Bubaline Breeding And Stem Cells Biotechnology: A Brief Review / Bubalinocultura E Biotecnologia Das Células-Tronco: Uma Breve Revisão / Bubalinocultura Y Biotecnologia De Células-Tronco: Una Breve Revisión

Buffaloes are dairy, meat and work farm animals very adapted to tropical regions, with large productivity and economic potential in several countries, including Brazil. In some states, the lack of technology in buffalo farming has increased reproductive and sanitary problems, turning imminent the extinction of these animals. In this contest, studies related to stem cell biotechnology have resulted in other possible utilization of buffaloes as experimental model, allowing the expansion of knowledge in this specie in particular cell characteristics. Stem cells have been the subject of many studies in several species, nevertheless buffaloes studies are scarce. Thus, this review aims to assemble and connect buffaloes and stem cells biotechnology studies to demonstrate the importance of research to increase the advancement of these two fields.(AU)

A Bubalinocultura abrange animais de tripla aptidão muito adaptados aos climas tropicais e com grande potencial produtivo e econômico em vários países, inclusive no Brasil. Em algumas regiões, a falta de tecnificação na produção de bubalinos tem agravado problemas reprodutivos e sanitários, tornando iminente a extinção desses animais. Nesse contexto, estudos relacionados à biotecnologia de células-tronco têm indicado resultados que viabilizam a utilização de búfalos como modelo experimental, além de permitir a ampliação dos conhecimentos acerca da espécie e de seu comportamento celular característico. As células-tronco têm sido alvo de muitas pesquisas em várias espécies, porém os estudos com bubalinos ainda são escassos. Desta forma, o objetivo dessa revisão foi reunir estudos relacionados à bubalinocultura e biotecnologia de células-tronco e demonstrar a importância das pesquisas que contribuem para o avanço dessas duas áreas.(AU)

La Bubalinocultura abarca animales de triple aptitud muy adaptados a los climas tropicales y con gran potencial productivo y económico en varios países, incluso en Brasil. En algunas regiones, la falta de tecnificación en la producción de bufalinos ha agravado problemas reproductivos y sanitarios, haciendo inminente la extinción de estos animales. En ese contexto, Estudios relacionados con la biotecnología de células madre han indicado resultados que viabilizan la utilización de búfalos como modelo experimental, además de permitir la ampliación de los conocimientos sobre la especie y su comportamiento celular característico. Las células madre han sido objeto de muchas investigaciones en várias espécies, pero los estudios con bubalinos todavía son escasos. De esta forma, el objetivo de esta revisión fue reunir estudios relacionados con la bubalinocultura y biotecnología de células madre y demostrar la importancia de las investigaciones que contribuyen al avance de estas dos áreas.(AU)

Bubaline Breeding And Stem Cells Biotechnology: A Brief Review / Bubalinocultura E Biotecnologia Das Células-Tronco: Uma Breve Revisão / Bubalinocultura Y Biotecnologia De Células-Tronco: Una Breve Revisión

Buffaloes are dairy, meat and work farm animals very adapted to tropical regions, with large productivity and economic potential in several countries, including Brazil. In some states, the lack of technology in buffalo farming has increased reproductive and sanitary problems, turning imminent the extinction of these animals. In this contest, studies related to stem cell biotechnology have resulted in other possible utilization of buffaloes as experimental model, allowing the expansion of knowledge in this specie in particular cell characteristics. Stem cells have been the subject of many studies in several species, nevertheless buffaloes studies are scarce. Thus, this review aims to assemble and connect buffaloes and stem cells biotechnology studies to demonstrate the importance of research to increase the advancement of these two fields.

A Bubalinocultura abrange animais de tripla aptidão muito adaptados aos climas tropicais e com grande potencial produtivo e econômico em vários países, inclusive no Brasil. Em algumas regiões, a falta de tecnificação na produção de bubalinos tem agravado problemas reprodutivos e sanitários, tornando iminente a extinção desses animais. Nesse contexto, estudos relacionados à biotecnologia de células-tronco têm indicado resultados que viabilizam a utilização de búfalos como modelo experimental, além de permitir a ampliação dos conhecimentos acerca da espécie e de seu comportamento celular característico. As células-tronco têm sido alvo de muitas pesquisas em várias espécies, porém os estudos com bubalinos ainda são escassos. Desta forma, o objetivo dessa revisão foi reunir estudos relacionados à bubalinocultura e biotecnologia de células-tronco e demonstrar a importância das pesquisas que contribuem para o avanço dessas duas áreas.

La Bubalinocultura abarca animales de triple aptitud muy adaptados a los climas tropicales y con gran potencial productivo y económico en varios países, incluso en Brasil. En algunas regiones, la falta de tecnificación en la producción de bufalinos ha agravado problemas reproductivos y sanitarios, haciendo inminente la extinción de estos animales. En ese contexto, Estudios relacionados con la biotecnología de células madre han indicado resultados que viabilizan la utilización de búfalos como modelo experimental, además de permitir la ampliación de los conocimientos sobre la especie y su comportamiento celular característico. Las células madre han sido objeto de muchas investigaciones en várias espécies, pero los estudios con bubalinos todavía son escasos. De esta forma, el objetivo de esta revisión fue reunir estudios relacionados con la bubalinocultura y biotecnología de células madre y demostrar la importancia de las investigaciones que contribuyen al avance de estas dos áreas.

Isolation, culture, characterization and cryopreservation of stem cells derived from amniotic mesenchymal layer and umbilical cord tissue of bovine fetuses / Isolamento, cultura, caracterização e criopreservação de células tronco derivadas de camada amniótica mesenquimal e de tecido do cordão umbilical de fetuses bovinos

Stem cells are undifferentiated cells with a high proliferation potential. These cells can be characterized by their in vivo ability to self-renew and to differentiate into specialized cell lines. The most used stem cell types, in both human and veterinary fields, are the mesenchymal stem cells (MSC) derived from bone marrow and adipose tissue. Nowadays, there is a great interest in using stem cells derived from fetal tissues, such as amniotic membrane (AM) and umbilical cord tissue (UCT), which can be obtained non-invasively at delivery time. Due to the scarcity of studies in bovine species, the aim of this study was to isolate, characterize, differentiate and cryopreserve MSC derived from the mesenchymal layer of amniotic membrane (AM), for the first time, and umbilical cord tissue (UCT) of dairy cow neonates after assisted delivery (AD) and from fetus at initial third of pregnancy (IT) obtained in slaughterhouse. Cells were isolated by enzymatic digestion of the tissue fragments with 0.1% collagenase solution. Six samples of AM and UCT at delivery time and six samples of AM and UCT at first trimester of pregnancy were subjected to morphology evaluation, imunophenotype characterization, in vitro osteogenic, adipogenic and chondrogenic differentiation and viability analysis after cryopreservation. All samples showed adherence to plastic and fibroblast-like morphology. Immunocytochemistry revealed expression of CD 44, NANOG and OCT-4 and lack of expression of MHC II in MSC from all samples. Flow cytometry demonstrated that cells from all samples expressed CD 44, did not or low expressed CD 34 (AM: IT-0.3%a, AD-3.4%b; UCT: 0.4%, 1.4%) and MHC II (AM: IT-1.05%a, AD-9.7%b; UCT: IT-0.7%a, AD-5.7%b). They were also capable of trilineage mesenchymal differentiation and showed 80% viability after cryopreservation. According to the results, bovine AM and UCT-derived cells, either obtained at delivery time or from slaughterhouse, are a painless and non-invasive source of MSC and can be used for stem cell banking.(AU)

As células tronco mesenquimais (CTMs) estão presentes na maioria dos tecidos adultos e possuem grande capacidade de multiplicação. Quando cultivadas in vitro são capazes de se auto renovar e dar origem a novos tipos celulares. As células tronco mais utilizadas, tanto na medicina humana como na medicina veterinária são as células tronco mesenquimais derivadas da medula óssea e do tecido adiposo. Atualmente, uma grande tendência para a utilização de CTMs obtidas de tecidos fetais, como a membrana amniótica (MA), matriz extravascular do cordão umbilical (TCU) e sangue do cordão umbilical (SCU) pode ser observada, já que estas fontes podem ser colhidas no momento do parto por uma técnica não invasiva. Dessa forma, o objetivo deste estudo foi isolar, caracterizar, diferenciar e criopreservar CTMs obtidas de MA e TCU de fetos bovinos colhidos no momento do parto e de fetos do terço inicial da gestação em abatedouro-frigorífico. As células foram recuperadas por meio de digestão enzimática tecidual, realizada com solução de colagenase 0,1%. Foram colhidas amostras de MA e TCU no momento do parto (n=6) e de MA e TCU no terço inicial de gestação (n=6), as quais foram submetidas às análises morfológicas, imunofenotípica por imunocitoquímica e citometria de fluxo, diferenciações in vitro nas linhagens osteogênica, adipogênica e condrogênica e ainda, avaliação da viabilidade após a criopreservação por citometria de fluxo. Todas as amostras dos diferentes grupos demonstraram adesão ao plástico e morfologia fibroblastóide. No ensaio imunocitoquímico todas as amostras foram imunomarcadas para CD44, NANOG e Oct-4, com ausência de marcação para MHC II. Na análise imunofenotipica por citometria de fluxo, todas as amostras apresentaram marcação para CD44, ausência de marcação para ou baixíssima expressão de CD34 (MA: TI-0,3%a, PA-3.4%b; TCU: TI-0,4%, PA-1.4%) e nula ou baixa expressão de MHC II (MA: TI-1.5%a, PA-9.7%b; UCT: TI-0.7%a, PA-5.7%b. Apresentaram também capacidade de diferenciação in vitro nas três linhagens mesodermais e quando analisadas pós criopreservação por citometria de fluxo, todas as amostras apresentaram viabilidade de 80%. Estes resultados indicam que MA e TCU, obtidos tanto no momento de parto como em abatedouro, de fetos bovinos podem ser utilizados como fonte não invasiva e indolor de CTMs e possibilitam a formação de bancos de armazenamento de células.(AU)

Isolation, culture, characterization and cryopreservation of stem cells derived from amniotic mesenchymal layer and umbilical cord tissue of bovine fetuses / Isolamento, cultura, caracterização e criopreservação de células tronco derivadas de camada amniótica mesenquimal e de tecido do cordão umbilical de fetuses bovinos

Stem cells are undifferentiated cells with a high proliferation potential. These cells can be characterized by their in vivo ability to self-renew and to differentiate into specialized cell lines. The most used stem cell types, in both human and veterinary fields, are the mesenchymal stem cells (MSC) derived from bone marrow and adipose tissue. Nowadays, there is a great interest in using stem cells derived from fetal tissues, such as amniotic membrane (AM) and umbilical cord tissue (UCT), which can be obtained non-invasively at delivery time. Due to the scarcity of studies in bovine species, the aim of this study was to isolate, characterize, differentiate and cryopreserve MSC derived from the mesenchymal layer of amniotic membrane (AM), for the first time, and umbilical cord tissue (UCT) of dairy cow neonates after assisted delivery (AD) and from fetus at initial third of pregnancy (IT) obtained in slaughterhouse. Cells were isolated by enzymatic digestion of the tissue fragments with 0.1% collagenase solution. Six samples of AM and UCT at delivery time and six samples of AM and UCT at first trimester of pregnancy were subjected to morphology evaluation, imunophenotype characterization, in vitro osteogenic, adipogenic and chondrogenic differentiation and viability analysis after cryopreservation. All samples showed adherence to plastic and fibroblast-like morphology. Immunocytochemistry revealed expression of CD 44, NANOG and OCT-4 and lack of expression of MHC II in MSC from all samples. Flow cytometry demonstrated that cells from all samples expressed CD 44, did not or low expressed CD 34 (AM: IT-0.3%a, AD-3.4%b; UCT: 0.4%, 1.4%) and MHC II (AM: IT-1.05%a, AD-9.7%b; UCT: IT-0.7%a, AD-5.7%b). They were also capable of trilineage mesenchymal differentiation and showed 80% viability after cryopreservation. According to the results, bovine AM and UCT-derived cells, either obtained at delivery time or from slaughterhouse, [...](AU)

As células tronco mesenquimais (CTMs) estão presentes na maioria dos tecidos adultos e possuem grande capacidade de multiplicação. Quando cultivadas in vitro são capazes de se auto renovar e dar origem a novos tipos celulares. As células tronco mais utilizadas, tanto na medicina humana como na medicina veterinária são as células tronco mesenquimais derivadas da medula óssea e do tecido adiposo. Atualmente, uma grande tendência para a utilização de CTMs obtidas de tecidos fetais, como a membrana amniótica (MA), matriz extravascular do cordão umbilical (TCU) e sangue do cordão umbilical (SCU) pode ser observada, já que estas fontes podem ser colhidas no momento do parto por uma técnica não invasiva. Dessa forma, o objetivo deste estudo foi isolar, caracterizar, diferenciar e criopreservar CTMs obtidas de MA e TCU de fetos bovinos colhidos no momento do parto e de fetos do terço inicial da gestação em abatedouro-frigorífico. As células foram recuperadas por meio de digestão enzimática tecidual, realizada com solução de colagenase 0,1%. Foram colhidas amostras de MA e TCU no momento do parto (n=6) e de MA e TCU no terço inicial de gestação (n=6), as quais foram submetidas às análises morfológicas, imunofenotípica por imunocitoquímica e citometria de fluxo, diferenciações in vitro nas linhagens osteogênica, adipogênica e condrogênica e ainda, avaliação da viabilidade após a criopreservação por citometria de fluxo. Todas as amostras dos diferentes grupos demonstraram adesão ao plástico e morfologia fibroblastóide. No ensaio imunocitoquímico todas as amostras foram imunomarcadas para CD44, NANOG e Oct-4, com ausência de marcação para MHC II. Na análise imunofenotipica por citometria de fluxo, todas as amostras apresentaram marcação para CD44, ausência de marcação para ou baixíssima expressão de CD34 (MA: TI-0,3%a, PA-3.4%b; TCU: TI-0,4%, PA-1.4%) e nula ou baixa expressão de MHC II (MA: TI-1.5%a, PA-9.7%b; UCT: TI-0.7%a, PA-5.7%b. [...](AU)

Efeito Do Cloprostenol Sódico Na Involução Uterina, Progesterona E Concentração De 13,14-Dihydro-15-Keto Prostaglandina F2αde Vacas Multíparas Bos Taurus Indicus / Effect Of Cloprostenol Sodium On Uterine Involution, Progesterone And 13,14-Dihydro-15-Keto Prostaglandin F2α Concentrations Of Multiparous Bos Taurus Indicus Cows / Efecto Del Cloprostenol Sódico En La Involución Uterina, Concentraciones De Progesterona Y 13,14-Dihidro-15-Keto Prostaglandina F2α De Vacas Multíparas Bos Taurus Indicus

Este estudo visou avaliar os efeitos do cloprostenol sódico na involução uterina, dosagem de progesterona (P4) e 13,14-dihydro-15-keto prostaglandina F2α (PGFM) e atividade folicular em vacas Nelore multíparas tratadas ou não com cloprostenol sódico nos dias 1 e 4 pós-parto (D0= nascimento), bem como testar a hipótese que o tratamento promove uma involução uterina mais rápida e retorno a atividade cíclica normal no puerpério. Para isso, foi feito ultrassom, palpação transretal, exame vaginoscópicoe determinação da concentração de P4 e PGFM nos dias 1, 7, 14, 28, 35 e 42 pós-parto (D0= nascimento). A vaginoscopia avaliou o óstio cervical (Escore 1 a 3) e descarga cervical (escore 1 a 5), a palpação transretal avaliou a involução uterina (escore 1 a 3) e o ultrassom avaliou o diâmetro dos folículos, tamanho dos cornos uterino e acumulo de fluido intrauterino (escore 0 a 3). O tratamento influenciou na descarga cervical (P= 0.034), e nas outras variáveis foi observada a influência do momento (P>0,05). Baseado nestes resultados, nós acreditamos que o uso desse protocolo nos animais com boa seleção genética, manejo e saudáveis pode ser desnecessário e promove gastos adicionais.(AU)

This study aimed to evaluate the effects of cloprostenol sodium at uterine involution and hormonal dosage of progesterone (P4) and 13,14-dihydro-15-keto prostaglandin F2α (PGFM) and follicular activity on multiparous Nelore cows treated or not with cloprostenol sodium on days 1 and 4 postpartum (D0= birth), as well as test the hypothesis that treatment promotes a faster uterine involution and return to normal cyclical activity at puerperium. For this, it was done ultrasound, transretal palpation, vaginoscopy exams and determination of concentration of P4 and PGFM on days 1, 7, 14, 28, 35 and 42 postpartum (D0= birth). Vaginoscopy evaluated cervical ostium (score 1 to 3) and cervical discharge (score 1 to 5), transrectal palpation evaluated uterine involution (score 1 to 3) and ultrasound evaluated the diameter of follicles, size of uterine horn and intrauterine fluid accumulation (score 0 to 3). Treatment influenced at cervical discharge (P= 0.034), and on the other variables it was observed influence of moment (P>0.05). Based on the results, we believe that the use of this protocol inanimals with good selection genetic, management and health can be unnecessary and promote additional spending.(AU)

El objetivo del estudio fue evaluar el efecto del cloprostenol sódico en la involución uterina y la concentración sérica de progesterona (P4) y 13,14-dihidro-15-keto prostaglandina F2α (PGFM) y actividad folicular en vacas multíparas Nelore tratadas o no, con cloprostenol sódico en los días 1 y 4 posparto (D0= día del nacimiento), de igual forma, comprobar la hipótesis de que el tratamiento promueve una involución uterina más rápida y un retorno de la actividad cíclica normal en el puerperio. Fue realizada ecografía, palpación transrectal, vaginoscopia y determinación de la concentración sérica de P4 y PGFM en los días 1, 7, 14, 28, 35, y 42 posparto (D0= día del nacimiento). La vaginoscopia evaluó el ostium cervical (escala de 1-3) y descarga cervical (escala de 1-5), la palpación transrectal determinó la involución uterina (escala de 1-3) y la ecografía evaluó el diámetro folicular, tamaño de los cuernos uterinos y la acumulación intrauterina de fluidos (escala de 0-3). El tratamiento influyó en la descarga cervical (P= 0.034), para las demás variables fue observado efecto del momento (P>0.05). Basados en los resultados, creemos que el uso de este protocolo en animales con buen manejo, salud y selección genética es innecesario y demanda gastos adicionales.(AU)

Efeito Do Cloprostenol Sódico Na Involução Uterina, Progesterona E Concentração De 13,14-Dihydro-15-Keto Prostaglandina F2αde Vacas Multíparas Bos Taurus Indicus / Effect Of Cloprostenol Sodium On Uterine Involution, Progesterone And 13,14-Dihydro-15-Keto Prostaglandin F2α Concentrations Of Multiparous Bos Taurus Indicus Cows / Efecto Del Cloprostenol Sódico En La Involución Uterina, Concentraciones De Progesterona Y 13,14-Dihidro-15-Keto Prostaglandina F2α De Vacas Multíparas Bos Taurus Indicus

Este estudo visou avaliar os efeitos do cloprostenol sódico na involução uterina, dosagem de progesterona (P4) e 13,14-dihydro-15-keto prostaglandina F2α (PGFM) e atividade folicular em vacas Nelore multíparas tratadas ou não com cloprostenol sódico nos dias 1 e 4 pós-parto (D0= nascimento), bem como testar a hipótese que o tratamento promove uma involução uterina mais rápida e retorno a atividade cíclica normal no puerpério. Para isso, foi feito ultrassom, palpação transretal, exame vaginoscópicoe determinação da concentração de P4 e PGFM nos dias 1, 7, 14, 28, 35 e 42 pós-parto (D0= nascimento). A vaginoscopia avaliou o óstio cervical (Escore 1 a 3) e descarga cervical (escore 1 a 5), a palpação transretal avaliou a involução uterina (escore 1 a 3) e o ultrassom avaliou o diâmetro dos folículos, tamanho dos cornos uterino e acumulo de fluido intrauterino (escore 0 a 3). O tratamento influenciou na descarga cervical (P= 0.034), e nas outras variáveis foi observada a influência do momento (P>0,05). Baseado nestes resultados, nós acreditamos que o uso desse protocolo nos animais com boa seleção genética, manejo e saudáveis pode ser desnecessário e promove gastos adicionais.

This study aimed to evaluate the effects of cloprostenol sodium at uterine involution and hormonal dosage of progesterone (P4) and 13,14-dihydro-15-keto prostaglandin F2α (PGFM) and follicular activity on multiparous Nelore cows treated or not with cloprostenol sodium on days 1 and 4 postpartum (D0= birth), as well as test the hypothesis that treatment promotes a faster uterine involution and return to normal cyclical activity at puerperium. For this, it was done ultrasound, transretal palpation, vaginoscopy exams and determination of concentration of P4 and PGFM on days 1, 7, 14, 28, 35 and 42 postpartum (D0= birth). Vaginoscopy evaluated cervical ostium (score 1 to 3) and cervical discharge (score 1 to 5), transrectal palpation evaluated uterine involution (score 1 to 3) and ultrasound evaluated the diameter of follicles, size of uterine horn and intrauterine fluid accumulation (score 0 to 3). Treatment influenced at cervical discharge (P= 0.034), and on the other variables it was observed influence of moment (P>0.05). Based on the results, we believe that the use of this protocol inanimals with good selection genetic, management and health can be unnecessary and promote additional spending.

El objetivo del estudio fue evaluar el efecto del cloprostenol sódico en la involución uterina y la concentración sérica de progesterona (P4) y 13,14-dihidro-15-keto prostaglandina F2α (PGFM) y actividad folicular en vacas multíparas Nelore tratadas o no, con cloprostenol sódico en los días 1 y 4 posparto (D0= día del nacimiento), de igual forma, comprobar la hipótesis de que el tratamiento promueve una involución uterina más rápida y un retorno de la actividad cíclica normal en el puerperio. Fue realizada ecografía, palpación transrectal, vaginoscopia y determinación de la concentración sérica de P4 y PGFM en los días 1, 7, 14, 28, 35, y 42 posparto (D0= día del nacimiento). La vaginoscopia evaluó el ostium cervical (escala de 1-3) y descarga cervical (escala de 1-5), la palpación transrectal determinó la involución uterina (escala de 1-3) y la ecografía evaluó el diámetro folicular, tamaño de los cuernos uterinos y la acumulación intrauterina de fluidos (escala de 0-3). El tratamiento influyó en la descarga cervical (P= 0.034), para las demás variables fue observado efecto del momento (P>0.05). Basados en los resultados, creemos que el uso de este protocolo en animales con buen manejo, salud y selección genética es innecesario y demanda gastos adicionales.

Considerações a respeito do pós-parto em bovinos / Considerations about the postpartum in cattle / Consideraciones sobre el período después del parto en el ganado

O puerpério é conhecido como o período que se inicia após o parto e persiste até o restabelecimento da condição de um animal não gestante. Compreendem na liberação dos restos placentários, involução uterina e mecanismos tais como contração uterina e digestão enzimática contribuem para a correta execução desses processos. Sua duração é variável e dependente de vários fatores tais como escore de condição corporal (ECC), produção leiteira, nutrição, condição uterina, entre outros. Tem-se também que para o estabelecimento de nova prenhez, é necessário que ocorra o retorno à ciclicidade por meio do crescimento, maturação e ovulação de um folículo e oócito sadios. Tal fato pode ser afetado pela presença do bezerro, amamentação e ECC em bovinos de corte e balanço energético, escore corporal, parição, estação do ano e doenças em bovinos de leite. Adicionalmente, é de extrema importância a característica do útero para o restabelecimento do estado reprodutivo fisiológico. Doenças uterinas podem afetar na liberação de substâncias que podem ser responsáveis pelo encurtamento ou prolongamento dos ciclos ovarianos, o que pode ocasionar perdas econômicas pelo fato de não atingir-se o desejável de produção de um bezerro/vaca/ano.

The postpartum period is known as the period that begins after birth and persists until the recovery of the condition of an animal that is not pregnant. They include the release of placental membranes, the uterine involution and mechanisms such as uterine contraction and enzymatic digestion contribute to the proper execution of these processes. Its duration is variable and dependent on several factors such as body condition score (BCS), milk production, nutrition, uterine condition, among others. It has also for the establishment of new pregnancy, it is necessary the return to cyclicity through growth, maturation and ovulation of a healthy follicle and oocyte. This can be affected by the presence of the calf, breast-feeding and BCS in beef cattle and energy balance, body condition score, parity, season and disease in dairy cattle. Additionally, it is extremely important the characteristic of the uterus for restoration, reproductive physiology. Uterine diseases can affect the release of substances that may be responsible for shortening or lengthening of ovarian cycles, which can cause economic losses because of not achieving is desirable to produce a calf / cow / year.

El puerperio es conocido como el periodo que se inicia después del parto y persiste hasta el restablecimiento de la condición de un animal no gestante. Comprende desde la liberación de los restos placentarios, involución uterina y mecanismos tales como contracción uterina y digestión enzimática, que contribuyen para la correcta ejecución de estos procesos. Su duración es variable y depende de varios factores, como condición corporal (CC), producción lechera, nutrición, estado del útero, entre otros. Para el restablecimiento de una nueva preñez, es necesario que ocurra el retorno del ciclo estral por medio del crecimiento, maduración y ovulación de un folículo y oocito sanos. Esto puede ser afectado por la presencia del ternero, amamantamiento y condición corporal en bovinos de corte y balance energético, condición corporal, parto, estación del año y enfermedades en bovinos de leche. Adicionalmente, es de extrema importancia la característica del útero para el restablecimiento del estado reproductivo fisiológico. Enfermedades uterinas pueden afectar la liberación de sustancias que pueden ser responsables del acortamiento o prolongación de los ciclos ovarianos, lo que puede ocasionar perdidas económicas por el hecho de no alcanzar lo deseado de producción de 1 ternero/vaca/año.

Isolamento, caracterização e diferenciação de células-tronco mesenquimais do líquido amniótico equino obtido em diferentes idades gestacionais / Isolation, characterization and differentiation of mesenchymal stem cells derived from equine amniotic fluid obtained from different gestacional ages

O interesse nas pesquisas com células-tronco derivadas de anexos fetais de diversas espécies cresceu exponencialmente nas últimas décadas em virtude de serem fontes de células-tronco adultas com potencial de diferenciação em diversas linhagens celulares que apresentam pouca ou nenhuma imunogenicidade, apresentando-se assim como alternativa de grande importância para a formação de bancos celulares. Apesar do crescente interesse, os estudos para espécie equina ainda são escassos. O objetivo deste trabalho foi isolar, caracterizar e diferenciar células-tronco mesenquimais (CTMs) derivadas do líquido amniótico equino obtidas do terço inicial, médio e final da gestação (LA-CTMs), comparando suas características. Foram colhidas 23 amostras de líquido amniótico as quais foram submetidas às análises morfológica, imunocitoquímica, imunofenotípica por citometria de fluxo e às diferenciações osteogênica, adipogênica e condrogênica in vitro. Todas as amostras demonstraram adesão ao plástico e morfologia fibroblastóide. No ensaio imunocitoquímico as células de todos os grupos foram imunomarcadas para CD44, PCNA e vimentina com ausência de marcação para citoqueratina e Oct-4. Na citometria de fluxo observou-se a expressão de CD44 e CD90 e ausência de expressão de CD34, sendo que os marcadores CD44 e CD90 mostraram padrão de expressão decrescente em relação ao desenvolvimento gestacional. As amostras obtidas de todas as fases da gestação foram capazes de diferenciação nas linhagens osteogênica, condrogênica e adipogênica. Portanto, as células obtidas do líquido amniótico apresentaram características morfológicas, imunofenotípicas e potencial de diferenciação típicos das CTMs, demonstrando que a colheita pode ser realizada em qualquer fase gestacional. No entanto, mais pesquisas devem ser realizadas principalmente quanto à expressão de marcadores de pluripotencialidade (como o Oct-4) e ao seu potencial de diferenciação em linhagens extra mesodermais já relatados na literatura.(AU)

The interest in stem cells derived from fetal annexes of many species has exponentially increased during the last decades, because they are adult stem cell sources with potential of differentiation in several cell lineages; which present little or no immunogenicity and are an alternative with great importance for storage cell banks. Despite the rising interest, studies for the equine species are still rare. The aim of this study was to isolate, characterize and differentiate mesenchymal stem cells derived from equine amniotic fluid obtained from initial, middle and late third of gestation (AF-MSCs), and compare their results. Twenty three samples from equine amniotic fluid were evaluated by morphological, immunocytochemical and immunophenotypical (Flow cytometer) assays and osteogenic, adipogenic and chondrogenic in vitro differentiation. All samples demonstrated plastic adhesion and fibroblastoid morphology. The immunocytochemical assay demonstrated cells from all the studied groups were positive for CD44, PCNA and vimentin and negative for cytokeratin and Oct-4. Flow cytometry demonstrated expression of CD44 and CD90 and no expression of CD34, where CD44 and CD90 markers presented decreasing pattern of expression in relation to the gestational development. All samples collected from all gestational phases were capable to differentiate in osteogenic, chondrogenic and adipogenic lineages. Thus, cells obtained from equine amniotic fluid presented morphological and immunophenotypical characteristics and potential of differentiation typical of MSCs showing that the collection can be performed at any stage of pregnancy. However, more studies should be performed about the expression of pluripotent markers as Oct-4 and the differentiation potential for extra mesodermal lineages prior demonstrated in the literature.(AU)

Isolation and characterization of equine peripheral blood-derived multipotent mesenchymal stromal cells / Isolamento e caracterização das células mesenquimais multipotentes estromais derivadas do sangue periférico equino

The objective of the study was to isolate, cultivate and characterize equine peripheral blood-derived multipotent mesenchymal stromal cells (PbMSCs). Peripheral blood was collected, followed by the isolation of mononuclear cells using density gradient reagents, and the cultivation of adherent cells. Monoclonal mouse anti-horse CD13, mouse anti-horse CD44, and mouse anti-rat CD90 antibodies were used for the immunophenotypic characterization of the surface of the PbMSCs. These cells were also cultured in specific media for adipogenic and chondrogenic differentiation. There was no expression of the CD13 marker, but CD44 and CD90 were expressed in all of the passages tested. After 14 days of cell differentiation into adipocytes, lipid droplets were observed upon Oil Red O (ORO) staining. Twenty-one days after chondrogenic differentiation, the cells were stained with Alcian Blue. Although the technique for the isolation of these cells requires improvement, the present study demonstrates the partial characterization of PbMSCs, classifying them as a promising type of progenitor cells for use in equine cell therapy.(AU)

O objetivo deste estudo foi isolar, cultivar e caracterizar as células mesenquimais multipotentes estromais derivadas do sangue periférico (SpCTMs) equino. O sangue periférico foi coletado, seguido do isolamento das células mononucleadas utilizando o reagente de gradiente de densidade e o cultivo das células aderentes. Os anticorpos monoclonais mouse anti-horse CD13, mouse anti-horse CD44 e mouse anti-rat CD90 foram utilizados para a caracterização imunofenotípica da superfície das SpCTMs. Estas células também foram cultivadas utilizando meio de cultura específico para a diferenciação adipogênica e condrogênica. Não houve expressão do marcador CD13, mas os marcadores CD44 e CD90 foram expressos em todas as passagens testadas. Após 14 dias da diferenciação das células em adipócitos, gotículas de lipídeos foram observados através da coloração com Oil Red O. Vinte e um dias após a diferenciação condrogênica, as células foram coradas com o Alcian Blue. Embora a técnica de isolamento destas células necessite ser otimizada, o presente estudo demonstra a caracterização parcial das SpCTMs, classificando-as como um tipo de células progenitoras promissoras para o uso na terapia celular em equinos.(AU)

Aplicação de células tronco guiada por ultrassom em lesão do nervo radial em cão - relato de caso

As células-tronco mesenquimais (CTMs)  são células  indiferenciadas que podem ser isoladas de diferentes tecidos, mas primariamente do estroma da medula óssea, e dão origem a tecidos conjuntivos, como ossos, cartilagens, gordura, bem como o sistema vascular e hematopoiético(1,3,4). Descobertas científicas têm demonstrado o potencial de aplicação terapêutico das  CTMs em enfermidades complexas ou lesões de difícil reparação, como as do sistema nervoso, em virtude das suas propriedades  regenerativas, antiinflamatórias e imunomoduladoras (3,4). Entretanto, é importante ressaltar que algumas dificuldades ainda são encontradas para o implante das CTMs no sistema nervoso central e periférico, particularmente em relação a forma de aplicação das células no foco de lesão. Sendo assim, a aplicação  guiada das CTMs com ultrassom se mostra uma alternativa viável para o sistema nervoso periférico, visto que é de fácil aplicação e baixo custo relativo(6). O ultrassom é eficiente na identificação de alterações dos nervos periféricos, para guiar procedimentos como biópsias e mais recentemente na Medicina Veterinária, para auxiliar na terapia celular (2,5). Nesse sentido, o objetivo deste trabalho é relatar um caso bem sucedido de implante de CTMs guiado com ultrassom para o tratamento de lesão de nervo radial em um cão.

Potencial de transdiferenciação neural das células-tronco mesenquimais da medula óssea de equino / Potential of neural transdifferentiation of mesenchymal stem cells from equine bone marrow

Os primeiros estudos demonstrando o potencial de trandiferenciação neural das células-tronco mesenquimais (CTMs) provenientes da medula óssea (MO) foram conduzidos em camundogos e humanos no início da década de 2000. Após esse período, o número de pesquisas e publicações com o mesmo propósito tem aumentado, mas com raros ou escassos estudos na espécie equina. Nesse sentindo, o objetivo desse trabalho foi avaliar o potencial in vitro da transdiferenciação neural das CTMs provenientes da MO de equinos utilizando-se dois protocolos: P1 (forksolin e ácido retinóico) e P2 (2-βmecarptoetanol). Após a confirmação das linhagens mesenquimais, pela positividade para o marcador CD90 (X=97,94%), negatividade para o marcador CD34 e resposta positiva a diferenciação osteogênica, as CTMs foram submetidas a transdiferenciação neural (P1 e P2) para avaliação morfológica e expressão dos marcadores neurais GFAP e β3 tubulina por citometria de fluxo. Os resultados revelaram mudanças morfológicas em graus variados entre os protocolos testados. No protocolo 1, vinte quatro horas após a incubação com o meio de diferenciação neural, grande proporção de células (>80%) apresentaram morfologia semelhante a células neurais, caracterizadas por retração do corpo celular e grande número de projeções protoplasmáticas (filopodia). Por outro lado, de forma comparativa, já nos primeiros 30 minutos após a exposição ao antioxidante β-mercaptoetanol (P2) as CTMs apresentaram rápida mudança morfológica caracterizada principalmente por retração do corpo celular e menor número de projeções protoplasmáticas. Também ficou evidenciado com o uso deste protocolo, menor aderência das células após tempo de exposição ao meio de diferenciação, quando comparado ao P1.(AU)

The first studies showing the potential of neural transdifferentiation of mesenchymal stem cells (MSCs) from bone marrow (BM) were conducted in camundogos and humans in the early 2000s. After this period, the number of research and publications with the same purpose increased, but with rare or scarce studies in horses. The aim of this study was to evaluate in vitro neuronal transdifferentiation potential of MSCs from equine BM using two protocols: P1 (forksolin and retinoic acid) and P2 (2-βmecarptoetanol). After confirming the mesenchymal lineages, by positivity for the marker CD90 (X=97.94%), negative for the marker CD34 and positive response for osteogenic differentiation, MSCs were subjected to neural transdifferentiation (P1 and P2) for morphological analysis and expression of neural markers GFAP and β3 tubulin by flow cytometry. The results revealed morphological changes in varying degrees between the tested protocols. In protocol 1, twenty four hours after incubation with the media of neural differentiation, a large proportion of cells (>80%) had similar morphology to neural cells, characterized by retraction of cellular body and a large number of cytoplasmic extension (filopodia). However, comparatively, within the first 30 minutes after exposure to the antioxidant β-mercaptoethanol (P2) MSCs showed rapid morphological changes characterized mainly by retraction of cellular body and less cytoplasmic extension.(AU)

Avaliação da eficácia de diferentes protocolos de preparo do Plasma Rico em Plaquetas para uso em Medicina Equina / Evaluating the effectiveness of different protocols for preparation of platelet rich plasma for use in equine medicine

O Plasma Rico em Plaquetas (PRP) é um preparado do sangue total que contém diversos fatores de crescimento responsáveis pela proliferação e diferenciação celular, angiogênese, como também pelo aumento da produção da matriz extracelular. Nesse sentido, o objetivo do presente estudo foi testar 10 protocolos diferentes de centrifugação para obtenção de PRP a partir do sangue total de equinos hígidos. Para isso foram utilizadas 10 amostras de 27mL de sangue total de cinco animais, as quais foram centrifugadas conforme cada protocolo proposto. Os resultados revelaram que os protocolos com menor força de centrifugação relativa resultaram em maior (p<0,05) concentração de plaquetas e, que não houve (p>0,05) influência do tempo de centrifugação em relação a essa variável. A influência do tempo foi observada apenas no número de leucócitos em protocolos com menor força de centrifugação relativa (FCR). Os quatro melhores protocolos, que obtiveram as maiores concentrações de plaquetas, foram submetidos à análise pelo teste de ELISA para dosar a quantidade de TGF-β que não revelou diferença (p>0,05) entre os protocolos.(AU)

Platelet-rich plasma (PRP) is a prepared of the whole blood which contains several growth factors responsible for cellular proliferation and differentiation, angiogenesis, and for the increase of the extracellular matrix. Thus, the aim of this study was to test 10 different centrifugation protocols to obtain PRP from the whole blood of healthy equines. Ten samples of 27mL of the whole blood of 5 healthy equines were used, which were centrifuged in accordance to the proposed protocols. The results showed that the protocols with less relative centrifugation force resulted in greater (p<0,05) platelets concentration. Also, platelets concentration was not influenced by varying the time of centrifugation. However, time did affect the number of leukocytes in some protocols. The best four protocols were analyzed by ELISA test to quantitate the amount of TGF-β, which revealed no difference (p> 0.05) between the protocols.(AU)

Platelet activation: ultrastructure and morphometry in platelet-rich plasma of horses / Ativação plaquetária: ultraestrutura e morfometria no plasma rico em plaquetas de equinos

This study was conducted to investigate the activation ability of the platelet-rich plasma (PRP) by pharmacological agents, as well as to verify the need or not of this activation for therapeutic use. The PRP was obtained from four healthy crossbred geldings aged 13 to 16 years (15±1years), and was processed for observation and quantification of the platelet morphology by using the transmission electron microscopy. All PRP samples were activated with 10 percent calcium chloride (CaCl2) solution, pure bovine thrombin or associated with CaCl2. The control (pure PRP) was not pharmacologically activated. In the pure PRP samples, 49 percent of the platelets were classified as state of activation uncertain, 41 percent as resting, 9 percent as fully activated and 1 percent as irreversibly damaged. Treatment with 10 percent CaCl2 provided a distribution of 54 percent platelets in state of activation uncertain, 24 percent as fully activated, 20 percent as resting, and 2 percent as irreversibly damaged. The platelet morphology of the bovine thrombin treated samples did not fit into classification adopted, as showing irregular shape with emission of large filamentous pseudopods, appearance of ruptured and whole granules in the remaining cytoplasm and extracellular environment. There was effect of the treatment on the platelet morphology (P=0.03). The 10 percent CaCl2 is an adequate platelet-activating agent. However, in cases the use of PRP under its liquid form is necessary, the use of pure PRP is recommended, since besides presenting an adequate percentage of fully activated platelets it also has significant amount of the resting type, which can be activated by substances found in the injured tissue.(AU)

O objetivo desse estudo foi investigar a capacidade de ativação do plasma rico em plaquetas (PRP) por substâncias farmacológicas, assim como verificar a necessidade ou não dessa ativação para uso terapêutico. O PRP foi obtido de quatro equinos mestiços hígidos, machos castrados, com 13 a 16 anos (15±1anos) de idade, e processado para observação e quantificação da morfologia plaquetária mediante a utilização da microscopia eletrônica de transmissão. Todas as amostras de PRP foram ativadas com cloreto de cálcio (CaCl2) a 10 por cento, trombina bovina pura ou associada a CaCl2. O controle (PRP puro) não foi ativado farmacologicamente. Nas amostras de PRP puro, 49 por cento das plaquetas foram classificadas como ativação incerta, 41 por cento em repouso, 9 por cento totalmente ativada e 1 por cento com dano irreversível. O tratamento com CaCl2 a 10 por cento proporcionou uma distribuição de 54 por cento de plaquetas com ativação incerta, 24 por cento totalmente ativada, 20 por cento em repouso, e 2 por cento como com dano irreversível. Amostras tratadas com trombina bovina apresentaram morfologia plaquetária que não se enquadraram na classificação adotada, apresentando forma irregular com emissão de grandes pseudópodes filamentosos, aspecto de rompimento e grânulos inteiros no citoplasma remanescente e meio extracelular. Houve efeito do tratamento sobre a morfologia plaquetária (P=0,03). O CaCl2 a 10 por cento é um adequado agente ativador de plaquetas. Entretanto, nos casos onde se faz necessário o uso de PRP na forma mais líquida, recomenda-se o uso do PRP puro, que além de apresentar uma adequada porcentagem de plaquetas totalmente ativadas, também possui importante quantidade do tipo em repouso, que pode ser ativado por substâncias presentes no tecido lesionado.(AU)

Aspectos morfológicos de biópsias musculares em equinos com miopatia sob forma de surto / Morphological features of muscle biopsies from horses of a myopathy outbreak

As miopatias em equinos são classificadas de acordo com aspectos clínicos, morfológicos e moleculares, em três grandes grupos: não associadas ao exercício, associadas ao exercício e devido alteração da condução elétrica do sarcolema. Apesar dos avanços no diagnóstico, a literatura ainda relata surtos de miopatia em equinos sem etiologia esclarecida em diversos países. O objetivo desse estudo foi descrever as alterações histológicas e histoquímicas de biópsias musculares de equinos acometidos por miopatia. Sete equinos da raça Quarto de Milha, com 18-24 meses de idade, apresentaram sinais clínicos de miopatia. Dentre esses animais, cinco apresentaram sinais subagudos leves a moderados e dois apresentaram sinais hiperagudos severos e decúbito lateral. Foram realizadas biópsias musculares utilizando a técnica percutânea, por agulha tipo Bergstrõm, no músculo glúteo médio em todos os animais acometidos. As amostras foram processadas por meio de técnicas histológicas (HE, Tricrômio de Gomori modificado) e histoquímicas (PAS, NADH, ATPase). Nos quadros clínicos mais leves, a principal alteração encontrada foi a presença de fibras vermelhas rajadas do tipo I e IIA, que estão associadas às alterações do metabolismo oxidativo e das funções mitocondriais, como ocorrem nas miopatias mitocondriais. Também foram observadas fibras atróficas do tipo I e IIA, além da presença de agregados subsarcolemais. Nos quadros mais severos o tecido muscular apresentou infiltrado inflamatório, aumento de colágeno, fagocitose, necrose, calcificação e regeneração muscular. Diante dos achados morfológicos, da resposta à terapia com vitamina E e Se e da baixa mortalidade quando comparado aos relatos de miopatia atípica, conclui-se que esse surto foi desencadeado por lesões mitocondriais, caracterizadas pelas fibras musculares vermelhas rajadas, possivelmente devido uma quebra da homeostase de vitamina E e Se, sendo compatível com o diagnóstico de miopatia nutricional.(AU)

Equine myopathies are classified according clinic, morphologic and molecular features in three groups: Non-exertional, exertional, and abnormal muscle membrane conduction. In spite the advances in diagnostic, the literature has reported outbreaks of equine myopathy without clear etiology in several countries. The aim of this study was to describe the histological and histochemical findings of muscle biopsies in an outbreak of equine myopathy. Seven 18 to 24-month-old Quarter horses showed clinical signs of myopathy. Five horses presented mild clinical signs and two horses had severe clinical signs with recumbency. Muscle biopsies were obtained from gluteal medium muscle by percutaneous technique with Bergstrom needle in all affected horses. Muscle samples were processed by histological (HE, modified gomori-trichrome) and histochemical (PAS, NADH, ATPase) technics. In animals with mild clinical signs, ragged red fibers type I and IIA, related to the oxidative metabolism dysfunction of mitochondria, was the main abnormality found. Muscle fiber atrophy and presence of subsarcolemmal aggregates in type I and IIA muscle fibers were also observed. More severe affected horses presented inflammatory infiltrate, proliferation of collagen, phagocytosis, necrosis and calcification. Based on the morphological findings, vitamin E therapy response associated with the low mortality when compared with atypical myopathy reports, We concluded that this outbreak was triggering for mitochondrial lesions, characterized by ragged red muscle fibers, probably due a breakdown homeostasis in vitamin E and Se, being compatible with nutritional myopathy diagnosis.(AU)

Componentes ricos em plaquetas na reparação de afecções tendo-ligamentosas e osteo-articulares em animais

Platelet-rich plasma and platelet concentrates are involved in growing factors. Both have great therapeutic potential. When the alpha-granules are released by the active platelet, they act in the lesion site stimulating the chemotaxis, the fiberplasia and the angiogenesis. They improve the regeneration of the tissue. Although these rich platelet components are easy to obtain and efficiently to prove by medicine and dentistry, their use on vet medicine is recent. So, much more control studies need to be done. This article reviews morphological aspects of platelets, action of growing factors and use of components rich in platelet in wound healing tendons, ligaments and osteo-articular structures.

O plasma rico em plaquetas e o concentrado de plaquetas são fontes de diversos fatores de crescimento, com grande potencial terapêutico. Uma vez liberados dos grânulos alfa das plaquetas ativadas, esses fatores atuarão no sítio da lesão, estimulando a quimiotaxia, fibroplasia e angiogênese, melhorando assim a reparação tecidual. Embora esses componentes ricos em plaquetas sejam de fácil obtenção e de eficácia comprovada na medicina humana e odontologia, a utilização desses componentes na medicina veterinária é relativamente recente, necessitando ainda de estudos controlados. Neste artigo, os aspectos morfológicos das plaquetas, a ação dos fatores de crescimento e a utilização de componentes ricos em plaquetas na reparação tecidual de estruturas tendo-ligamentosas e osteo-articulares são revisados.

Componentes ricos em plaquetas na reparação de afecções tendo-ligamentosas e osteo-articulares em animais

Platelet-rich plasma and platelet concentrates are involved in growing factors. Both have great therapeutic potential. When the alpha-granules are released by the active platelet, they act in the lesion site stimulating the chemotaxis, the fiberplasia and the angiogenesis. They improve the regeneration of the tissue. Although these rich platelet components are easy to obtain and efficiently to prove by medicine and dentistry, their use on vet medicine is recent. So, much more control studies need to be done. This article reviews morphological aspects of platelets, action of growing factors and use of components rich in platelet in wound healing tendons, ligaments and osteo-articular structures.

O plasma rico em plaquetas e o concentrado de plaquetas são fontes de diversos fatores de crescimento, com grande potencial terapêutico. Uma vez liberados dos grânulos alfa das plaquetas ativadas, esses fatores atuarão no sítio da lesão, estimulando a quimiotaxia, fibroplasia e angiogênese, melhorando assim a reparação tecidual. Embora esses componentes ricos em plaquetas sejam de fácil obtenção e de eficácia comprovada na medicina humana e odontologia, a utilização desses componentes na medicina veterinária é relativamente recente, necessitando ainda de estudos controlados. Neste artigo, os aspectos morfológicos das plaquetas, a ação dos fatores de crescimento e a utilização de componentes ricos em plaquetas na reparação tecidual de estruturas tendo-ligamentosas e osteo-articulares são revisados.

Componentes ricos em plaquetas na reparação de afecções tendo-ligamentosas e osteo-articulares em animais

Platelet-rich plasma and platelet concentrates are involved in growing factors. Both have great therapeutic potential. When the alpha-granules are released by the active platelet, they act in the lesion site stimulating the chemotaxis, the fiberplasia and the angiogenesis. They improve the regeneration of the tissue. Although these rich platelet components are easy to obtain and efficiently to prove by medicine and dentistry, their use on vet medicine is recent. So, much more control studies need to be done. This article reviews morphological aspects of platelets, action of growing factors and use of components rich in platelet in wound healing tendons, ligaments and osteo-articular structures.

O plasma rico em plaquetas e o concentrado de plaquetas são fontes de diversos fatores de crescimento, com grande potencial terapêutico. Uma vez liberados dos grânulos alfa das plaquetas ativadas, esses fatores atuarão no sítio da lesão, estimulando a quimiotaxia, fibroplasia e angiogênese, melhorando assim a reparação tecidual. Embora esses componentes ricos em plaquetas sejam de fácil obtenção e de eficácia comprovada na medicina humana e odontologia, a utilização desses componentes na medicina veterinária é relativamente recente, necessitando ainda de estudos controlados. Neste artigo, os aspectos morfológicos das plaquetas, a ação dos fatores de crescimento e a utilização de componentes ricos em plaquetas na reparação tecidual de estruturas tendo-ligamentosas e osteo-articulares são revisados.

Influência da monofenilbutazona associada ou não ao omeprazol sobre o sistema digestório e renal de pôneis hígidos / Influence of mofebutazone associated or not to omeprazole on the digestive and renal tracts of healthy ponies

Os objetivos deste trabalho foram averiguar se a monofenilbutazona causa efeitos colaterais no trato digestório e lesões renais em pôneis hígidos e verificar a capacidade do omeprazol em inibir a gênese de úlceras gástricas. O experimento foi executado em duas etapas. Na primeira foram utilizados seis pôneis, sendo três deles tratados diariamente por via intravenosa (IV) com as doses de 3, 4,5 ou 6mg kg-1 de monofenilbutazona durante 12 dias. Os demais, além de antiinflamatório, também receberam 3mg kg-1 de omeprazol. Já na segunda etapa foram incluídos quatro pôneis hígidos, sendo dois tratados com doses diárias de 4,5mg kg-1 de monofenilbutazona durante 12 dias e os demais com 5mL de NaCl a 0,9 por cento, por via IV. Todos os pôneis foram submetidos à gastroscopia antes e após cada etapa experimental. Adicionalmente, na primeira etapa, foram realizadas urinálise e determinação dos valores de variáveis hematológicas (hematócrito e proteína plasmática total) e bioquímicas (creatinina, albumina, Ca+2 e P+3). Na primeira etapa, apenas os dois pôneis tratados com 6mg kg-1 de monofenilbutazona apresentaram úlceras na região aglandular, ao longo da margo plicatus. Na segunda etapa, dois animais também apresentaram úlceras gástricas, sendo que um deles havia recebido apenas NaCl a 0,9 por cento. A ocorrência das úlceras não foi influenciada (P>0,05) pela administração e pela dose da monofenilbutazona, nem pela presença do omeprazol. O efeito da monofenilbutazona sobre as variáveis hematológicas e bioquímicas foi inexpressivo (P+3) ou ausente (hematócrito, proteína plasmática total, creatinina, albumina, Ca+2) (P>0,05). Os resultados obtidos permitem concluir que: a ocorrência de úlceras na região aglandular de pôneis hígidos não sofre a influência da aplicação e da dose de monofenilbutazona, quando administrada durante 12 dias; úlceras em grau 4 na região aglandular de pôneis não necessariamente estão acompanhadas de sintomatologia clínica...(AU)

This research aimed to investigate whether mofebutazone causes gastrointestinal and renal side effects in healthy ponies as well as to verify the capacity of omeprazole to inhibit the genesis of gastric ulcers. The experiment was carried out in two phases. In the first, six ponies were used, with three of them being treated daily with different doses (3, 4.5 and 6mg kg-1) of intravenous (IV) mofebutazone for 12 days. The other ponies were given 3mg kg-1 of omeprazole in addition to the anti-inflammatory drug. In the second phase, four ponies were included, with two of them being treated daily with 4.5mg kg-1 of mofebutazone for 12 days and the two remainders with 5mL of IV NaCl at 0.9 percent. All ponies underwent gastroscopy before and after each experimental phase. Additionally, in the first phase, urine, hematological (hematocrit, and total plasma protein) and biochemical (creatinine, albumin, Ca+2 and P+3) analysis were determined. In the first phase, only the two ponies treated with 6mg kg-1 of mofebutazone presented ulcers in the aglandular region along the margo plicatus. In the second phase, two animals also presented gastric ulcers, with one having received only NaCl at 0.9 percent solution. Ulcers occurrence was neither influenced (P>0.05) by the administration and dose of mofebutazone, nor by the presence of omeprazole. Mofebutazone effect on the hematological and biochemical variables was unremarkable (P+3) or absent (hematocrit, total plasma protein, creatinine, albumin, Ca+2) (P>0.05). Based on these results the following conclusions could be drawn: the occurrence of gastric ulcers in the aglandular region of healthy ponies was not influenced by application and dose of mofebutazone when administered for 12 days; grade four ulcers in the aglandular region of ponies may not be accompanied by clinical signs; healthy ponies tolerate application of up to 6mg kg-1 of IV mofebutazone for 12 days without the occurrence of renal...(AU)

Coleta, processamento, caracterização fenótipa das células-tronco mesenquimais e sua viabilidade de aplicação por via intratecal em equinos

O interesse terapêutico e biológico nas células-tronco tem aumentando nos últimos anos, fato este demonstrado pelo número crescente de pesquisas e publicações na área. Na espécie equina, as pesquisas envolvendo o uso da terapia celular com células-tronco mesenquimais (CTMs) estão focadas, particularmente para o tratamento de lesões tendíneas e osteoarticulares, havendo poucos relatos da sua utilização em outros tecidos, tais como o sistema nervoso. Desta forma, as vias de aplicação mais utilizadas até então para uso clínico em equino são as intralesionais e intra-articulares, carecendo assim na medicina equina de estudos pré-clínicos que avaliem a segurança de administração das CTMs em outras vias, tais como a intratecal por via liquórica. Nesse sentido, o objetivo geral deste estudo foi a obtenção, o cultivo e a caracterização das CTMs provenientes da medula óssea (MO) de equinos, além da avaliação da viabilidade e da segurança de aplicação dessas células autólogas por via intratecal através do espaço atlanto-occiptal. Também foi avaliado in vitro o potencial de transdiferenciação das CTMs-MO em fenótipos neurais, utilizando-se dois protocolos de diferenciação neural: P1 (forksolin e ácido retinóico) e P2 (2- mercaptoetanol). Ao término do cultivo primário, a análise imunofenotípica revelou a presença de CTMs com elevada expressão do marcador CD90, seguida de menor expressão para o marcador CD44 e ausência de expressão do marcador CD34. Nos ensaios de diferenciação nas tri-linhagens mesodermais ficou evidenciada a resposta positiva às diferenciações osteogênica (OST), condrogênica (CDG) e adipogênica (ADP) caracterizadas pela deposição de matriz extracelular rica em cálcio (OST), proteoglicanos e colágeno...

Biological and therapeutic interest in stem cells has increased in recent years, a fact demonstrated by the crescent number of research and publications in the area. In equine species, research involving the use of cell therapy with mesenchymal stem cells (MSCs) are focused, particularly for the treatment of tendineous and osteoarticular injuries, having scarces reports of its use in other tissues such as the nervous system. Thus, the pathways of administration most used so far for clinical use in equines are the intralesional and intra-articular, needing thereby in equine medicine of preclinical studies that asses the security of administration of MSCs in other pathways such as intrathecal by liquoric way. In this sense, the general aim of this study was the obtaining, cultivation and characterization of MSCs from bone marrow (BM) of equines, besides the evaluation of the feasibility and safety of application of these autologous cells by intrathecal pathway through atlanto-occipital space. It was also evaluated in vitro the potential of transdifferentiation of MSCs-MO in neural phenotypes, using two protocols of neural differentiation: P1 (forksolin and retinoic acid) and P2 (2- mercaptoethanol). At the end of the primary culture immunophenotypic analysis revealed the presence of MSCs with high expression of marker CD90, followed by the lower expression for the marker CD44 and absence of expression of marker CD34. In tests of differentiation in the tri-lineage mesodermal became evidenced the positive response to osteogenic (OST), chondrogenic (CDG) and adipogenic (ADP) differentiation characterized by the deposition of extracellular matrix rich in calcium (OST), proteoglycans and collagen II (CDG) and deposition of intracellular lipid droplets (ADP). In immunocytochemical characterization MSCs were...

Babesiose eqüina em potro neonato

Um potro da raça Mangalarga Marchador, com 48 horas de vida, foi admitido no hospital veterinário da Universidade Federal deViçosa, apresentando anemia, icterícia, aumento de temperatura, desidratação e impossibilidade de manter-se em estação. Oesfregaço sangüíneo comprovou alta infecção por Babesia equi, que também foi detectada no exame histopatológico do cérebro.