mL (P<0.05), while necrosis rates increased (P<0.05). However, rates of healthy cells at the highest tested concentration (10µg/mL) did not differ from control (P>0.05). Apamin did not alter ROS, LPO, or DNA fragmentation. Therefore, all analyzed concentrations (1.25 to 10µg/mL) decreased mMP. Such decrease in apoptosis might be due to a suppression of mitochondrial pro-apoptotic messengers, as this peptide causes no oxidative stress, lipid peroxidation, and DNA damage. Highly sensitive techniques are majorly important for proper interpretation of cellular toxicity mechanisms, combined with routine laboratory methods.(AU)

Das células do sistema imunológico, macrófagos desempenham um papel fundamental. Apamina, constituinte do veneno de abelhas, é importante na defesa destas. Objetivou-se avaliar o metabolismo da linhagem de macrófagos J774 1.6 expostos à apamina isolada e purificada, avaliando-se citotoxicidade por redução de MTT e análise por citometria de fluxo (apoptose / necrose, produção de espécies reativas de oxigênio (EROs), lipoperoxidação membranosa (LPO), potencial elétrico da membrana mitocondrial (MMP) e fragmentação do DNA). Nenhuma concentração testada (10 a 100µg / mL) foi citotóxica. As taxas de apoptose diminuíram nas concentrações 2,5, 5,0 e 10,0µg / mL (P<0,05), enquanto as de necrose aumentaram (P<0,05). Entretanto, as taxas de células saudáveis na maior concentração testada (10µg / mL) não diferiram do controle (P>0,05). A apamina não alterou as ERO, a LPO nem a fragmentação do DNA. Portanto, todas as concentrações analisadas (1,25 a 10µg / mL) diminuíram a mMP. Tal diminuição na apoptose pode ser por uma supressão de mensageiros pró-apoptóticos mitocondriais, já que este peptídeo não causa estresse oxidativo, peroxidação lipídica nem dano ao DNA. Técnicas altamente sensíveis são importantes para adequada interpretação dos mecanismos de citotoxicidade.(AU)

The occurrence of diseases and their relationship with passive immune transfer in Holstein dairy calves submitted to individual management in southern Brazil / Ocorrência de doenças e sua relação com a transferência de imunidade passiva em bezerras Holandês criadas em sistema individual no sul do Brasil

Calves are extremely dependent on colostrum intake for the acquisition of passive immunity. This study aimed to determine the occurrence of diarrhea and respiratory diseases and the impact of Failure of Passive Immune Transfer (FPIT) on the health and zootechnical performance of Holstein dairy calves in individual management. This study has been carried out in five commercial farms in Rio Grande do Sul State, Brazil, from March 2017 to January 2018. In this study, 131 calves were followed from birth to 60 days of age. Total Plasmatic Protein (TPP) has been performed to determine passive immune transfer quality in 53 calves (53/131). A daily clinical follow-up has been accomplished aiming at diagnosing diseases and their incidences, and zootechnical measures such as withers height, width of the croup and weight have been evaluated. FPIT rate was 32.07%, diarrhea occurrence and respiratory diseases were 77.9% and 49.6%, respectively. FPIT increased the chances of calves presenting diarrhea and developing respiratory diseases, but no differences on zootechnical performance were found. The frequency of FPIT is still high and is a factor that corroborated the increased risk for diarrhea and respiratory disease but did not influence the performance of calves in the preweaning phase.(AU)

Bezerras são extremamente dependentes da ingestão de colostro para adquirir imunidade passiva. Este estudo teve o objetivo de determinar os índices de ocorrência de diarreia e de doença respiratória, assim como o impacto da falha na transferência de imunidade passiva (FTIP) no desenvolvimento de doenças e no desempenho zootécnico de bezerras Holandês criadas em sistema individual. O estudo foi desenvolvido em cinco propriedades comerciais no Rio Grande do Sul, Brasil, entre março de 2017 e janeiro de 2018. Assim, 131 bezerras foram acompanhadas, do nascimento aos 60 dias de idade. Em 53 animais, foi realizada avaliação de proteínas plasmáticas totais para determinar a qualidade na transferência de imunidade passiva. Acompanhamento clínico diário foi realizado, a fim de diagnosticar doenças e suas incidências, assim como avaliações zootécnicas, como altura de cernelha, largura de garupa, perímetro torácico e peso. O percentual de FTIP foi 32,07%, a ocorrência de diarreias e de doenças respiratórias foi, respectivamente, 77,9% e 49,6%. A FTIP aumentou as chances de as bezerras apresentarem diarreia e doenças respiratórias, mas não alterou o desempenho zootécnico. Conclui-se que a frequência na FTIP ainda é elevada, fator que corroborou o aumento do risco para as diarreias e doença respiratória. Apesar disso, a FTIP não influenciou no desenvolvimento das bezerras na fase de aleitamento.(AU)

Efeito da suplementação de suínos em terminação com diferentes associações entre minerais sobre o desempenho, as características de carcaça e a viabilidade econômica / Effect of supplementation of finishing swines with different associations between minerals on performance, carcass characteristics and economic viability

Objetivou-se, com este estudo, verificar a influência da suplementação com diferentes associações entre minerais orgânicos sobre o desempenho e as características de carcaça, bem como avaliar sua viabilidade econômica, para suínos em terminação. Foram utilizados 88 machos castrados, divididos entre quatro tratamentos: controle com dieta basal e suplementação com CrFe, MgSe e CrFeMgSe, durante os 28 dias que antecederam o abate. O delineamento experimental foi em blocos ao acaso, com parcela experimental representada por dois animais. Os animais suplementados com CrFeMgSe apresentaram piores índices de peso final, ganho de peso diário e consumo durante todo o período, com consequente redução no peso de carcaça, menor profundidade de lombo, área de olho-de-lombo e menor quantidade de carne magra na carcaça. Houve um aumento no custo da dieta para os grupos CrFe, MgSe e CrFeMgSe, respectivamente. O uso de cromo mais ferro e magnésio mais selênio, associados dois a dois, não altera os parâmetros de desempenho e as características de carcaça. A associação dos quatro minerais, no entanto, promove piora nessas características e aumenta o custo da dieta.(AU)

This study aimed to verify the influence of supplementation with different associations between organic minerals on performance, carcass characteristics and economic viability for finishing swine. 88 castrated males were divided in four treatments: control with basal diet and supplementation with CrFe, MgSe and CrFeMgSe during the 28 days prior to slaughter. The experimental design was randomized blocks with an experimental plot represented by two animals. The animals supplemented with CrFeMgSe had worse final weight, daily weight gain and consumption throughout the period, with consequent reduction in carcass weight, lower loin depth, loin eye area and amount of lean meat. There was an increase in the effective operational cost of diet with CrFe, MgSe and CrFeMgSe groups, respectively. The use of chromium plus iron and magnesium plus selenium, associated two by two, did not alter the performance parameters and carcass. However, the four minerals association promote a worsening in these characteristics and increase the cost of production.(AU)

Biomass components and structure of massai grass fertilized with nitrogen and grazed by sheep / Componentes da biomassa e estrutura do capim-massai adubado com nitrogênio e pastejado por ovinos

To evaluate the biomass components of massai grass subjected to nitrogen (N) fertilization levels (control - 0; 400; 800 and 1200 kg ha-1 year-1 of N) and under rotational stocking with sheep, this study was undertaken using a completely randomized design with measurements repeated in time. A quadratic response was observed reaching maximum values as the levels of nitrogen fertilization increased for green forage biomass, green leaf biomass, green stem biomass (5,172.9; 4,146.3; 1,033.9 kg ha-1 cycle-1, respectively), forage total density (179.1 kg ha-1 cm-1), canopy height (36.8 cm) and live material/dead material ratio (4.0) at levels 896; 934; 797; 879.2; 751.4 and 1,161 kg ha-1 year-1 of N, respectively. For all variables, oscillation was observed between the grazing cycles studied. Nitrogen fertilization has a positive response on the biomass components and canopy structure of massai grass.(AU)

Objetivou-se avaliar os componentes da biomassa do capim-massai sob lotação rotativa com ovinos e adubado com doses de nitrogênio (controle - 0; 400; 800 e 1200 kg de N ha -1 ano -1 ), em delineamento inteiramente ao acaso, com medidas repetidas no tempo. Constatou-se resposta quadrática, alcançando valores máximos com o incremento das doses de nitrogênio para as produções de biomassa de forragem verde, de lâmina foliar verde, de colmo verde (5172,9; 4146,3; 1033,9 kg ha -1 ciclo -1 , respectivamente) e para a densidade total de forragem (179,1 kg ha -1 cm -1 ), altura do dossel (36,8 cm) e relação material vivo/material morto (4,0) nas doses 896; 934; 797; 879,2; 751,4 e 1161 kg ha -1 ano -1 de N, respectivamente. Para todas as variáveis, verificou-se oscilação entre os ciclos de pastejo estudados. A adubação nitrogenada exerce respostas positivas sobre os componentes da biomassa e a estrutura do dossel do capim-massai.(AU)

Efeito da suplementação de suínos em terminação com diferentes associações entre minerais sobre o desempenho, as características de carcaça e a viabilidade econômica / Effect of supplementation of finishing swines with different associations between minerals on performance, carcass characteristics and economic viability

Objetivou-se, com este estudo, verificar a influência da suplementação com diferentes associações entre minerais orgânicos sobre o desempenho e as características de carcaça, bem como avaliar sua viabilidade econômica, para suínos em terminação. Foram utilizados 88 machos castrados, divididos entre quatro tratamentos: controle com dieta basal e suplementação com CrFe, MgSe e CrFeMgSe, durante os 28 dias que antecederam o abate. O delineamento experimental foi em blocos ao acaso, com parcela experimental representada por dois animais. Os animais suplementados com CrFeMgSe apresentaram piores índices de peso final, ganho de peso diário e consumo durante todo o período, com consequente redução no peso de carcaça, menor profundidade de lombo, área de olho-de-lombo e menor quantidade de carne magra na carcaça. Houve um aumento no custo da dieta para os grupos CrFe, MgSe e CrFeMgSe, respectivamente. O uso de cromo mais ferro e magnésio mais selênio, associados dois a dois, não altera os parâmetros de desempenho e as características de carcaça. A associação dos quatro minerais, no entanto, promove piora nessas características e aumenta o custo da dieta.(AU)

This study aimed to verify the influence of supplementation with different associations between organic minerals on performance, carcass characteristics and economic viability for finishing swine. 88 castrated males were divided in four treatments: control with basal diet and supplementation with CrFe, MgSe and CrFeMgSe during the 28 days prior to slaughter. The experimental design was randomized blocks with an experimental plot represented by two animals. The animals supplemented with CrFeMgSe had worse final weight, daily weight gain and consumption throughout the period, with consequent reduction in carcass weight, lower loin depth, loin eye area and amount of lean meat. There was an increase in the effective operational cost of diet with CrFe, MgSe and CrFeMgSe groups, respectively. The use of chromium plus iron and magnesium plus selenium, associated two by two, did not alter the performance parameters and carcass. However, the four minerals association promote a worsening in these characteristics and increase the cost of production.(AU)

Biomass components and structure of massai grass fertilized with nitrogen and grazed by sheep / Componentes da biomassa e estrutura do capim-massai adubado com nitrogênio e pastejado por ovinos

To evaluate the biomass components of massai grass subjected to nitrogen (N) fertilization levels (control - 0; 400; 800 and 1200 kg ha-1 year-1 of N) and under rotational stocking with sheep, this study was undertaken using a completely randomized design with measurements repeated in time. A quadratic response was observed reaching maximum values as the levels of nitrogen fertilization increased for green forage biomass, green leaf biomass, green stem biomass (5,172.9; 4,146.3; 1,033.9 kg ha-1 cycle-1, respectively), forage total density (179.1 kg ha-1 cm-1), canopy height (36.8 cm) and live material/dead material ratio (4.0) at levels 896; 934; 797; 879.2; 751.4 and 1,161 kg ha-1 year-1 of N, respectively. For all variables, oscillation was observed between the grazing cycles studied. Nitrogen fertilization has a positive response on the biomass components and canopy structure of massai grass.(AU)

Objetivou-se avaliar os componentes da biomassa do capim-massai sob lotação rotativa com ovinos e adubado com doses de nitrogênio (controle - 0; 400; 800 e 1200 kg de N ha -1 ano -1 ), em delineamento inteiramente ao acaso, com medidas repetidas no tempo. Constatou-se resposta quadrática, alcançando valores máximos com o incremento das doses de nitrogênio para as produções de biomassa de forragem verde, de lâmina foliar verde, de colmo verde (5172,9; 4146,3; 1033,9 kg ha -1 ciclo -1 , respectivamente) e para a densidade total de forragem (179,1 kg ha -1 cm -1 ), altura do dossel (36,8 cm) e relação material vivo/material morto (4,0) nas doses 896; 934; 797; 879,2; 751,4 e 1161 kg ha -1 ano -1 de N, respectivamente. Para todas as variáveis, verificou-se oscilação entre os ciclos de pastejo estudados. A adubação nitrogenada exerce respostas positivas sobre os componentes da biomassa e a estrutura do dossel do capim-massai.(AU)

Evaluation of the presence of Leishmania infantum in bone stored in glycerol or sterilized by autoclave for cortical bone grafting / Avaliação da presença de Leishmania infantum em ossos armazenados em glycerol ou esterilizados em autoclave para enxertia óssea cortical

This study was performed to evaluate the effects of autoclaving and storage in 85% glycerol on cortical bone from dogs infected with Leishmania sp. We used 42 cadavers with leishmaniasis. The dogs were evaluated for the presence of Leishmania sp. in culture of bone marrow and by culturing cortical bone. From the infected animals, we harvested 42 diaphysis of the right femur for culture of cortical bone before and after autoclaving or storage in glycerol. There was no significant difference in growth of the parasite in culture of bone marrow or cortical bone. There was no growth of Leishmania sp. in culture of samples after autoclaving or storage in glycerol. Both treatments were effective in preventing the growth of the parasite in vitro, so it was considered viable for grafting.(AU)

Este estudo teve por objetivo avaliar os efeitos da esterilização em autoclave e do armazenamento em glicerol a 85% no osso cortical de cães infectados por Leishmania sp. Foram utilizados 42 cadáveres de cães com leishmaniose. Os cães foram avaliados para a presença de Leishmania sp. em cultura de medula óssea e de osso cortical. Foram coletadas 42 diáfises do fêmur direito para cultura do osso cortical antes e após a esterilização e o armazenamento em glicerol. Não houve diferença significativa no crescimento do parasito em cultura utilizando-se medula óssea ou osso cortical. Não houve crescimento de Leishmania sp. em cultura de amostras de osso cortical após a autoclavagem ou o armazenamento em glicerol. Ambos os tratamentos foram eficazes na prevenção do crescimento do parasita in vitro, de modo que foram considerados viáveis para enxerto.(AU)

Evaluation of the presence of Leishmania infantum in bone stored in glycerol or sterilized by autoclave for cortical bone grafting / Avaliação da presença de Leishmania infantum em ossos armazenados em glycerol ou esterilizados em autoclave para enxertia óssea cortical

This study was performed to evaluate the effects of autoclaving and storage in 85% glycerol on cortical bone from dogs infected with Leishmania sp. We used 42 cadavers with leishmaniasis. The dogs were evaluated for the presence of Leishmania sp. in culture of bone marrow and by culturing cortical bone. From the infected animals, we harvested 42 diaphysis of the right femur for culture of cortical bone before and after autoclaving or storage in glycerol. There was no significant difference in growth of the parasite in culture of bone marrow or cortical bone. There was no growth of Leishmania sp. in culture of samples after autoclaving or storage in glycerol. Both treatments were effective in preventing the growth of the parasite in vitro, so it was considered viable for grafting.(AU)

Este estudo teve por objetivo avaliar os efeitos da esterilização em autoclave e do armazenamento em glicerol a 85% no osso cortical de cães infectados por Leishmania sp. Foram utilizados 42 cadáveres de cães com leishmaniose. Os cães foram avaliados para a presença de Leishmania sp. em cultura de medula óssea e de osso cortical. Foram coletadas 42 diáfises do fêmur direito para cultura do osso cortical antes e após a esterilização e o armazenamento em glicerol. Não houve diferença significativa no crescimento do parasito em cultura utilizando-se medula óssea ou osso cortical. Não houve crescimento de Leishmania sp. em cultura de amostras de osso cortical após a autoclavagem ou o armazenamento em glicerol. Ambos os tratamentos foram eficazes na prevenção do crescimento do parasita in vitro, de modo que foram considerados viáveis para enxerto.(AU)

Effect of watershed land use on water quality: a case study in Córrego da Olaria Basin, São Paulo State, Brazil

Abstract The water quality is related to the hydrologic and limnologic properties of ground and surface water, and significant efforts have been made to monitor water sources to understand the effects of land use changes in agricultural areas, with significant socioeconomic activities. The objective of this study was to evaluate the qualitative aspects of surface water in subbasins related to land use. Samples were analyzed in terms of physical and chemical parameters on monthly discrete water quality sampling in four representative sites at first order subbasin streams, located at the Polo Regional Centro Norte, Pindorama County, State of São Paulo, Brazil. The land use classification was made by visual detection technique in a multispectral satellite data obtained from LandSat8- spectral bands of the OLI sensor. The watershed was classified into major land cover/use classes and overlay maps generated in ArcGIS 10 indicated a significant shift from natural vegetation to agriculture activities. Water quality monitoring was according to the brazilian protocol and the results were submitted to analysis of variance (ANOVA). The values obtained differ significantly at each sampling point - subbasins, reflecting the effects of land use on water quality. Soil conservation management is important to optimize soil use in order to contribute to the control of water pollution and the formulation of a public policy is necessary for the conservation of water and soil resources.

Resumo A qualidade da água está relacionada com as propriedades hidrológicas e limnológicas das águas subterrâneas e superficiais, e esforços significativos devem ser realizados para monitorar as nascentes no intuito de compreender os efeitos das mudanças no uso da terra em áreas agrícolas, com atividades socioeconômicas significativas. O objetivo deste estudo foi avaliar os aspectos qualitativos das águas superficiais de bacias hidrográficas e correlacionar com o uso do solo. As amostras foram analisadas em termos dos parâmetros físicos e químicos na amostragem mensal discreta da qualidade da água, em quatro locais representativos de nascentes em microbacias de primeira ordem, localizadas no Polo Regional Centro Norte, Pindorama, Estado de São Paulo, Brasil. A classificação do uso do solo foi feita por técnica de detecção visual em uma imagem multiespectral de satélite LandSat8- bandas espectrais, sensor OLI. O uso do solo foi classificado nas principais classes de uso e os mapas de sobreposição gerados no ArcGIS 10 indicaram uma mudança significativa da vegetação natural para as atividades agrícolas. O monitoramento da qualidade da água foi realizado de acordo com o protocolo brasileiro e os resultados foram submetidos à análise de variância (ANOVA). Os valores obtidos diferem significativamente em cada ponto de amostragem, refletindo os efeitos do uso do solo sobre a qualidade da água. A gestão do solo e da água é importante para aperfeiçoar as práticas agrícolas, no intuito de contribuir para o controle da poluição da água e para a formulação de uma política pública necessária para a conservação dos recursos hídricos e do solo.