Molecular evidence of early vertical transmission of Leishmania (Leishmania) infantum in a dog / Evidência molecular da transmissão vertical precoce de Leishmania (Leishmania) infantum em um cão

Visceral leishmaniasis (VL) is caused by the protozoon Leishmania infantum . Transmission of this parasite to hosts occurs mainly through the bite of infected sand flies. However, alternative infection routes have been hypothesized, especially in areas where the biological vector is absent. The exact time of infection and whether in utero transmission occurs have still not been fully elucidated. This report demonstrates molecular evidence of vertical transmission of L. infantum from a pregnant dog to the embryo. Samples (e.g. vulva, vagina, cervix, uterine body, uterine horn and ovaries) from a female naturally infected by L. infantum and from her embryo were molecularly analyzed by means of qPCR and cPCR followed by DNA sequencing. The gestational age was estimated to be 23±1 day. Through qPCR, the presence of L. infantum DNA was detected in all the samples analyzed (n=7), including the embryo, conversely through cPCR, only four samples (vagina, cervix, uterine body and embryo) were positive. This study demonstrated that transmission of L. infantum from a pregnant dog to the embryo might occur in the early days of pregnancy. In conclusion, this is the first report showing L. infantum infecting a canine embryo.

Leishmaniose visceral (LV) é causada pelo protozoário Leishmania infantum . A transmissão deste parasito para hospedeiros é principalmente vetorial. No entanto, rotas alternativas de infecção têm sido investigadas, especialmente em áreas onde o vetor biológico está ausente. O período exato de infecção e se a transmissão in utero ocorre ainda não está totalmente elucidada. Este estudo demonstra uma evidência molecular da transmissão vertical de L. infantum de uma cadela prenhe para o embrião. As amostras (vulva, vagina, cérvix, corpo do útero, corno do útero e ovários) de uma fêmea naturalmente infectada por L. infantum e de seu embrião foram analisados molecularmente por meio de qPCR e cPCR, seguido de sequenciamento de DNA. A estimativa da idade gestacional foi de 23±1 dia. Na qPCR, a presença de DNA de L. infantum foi detectado em todas as amostras (n=7) analisadas, incluindo o embrião. No entanto, na PCR convencional, apenas quatro amostras (vagina, cérvix, corpo do útero e embrião) foram positivas. Este estudo demonstrou que a transmissão de L. infantum de uma cadela prenhe para o embrião pode ocorrer nos primeiros dias de prenhez. Em conclusão, de acordo com o conhecimento dos autores, este é o primeiro relatório evidenciando infecção de embrião canino por L. infantum.

Molecular evidence of early vertical transmission of Leishmania (Leishmania) infantum in a dog / Evidência molecular da transmissão vertical precoce de Leishmania (Leishmania) infantum em um cão

Visceral leishmaniasis (VL) is caused by the protozoon Leishmania infantum . Transmission of this parasite to hosts occurs mainly through the bite of infected sand flies. However, alternative infection routes have been hypothesized, especially in areas where the biological vector is absent. The exact time of infection and whether in utero transmission occurs have still not been fully elucidated. This report demonstrates molecular evidence of vertical transmission of L. infantum from a pregnant dog to the embryo. Samples (e.g. vulva, vagina, cervix, uterine body, uterine horn and ovaries) from a female naturally infected by L. infantum and from her embryo were molecularly analyzed by means of qPCR and cPCR followed by DNA sequencing. The gestational age was estimated to be 23±1 day. Through qPCR, the presence of L. infantum DNA was detected in all the samples analyzed (n=7), including the embryo, conversely through cPCR, only four samples (vagina, cervix, uterine body and embryo) were positive. This study demonstrated that transmission of L. infantum from a pregnant dog to the embryo might occur in the early days of pregnancy. In conclusion, this is the first report showing L. infantum infecting a canine embryo.(AU)

Leishmaniose visceral (LV) é causada pelo protozoário Leishmania infantum . A transmissão deste parasito para hospedeiros é principalmente vetorial. No entanto, rotas alternativas de infecção têm sido investigadas, especialmente em áreas onde o vetor biológico está ausente. O período exato de infecção e se a transmissão in utero ocorre ainda não está totalmente elucidada. Este estudo demonstra uma evidência molecular da transmissão vertical de L. infantum de uma cadela prenhe para o embrião. As amostras (vulva, vagina, cérvix, corpo do útero, corno do útero e ovários) de uma fêmea naturalmente infectada por L. infantum e de seu embrião foram analisados molecularmente por meio de qPCR e cPCR, seguido de sequenciamento de DNA. A estimativa da idade gestacional foi de 23±1 dia. Na qPCR, a presença de DNA de L. infantum foi detectado em todas as amostras (n=7) analisadas, incluindo o embrião. No entanto, na PCR convencional, apenas quatro amostras (vagina, cérvix, corpo do útero e embrião) foram positivas. Este estudo demonstrou que a transmissão de L. infantum de uma cadela prenhe para o embrião pode ocorrer nos primeiros dias de prenhez. Em conclusão, de acordo com o conhecimento dos autores, este é o primeiro relatório evidenciando infecção de embrião canino por L. infantum.(AU)

Correlation between chronic inflammation, immunostaining and parasite load in the genital system of female dogs naturally infected with Leishmania infantum / Correlação entre inflamação crônica, imunomarcação e carga parasitária no sistema genital de cadelas naturalmente infectadas com Leishmania infantum

The aim of the present study was to investigate the correlations among chronic inflammatory reaction, immunostaining and parasite load in the genital system of female dogs naturally infected with Leishmania infantum . Animals (n = 10) used in this study were from the Department of Vector Control and Animal Surveillance of the municipality of Caruaru, state of Pernambuco, Brazil. Fragments of the vulva, vagina, cervix, uterine body, uterine horns and ovaries were submitted to histopathological analysis, immunohistochemistry (IHC) and DNA detection of amastigotes by qPCR. Correlations were found between the IHC findings and chronic inflammatory infiltrate related to L. Infantum only in the vulva and vagina; whereas, the same inflammatory reactions without immunostaining were observed in all organs, except the ovaries. L. Infantum DNA was detected in all organs of genital system, with no difference in parasite load observed among the different organs. No correlation was reported between parasite load and inflammatory lesions in the organs evaluated, except for the uterine body, in which an inverse correlation was detected. In conclusion, the vulva and vagina were the major sites of lesions and immunostaining for L. Infantum amastigotes in the genital system of female dogs. Moreover, parasite load exerted no influence on the intensity of the lesions in the organs evaluated.(AU)

Considerando a falta de estudos sobre lesões nos órgãos genitais de cadelas naturalmente infectadas por Leishmania infantum , o objetivo do presente estudo foi investigar a correlação entre reação inflamatória crônica, imunomarcação e carga parasitária, no sistema genital. Dez animais foram fornecidos pelo Departamento de Controle de Vetores e Vigilância Animal do município de Caruaru, Estado de Pernambuco, Brasil. Fragmentos de vulva, vagina, cérvix, corpo do útero, corno do útero e ovários foram avaliados por descrição histopatológica, imuno-histoquímica (IHQ) e detecção de DNA de formas amastigotas por qPCR. A relação entre IHQ e infiltrado inflamatório crônico relacionado com L. infantum foi observada apenas na vulva e vagina, enquanto as mesmas reações sem imunomarcação foram observadas em todos os órgãos, exceto nos ovários. DNA de L. infantum foi detectado em todos os órgãos do sistema genital, porém, sem diferença de carga parasitária entre eles. Não houve correlação entre a carga parasitária e lesões inflamatórias nos órgãos avaliados, com exceção do corpo do útero, em que foi encontrada uma correlação inversa. Em conclusão, a vulva e a vagina foram os principais locais de lesões e imunomarcação para formas amastigotas L. infantum no sistema genital de cadelas. A carga parasitária não influenciou a intensidade das lesões nos órgãos avaliados.(AU)

Histopathological evaluation and parasite quantification (qPCR) in the male dog's genital system after natural infection with Leishmania infantum / Avaliação histopatológica e quantificação parasitária (qPCR) no sistema genital de cães machos após infecção natural com Leishmania infantum

Canine visceral leishmaniasisis an important disease caused by the protozoon Leishmania infantum which affects several organs and systems, including the genital tract. The L. infantum tropism to the male genital system and correlation among parasite load, immunohistochemistry detection and structural changes in these organs is controversy. Therefore, the aim of this study was to evaluate this correlation in the genital organs of the male dogs naturally infected with L. infantum. Samples from testicles, epididymis, prostate, glans penis, prepuce and scrotum were collected from 19 positive adult dogs. Structural changes were observed in the testicles (5.2%), epididymis (2.6%), prepuce (5.2%) and scrotum (5.2%) of the samples positive at immunohistochemistry examination. Conversely, similar structural changes were observed in all tissues negative at immunohistochemistry analysis. Moreover, L. infantum DNA was detected in all organs with the highest parasite load found in testicles, epididymis, and prostate gland. , Testicles had the highest parasite load but the lowest number of inflammatory lesions. These inflammatory lesions were observed in all organs of reproductive system of dogs; however, no correlation was observed between the parasite load and inflammatory lesions of dogs naturally infected with L. infantum.(AU)

A Leishmaniose Visceral Canina é uma importante enfermidade causada pelo protozoário Leishmania infantum que afeta diversos órgãos e sistemas, incluindo o trato genital. No entanto, o tropismo da L. infantum pelo sistema genital masculino e a correlação entre carga parasitária, detecção imunohistoquímica e alterações estruturais nesses órgãos ainda é uma questão controversa. Sendo assim, o objetivo deste estudo foi avaliar essa correlação em órgãos genitais de cães naturalmente infectados por L. infantum. Para tal, amostras de testículos, epidídimos, próstata, glande, prepúcio e escroto foram coletadas de 19 cães adultos positivos. Lesões microscópicas associadas com imunomarcação de formas amastigotas do parasito foram observadas nos testículos (5,2%), epidídimos (2,6%), prepúcio (5,2%) e escroto (5,2%). Por outro lado, alterações estruturais sem imunomarcação foram observadas em todos os órgãos. Além disso, o DNA de L. infantum foi encontrado em todos os órgãos com maior carga parasitária nos testículos, epidídimos e próstata. Curiosamente, os testículos apresentaram a maior carga parasitária, porém apresentaram o menor grau de lesões inflamatórias. Essas lesões inflamatórias foram observadas em todos os órgãos do sistema reprodutor de cães com L. infantum. Entretanto, não houve correlação entre carga parasitária e lesões inflamatórias nestes órgãos.(AU)

Osteossarcoma condroblástico atípico no esqueleto axial em cão / Atypical chondroblastic osteosarcoma in the axial skeleton in a dog

O Osteossarcoma é o tumor ósseo maligno mais comum nos cães, acometendo com maior freqüência animais de média idade a idosos. É um tumor de origem mesenquimal, com grande potencial para o desenvolvimento de metástases, sendo caracterizado pelo seu comportamento agressivo e invasivo. No esqueleto axial, o osteossarcoma primário é considerado raro, pode ocorrer nas costelas, esterno, vértebras e ossos e crânio, além disso, também pode ocorrer no osso pélvico. Este trabalho relata um caso atípico de osteossarcoma condroblástico primário de costela, com metástase esofágica, em um cão. O paciente apresentava abafamento dos sons cardíacos à auscultação, dispneia expiratória e grave desidratação. A radiografia torácica evidenciou o aumento generalizado da silhueta cardíaca, sugestiva de efusão pericárdica. Devido a suspeita de neoplasia intratorácica e ao estado geral ruim do paciente foi realizada eutanásia e a necropsia revelou a massa neoplásica dentro da cavidade torácica, aderida à costela, ao esterno e ao saco pericárdico, além de uma massa metastática localizada no esôfago. O exame histopatológico confirmou o diagnóstico desta neoplasia. Este relato trata-se de um caso atípico de osteossarcoma condroblástico primário de costela em cão, com metástase no esôfago, sendo considerado atípico devido a localização da massa neoplásica dentro da cavidade torácica, aderida externamente ao saco pericárdio.(AU)

Osteosarcoma is the most common malignant bone tumor in dogs, most frequently affecting middleto old-aged animals. It is a tumor of mesenchymal origin with great potential for the development of metastases, and is characterized by its aggressive and invasive behavior. In the axial skeleton, primary osteosarcoma is rare but may occur in the ribs, sternum, vertebrae and skull. This paper reports an atypical case of primary chondroblastic osteosarcoma of the rib with esophageal metastasis in a dog. The patient had muffled heart sounds on auscultation, expiratory dyspnea, and severe dehydration. Thoracic radiography showed generalized enlargement of the heart silhouette, suggestive of pericardial effusion. Because of a suspicion of intrathoracic neoplasia and the poor general state of the patient, euthanasia was advised. Necropsy revealed a neoplastic mass within the thoracic cavity, adhered to a rib and the sternum and pericardial sac, in addition to a metastatic mass in the esophagus. Histopathological examination confirmed the diagnosis of this neoplasia. This report describes an unusual case of primary chondroblastic osteosarcoma of the rib in a dog with metastasis in the esophagus. It is considered unusual because of the location of the tumoral mass inside the thoracic cavity and external adhesion to the pericardial sac.(AU)

Post-natal development of rats` offspring treated with the ethanol extract of Neem leaves (Azadirachta indica A. Juss) during pregnancy and lactation / Desenvolvimento pós-natal de proles de ratas tratadas com o extrato etanólico das folhas de nim (Azadirachta indica A. Juss) durante a gestação e lactação

Teratogenicity and developmental abnormalities in the offspring of female rats that ingested ethanol extract of Neem plants during pregnancy and lactation period were assessed. Twenty-four female Wistar rats were randomly distributed in control group and in three experimental groups and treated during the 4th, 5th, and 6th day of pregnancy. After birth, the lactating females received, by gavage, 65, 135 and 200 mg kg-1 of Neem ethanol extract, during 15 days. Results show, there was no significant difference in body mass index of neonatal rats in the 4 groups evaluated, whereas mean rate of offspring survival was 79.4%. Hair growth, incisor teeth eruption, ear detachment, eyelid opening, and spontaneous ambulation were similar for all groups. Likewise, physical development and development of motor activity, ambulation, and postural reflexes were similar for all groups. The administration of Neem ethanol extract did not cause any reproductive or systemic toxicity in animals. Results show that, Neem ethanol extract safe at doses 65, 135 and 200 mg kg-1 in pregnant or lactating rats.(AU)

Teratogenicidade e anormalidades no desenvolvimento de proles de ratas que ingeriram o extrato etanólico de folhas de nim durante a gestação e lactação foram avaliadas. Vinte e quatro ratas Wistar foram distribuídas aleatoriamente em um grupo controle e três grupos experimentais tratados no quarto, quinto e sexto dias de gestação. Após o nascimento, as fêmeas lactantes receberam através de gavagem, o extrato etanólico de nim nas doses de 65, 135 e 200 mg kg-1 durante 15 dias. Nenhuma diferença significativa foi observada em relação ao índice de massa corpórea das fêmeas em lactação nos grupos em todos os momentos e a taxa média de sobrevivência dos filhotes foi de 79,4%. O tempo de crescimento piloso, erupção dos dentes incisivos, descolamento de orelha, abertura palpebral e deambulação espontânea foram semelhantes em todos os grupos. O desenvolvimento físico e da atividade motora, deambulação e reflexos posturais foram semelhantes em todos os grupos. A administração não resultou em toxicidade reprodutiva ou sistêmica. Os resultados mostraram que o extrato etanólico do nim é seguro para uso nas doses de 65, 135 e 200mg kg-1 em ratas prenhes ou em lactação.(AU)

Osteossarcoma condroblástico atípico no esqueleto axial em cão / Atypical chondroblastic osteosarcoma in the axial skeleton in a dog

O Osteossarcoma é o tumor ósseo maligno mais comum nos cães, acometendo com maior freqüência animais de média idade a idosos. É um tumor de origem mesenquimal, com grande potencial para o desenvolvimento de metástases, sendo caracterizado pelo seu comportamento agressivo e invasivo. No esqueleto axial, o osteossarcoma primário é considerado raro, pode ocorrer nas costelas, esterno, vértebras e ossos e crânio, além disso, também pode ocorrer no osso pélvico. Este trabalho relata um caso atípico de osteossarcoma condroblástico primário de costela, com metástase esofágica, em um cão. O paciente apresentava abafamento dos sons cardíacos à auscultação, dispneia expiratória e grave desidratação. A radiografia torácica evidenciou o aumento generalizado da silhueta cardíaca, sugestiva de efusão pericárdica. Devido a suspeita de neoplasia intratorácica e ao estado geral ruim do paciente foi realizada eutanásia e a necropsia revelou a massa neoplásica dentro da cavidade torácica, aderida à costela, ao esterno e ao saco pericárdico, além de uma massa metastática localizada no esôfago. O exame histopatológico confirmou o diagnóstico desta neoplasia. Este relato trata-se de um caso atípico de osteossarcoma condroblástico primário de costela em cão, com metástase no esôfago, sendo considerado atípico devido a localização da massa neoplásica dentro da cavidade torácica, aderida externamente a

Osteosarcoma is the most common malignant bone tumor in dogs, most frequently affecting middleto old-aged animals. It is a tumor of mesenchymal origin with great potential for the development of metastases, and is characterized by its aggressive and invasive behavior. In the axial skeleton, primary osteosarcoma is rare but may occur in the ribs, sternum, vertebrae and skull. This paper reports an atypical case of primary chondroblastic osteosarcoma of the rib with esophageal metastasis in a dog. The patient had muffled heart sounds on auscultation, expiratory dyspnea, and severe dehydration. Thoracic radiography showed generalized enlargement of the heart silhouette, suggestive of pericardial effusion. Because of a suspicion of intrathoracic neoplasia and the poor general state of the patient, euthanasia was advised. Necropsy revealed a neoplastic mass within the thoracic cavity, adhered to a rib and the sternum and pericardial sac, in addition to a metastatic mass in the esophagus. Histopathological examination confirmed the diagnosis of this neoplasia. This report describes an unusual case of primary chondroblastic osteosarcoma of the rib in a dog with metastasis in the esophagus. It is considered unusual because of the location of the tumoral mass inside the thoracic cavity and external adhesion to the pericardial sac.

Osteossarcoma condroblástico atípico no esqueleto axial em cão / Atypical chondroblastic osteosarcoma in the axial skeleton in a dog

O Osteossarcoma é o tumor ósseo maligno mais comum nos cães, acometendo com maior freqûência animais de média idade a idosos. É um tumor de origem mesenquimal, com grande potencial para o desenvolvimento de metástases, sendo caracterizado pelo seu comportamento agressivo e invasivo. No esqueleto axial, o osteossarcoma primário é considerado raro, pode ocorrer nas costelas, esterno, vértebras e ossos e crânio, além disso, também pode ocorrer no osso pélvico. Este trabalho relata um caso atípico de osteossarcoma condroblástico primário de costela, com metástase esofágica, em um cão. O paciente apresentava abafamento dos sons cardíacos à auscultação, dispneia expiratória e grave desidratação. A radiografia torácica evidenciou o aumento generalizado da silhueta cardíaca, sugestiva de efusão pericárdica. Devido a suspeita de neoplasia intratorácica e ao estado geral ruim do paciente foi realizada eutanásia e a necropsia revelou a massa neoplásica dentro da cavidade torácica, aderida à costela, ao esterno e ao saco pericárdico, além de uma massa metastática localizada no esôfago. O exame histopatológico confirmou o diagnóstico desta neoplasia. Este relato trata-se de um caso atípico de osteossarcoma condroblástico primário de costela em cão, com metástase no esôfago, sendo considerado atípico devido a localização da massa neoplásic

Osteosarcoma is the most common malignant bone tumor in dogs, most frequently affecting middleto old-aged animals. It is a tumor of mesenchymal origin with great potential for the development of metastases, and is characterized by its aggressive and invasive behavior. In the axial skeleton, primary osteosarcoma is rare but may occur in the ribs, sternum, vertebrae and skull. This paper reports an atypical case of primary chondroblastic osteosarcoma of the rib with esophageal metastasis in a dog. The patient had muffled heart sounds on auscultation, expiratory dyspnea, and severe dehydration. Thoracic radiography showed generalized enlargement of the heart silhouette, suggestive of pericardial effusion. Because of a suspicion of intrathoracic neoplasia and the poor general state of the patient, euthanasia was advised. Necropsy revealed a neoplastic mass within the thoracic cavity, adhered to a rib and the sternum and pericardial sac, in addition to a metastatic mass in the esophagus. Histopathological examination confirmed the diagnosis of this neoplasia. This report describes an unusual case of primary chondroblastic osteosarcoma of the rib in a dog with metastasis in the esophagus. It is considered unusual because of the location of the tumoral mass inside the thoracic cavity and external adhesion to the pericardial sac.  

Osteossarcoma condroblástico atípico no esqueleto axial em cão / Atypical chondroblastic osteosarcoma in the axial skeleton in a dog

O Osteossarcoma é o tumor ósseo maligno mais comum nos cães, acometendo com maior freqûência animais de média idade a idosos. É um tumor de origem mesenquimal, com grande potencial para o desenvolvimento de metástases, sendo caracterizado pelo seu comportamento agressivo e invasivo. No esqueleto axial, o osteossarcoma primário é considerado raro, pode ocorrer nas costelas, esterno, vértebras e ossos e crânio, além disso, também pode ocorrer no osso pélvico. Este trabalho relata um caso atípico de osteossarcoma condroblástico primário de costela, com metástase esofágica, em um cão. O paciente apresentava abafamento dos sons cardíacos à auscultação, dispneia expiratória e grave desidratação. A radiografia torácica evidenciou o aumento generalizado da silhueta cardíaca, sugestiva de efusão pericárdica. Devido a suspeita de neoplasia intratorácica e ao estado geral ruim do paciente foi realizada eutanásia e a necropsia revelou a massa neoplásica dentro da cavidade torácica, aderida à costela, ao esterno e ao saco pericárdico, além de uma massa metastática localizada no esôfago. O exame histopatológico confirmou o diagnóstico desta neoplasia. Este relato trata-se de um caso atípico de osteossarcoma condroblástico primário de costela em cão, com metástase no esôfago, sendo considerado atípico devido a localização da massa neoplásic

Osteosarcoma is the most common malignant bone tumor in dogs, most frequently affecting middleto old-aged animals. It is a tumor of mesenchymal origin with great potential for the development of metastases, and is characterized by its aggressive and invasive behavior. In the axial skeleton, primary osteosarcoma is rare but may occur in the ribs, sternum, vertebrae and skull. This paper reports an atypical case of primary chondroblastic osteosarcoma of the rib with esophageal metastasis in a dog. The patient had muffled heart sounds on auscultation, expiratory dyspnea, and severe dehydration. Thoracic radiography showed generalized enlargement of the heart silhouette, suggestive of pericardial effusion. Because of a suspicion of intrathoracic neoplasia and the poor general state of the patient, euthanasia was advised. Necropsy revealed a neoplastic mass within the thoracic cavity, adhered to a rib and the sternum and pericardial sac, in addition to a metastatic mass in the esophagus. Histopathological examination confirmed the diagnosis of this neoplasia. This report describes an unusual case of primary chondroblastic osteosarcoma of the rib in a dog with metastasis in the esophagus. It is considered unusual because of the location of the tumoral mass inside the thoracic cavity and external adhesion to the pericardial sac.