Resumo

A fisiologia reprodutiva da espécie canina e a resposta insatisfatória do sêmen do cão à técnica da congelação são os dois maiores empecilhos aos esforços para o avanço da inseminação artificial em cães. Inúmeras pesquisas estão sendo desenvolvidas nessa área, gerando muitas informações, sobretudo na tecnologia de sêmen. O objetivo desse texto é discutir os principais avanços na avaliação e congelação de sêmen e sua influencia nos resultados de inseminação artificial.

The canine reproductive physiology and unsatisfactory results on techniques of frozen dog semen has been the biggest barrier on the improvement of artificial insemination in dogs. Many researches are been done in this area generating a lot of information, especially on semen technology. The aim of this text is to discuss the major advances on semen evaluation and semen frozen and its influence on artificial insemination results.

Resumo

The canine species has been used as an experimental model for preservation of endangered species. Biotechnologies of reproduction, such as in vitro maturation (IVM), have been used to meet this objective. Several protocols for in vitro embryo production (IVEP) in swine and bovine species have been adapted for canids. Ho wever, the highest rate reported for in vitro maturation in canids is only 39%, which is still lower than those in other species. Therefore, current research on assisted reproduction in canids have focused on several IVM protocols, including the addition of proteins, hormones, meiosis inhibitors, growth factors and antioxidants to the maturation media and the determination of suitable timing for culture, so that variables involved in the process can be fine-tuned. This review has the main objective of describing major developments and limitations in the process of oocyte maturation in bitches.

Resumo

Analisou-se a piometra de 31 cadelas, de raças e idades variadas, sendo 25 cadelas com piometra de cérvice aberta e seis de cérvice fechada. Após ovariossalpingo-histerectomia, foram coletados fragmentos da cérvice e do útero para a avaliação imunoistoquímica. Foram analisados os receptores de estrógenos α e β, progesterona e colágenos I e III. Foram realizadas imunomarcações em diferentes regiões da cérvice, como o epitélio glandular, o epitélio luminal e o estroma glandular, assim como em diferentes regiões do útero, como o epitélio glandular e o estroma glandular. As imunomarcações de colágenos I e III foram realizadas nas regiões glandular e muscular da cérvice e do útero. Concentrações de receptores de progesterona foram maiores em cadelas com piometra fechada.

The pyometra in 31 bitches of different breeds and ages, 25 with pyometra cervix open and 6 closed cervix was analyzed. After the ovariohysterectomy procedure, samples were collected from the cervix and uterus to evaluate immunohistochemistry. For immunohistochemical evaluation estrogen receptors α and β, progesterone and collagen I and III were analyzed. Immunostainings were performed in different regions of the cervix such as glandular epithelium, luminal epithelium and glandular stroma, as well as in different regions of the uterus, such as glandular epithelium and glandular stroma. The immunostainings for collagen I and III were performed in muscular and glandular regions of the cervix and uterus. The concentration the progesterone receptors were elevated in bitches from the closed pyometra.

Resumo

We investigated estradiol benzoate effects on oocytes/embryos recovery rate and the influence of this drug on the hematopoietic system. Twenty four bitches were divided in two groups, Group I, 12 females that received a single shot of estradiol benzoate, 0.2 mg/kg intramuscularly, between 2 and 7 days after the date of the last mismating or insemination and, Group II (control), 12 bitches that received 0.2 ml/kg of oily diluent, in corresponding dates. The bitches were ovary-hysterectomized and the uterus/oviduct were isolated and flushed with a PBS, heparin and polyvinyl alcohol solution. Oocytes and embryos were quantified and classified according to their stage of development. Blood counts were performed on M1 (before drug administration), M2 (15 days after drug administration) and M3 (40 days after drug administration). Pearson correlation coefficient was used to analyze the variable retrieval structures, while Fisher exact test was used for the analysis of embryonic viability. ANOVA was used to analyze repeated measurements and Tukey test for hematological parameters. All tests were performed at 5% significance level. The recovery rate of total structures in group I was lower (22.88%) than group II (65.85%). A lower embryo recovery (ratio 3: 52) rate and a greater number of degenerated structures (ratio 11: 1) were observed in group I. Hematological parameters showed significant difference in erythrocytes, hematocrit and hemoglobin concentrations 15 days after drug administration and difference in leukocytes concentration 40 days after using the medication in bitches of group I, however, at the end of the experiment all bitches had blood counts considered normal.

Nosso objetivo foi avaliar os efeitos do benzoato de estradiol' sobre a taxa de recuperação oocitária e embrionária e sua influência sobre o sistema hematopoiético. Vinte e quatro fêmeas foram utilizadas: GRUPO I ­ 12 cadelas que receberam uma única aplicação de benzoato de estradiol, dose de 0,2 mg/Kg, via intramuscular, entre o 2º e 7º dia do último acasalamento ou inseminação. GRUPO II - 12 cadelas que receberam solução oleosa diluente, dose de 0,2 ml/Kg em datas correspondentes. As cadelas foram submetidas a ovariohisterectomia e as tubas uterinas e útero lavados, com solução de PBS, álcool polivinil e heparina. Os oócitos e embriões foram quantificados e classificados de acordo com seu estádio de desenvolvimento. O hemograma foi realizado em M1 (antes da aplicação do fármaco), M2 (15 dias após a aplicação do fármaco) e M3 (40 dias após a aplicação do fármaco). Para as variáveis recuperação de estruturas foi utilizado o coeficiente de correlação de Pearson e teste exato de Fisher na análise de viabilidade embrionária, análise de variância - ANOVA para medidas repetidas e o teste de Tukey para os parâmetros hematológicos. Todos os testes foram realizados a 5% de significância. A taxa de recuperação de estruturas no grupo I foi menor (22,88%) quando comparada ao grupo II (65,85%). Foi observada uma menor recuperação embrionária (proporção 3: 52) e um maior número de estruturas degeneradas (proporção 11: 1), no grupo I. Os parâmetros hematológicos mostraram diferença significativa em relação a concentração de hemáceas, hemoglobina, e volume globular, 15 dias após a aplicação do fármaco e diferença na concentração de leucócitos 40 dias após o uso dessa medicação em cadelas do grupo I, no entanto, ao final do experimento todas as fêmeas apresentavam hemogramas considerados normais.

Resumo

A expressão de receptores de estrógeno (ER) e progesterona (PR) por meio da técnica de q-PCR foi avaliada em 26 cadelas portadoras de neoplasias mamárias e cinco cadelas sem afecções mamárias (grupo controle). Os resultados mostraram que os três grupos de animais estudados - com tumor maligno ou benigno e controle - expressaram receptores de estrógeno alfa, beta e progesterona. A quantificação relativa mostrou tendência para uma expressão maior de receptores no grupo controle e menor no grupo de animais com neoplasias malignas. Além disso, observou-se expressão maior de ERα em relação ao ERβ, e as neoplasias malignas de origem mista apresentaram maiores concentrações dos receptores PR, ERα e ERβ que as neoplasias de origem epitelial.

The estrogen and progesterone receptor (ER and PR) expression with the q-PCR technique was evaluated in 26 female dog carrying of mammary tumors and five female dogs without mammary disease (control group). The results showed that the three animal groups evaluated - malignant or benign tumor and control - expressed alpha and beta estrogen and progesterone receptors. The relative quantification showed a tendency for a higher expression of receptors from the control group and smaller in the malignat tumors animal group. Also, there was a major ERα expression regarding to ERβ and the malignat tumors from mixed origin presented higher concentrations of receptors PR, ERα and ERβ, when compared to tumors of epithelial origin.

Resumo

Avaliaram-se a concentração de lactato e a glicemia em sete cadelas em trabalho de parto submetidas à cesariana e em seus respectivos neonatos. O lactato materno foi mensurado utilizando-se medidor portátil e pelo método enzimático colorimétrico. Nos neonatos avaliou-se também o peso ao nascimento. Os valores de lactato materno e neonatal foram estatisticamente diferentes, sendo mais elevado nos neonatos. Ao nascimento, as cadelas e os neonatos encontravam-se normoglicêmicos, e não se observou correlação entre a glicemia de ambos. Os valores de lactato obtidos pelo o analisador portátil (3,5±0,6mmol/L) foram mais altos do que os obtidos pelo método enzimático colorimétrico (1,6±0,6mmol/L). Observou-se correlação significativa entre o peso do neonato e a concentração de lactato, isto é, os filhotes de menor peso apresentaram maior concentração de lactato.

This work evaluated the concentration of lactate and blood glucose in seven bitches in labor subject to caesarean section and in their newborns. The lactate concentration was measured using a portable analyzer and enzymatic colorimetric method. In neonates, the birth weight was evaluated. The maternal and neonatal lactate values were statistically different, being higher in newborns. At birth, the bitches and the newborns had normal glucose status, and no correlation was observed between blood glucose in either. The lactate concentration obtained by the portable analyzer (3.5±0.6mmol/L) was higher than that obtained with the enzymatic colorimetric method (1.6±0.6mmol/L). There was significant correlation between the neonate weight and lactate concentration and in puppies with lighter weight there was a higher concentration of lactate.

Resumo

Os aspectos relacionados à ovulação, à fertilização e ao desenvolvimento embrionário inicial na espécie canina apresentam pecularidades. Nas cadelas há uma grande dificuldade na determinação precisa do momento da ocorrência das ovulações, devido ao período adicional necessário à maturação oocitária, já que os oócitos caninos são liberados ainda em estágio imaturo, esse fato, associados a longevidade dos espermatozoídes no trato genital da fêmea são responsáveis por um comprometimento da determinação da cronologia do desenvolvimento embrionário. Um maior conhecimento a respeito dessas particularidades é de grande valia para aplicação das principais biotécnicas reprodutivas nos canídeos domésticos e não domésticos. O objetivo desta revisão de literatura é discutir aspectos relacionados à ovulação, à fertilização e ao desenvolvimento embrionário inicial das cadelas, visando ao uso desses conhecimentos na prática veterinária e na área de biotecnologia reprodutiva.

The aspects related to the ovulation, fertilization and initial embryonic development on canine species have several peculiarities. Due to the difficulty to determine the exact moment of ovulation, the additional period required after ovulation for the oocytary maturation and the longevity of the spermatozoa in the reproduction system of the bitches, the chronology of the embryonic development are engaged. The major knowledge of these particularities has a great importance for the application in reproduction biothecnique in the domestic and non-domestic carnivores. Therefore, the aim of this review is to discuss this knowledge in the practical veterinary as well as in the area of reproductive biotechnology.

Resumo

Avaliou-se o efeito da centrifugação sobre a viabilidade do sêmen canino e compararam-se três meios de diluição pré-centrifugação. Utilizaram-se 10 ejaculados completos de 10 cães que, após a avaliação inicial, foram divididos em quatro porções (grupos). Uma das amostras, não centrifugada, formou o grupo-controle; as outras foram diluídas em três diferentes meios e centrifugadas a 800 x g por 15 minutos, formando os grupos: CPSA - constituído por sêmen centrifugado em plasma seminal autólogo; CLG - sêmen centrifugado em meio à base de leite desnatado e glicose (LG); e CPer- sêmen centrifugado em gradientes de Percoll (45 por cento e 90 por cento). Após a centrifugação e a eliminação do sobrenadante, procedeu-se à ressuspensão de todas as porções do ejaculado em LG e à imediata avaliação quanto à motilidade, vigor, aglutinação espermática e integridade das membranas espermáticas. Todas as suspensões foram, então, incubadas a 37ºC por 30 minutos e reavaliadas. O processo de centrifugação não causou danos aos espermatozoides e a centrifugação em meio LG melhorou a viabilidade espermática.

The effect of the centrifugation process on canine sperm viability was evaluated using three different precentrifugation extenders in the process. After an initial evaluation, ten complete ejaculates from ten dogs were used and subdivided in four groups. One sample of semen was not centrifuged and was used as control and the remaining samples of semen were diluted in three different extenders and centrifuged at 800 x g per 15 minutes, performing groups: CPSA- centrifuged in autologous seminal fluid, CLGcentrifuged in skim milk plus glucose extender (LG), and CPer- centrifuged under Percoll gradient (45 percent and 90 percent). After centrifugation, the resulting pellets were diluted in LG and evaluated for motility, viability, sperm agglutination, and spermatic membrane integrity. All the samples were incubated at 37ºC for 30 minutes and the evaluations were performed again. Centrifugation procedures did not induce damage to canine spermatozoa and samples centrifuged and diluted in skim milk plus glucose extender remained with better viability.

Resumo

Susceptibility profile and multiple drug resistance in 158 E. coli strains isolated from urinary tract infection (UTI), pyometra, and feces of dogs were studied. Norfloxacin, ciprofloxacin, and enrofloxacin were the most-effective drugs (>60 percent) for E. coli strains. High rates of resistance to antimicrobials were observed in 60 percent or more of the isolated strains using sulfametoxazole/trimetoprim. Multiple drug resistance for three or more antimicrobials was observed in two (47.1 percent) strains isolated from UTI, seven (13.5 percent) from pyometra, and four (7.3 percent) from feces. From these, 17 (33.3 percent), one (1.9 percent), and three (5.5 percent), respectively, showed multiple resistance to five or more drugs.

Resumo

Este estudo objetivou avaliar o perfil de crescimento embrionário/fetal ovino do 21º ao 41º dia de gestação através de avaliação ultra-sonográfica. Para tanto, foram realizados exames ultra-sonográficos transretais com transdutor de 5,0 MHz, três vezes por semana, em ovelhas submetidas a esquema de sincronização de cio e posterior monta controlada. A análise de regressão quadrática que incluiu a relação do diâmetro embrionário/fetal (DEF) e dias de gestação apresentando a seguinte equação: DEF = 45,9995 - 3,4320xdias + 0,079xdias2 com um coeficiente de determinação (r2) de 87,71%, denotando, desta forma, o perfil de crescimento no período experimental.

This study was developed to evaluate the ovine embryonic-foetal growth profile from 21º to 41º day of pregnancy through ultrasonographic evaluation. The examinations were performed with transrectal ultrasonoghaphy with 5,0 MHz probe, three times a week, in ewes sumitted a estrus sincronization and natural breeding. The quadratic equation included the relatiotionship betwenn crown-rump (CR) and gestation in days was: CR = 45,9995 - 3,4320xdays + 0,079xdays2and the coefficient of determination (r2) was 87,71%. Denoting the embryonic and fetal growth profile in the experiment.

Resumo

RESUMO: Foram analisados dados referentes a 60 tratos genitais de ovinos gestantes obtidos em matadouro. Todas as gestações foram simples e demonstrou-se a ocorrência de migração intra-uterina em 15% dos casos. O ovário com corpo lúteo (CL) foi maior (p

Resumo

Compararam-se os perfis dos constituintes do sangue de ovelhas submetidas a cesariana eletiva (n=21; GI) ou com partos normais (n= 11; GII). Obtiveram-se amostras de sangue em cinco momentos: no dia do parto, antes de sua ocorrência (M1), um (M2), dois (M3), três (M4) e sete (M5) dias pós-parto. Os valores do eritrograma em todos os animais apresentaram-se normais, näo se constituindo em guia para o prognóstico da ocorrência pós-parto. No leucograma do GI observou-se presença de neutrófilos imaturos nos animais que morreram após a cirurgia. Apesar de a contagem de neutrófilos imaturos ter sido sugestiva do efeito da cesariana, nenhuma variável hematológica mensurada constituiu-se em acurado guia para o prognóstico da cesariana

Resumo

Doze cadelas mestiças, adultas, foram submetidas à ovário-histerectomia e posteriormente distribuídas em dois grupos de seis animais. Um dos grupos recebeu estrógenos naturais conjugados na dose de 0,01mg/kg, via oral, a cada 48 horas, durante 12 meses, e o outro serviu como controle. A cada 60 dias foram realizadas colheitas de sangue e obtidos os valores de colesterol total, triglicerídeos, HDL, LDL e VLDL. Houve elevação do colesterol total e do LDL nas fêmeas sem reposição de hormônio. No grupo que recebeu estrógenos houve elevação do HDL. A ovário-histerectomia influenciou significativamente o perfil lipoprotéico; a reposição com estrógenos foi capaz de preservar esse perfil nas cadelas castradas.

Resumo

Este trabalho objetivou relacionar o diâmetro da vesícula embrionária/fetal (DVE) e comprimento craniocaudal do embriäo/feto (CCC) do 15§ ao 45§ dia de gestaçäo com a idade de gestaçäo em ovelhas. Utilizaram-se 19 ovelhas adultas da raça Bergamácia, com cio sincronizado e cobertas por um mesmo reprodutor. A avaliaçäo ultra-sonográfica foi realizada diariamente do 15§ ao 30§ dia após a cobriçäo e a cada cinco dias do 30§ ao 45§ dia, utilizando-se aparelho com transdutor linear de 5,0 e 7,5MHZ. O crescimento diário médio do DVE e CCC foi de 1,40mm e 1,33mm, respectivamente. A calibragem inversa obtida para DVE foi: Dias = -11 + 50(0,1 + 0,04log DVE sobrescrito) 1/2(sobrescrito), com R2(sobrescrito) = 0,85 e para CCC foi: Dias = 13,63 + 12,5(-0,71 + 0,l6CCC)1/2(sobrescrito), com R 2 sobrescrito = 0,93. Tanto o DVE como o CCC obtidos por ultra-sonografia säo medidas pelas quais se pode prever a idade de gestaçäo em ovelhas da raça Bergamácia

Resumo

O presente estudo objetivou diagnosticar as causas da morte embrionária precoce em 128 éguas. Amostras de soro foram coletadas nos dias 4, 7, 10, 13, 16, 19, 21 e 30 após ovulaçäo, para dosagens hormonais e mensuraçöes do corpo lúteo. O diâmetro e as características da vesícula embrionária foram avaliados, através da ultra-sonografia, a partir do 12º dia pós-ovulaçäo. Das 128 éguas estudadas, 17 (13.28 por cento) apresentaram morte embrionária. O diâmetro do corpo lúteo, bem como as concentraçöes plasmáticas de progesterona, foi semelhante nos grupos que apresentaram morte embrionária e nos que mantiveram a gestaçäo. Os níveis de estrogeno plasmáfico foram mais elevados no grupo das fêmeas que mantiveram a gestaçäo. Os exames citológicos, microbiológicos e histopatológicos revelaram que a maioria das éguas com diagnóstico de morte embrionária eram portadoras de endometrites

Resumo

No presente trabalho foi realizado um estudo da técnica cirúrgica de coleta de embriöes na espécie caprina, utilizando-se doadoras heterozigotas para a translocaçäo 5/15, acasaladas com animal translocado. Simultaneamente foram observados aspectos técnicos inerentes à criopreservaçäo, descongelaçäo e cultivo das estruturas recuperadas. Frente ao tratamento superovulatório, o cio foi observado em 24 ou 48 horas após a remoçäo da esponja intravaginal e foram recuperadas 71 estruturas viáveis em 43 coletas. O 1-2 Propanodiol mostrou-se eficiente criopreservador, permitindo cultivo de todos os embriöes, fato näo observado quando utilizou-se o Glicerol. As aderências provocadas pelas repetidas coletas constituem-se no grande desafio no sentido de se aperfeiçoar a técnica, pois säo consideradas um fator limitante ao uso de doadores no início da vida reprodutiva