Acción del luz UV y riboflavina en inactivación da Leishmania en sangre canino mantenido en bolsas de transfusión / Action of ultraviolet light and riboflavin in the inactivation of Leishmania in canine blood stored in bags for transfusion / Ação da luz ultravioleta e da riboflavina na inativação de Leishmania em sangue canino conservado em bolsas para transfusão

Es extremadamente importante para la medicina de transfusión tener seguridad en procedimiento de transferencia de componentes de la sangre, lo que minimiza la aparición de transmisión de patógenos. Este estudio investigó la eficacia de la luz ultravioleta y riboflavina en la inactivación de Leishmania infantum chagasi en muestras de sangre de perros recogidos en bolsas de plástico para la transfusión. Para detectar bolsas de sangre positivos para ser utilizado en el experimento se realizó PCR convencionales de las bolsas tomadas de animales sintomáticos, la aspiración positiva de los ganglios linfáticos y IFA (título de 1: 640) a partir de CCZ Araçatuba-SP. Después de 21 días de almacenamiento a 4C la sangre canina parasitada se añadió a riboflavina a una concentración final de 50µM. A partir de entonces, la bolsa fue colocada en el iluminador a una longitud de onda de 365 nm de luz UV durante 30 a 45 minutos y se mantuvo sobre uno homogeneizador de bolsa de sangre. Para demostrar la inactivación se usaron 28 hámsteres (Mesocricetus auratus), machos, adultos. Siete animales fueron inoculados con la sangre sin tratamiento (grupo de leishmaniasis: GL); siete de sangre después de la adición de riboflavina (grupo de riboflavina: GRB); siete de sangre después del tratamiento con riboflavina asociada con luz ultravioleta durante 30 minutos (grupo tratado 1: GT30) y siete con la [...](AU)

It is extremely important for the transfusion medicine the safety in blood components transfer procedure, minimizing the occurrence of pathogen transmission. This study investigated the efficiency of ultraviolet light and riboflavin in the inactivation of Leishmania infantum chagasi in canine blood samples collected in plastic bags for transfusion. To detect positive blood bags to be used in the experiment, it was performed conventional PCR of the bags collected from symptomatic animals, with positive aspiration of lymph node and IFA (title 1: 640), from an epidemic region for the disease. After 21 days of storage at 4C, parasitized canine blood riboflavin was added to a final concentration of 50M. Thereafter, the bag was placed in the illuminator at a wavelength of 365 nm UV light for 30 to 45 minutes and maintained over a homogenizer blood bag. To prove the inactivation, they were used 28 hamsters (Mesocricetus auratus), adult, male. Seven animals were inoculated with the blood without treatment (group leishmaniasis: GL); seven, with blood after the addition of riboflavin (riboflavin group: GRB); seven, with blood after treatment with riboflavin associated with ultraviolet light for 30 minutes (treated group 1: GT30) and seven, with blood after treatment with riboflavin associated with ultraviolet light for 45 minutes (treated group 2: GT45). The animals were kept [...](AU)

É de extrema importância para a medicina transfusional que haja segurança no procedimento de transferência de hemocomponentes, minimizando a ocorrência da transmissão de patógenos. O presente trabalho investigou a eficiência da luz ultravioleta e riboflavina na inativação de Leishmania infantum chagasi em amostras de sangue canino, colhidas em bolsas plásticas para transfusão. Para detectar as bolsas de sangue positivas a serem utilizadas no experimento, foi realizada PCR convencional de sangue de bolsas colhidas de animais sintomáticos, positivos na punção aspirativa de linfonodo e na RIFI (título 1:640), procedentes do CCZ de região epidêmica para a enfermidade. Após 21 dias de armazenamento em temperatura de 4ºC, o sangue canino parasitado foi adicionado de riboflavina na concentração final de 50µM. Posteriormente, a bolsa foi colocada no iluminador a um comprimento de onda de 365 nm de luz UV por 30 e 45 minutos, sendo mantida sobre um homogeinizador de bolsa de sangue. Para comprovar a inativação, foram utilizados 28 hamsters (Mesocricetus auratus), machos e adultos. Sete animais foram inoculados com o sangue sem tratamento (grupo leishmaniose: GL); sete, com sangue após a adição de riboflavina (grupo riboflavina: GRB); sete, com sangue após tratamento com riboflavina associado à luz ultravioleta por 30 minutos (grupo tratado 1: GT30) e sete, com sangue após tratamento [...](AU)

Acción del luz UV y riboflavina en inactivación da Leishmania en sangre canino mantenido en bolsas de transfusión / Action of ultraviolet light and riboflavin in the inactivation of Leishmania in canine blood stored in bags for transfusion / Ação da luz ultravioleta e da riboflavina na inativação de Leishmania em sangue canino conservado em bolsas para transfusão

Es extremadamente importante para la medicina de transfusión tener seguridad en procedimiento de transferencia de componentes de la sangre, lo que minimiza la aparición de transmisión de patógenos. Este estudio investigó la eficacia de la luz ultravioleta y riboflavina en la inactivación de Leishmania infantum chagasi en muestras de sangre de perros recogidos en bolsas de plástico para la transfusión. Para detectar bolsas de sangre positivos para ser utilizado en el experimento se realizó PCR convencionales de las bolsas tomadas de animales sintomáticos, la aspiración positiva de los ganglios linfáticos y IFA (título de 1: 640) a partir de CCZ Araçatuba-SP. Después de 21 días de almacenamiento a 4C la sangre canina parasitada se añadió a riboflavina a una concentración final de 50µM. A partir de entonces, la bolsa fue colocada en el iluminador a una longitud de onda de 365 nm de luz UV durante 30 a 45 minutos y se mantuvo sobre uno homogeneizador de bolsa de sangre. Para demostrar la inactivación se usaron 28 hámsteres (Mesocricetus auratus), machos, adultos. Siete animales fueron inoculados con la sangre sin tratamiento (grupo de leishmaniasis: GL); siete de sangre después de la adición de riboflavina (grupo de riboflavina: GRB); siete de sangre después del tratamiento con riboflavina asociada con luz ultravioleta durante 30 minutos (grupo tratado 1: GT30) y siete con la [...]

It is extremely important for the transfusion medicine the safety in blood components transfer procedure, minimizing the occurrence of pathogen transmission. This study investigated the efficiency of ultraviolet light and riboflavin in the inactivation of Leishmania infantum chagasi in canine blood samples collected in plastic bags for transfusion. To detect positive blood bags to be used in the experiment, it was performed conventional PCR of the bags collected from symptomatic animals, with positive aspiration of lymph node and IFA (title 1: 640), from an epidemic region for the disease. After 21 days of storage at 4C, parasitized canine blood riboflavin was added to a final concentration of 50M. Thereafter, the bag was placed in the illuminator at a wavelength of 365 nm UV light for 30 to 45 minutes and maintained over a homogenizer blood bag. To prove the inactivation, they were used 28 hamsters (Mesocricetus auratus), adult, male. Seven animals were inoculated with the blood without treatment (group leishmaniasis: GL); seven, with blood after the addition of riboflavin (riboflavin group: GRB); seven, with blood after treatment with riboflavin associated with ultraviolet light for 30 minutes (treated group 1: GT30) and seven, with blood after treatment with riboflavin associated with ultraviolet light for 45 minutes (treated group 2: GT45). The animals were kept [...]

É de extrema importância para a medicina transfusional que haja segurança no procedimento de transferência de hemocomponentes, minimizando a ocorrência da transmissão de patógenos. O presente trabalho investigou a eficiência da luz ultravioleta e riboflavina na inativação de Leishmania infantum chagasi em amostras de sangue canino, colhidas em bolsas plásticas para transfusão. Para detectar as bolsas de sangue positivas a serem utilizadas no experimento, foi realizada PCR convencional de sangue de bolsas colhidas de animais sintomáticos, positivos na punção aspirativa de linfonodo e na RIFI (título 1:640), procedentes do CCZ de região epidêmica para a enfermidade. Após 21 dias de armazenamento em temperatura de 4ºC, o sangue canino parasitado foi adicionado de riboflavina na concentração final de 50µM. Posteriormente, a bolsa foi colocada no iluminador a um comprimento de onda de 365 nm de luz UV por 30 e 45 minutos, sendo mantida sobre um homogeinizador de bolsa de sangue. Para comprovar a inativação, foram utilizados 28 hamsters (Mesocricetus auratus), machos e adultos. Sete animais foram inoculados com o sangue sem tratamento (grupo leishmaniose: GL); sete, com sangue após a adição de riboflavina (grupo riboflavina: GRB); sete, com sangue após tratamento com riboflavina associado à luz ultravioleta por 30 minutos (grupo tratado 1: GT30) e sete, com sangue após tratamento [...]

Clinical and epidemiological aspects of feline leishmaniasis in Brazil / Aspectos clínicos e epidemiológicos da leishmaniose felina no Brasil

Tegumentary and visceral leishmaniasis are severe and unfortunately common parasitic diseases in Brazil. Among domestic animals, dogs are considered the main urban reservoir of the protozoan parasites, however, there is evidence that infected cats can also contribute towards the disease pool. The number of cats diagnosed with leishmaniasis has greatly increased in the last few years, highlighting the importance of thorough investigations on the role of the cat in the epidemiological cycle of the disease and in public health related issues. The main clinical manifestations of leishmaniasis suffered by cats, even when infected with Leishmania chagasi, a viscerotropic species, are skin abnormalities, which can be confounded with multiple other diseases. Indirect ELISA should be used as a screening test in epidemiological investigations for being a sensitive technique, followed by more specific laboratory tests. The standardization and validation of rapid, economical and reproducible diagnostic methods, to be employed in epidemiological surveillance, are still required.(AU)

Leishmaniose tegumentar e visceral são doenças parasitárias graves e, infelizmente, comuns no Brasil. Entre os animais domésticos, o cão é considerado o principal reservatório urbano do parasito protozoário; no entanto, há indícios de que gatos infectados também possam contribuir para essas doenças. O número de gatos com diagnóstico de leishmaniose aumentou muito nos últimos anos, destacando a importância de investigações aprofundadas sobre o papel desse hospedeiro no ciclo epidemiológico da doença e em Saúde Pública. As principais manifestações clínicas da leishmaniose felina são anormalidades na pele, o que pode ser confundida com várias outras doenças, mesmo em casos de infecção por Leishmania chagasi, uma espécie viscerotrópica. ELISA indireto poderia ser usado como teste de triagem em investigações epidemiológicas, por ser um método sensível, seguido de exames laboratoriais mais específicos. A padronização e validação de métodos de diagnóstico rápidos, econômicos e reprodutíveis a serem empregados na vigilância epidemiológica ainda são necessárias.(AU)

Hypertension and its correlation with renal lesions in dogs with leishmaniosis / Hipertensão e sua correlação com lesões renais em cães com leishmaniose

To evaluate the prevalence of hypertension and its correlation with the severity of renal injury and proteinuria in dogs with leishmaniosis, sixty-six dogs were divided into two groups. Group 1 (G1) was composed of 54 dogs included in stage 1 of chronic kidney disease (CKD), and group 2 (G2) of twelve dogs in stages 2 and 3 of CKD. Prevalence of hypertension was 28.8%, comprising 22.2% of the dogs from G1 and 58.3% from G2 (P=0.011). The mean arterial blood pressure (BP) of dogs from G1 (135.7 ± 20.5) was lower than from G2 (170.0 ± 26.3) (P <0.001). Urine protein-creatinine ratio (UP/C) revealed values above 0.5 in 75.7% of the dogs, with 34% presenting hypertension. All dogs with hypertension had histopathological and laboratory evidence of glomerular disease. Although there was no statistically significant correlation between elevated BP and the severity of glomerular lesions (P=0.408), there was a statistically significant correlation between elevated BP and increased UP/C in the studied population (P=0.002). Thus, dogs with leishmaniosis and renal disease must be screened for the presence of hypertension so that treatment may be instituted as early as possible, in countries where treatment is allowed, to prevent the progression of renal damage.(AU)

Para avaliar a prevalência de hipertensão arterial e sua correlação com a severidade da lesão renal e proteinúria em cães com leishmaniose, 66 cães foram divididos em dois grupos. O grupo 1 (G1), composto por 54 cães em estágio 1 de doença renal crônica (DRC), e o grupo 2 (G2) por 12 cães em estágios 2 e 3 de DRC. A prevalência de hipertensão foi de 28,8%, compreendendo 22,2% dos cães de G1 e 58,3% dos cães de G2 (p = 0,011). A pressão arterial média (PA) de G1 (135,7 ± 20,5) foi inferior a de G2 (170,0 ± 26,3) (P <0,001). A relação proteína creatinina urinária (P/C U) foi maior que 0,5 em 75,7% dos cães, dos quais 34% possuíam hipertensão. Todos os cães com hipertensão apresentavam doença glomerular. Embora não tenha sido observada correlação estatisticamente significativa entre elevação da PA e severidade das lesões glomerulares (P =0,408), houve uma correlação significativa entre PA elevada e aumento da UP/C (P = 0,002). Portanto, cães com leishmaniose e doença renal devem ser pesquisados ​​quanto à presença de hipertensão, para que o tratamento possa ser instituído o mais precocemente possível em países onde ele é permitido, para evitar a progressão da lesão renal.(AU)

Hypertension and its correlation with renal lesions in dogs with leishmaniosis

To evaluate the prevalence of hypertension and its correlation with the severity of renal injury and proteinuria in dogs with leishmaniosis, sixty-six dogs were divided into two groups. Group 1 (G1) was composed of 54 dogs included in stage 1 of chronic kidney disease (CKD), and group 2 (G2) of twelve dogs in stages 2 and 3 of CKD. Prevalence of hypertension was 28.8%, comprising 22.2% of the dogs from G1 and 58.3% from G2 (P=0.011). The mean arterial blood pressure (BP) of dogs from G1 (135.7 ± 20.5) was lower than from G2 (170.0 ± 26.3) (P 0.001). Urine protein-creatinine ratio (UP/C) revealed values above 0.5 in 75.7% of the dogs, with 34% presenting hypertension. All dogs with hypertension had histopathological and laboratory evidence of glomerular disease. Although there was no statistically significant correlation between elevated BP and the severity of glomerular lesions (P=0.408), there was a statistically significant correlation between elevated BP and increased UP/C in the studied population (P=0.002). Thus, dogs with leishmaniosis and renal disease must be screened for the presence of hypertension so that treatment may be instituted as early as possible, in countries where treatment is allowed, to prevent the progression of renal damage.

Para avaliar a prevalência de hipertensão arterial e sua correlação com a severidade da lesão renal e proteinúria em cães com leishmaniose, 66 cães foram divididos em dois grupos. O grupo 1 (G1), composto por 54 cães em estágio 1 de doença renal crônica (DRC), e o grupo 2 (G2) por 12 cães em estágios 2 e 3 de DRC. A prevalência de hipertensão foi de 28,8%, compreendendo 22,2% dos cães de G1 e 58,3% dos cães de G2 (p = 0,011). A pressão arterial média (PA) de G1 (135,7 ± 20,5) foi inferior a de G2 (170,0 ± 26,3) (P 0,001). A relação proteína creatinina urinária (P/C U) foi maior que 0,5 em 75,7% dos cães, dos quais 34% possuíam hipertensão. Todos os cães com hipertensão apresentavam doença glomerular. Embora não tenha sido observada correlação estatisticamente significativa entre elevação da PA e severidade das lesões glomerulares (P =0,408), houve uma correlação significativa entre PA elevada e aumento da UP/C (P = 0,002). Portanto, cães com leishmaniose e doença renal devem ser pesquisados quanto à presença de hipertensão, para que o tratamento possa ser instituído o mais precocemente possível em países onde ele é permitido, para evitar a progressão da lesão renal.

Visceral leishmaniasis in Brazil / Leishmaniose visceral no Brasil

Visceral leishmaniasis (VL) is among the most important vector-borne diseases that occur in Brazil, mainly due to its zoonotic nature. It is currently present in almost all Brazilian territory, and its control is a challenge both for veterinarians and for public health officials. The etiologic agent is Leishmania infantum (syn chagasi), and the main vector in Brazil is Lutzomyia longipalpis. Of all animals identified as reservoirs of VL, the dog is considered the most important domestic reservoir. Although the disease has already been identified in cats, the epidemiological role of this animal species is still unclear. This article presents a brief review of the epidemiological situation of the disease, its mode of transmission, clinical features in dogs and cats as well as possible risk factors associated with the occurrence of the disease in Brazil(AU)

A leishmaniose visceral (LV) está entre as mais importantes doenças transmitidas por vetores que ocorrem no Brasil, principalmente devido ao seu caráter zoonótico. Atualmente, está presente em quase todo o território brasileiro, e seu controle é um desafio tanto para médicos veterinários como para agentes de saúde pública. O agente etiológico da doença é a Leishmania infantum (syn chagasi), e o principal vetor no Brasil é a Lutzomyia longipalpis. De todos os animais identificados como reservatórios da LV, o cão é considerado o reservatório doméstico mais importante. Apesar da doença já ter sido identificada em gatos, o papel epidemiológico desta espécie animal ainda é incerto. O presente artigo apresenta uma breve revisão sobre a situação epidemiológica da doença, a sua forma de transmissão, os aspectos clínicos nos cães e gatos, bem como possíveis fatores de risco associados à ocorrência da doença no Brasil(AU)

Leishmania sp. infection in dogs from Florianópolis, Santa Catarina, SC, Brazil / Infecção por Leishmania sp. em cães de Florianópolis, Santa Catarina, SC, Brasil

The aim of the present study was to investigate the occurrence of Leishmania sp. infection in dogs (N = 491) living in the municipality of Florianópolis, Santa Catarina (SC), Brazil, which was considered a disease-free region for visceral leishmaniasis until 2011, when autochthonous cases of canine disease were notified. Seroprevalence in this population was assessed by ELISA (0.4%; 2/491) and IFAT (4.09%; 24/491). Only one dog exhibited seroreactivity in both serological methods, comprising a total of 25 (5.3%) seroreagent animals. Leishmania sp. DNA, obtained from a sample of whole blood of this animal, was amplified by both conventional and Real-Time PCR. Sequencing of the amplified DNA and, thereby, determination of the Leishmania species involved, was not possible. Our results suggest the necessity of a thorough epidemiological investigation in Florianópolis.(AU)

O objetivo do presente estudo foi pesquisar a ocorrência de infecção por Leishmania sp. em cães (N = 491) domiciliados no município de Florianópolis, Santa Catarina, considerada uma região indene para leishmaniose visceral até o ano de 2011, quando foram notificados casos autóctones da doença canina. A soroprevalência na população foi avaliada por ELISA (0,4%; 2/491) e RIFI (4,09%; 24/491). Somente um cão apresentou sororeatividade em ambos os métodos soro-lógicos, totalizando 25 (5,3%) animais sororeagentes. O DNA de Leishmania sp., obtido de uma amostra do sangue total desse animal, foi amplificado por PCR convencional e PCR em Tempo Real. Não foi possível realizar o sequenciamento do DNA amplificado e, deste modo, determinar a espécie de Leishmania envolvida. Os nossos resultados sugerem a necessidade de uma investigação epidemiológica minuciosa em Florianópolis.(AU)

Serosurvey of tick-borne pathogens in dogs from urban and rural areas from Parana State, Brazil / Avaliação sorológica de patógenos transmitidos por carrapatos em cães urbanos e rurais do estado do Paraná, Brasil

Considering the zoonotic potential of tick-borne disease (TBD) agents and the fact that dogs may act as sentinels for human infection, the aim of the present study was to determine the seroprevalence of TBD agents and risk factors for exposure in two different canine populations from Parana State, Southern Brazil. A total of 138 dog serum samples from urban (UA) (n=68) and rural (RA) (n=70) areas were tested with commercial ELISA rapid test forAnaplasma phagocytophilum, Ehrlichia canisand Borrelia burgdorferi antibodies and indirect immunofluorescence assay (IFAT) for Babesia vogeli. An overall of 92∕138 (66.7%) dogs, being 62∕68 (91.2%) from UA and 30∕70 (42.9%) from RA, were seropositive for at least one TBD agent. From the total number of dogs, sixty-two were positive for E. canis (44.9%), 19 (13.8%) for A. phagocytophilum, and 64 (46.4%) for B. vogeli. Anti-B. burgdorferi antibodies were not detected. Dogs from UA showed a higher percentage of tick infestation (p = 0.0135) and were highly associated with seropositivity to E. canis (p = 0.000005), A. phagocytophilum (p = 0.0001), and B. vogeli (p = 0.0012). In summary, the findings indicate that dogs from urban areas present higher potential risk exposure to TBD pathogens than those from rural areas.

Considerando o potencial zoonótico das doenças transmitidas por carrapatos (DTCs) e que os cães podem atuar como sentinelas para infecções em humanos, os objetivos deste estudo foram determinar a soroprevalência de agentes das DTCs e fatores de risco para a exposição em duas diferentes populações caninas do Estado do Paraná, região Sul do Brasil. Um total de 138 amostras de soro de cães de área urbana (AU) (n = 68) e rural (AR) (n = 70) foram testadas utilizando um teste de ELISA comercial rápido para detecção de anticorpos contra Anaplasma phagocytophilum, Ehrlichia canis e Borrelia burgdorferi e imunofluorescência indireta (IFI) para Babesia vogeli. Um total de 92∕138 (66,7%) cães, sendo 62∕68 (91,2%) da AU e 30∕70 (42,9%) da AR, foram soropositivos para pelo menos um agente. Do número total de amostras, sessenta e duas (44,9%) foram positivas para E. canis, 19 (13,8%) para A. phagocytophilum e 64 (46,4%) para B. canis vogeli. Anticorpos anti-B. burgdorferi não foram detectados. Os cães da AU apresentaram o maior percentual de infestação por carrapatos (p = 0,0135) e foram altamente associados com a positividade para E. canis (p = 0,000005), A. phagocytophilum (p = 0,0001) e B. vogeli (p = 0,0012). Em resumo, nossos achados indicam que cães de áreas urbanas têm um maior risco potencial de exposição a agentes patogênicos das DTCs comparados aos das áreas rurais.

Serosurvey of tick-borne pathogens in dogs from urban and rural areas from Parana State, Brazil

Considering the zoonotic potential of tick-borne disease (TBD) agents and the fact that dogs may act as sentinels for human infection, the aim of the present study was to determine the seroprevalence of TBD agents and risk factors for exposure in two different canine populations from Parana State, Southern Brazil. A total of 138 dog serum samples from urban (UA) (n=68) and rural (RA) (n=70) areas were tested with commercial ELISA rapid test forAnaplasma phagocytophilum, Ehrlichia canisand Borrelia burgdorferi antibodies and indirect immunofluorescence assay (IFAT) for Babesia vogeli. An overall of 92138 (66.7%) dogs, being 6268 (91.2%) from UA and 3070 (42.9%) from RA, were seropositive for at least one TBD agent. From the total number of dogs, sixty-two were positive for E. canis (44.9%), 19 (13.8%) for A. phagocytophilum, and 64 (46.4%) for B. vogeli. Anti-B. burgdorferi antibodies were not detected. Dogs from UA showed a higher percentage of tick infestation (p = 0.0135) and were highly associated with seropositivity to E. canis (p = 0.000005), A. phagocytophilum (p = 0.0001), and B. vogeli (p = 0.0012). In summary, the findings indicate that dogs from urban areas present higher potential risk exposure to TBD pathogens than those from rural areas.

Considerando o potencial zoonótico das doenças transmitidas por carrapatos (DTCs) e que os cães podem atuar como sentinelas para infecções em humanos, os objetivos deste estudo foram determinar a soroprevalência de agentes das DTCs e fatores de risco para a exposição em duas diferentes populações caninas do Estado do Paraná, região Sul do Brasil. Um total de 138 amostras de soro de cães de área urbana (AU) (n = 68) e rural (AR) (n = 70) foram testadas utilizando um teste de ELISA comercial rápido para detecção de anticorpos contra Anaplasma phagocytophilum, Ehrlichia canis eBorrelia burgdorferi e imunofluorescência indireta (IFI) para Babesia vogeli. Um total de 92138 (66,7%) cães, sendo 6268 (91,2%) da AU e 3070 (42,9%) da AR, foram soropositivos para pelo menos um agente. Do número total de amostras, sessenta e duas (44,9%) foram positivas paraE. canis, 19 (13,8%) para A. phagocytophilum e 64 (46,4%) para B. canis vogeli. Anticorpos anti-B. burgdorferi não foram detectados. Os cães da AU apresentaram o maior percentual de infestação por carrapatos (p = 0,0135) e foram altamente associados com a positividade para E. canis (p = 0,000005), A. phagocytophilum (p = 0,0001) e B. vogeli (p = 0,0012). Em resumo, nossos achados indicam que cães de áreas urbanas têm um maior risco potencial de exposição a agentes patogênicos das DTCs comparados aos das áreas rurais.

Estudo da imunopatogenia das lesões no sistema nervoso central de cães naturalmente acometidos por leishmaniose visceral / Study of the immunopathogenesis of central nervous system lesions in dogs naturally affected by visceral leishmaniasis

A Leishmaniose visceral em cães é descrita como uma doença de caráter crônico na qual os principais sintomas são perda progressiva de peso, caquexia e lesões dermatológicas. Recentemente, a doença tem sido relacionada com alterações neurológicas. Um total de 40 cães portadores de leishmaniose visceral foi dividido em dois grupos. O primeiro composto por cães sem sintomas neurológicos (n=30) e o segundo grupo composto por cães com sintomas neurológicos (n=10). Amostras de encéfalo foram coletadas e armazenadas em formalina tamponada, para realização de imunoistoquímica para a pesquisa de formas amastigotas de Leishmania (Leishmania) infantum chagasi, linfócitos T CD3+, CD4+ e CD8+ e macrófagos. A reação de imunoistoquímica não revelou formas amastigotas do parasita. Linfócitos T estavam presentes em 24/30 (80%) dos cães sem sintomas neurológicos e em todos os cães do segundo grupo (p=0,0011). Linfócitos CD4+ e CD8+ raramente foram observados, apresentando imunomarcação para CD4+ em 10/40 (25%) dos cães e em metade dos animais do grupo neurológico (p=0,0090). A presença de CD8+ foi detectada em 4/10 (40%) cães com doenças neurológicas (p=0,0021). Macrófagos foram observados em 38/40 (95%) cães, sem diferença estatística significante entre os dois grupos (p= 0,7664).(AU)

Visceral leishmaniasis in dogs is described as a chronic disease whose main symptoms are progressive weigth loss, cachexy and dermatologic lesions. Recently, the disease has been associated to neurologic disorders. A total of 40 dogs with visceral leishmaniasis were divided into two groups. The first composed of dogs without neurological signs (n=30) and the second by dogs with neurological disorders (n=10). Brain samples were collected, stored in 10% buffered formalin and subjected to immunohistochemical examination for amastigotes forms of Leishmania (Leishmania) infantum chagasi, CD3+, CD4+ and CD8+ T lymphocytes and macrophages. Imunnohistochemistry evaluation revealed no amastigote forms of the parasite. CD3+ T lymphocytes were present in 24/30 (80%) dogs without neurological signs and in all dogs from the second group (p=0.0011). CD4+ and CD8+ were rarely observed, with CD4+ immunostaining in 10/40 (25%) dogs, from which half of them had neurological disease (p=0.0090). The presence of CD8+ was detected only in 4/10 (40%) dogs from neurological group (p=0.0021). Macrophages were detected in 38/40 (95%) dogs, without significant differences between groups (p=0.7664).(AU)

Subclinical Muscle Injuries in Dogs Infected with Leishmania (Leishmania) infantum chagasi

Although canine visceral leishmaniasis (CVL) has been extensively studied, muscular damage due to Leishmania (Leishmania) infantum chagasi infection remains to be fully established. The aim of this study was to describe the electromyographic and histological changes, as well as search for the presence of amastigote forms of Leishmania spp., CD3+ T-lymphocytes, macrophages and IgG in skeletal muscles of dogs with visceral leishmaniasis (VL). Four muscles (triceps brachial, extensor carpi radialis, biceps femoris and gastrocnemius) from a total of 17 naturally infected and six healthy dogs were used in this study. Electromyographic alterations such as fibrillation potentials, positive sharp waves and complex repetitive discharges were observed in, at least, three muscles from all infected dogs. Myocyte necrosis and degeneration were the most frequent muscular injury seen, followed by inflammatory reaction, fibrosis and variation in muscle fibers size. Immunohistochemistry in muscle samples revealed amastigote forms in 4/17 (23.53%), IgG in 12/17 (70.58%), CD3+ T-lymphocytes in 16/17 (94.12%) and macrophages in 17/17 (100%) dogs. Statistically positive correlation was observed between: inflammatory infiltrate (p=0.0305) and CD3+ immunoreaction (p=0.0307) in relation to the number of amastigote forms; inflammatory infiltrate (p=0.0101) and macrophage immunoreaction (p=0.0127) in relation to the amount of CD3+; and inflammatory infiltrate (p=0.0044) and degeneration / necrosis (p<0.0001) in relation to the presence of macrophages. Our results suggest that different mechanisms contribute to the development of myocytotoxicity, including celular and humoral immune responses and direct muscular injury by the parasite. Nevertheless, the catabolic nature of the disease can probably interact with other factors, but cannot be incriminated as the only responsible for myositis.(AU)

Estudo soroepidemiológico de leishmaniose em equinos na região de Araçatuba-SP, Brasil, área endêmica para leishmaniose visceral / A seroepidemiological study of leishmaniasis in horses in the region from Araçatuba-SP, Brazil, an endemic area for visceral leishmaniasis

O presente estudo teve como objetivo pesquisar a presença de anticorpos anti-Leishmania sp. em equinos provenientes do município de Araçatuba-São Paulo, área endêmica para leishmaniose visceral canina e humana. Dos 466 equinos testados para a presença de IgG anti-Leishmania chagasi pelo método de ELISA, 68 (14,59%) apresentaram sororeatividade, com títulos variando entre 0,324 e 0,813. As amostras de soro dos equinos positivos por ELISA foram testadas também por imunocromatografia, e 19/466 (4,08%) apresentaram resultado positivo. Os resultados obtidos no presente estudo indicaram que esta espécie animal está em contato e deve atrair flebotomíneos transmissores da doença, e salientam a necessidade de investigação mais acurada sobre o real papel dos equinos residentes em áreas endêmicas, de forma a auxiliar nas medidas de controle da doença.(AU)

The aim of the present study was to perform a leishmaniasis survey in horses from Araçatuba, São Paulo, an endemic area of Brazil. Of the 466 horses tested for the presence of anti-Leishmania chagasi titers by ELISA, 68 (14.59%) were seropositive, with titers varying between 0.324 and 0.813. ELISA positive samples were also tested by immunocromatography and 19/466 (4.08%) were positive. The results of the present study indicated that equines are in contact and can attract phlebotomines, and highlight the necessity of a more accurate investigation on the role played by the horses living in endemic areas, in order to help to control the spread of the illness.(AU)

Estudo da imunopatogenia das lesões no sistema nervoso central de cães naturalmente acometidos por leishmaniose visceral / Study of the immunopathogenesis of central nervous system lesions in dogs naturally affected by visceral leishmaniasis

A Leishmaniose visceral em cães é descrita como uma doença de caráter crônico na qual os principais sintomas são perda progressiva de peso, caquexia e lesões dermatológicas. Recentemente, a doença tem sido relacionada com alterações neurológicas. Um total de 40 cães portadores de leishmaniose visceral foi dividido em dois grupos. O primeiro composto por cães sem sintomas neurológicos (n=30) e o segundo grupo composto por cães com sintomas neurológicos (n=10). Amostras de encéfalo foram coletadas e armazenadas em formalina tamponada, para realização de imunoistoquímica para a pesquisa de formas amastigotas de Leishmania (Leishmania) infantum chagasi, linfócitos T CD3+, CD4+ e CD8+ e macrófagos. A reação de imunoistoquímica não revelou formas amastigotas do parasita. Linfócitos T estavam presentes em 24/30 (80%) dos cães sem sintomas neurológicos e em todos os cães do segundo grupo (p=0,0011). Linfócitos CD4+ e CD8+ raramente foram observados, apresentando imunomarcação para CD4+ em 10/40 (25%) dos cães e em metade dos animais do grupo neurológico (p=0,0090). A presença de CD8+ foi detectada em 4/10 (40%) cães com doenças neurológicas (p=0,0021). Macrófagos foram observados em 38/40 (95%) cães, sem diferença estatística significante entre os dois grupos (p= 0,7664).(AU)

Visceral leishmaniasis in dogs is described as a chronic disease whose main symptoms are progressive weigth loss, cachexy and dermatologic lesions. Recently, the disease has been associated to neurologic disorders. A total of 40 dogs with visceral leishmaniasis were divided into two groups. The first composed of dogs without neurological signs (n=30) and the second by dogs with neurological disorders (n=10). Brain samples were collected, stored in 10% buffered formalin and subjected to immunohistochemical examination for amastigotes forms of Leishmania (Leishmania) infantum chagasi, CD3+, CD4+ and CD8+ T lymphocytes and macrophages. Imunnohistochemistry evaluation revealed no amastigote forms of the parasite. CD3+ T lymphocytes were present in 24/30 (80%) dogs without neurological signs and in all dogs from the second group (p=0.0011). CD4+ and CD8+ were rarely observed, with CD4+ immunostaining in 10/40 (25%) dogs, from which half of them had neurological disease (p=0.0090). The presence of CD8+ was detected only in 4/10 (40%) dogs from neurological group (p=0.0021). Macrophages were detected in 38/40 (95%) dogs, without significant differences between groups (p=0.7664).(AU)

Alterações eletromiográficas e histopatológicas da musculatura de cães naturalmente infectados por Leishmania infantum / Muscular electromyographic and histopathologic changes in dogs naturally infected by Leishmania infantum

O objetivo do presente estudo foi avaliar as alterações eletromiográficas e histopatológicas de músculos estriados esqueléticos de cães naturalmente infectados por Leishmania infantum. Foram selecionados 25 cães adultos, sem raça definida, com diagnósticos parasitológico, molecular e sorológico estabelecidos para a infecção. Os músculos avaliados foram: tríceps braquial, extensor carpo radial, bíceps femoral e gastrocnêmio. Um cão possuía problemas locomotores, com paresia de membros posteriores associada à intensa atrofia muscular. Vinte e três (92%) apresentavam algum tipo de alteração muscular, sendo que em 22 (88%) tais alterações foram identificadas diretamente pela eletromiografia. Mesmo sem sinais clínicos, em dez cães (40%) foram evidenciadas alterações eletromiográficas e histopatológicas. Antígenos de Leishmania foram identificados na musculatura de quatro (16%) cães. Os resultados eletromiográficos indicaram a ocorrência de polimiosite crônica em 13 (52%) cães, presença de músculos com inflamação tanto aguda quanto crônica em quatro (16%), miopatia aguda em dois (8%), e ausência de alterações eletromiográficas em três (12%). As alterações histopatológicas mais frequentemente observadas foram degeneração e necrose de miofibras e presença de infiltrado inflamatório verificadas em 12 (48%) cães. Outras alterações, quando comparado com as amostras de cães normais, foram do tamanho de grupos de fibras musculares em 15 (60%) e fibrose peri ou endomisial em 14 (56%) animais. As alterações observadas no presente estudo permitiram concluir que mesmo na ausência de sinais clínicos de comprometimento muscular, a maior parte dos cães infectados por L. infantum apresenta polimiosite crônica.(AU)

The aim of this study was to evaluate the electromyographic and histopathological changes in skeletal muscles of dogs naturally infected by L. infantum. Twenty five mixed breed adult dogs with parasitological, molecular and serological diagnosis were selected. The evaluated muscles were: triceps brachial, extensor carpi radialis, biceps femoris and gastrocnemius. One dog had locomotor clinical signs with hind limbs paresis associated with severe muscle atrophy. Twenty-three (92%) had some type of muscular change, and in 22 (88%) such changes were directly identified by electromyography. Even without any clinical signs of the disease, 10 (40%) dogs had electromyographic and histopathological changes. Leishmania antigens were detected in muscles of four (16%) dogs. The electromyographic evaluation indicated the occurrence of chronic polymyositis in 13 (52%) dogs, the presence of both acute and chronic muscle inflammation four (16%), acute myopathy in two (8%) and absence of electromyographic abnormalities in three (12%) dogs. The most frequently observed histopathological changes were degeneration and necrosis of myofibers and inflammatory infiltration observed in 12 (48%) dogs. Other changes were decreased diameter of muscle fibers in 15 (60%) and peri or endomysial fibrosis in 14 (56%) animals. The changes observed in the present study showed that even in the absence of clinical signs, most dogs infected by Leishmania infantum have chronic polymyositis.(AU)

Detecção de anticorpos anti-Leishmania infantum syn chagasi em cães de São José do Rio Preto, São Paulo / Anti-Leishmania infantum syn chagasi antibodies in dogs from São José do Rio Preto, São paulo

A leishmaniose visceral (LV) é uma zoonose que vem se expandido por todo o território paulista desde 1998, quando foi identificado o primeiro caso canino autóctone, no município de Araçatuba. O objetivo do presente estudo foi determinar a ocorrência de anticorpos anti-Leishmania infantum syn chagasi em amostras de soro de 584 cães de São José do Rio Preto, São Paulo, área não endêmica para a doença. Cinco cães (0,86%) foram soro reagentes pela técnica de ELISA e um (0,17%) por imunocromatografia. A reação de imunofluorescência indireta, realizada em 138 animais que possuíam densidades ópticas acima ou próximas ao ponto de corte do ELISA evidenciou dois cães (1,45%) com títulos acima de 1:40. Apenas um animal foi sororeagente nas três técnicas sorológicas. Apesar deste cão não apresentar histórico de deslocamento para áreas endêmicas, havia sido adquirido em região com casos caninos e humanos de LV. Os resultados obtidos no presente estudo fazem supor que não existiam casos autóctones de LV canina na população estudada.(AU)

Visceral leishmaniasis (VL) has been a widespread zoonosis in São Paulo since 1998, when the first autochthonous canine case was identified in Araçatuba. The aim of this study was to determine the occurrence of anti–Leishmania infantum syn chagasi antibodies in serum samples of 584 dogs from São José do Rio Preto, São Paulo, a non endemic area for the disease. Five dogs (0.86%) seroconverted by ELISA and one (0.17%) by immunochromatography. The indirect immunofluorescent reaction, carried out in 138 animals whose optical densities were above or close to ELISAs cutt-off point, evidenced two dogs (1.45%) with titers above 1:40. Only one dog was serum-reactive on the three techniques. Although there was not a history of displacing this animal to endemic areas, the dog had been acquired in a region with canine and human cases of VL. These results suggests that there were no autochthonous cases of canine VL in this population.(AU)

Sorofrequência de infecção pelo vírus da imunodeficiência felina e vírus da leucemia felina em gatos do município de Araçatuba, São Paulo / Serofrequency of feline immunodeficiency virus and feline leukemia virus in cats of Araçatuba, São Paulo

imunodeficiência viral felina e a leucemia viral felina representam importantes doenças infecciosas causadas por retrovírus. O presente estudo teve por objetivos investigar a sorofrequência da infecção pelo vírus da imunodeficiência felina (FIV) e pelo vírus da leucemia felina (FeLV) em gatos provenientes do município de Araçatuba, Estado de São Paulo. Amostras de sangue de 302 gatos foram colhidas e testadas quanto à presença de anticorpos antivírus da imunodeficiência felina e do antígeno do vírus da leucemia felina por meio do ELISA Snap-Combo®FIV-FeLV (IDEXX Laboratories). A frequência de positividade para FIV foi de 5,63% (17/302) e para FeLV de 0,33% (1/302). Dos 17 gatos infectados pelo FIV, nove (52,94%) eram sintomáticos. Houve um predomínio da infecção pelo FIV em machos (p = 0,0316) e em gatos com idade variando entre um e três anos (p = 0,0324).(AU)

Feline immunodeficiency virus and feline leukemia represent important infectious diseases caused by retroviruses. This study aimed to investigate the prevalence of infection by feline immunodeficiency virus (FIV) and feline leukemia virus (FeLV) in cats from the municipality of Araçatuba, São Paulo. Blood samples from 302 cats were collected and tested for the presence of antibodies against feline immunodeficiency virus and antigen of feline leukemia virus by ELISA ® Snap- Combo FIV-FeLV (IDEXX Laboratories). The frequency of FIV positivity was 5.63% (17/302) and of FeLV was 0.33% (1/302). Of the 17 cats infected with FIV, nine (52.94%) were symptomatic. There was a prevalence of FIV infection in males (p = 0.0316) and cats aged between one and three years (p = 0.0324).(AU)

Leucograma e metabolismo oxidativo dos neutrófilos de cães com leishmaniose visceral antes e após o tratamento com antimoniato de meglumina e alopurinol / Luekogram and neutrophil oxidative metabolism of dogs with visceral leishmaniasis before and after treatment with meglumine antimonate and allopurinol

Compararam-se o leucograma e o metabolismo oxidativo dos neutrófilos de dez cães com leishmaniose visceral (LV) antes e após o início do tratamento com antimoniato de meglumina (AM) e com a associação de antimoniato de meglumina e alopurinol (AMA). Os resultados obtidos comprovaram que os neutrófilos de cães com LV não perdem sua capacidade de reduzir o tetrazólio nitroazul (NBT) e, na maioria dos casos, o metabolismo oxidativo apresentou-se mais ativo que o normal. Cães com LV apresentaram uma diminuição do metabolismo oxidativo dos neutrófilos após o tratamento com AM e AMA. O conjunto dos resultados sugere que a diminuição da taxa de redução do NBT está relacionada com a diminuição da carga parasitária de leishmania e a um possível efeito inibidor dessas drogas sobre o metabolismo oxidativo dos neutrófilos.

Leukogram and neutrophil oxidative metabolism from dogs with visceral leishmaniasis (VL) were compared before and after treatment with meglumine antimoniate (AM) and with an association of meglumine antimoniate and allopurinol (AMA). The results obtained demonstrated that neutrophils of dogs with VL do not lose their capacity of reducing NBT and that oxidative metabolism has been more active in the majority of the cases. After treatment with AM and AMA, dogs with VL presented a redution of neutrophils oxidative metabolism, suggesting that this decrease was related with the decrease in the number of parasites and a probable inhibitor effect of these drugs on neutrophils oxidative metabolism.

Leucograma e metabolismo oxidativo dos neutrófilos de cães com leishmaniose visceral antes e após o tratamento com antimoniato de meglumina e alopurinol / Luekogram and neutrophil oxidative metabolism of dogs with visceral leishmaniasis before and after treatment with meglumine antimonate and allopurinol

Compararam-se o leucograma e o metabolismo oxidativo dos neutrófilos de dez cães com leishmaniose visceral (LV) antes e após o início do tratamento com antimoniato de meglumina (AM) e com a associação de antimoniato de meglumina e alopurinol (AMA). Os resultados obtidos comprovaram que os neutrófilos de cães com LV não perdem sua capacidade de reduzir o tetrazólio nitroazul (NBT) e, na maioria dos casos, o metabolismo oxidativo apresentou-se mais ativo que o normal. Cães com LV apresentaram uma diminuição do metabolismo oxidativo dos neutrófilos após o tratamento com AM e AMA. O conjunto dos resultados sugere que a diminuição da taxa de redução do NBT está relacionada com a diminuição da carga parasitária de leishmania e a um possível efeito inibidor dessas drogas sobre o metabolismo oxidativo dos neutrófilos.(AU)

Leukogram and neutrophil oxidative metabolism from dogs with visceral leishmaniasis (VL) were compared before and after treatment with meglumine antimoniate (AM) and with an association of meglumine antimoniate and allopurinol (AMA). The results obtained demonstrated that neutrophils of dogs with VL do not lose their capacity of reducing NBT and that oxidative metabolism has been more active in the majority of the cases. After treatment with AM and AMA, dogs with VL presented a redution of neutrophils oxidative metabolism, suggesting that this decrease was related with the decrease in the number of parasites and a probable inhibitor effect of these drugs on neutrophils oxidative metabolism.(AU)

Ocorrência de leishmaniose em gatos de área endêmica para leishmaniose visceral / Occurrence of leishmaniasis in cats from endemic area for visceral leishmaniasis

Apesar da descrição de vários casos de leishmaniose felina no mundo, pouco se sabe sobre a importância do gato como um reservatório da doença. O objetivo do presente estudo foi determinar a ocorrência de leishmaniose em gatos provenientes de uma área endêmica para leishmaniose visceral no Brasil. Duzentos gatos foram incluídos no estudo. A presença de infecção foi determinada por meio do achado de formas amastigotas do parasita em esfregaços obtidos por punção biópsia aspirativa de linfonodos, medula óssea, baço e fígado, e pela presença de anticorpos anti-L. chagasi pelo teste de ELISA indireto. Nossos resultados demonstraram uma prevalência de infecção em 14,5% (31/200) dos gatos na população estudada, sendo 4% (8/200) por diagnóstico parasitológico e 11,5% (23/200) por sorologia.(AU)

Despite the description of several cases of feline leishmaniasis around the world, little information is available about the importance of the cat as a reservoir of the disease. The aim of the present study was to determine the occurrence of leishmaniasis in cats from an endemic area for visceral leishmaniasis in Brazil. Two hundred cats were included in this study. Infection was evaluated through the presence of amastigotes in stained smears from fine-needle aspirates of lymph nodes, bone marrow, spleen and liver, and by antibody reactivity against Leishmania chagasi using indirect ELISA. Our results showed a prevalence of infection in 14.5% (31/200) of the feline population studied, with 4% (8/200) of positivity by parasitological diagnosis and 11.5% (23/200) by serology.(AU)

Clinical and parasitological evaluation of dogs naturally infected by Leishmania (Leishmania) chagasi submitted to treatment with meglumine antimoniate and allopurinol / Avaliação clínica e parasitológica de cães naturalmente infectados por Leishmania (Leishmania) chagasi submetidos a tratamento com antimoniato de meglumina e alopurinol

Aiming to assess the efficacy of the treatment, to verify the occurrence of possible disease relapses and to search for the presence of parasites after the treatment, seven dogs naturally infected by Leishmania sp., were submitted to a treatment with meglumine antimoniate and allopurinol. For this, lymph node and bone marrow aspiration biopsies were carried out at seven moments. After the end of the six-month observation period all dogs were submitted to euthanasia. Then, spleen and liver “imprints” and in vitro cultures were carried out to search for amastigote forms of the parasite. All animals presented remission of the symptoms and during all the observation period no dog presented relapse of the disease, although amastigote forms of the parasite were observed in two of the animals at the end of the experiment. Thus, it was possible to conclude that the treatment promotes clinical healing but it does not eliminate the parasites completely.(AU)

Com objetivo de avaliar a eficácia do tratamento, verificar a ocorrência de possíveis recidivas da doença e pesquisar a presença de parasitas após a realização do tratamento, foram utilizados sete cães naturalmente infectados por Leishmania sp., submetidos a tratamento com antimoniato de meglumina e alopurinol. Para tanto, foram realizadas punções biópsias aspirativas de linfonodos e de medula óssea em sete momentos. Após o término dos seis meses de observação, todos os cães foram submetidos à eutanásia e realizados “imprints” e cultivo in vitro do baço e fígado para a pesquisa de formas amastigotas. Todos os animais apresentaram remissão dos sintomas e durante todo o período de observação nenhum cão apresentou recidiva da doença apesar de ter sido observada a presença de formas amastigotas do parasita em dois animais, ao término do experimento. Desta forma, foi possível concluir que o tratamento promove a cura clínica, entretanto não elimina completamente os parasitas.(AU)