Detection of icaA, icaD, and bap genes and biofilm production in Staphylococcus aureus and non-aureus staphylococci isolated from subclinical and clinical bovine mastitis / Detecção dos genes icaA, icaD e bap e produção de biofilme por Staphylococcus aureus e estafilococos não-aureus isolados de mastite clínica e subclínica bovina

Algumas espécies de Staphylococcus causam infecções crônicas intramamárias e podem levar à formação de biofilme. No presente estudo, levantou-se a hipótese de que as espécies de Staphylococcus isolados da mastite bovina são capazes de formar biofilme in vitro associado à presença dos genes icaA, icaD ou bap. Um total de 200 isolados de Staphylococcus, sendo 100 Staphylococcus aureus de casos de mastite subclínica e 100 estafilococos não aureus (ENA) de casos de mastite subclínica e clínica, obtidos em duas fazendas leiteiras, no estado de São Paulo, foram avaliados quanto à capacidade de produzir biofilmes in vitro. A presença de icaA, icaD e bap foi confirmada por PCR, e a produção de biofilme em ágar vermelho congo (Congo Red Agar - CRA) e em teste de microplaca (Microtiter Plate - MtP) foi avaliada nos isolados de S. aureus e ENA. Os resultados mostraram a presença dos genes icaA, icaD e bap em S. aureus, mas não em ENA. A produção de biofilme pode estar associada à presença de outros fatores ou genes que estimulam a produção de biofilme in vitro. O ensaio de MtP serve como um modelo quantitativo para o estudo da aderência de espécies de estafilococos associados à mastite bovina.(AU)

Detection of icaA, icaD, and bap genes and biofilm production in Staphylococcus aureus and non-aureus staphylococci isolated from subclinical and clinical bovine mastitis / Detecção dos genes icaA, icaD e bap e produção de biofilme por Staphylococcus aureus e estafilococos não-aureus isolados de mastite clínica e subclínica bovina

Algumas espécies de Staphylococcus causam infecções crônicas intramamárias e podem levar à formação de biofilme. No presente estudo, levantou-se a hipótese de que as espécies de Staphylococcus isolados da mastite bovina são capazes de formar biofilme in vitro associado à presença dos genes icaA, icaD ou bap. Um total de 200 isolados de Staphylococcus, sendo 100 Staphylococcus aureus de casos de mastite subclínica e 100 estafilococos não aureus (ENA) de casos de mastite subclínica e clínica, obtidos em duas fazendas leiteiras, no estado de São Paulo, foram avaliados quanto à capacidade de produzir biofilmes in vitro. A presença de icaA, icaD e bap foi confirmada por PCR, e a produção de biofilme em ágar vermelho congo (Congo Red Agar - CRA) e em teste de microplaca (Microtiter Plate - MtP) foi avaliada nos isolados de S. aureus e ENA. Os resultados mostraram a presença dos genes icaA, icaD e bap em S. aureus, mas não em ENA. A produção de biofilme pode estar associada à presença de outros fatores ou genes que estimulam a produção de biofilme in vitro. O ensaio de MtP serve como um modelo quantitativo para o estudo da aderência de espécies de estafilococos associados à mastite bovina.(AU)

Ocorrência, patógenos e fatores de risco para mastite subclínica em cabras leiteiras / Occurrence, pathogens and risk factors for subclinical mastitis in dairy goats

Milk samples from 257 goats and 513 half udders of 10 dairy goat farms were analyzed by microbiological culture, to evaluate the sanitary management, and epidemiological questionnaire results. Multivariate analysis of risk factors for subclinical mastitis in goats, with the adjusted Odds Ratio for subclinical mastitis was performed. The prevalence of subclinical mastitis in goats by microbiological culture was 43.6%, and clinical mastitis was 5.84%. From 178 positive teats by microbiological culture, the most prevalent pathogens were coagulase-negative staphylococci - CNS (70%), S. aureus (13.5%), S. intermedius (7.9%), and Enterobacteriaceae (4%). The risk factors analysis revealed significant association between the disease and the flock size (OR= 3.33; P= 0.0268), and the farm was a confounding factor, being kept in the final statistical model. Despite the non-identification of all the factors associated with subclinical mastitis in herds and the existence of confounding factors that hinder statistical analyzes, the study of risk factors is important for the improvement of disease control and prevention programs in dairy goat, and it can be used as a tool in the reduction of environmental and contagious pathogens such as staphylococci that were the most identified pathogens causing caprine mastitis in the study.(AU)

Ocorrência, patógenos e fatores de risco para mastite subclínica em cabras leiteiras / Occurrence, pathogens and risk factors for subclinical mastitis in dairy goats

Milk samples from 257 goats and 513 half udders of 10 dairy goat farms were analyzed by microbiological culture, to evaluate the sanitary management, and epidemiological questionnaire results. Multivariate analysis of risk factors for subclinical mastitis in goats, with the adjusted Odds Ratio for subclinical mastitis was performed. The prevalence of subclinical mastitis in goats by microbiological culture was 43.6%, and clinical mastitis was 5.84%. From 178 positive teats by microbiological culture, the most prevalent pathogens were coagulase-negative staphylococci - CNS (70%), S. aureus (13.5%), S. intermedius (7.9%), and Enterobacteriaceae (4%). The risk factors analysis revealed significant association between the disease and the flock size (OR= 3.33; P= 0.0268), and the farm was a confounding factor, being kept in the final statistical model. Despite the non-identification of all the factors associated with subclinical mastitis in herds and the existence of confounding factors that hinder statistical analyzes, the study of risk factors is important for the improvement of disease control and prevention programs in dairy goat, and it can be used as a tool in the reduction of environmental and contagious pathogens such as staphylococci that were the most identified pathogens causing caprine mastitis in the study.(AU)

INQUÉRITO/PESQUISA SOROEPIDEMIOLÓGICO PARA Neospora caninum EM OVINOS DESTINADOS AO ABATE / SEROEPIDEMIOLOGICAL SURVEY OF Neospora caninum IN SHEEP FOR SLAUGHTER

Neospora caninum é um protozoário intracelular obrigatório responsável por uma doença emergente com impacto econômico devido às perdas reprodutivas e cujo potencial zoonótico é até agora desconhecido. Diferentes espécies de animais são suscetíveis à infecção com N. caninum e evidência sorológica de exposição humana também foi demonstrada em diversos estudos (NAM et al., 1998; TRANAS et al., 1999; LOBATO et al., 2006). O primeiro relato de neosporose em ovinos ocorreu em 1990 (DUBEY et al., 1990), em um cordeiro com sinais clínicos de doença neurológica. No Brasil, há poucos relatos de infecção natural em ovelhas. Assim, o presente estudo teve como objetivo investigar os anticorpos e fatores de risco para Neospora caninum em ovinos para abate. Amostras sorológicas de 596 ovelhas de São Paulo e Rio Grande do Sul foram avaliados pelo teste de imunofluorescência indireta (RIFI). De todas as amostras testadas, 353/596 (59,23%) foram positivas, com titulação de 25 (129, 36,54%), o valor de corte adotado; 50 (131; 37,11%), 100 (65; 18,41%), 2

Estudo dos métodos de rotina diagnóstica de mastite no leite de éguas / Study of routine diagnosis methods of mastitis in mares

Routine diagnosis methods used in bovine mastitis were studied in 55 mares in lactation. The findings of strip cup test, California Mastitis Test-CMT, electronic somatic cell count-CCS, microbiological culture, and in vitro antimicrobial susceptibility profile of isolates were discussed. Streptococcus spp., Staphylococcus spp, and enterobacteria were the most common microorganisms isolated in health and CMT-positive mammary glands. Staphylococcus aureus and Arcanobacterium pyogenes were identified in two mares presenting clinical mastitis. Mean somatic cell count of eight mares without presence of microorganisms in milk was 247.57x10³/mL and 1.621,86x10³/mL in 47 mares with positive microbiological culture. Moderate concordance (63.8 percent) between positive reactions in CMT (1 to 3+) and microbiological culture was observed. Amicacin (78.9 percent), ceftiofur (74.7 percent), sulpha-trimetoprim (69,0 percent) and norfloxacin (69.0 percent), were the most effective drugs, while resistance of isolates was mainly observed against penicillin (64.8 percent), gentamycin (35.2 percent), azithromycin (35.2 percent), enrofloxacin (28.2 percent), and florfenicol (28.2 percent).(AU)

Utilização de composto homeopático no tratamento da mastite bovina

ABSTRACT Mastitis is an inflammatory response of the mammary gland being the most common dairy cattle infection. The antibiotical therapy its the most common treatment for this disease. However the high cost and the presence of residues in the milk must be considered when choosing the conventional therapy. Homeopathy is a treatment that must be considered in mastitis cases, and its practically the only option for organic producers. This research aimed to evaluate the effectiveness of homeopathic treatment, through the Tamis test accomplished daily, the Somatic Cell Count SCC, the California Mastitis Test CMT, the Colony Forming Units CFU, and milk production. 100 animals which were part of two lots of 50 animals previously existing in the farm, were chosen by the owner. The lots were classified as control group and experimental group. Four milk collects were realized before the beginning of the study, four during the homeopathic treatment and one at the end of the research. There were no significant differences in CFU and CCS. In the CMT analysis, was verified a decline in the subclinical cases of the experimental group. The most commonly isolated agent was Corynebacterium bovis in both groups throughout the experiment. As for milk production, there was no significant difference between the two groups. The results suggests the use of alternative methods for mastitis control, and showed the need for further studies to evaluate the real effectiveness of the homeopathic treatment.

RESUMO A mastite é uma resposta inflamatória da glândula mamária, sendo a infecção mais frequente do gado destinado a produção leiteira. A utilização de antimicrobianos é prática rotineira para o tratamento desta afecção. O alto custo dos medicamentos e a presença destes como resíduos no leite são fatores que devem ser considerados na terapia convencional. A homeopatia é uma possibilidade de tratamento, que se adequa às mastites, e praticamente a única opção para a obtenção de produtos orgânicos. O objetivo deste trabalho foi avaliar a eficiência do tratamento homeopático, pela realização da prova do Tamis diariamente, e pela contagem de células somáticas, California Mastitis Test CMT, contagem de unidades formadoras de colônias UFC, e pela análise da produção diária de leite. Foram selecionados 2 lotes de 50 animais em fase de lactação, estabelecidos previamente pelo proprietário, categorizados como grupo controle e experimental. Foram realizadas quatro coletas de leite, antes da utilização do tratamento, quatro coletas durante o período de tratamento, e uma coleta duas semanas após o seu término. Não foram observadas diferenças significativas quanto a UFC e CCS. Quanto ao CMT, observou-se redução nos casos de mastite subclinica no grupo experimental. O agente mais comumente isolado foi Corynebacterium bovis em ambos os grupos durante todo o experimento. Quanto à produção de leite, não houve diferença significante estatisticamente entre os dois grupos. Os resultados obtidos no presente trabalho sugerem a utilização de métodos alternativos de tratamento das mastites, e por outro lado mostram a necessidade de novos estudos para se avaliar a eficácia da homeopatia.

Rabies in the big fruit-esting bat Artibeus lituratus from Botucatu, Southeastern Brazil

Rabies is a viral disease of mammals transmitted through the bite of a rabid animal. A frugivorous adult male bat, Artibeus lituratus, family Phyllostomidae, was diagnosed as positive to rabies by direct immunofluorescence (DIF) and mouse inoculation test (MIT) of the bat's brain, both performed at the School of Veterinary Medicine and Animal Husbandry - FMVZ, UNESP, Botucatu, São Paulo State, Brazil. The animal collided with the window of a commercial establishment in the urban area during the day. With regard to DIF, a high amount of Negri bodies of several sizes was observed in the brain. The spleen and right kidney presented some Negri bodies too. In relation to MIT, the mice presented paralysis in the 7th day, and died in the day after with several characteristic small bodies. The reverse transcriptase-polymerase chain reaction (RT-PCR), followed by hemi-nested RT-PCR (hnRT-PCR) resulted in an amplification of fragments from the bat's brain viral RNA, 432bp in RT-PCR, and 274bp in hnRT-PCR, confirming the diagnosis. Therefore, the hnRT-PCR and DIF have good sensitivity and specificity, providing and confirming the diagnosis of the clinical samples in a short period of time.(AU)

INQUÉRITO/PESQUISA SOROEPIDEMIOLÓGICO PARA Neospora caninum EM OVINOS DESTINADOS AO ABATE / SEROEPIDEMIOLOGICAL SURVEY OF Neospora caninum IN SHEEP FOR SLAUGHTER

Neospora caninum é um protozoário intracelular obrigatório responsável por uma doença emergente com impacto econômico devido às perdas reprodutivas e cujo potencial zoonótico é até agora desconhecido. Diferentes espécies de animais são suscetíveis à infecção com N. caninum e evidência sorológica de exposição humana também foi demonstrada em diversos estudos (NAM et al., 1998; TRANAS et al., 1999; LOBATO et al., 2006). O primeiro relato de neosporose em ovinos ocorreu em 1990 (DUBEY et al., 1990), em um cordeiro com sinais clínicos de doença neurológica. No Brasil, há poucos relatos de infecção natural em ovelhas. Assim, o presente estudo teve como objetivo investigar os anticorpos e fatores de risco para Neospora caninum em ovinos para abate. Amostras sorológicas de 596 ovelhas de São Paulo e Rio Grande do Sul foram avaliados pelo teste de imunofluorescência indireta (RIFI). De todas as amostras testadas, 353/596 (59,23%) foram positivas, com titulação de 25 (129, 36,54%), o valor de corte adotado; 50 (131; 37,11%), 100 (65; 18,41%), 2