Seroepidemiological study of maedi-visna in sheep in Ceara, Rio Grande do Norte, Paraíba, and Sergipe States / Estudo soroepidemiológico da maedi-visna em ovinos nos estados do Ceará, Rio Grande do Norte, Paraíba e Sergipe

The production performance of a livestock herd can be compromised by various diseases. In sheep, maedi-visna (MV) infections, which have a chronic nature, are caused by a virus (maedi-visna virus (MVV)) belonging to the genus Lentivirus of the Retroviridae family. The infection can cause significant economic losses and has considerable health impacts on sheep breeding in production systems. Due to the importance of this disease in sheep flocks, the objective was to conduct a serosurvey of MVV in the states of Ceará (CE), Rio Grande do Norte (RN), Paraíba (PB), and Sergipe (SE). A total of, 3332 serum samples were collected in the four states, 1011 in CE, 931 in RN, 459 in PB, and 931 in SE, with the number of samples proportional to the actual herd size of each state. The samples were analyzed using the agar gel microimmunodiffusion test (AGID). Reproducers were revaluated using western blotting (WB). In addition to this serological survey, we administered an investigative questionnaire to identify possible risk factors that facilitate the introduction and spread of diseases (location, category, sex, breed type, creation system, production, herd size, and association with goats). After analysis of the sera using the AGID test, there was zero prevalence. Revaluating breeders by WB revealed a 5.5% prevalence of MV in the four states studied, with prevalences for the states of CE, RN, Paraiba, and SE of 2.3% (2/88), 10.4% (8/77), 3.6% (1/28), and 4.7% (2/42), respectively, corresponding to 13 breeders containing antibodies to the virus. These findings emphasized that the choice of diagnostic tests is extremely important for the early detection of seropositive animals and thus the prevention of the spread of the virus among herds in the region.(AU)

O desempenho produtivo de um rebanho pode ser comprometido por diversas enfermidades. Em relação aos ovinos, à ocorrência da Maedi - Visna (MV) doença infecciosa, de caráter crônico, causada por um vírus (Maedi-Visna Vírus MVV) pertencente ao gênero Lentivirus da família Retroviridae. A infecção pode causar importantes perdas econômicas e elevados impactos sanitários nos sistemas de produção da ovinocultura. Em virtude da importância desta enfermidade nos rebanhos ovinos, o objetivo do estudo foi realizar um levantamento soroepidemiológico do vírus da Maedi - Visna (MVV) nos estados do Ceará (CE), Rio Grande do Norte (RN), Paraíba (PB) e Sergipe (SE). Para tanto, foram coletadas 3332 amostras de sangue nos quatro estados, sendo 1011 do CE, 931 do RN, 459 da PB e 931 de SE, sendo este número de amostras proporcional ao rebanho efetivo de cada estado. As amostras foram analisadas utilizando o teste de microimunodifusão em gel de ágar (IDGA). Os reprodutores foram reavaliados pela técnica de Western Blot (WB). Associado a esse levantamento sorológico foi aplicado um questionário epidemiológico para identificar possíveis fatores de risco que podem facilitar a introdução e disseminação de enfermidades (localização, categoria, sexo, tipo racial, sistema de criação, produção, tamanho de rebanho e associação com caprinos). Após análise dos soros pelo teste de IDGA foi verificada uma soroprevalência nula nos rebanhos estudados. Os reprodutores reavaliados pelo WB apresentaram uma prevalência geral de 5,5% da MV nos quatro estados estudados, sendo que os estados do Ceará, Rio Grande do Norte, Paraíba e Sergipe apresentaram, 2,3% (2/88), 10,4% (8/77), 3,6% (1/28) e 4,7% (2/42) respectivamente, correspondendo a 13 reprodutores que apresentaram presença de anticorpos. Diante desses resultados, ressalta-se que a escolha dos testes diagnósticos é de extrema importância para que haja uma detecção precoce de animais soropositivos, e assim evitar a...(AU)

Detection of Maedi-Visna virus from sheep bronchoalveolar lavage by Nested PCR evaluation of different primers pairs / Detecção do vírus Maedi-Visna em amostras de lavado bronco-alveolar de ovinos através da técnica de Nested PCR utilizando diferentes pares de primers

Background: Small ruminant lentiviruses (SRLV) are characterized by a high degree of genetic variability related to your replication process, resulting in several strains in different geographic regions. The Polymerase Chain Reaction (PCR) is very successful in the detection of proviral DNA of SRLV, however, due to the high variability of the lentivirus genome, the efficiency and sensibility of PCR depends mainly on the specificity of the primers designed and the choice of the amplified target viral region. The aim of this study was to compare detection of Maedi Visna Virus (MVV) from bronco alveolar lavage samples of sheep by Nested PCR using primers for the gag and LTR genes. Materials, Methods & Results: Samples of sheep bronchoalveolar lavage (n = 58) from slaughterhouse in the Metropolitan Region of Fortaleza were previously tested by nested PCR using primers for region gag. Thereafter, these samples were tested by nested PCR with primers designed for the LTR region. Both tests were conducted using thermocycler (Biocycler®) under the following conditions: initial denaturation at 94C for 5 min, followed by 35 cycles of denaturation at 94C for 1 min, annealing of primers at 56C for 1 min and extension of DNA at 72C for 45 s with a final extension at 72 for 7 min. The first and second round were performed under the same conditions. Every amplification was performed [...](AU)

Detection of Maedi-Visna virus from sheep bronchoalveolar lavage by Nested PCR evaluation of different primers pairs / Detecção do vírus Maedi-Visna em amostras de lavado bronco-alveolar de ovinos através da técnica de Nested PCR utilizando diferentes pares de primers

Background: Small ruminant lentiviruses (SRLV) are characterized by a high degree of genetic variability related to your replication process, resulting in several strains in different geographic regions. The Polymerase Chain Reaction (PCR) is very successful in the detection of proviral DNA of SRLV, however, due to the high variability of the lentivirus genome, the efficiency and sensibility of PCR depends mainly on the specificity of the primers designed and the choice of the amplified target viral region. The aim of this study was to compare detection of Maedi Visna Virus (MVV) from bronco alveolar lavage samples of sheep by Nested PCR using primers for the gag and LTR genes. Materials, Methods & Results: Samples of sheep bronchoalveolar lavage (n = 58) from slaughterhouse in the Metropolitan Region of Fortaleza were previously tested by nested PCR using primers for region gag. Thereafter, these samples were tested by nested PCR with primers designed for the LTR region. Both tests were conducted using thermocycler (Biocycler®) under the following conditions: initial denaturation at 94C for 5 min, followed by 35 cycles of denaturation at 94C for 1 min, annealing of primers at 56C for 1 min and extension of DNA at 72C for 45 s with a final extension at 72 for 7 min. The first and second round were performed under the same conditions. Every amplification was performed [...]

Eletroforese bidimensional e espectrometria de massa como ferramentas proteômicas aplicadas à definição de marcadores proteicos associados à eficiência reprodutiva de caprinos / Two-dimensional electrophoresis and mass spectrometry as proteomic tools applied to the definition of protein markers associated with reproductive efficiency goats

O crescimento e desenvolvimento do rebanho caprino no Nordeste são observados com o aumento na produção da pecuária do Brasil. Esse aumento é reflexo, a princípio, das maiores exigências do mercado consumidor por produtos de melhor qualidade obtidos a partir de rebanhos de alto padrão zootécnico. As pesquisas atuais ilustram a necessidade de dispor de biomarcadores que auxiliem a indicação do potencial reprodutivo dos animais, uma vez que isso não pode ser expresso apenas com o exame andrológico. A avaliação da expressão das proteínas, tomando-as como biomarcadores, é análise potencial uma vez que estas, dentre os constituintes do plasma seminal, são encontradas em maior quantidade na forma de complexos associados, desempenhando papel crucial em todos os processos relacionados à capacidade fecundante dos espermatozoides. Essa análise é realizada por métodos de separação e detecção simultânea de proteínas utilizando técnicas como a eletroforese bidimensional (2DE) ou cromatografias, acoplados a métodos cada vez mais eficientes e sensíveis de identificação e quantificação de níveis de expressão de proteínas por espectrometria de massas. O objetivo desta revisão é abordar sobre a técnica de eletroforese bidimensional associada à espectrometria de massa como ferramenta na análise da expressão de proteínas dentro do campo da proteômica.

The growth and development of goat herds in the northeast are being observed due to the increase in livestock production in Brazil. This increase reflects demands of the consumer market for high quality product, which are obtained from flocks of high standard zootechnics. Current research illustrates the need for biomarkers that indicate an animal ́s reproductive potential, since this cannot be expressed solely with andrologic evaluation. For this reason, the expression of the proteins as biomarkers is a potential analysis. The proteins from the seminal plasma constituents are found in larger amounts in the form of associated complexes, playing a crucial role in all processes related to the fertilizing capacity of sperm. This analysis is performed by separation methods and simultaneous detection of proteins using techniques such as two-dimensional electrophoresis (2DE) or chromatography. These techniques are coupled with methods to identify and quantify expression levels of proteins by mass spectrometry that are increasingly efficient and sensitive. The aim of this review was to discuss the technique of two-dimensional electrophoresis combined with mass spectrometry as a tool in the analysis of protein expression within the field of proteomics.

Eletroforese bidimensional e espectrometria de massa como ferramentas proteômicas aplicadas à definição de marcadores proteicos associados à eficiência reprodutiva de caprinos / Two-dimensional electrophoresis and mass spectrometry as proteomic tools applied to the definition of protein markers associated with reproductive efficiency goats

O crescimento e desenvolvimento do rebanho caprino no Nordeste são observados com o aumento na produção da pecuária do Brasil. Esse aumento é reflexo, a princípio, das maiores exigências do mercado consumidor por produtos de melhor qualidade obtidos a partir de rebanhos de alto padrão zootécnico. As pesquisas atuais ilustram a necessidade de dispor de biomarcadores que auxiliem a indicação do potencial reprodutivo dos animais, uma vez que isso não pode ser expresso apenas com o exame andrológico. A avaliação da expressão das proteínas, tomando-as como biomarcadores, é análise potencial uma vez que estas, dentre os constituintes do plasma seminal, são encontradas em maior quantidade na forma de complexos associados, desempenhando papel crucial em todos os processos relacionados à capacidade fecundante dos espermatozoides. Essa análise é realizada por métodos de separação e detecção simultânea de proteínas utilizando técnicas como a eletroforese bidimensional (2DE) ou cromatografias, acoplados a métodos cada vez mais eficientes e sensíveis de identificação e quantificação de níveis de expressão de proteínas por espectrometria de massas. O objetivo desta revisão é abordar sobre a técnica de eletroforese bidimensional associada à espectrometria de massa como ferramenta na análise da expressão de proteínas dentro do campo da proteômica.(AU)

The growth and development of goat herds in the northeast are being observed due to the increase in livestock production in Brazil. This increase reflects demands of the consumer market for high quality product, which are obtained from flocks of high standard zootechnics. Current research illustrates the need for biomarkers that indicate an animal ́s reproductive potential, since this cannot be expressed solely with andrologic evaluation. For this reason, the expression of the proteins as biomarkers is a potential analysis. The proteins from the seminal plasma constituents are found in larger amounts in the form of associated complexes, playing a crucial role in all processes related to the fertilizing capacity of sperm. This analysis is performed by separation methods and simultaneous detection of proteins using techniques such as two-dimensional electrophoresis (2DE) or chromatography. These techniques are coupled with methods to identify and quantify expression levels of proteins by mass spectrometry that are increasingly efficient and sensitive. The aim of this review was to discuss the technique of two-dimensional electrophoresis combined with mass spectrometry as a tool in the analysis of protein expression within the field of proteomics.(AU)

Princípios básicos da criomicrobiologia: enfoque nos tipos de micro-organismos e nos principais agentes crioprotetores / Basic principles of criomicrobiologia: focus in kind of microorganisms and principals cryoprotectants agents

O reconhecimento da grande relevância da biodiversidade microbiana para o desenvolvimento humano tem conduzido ao aprimoramento de técnicas destinadas à conservação dos mais diversos espécimes microbiológicos. Contudo, ainda não existe uma fórmula singular, ideal ou universal que possibilite a eficiência da estocagem e preservação microbiana a longo prazo. Consequentemente, diversos micro-organismos para os quais há uma crescente demanda, ainda esperam pelo desenvolvimento de metodologias adequadas à sua conservação, fazendo da criobiologia um campo de vasto potencial para o desenvolvimento de pesquisas. Nesse contexto, a proposta dessa revisão é discutir os princípios básicos da criomicrobiologia, com enfoque na preservação dos variados tipos de micro-organismos e nos principais agentes crioprotetores, tomando como base estudos disponíveis na literatura científica.

The recognizing the great importance of microbial biodiversity for human development has led to the improvement of techniques for the conservation of diverse microbiological specimens. However, there isn't a singular, ideal or universal method to provice the efficiency of the long-term microorganisms stock and preservation. Many microorganisms for which there is a growing demand still wait for the development of satisfactory methodologies to their conservation, making the cryobiology a field of vast potential for the development of researches. Then, the proposal of this review is to discuss the basic principles of cryomicrobiology, focusing the preservation of kinds microorganisms and principals agents cryoprotectants, using the available studies in the comtemporary scientific literature as base.

Detecção do vírus maedi-visna no lavado bronco-alveolar de pulmões ovinos / Detection of virus maedi visna bronchoalveolar washed in lungs of sheep

O vírus Maedi-Visna é um lentivírus pertencente à família Retroviridae, responsável por causar uma doença de caráter multissistêmico, que não possui tratamento ou vacina, denominada Maedi-Visna. O animal infectado pode apresentar lesões nos pulmões, articulações, glândulas mamárias e cérebro, isoladamente ou não; porém, normalmente, o animal se apresenta assintomático, devendo-se recorrer a testes laboratoriais para seu diagnóstico. O objetivo desse trabalho foi detectar o vírus Maedi-Visna no lavado bronco-alveolar de pulmões ovinos provenientes de abatedouro da Região Metropolitana de Fortaleza. Para tanto, foram coletadas amostras de pulmões ovinos, e realizado o lavado bronco-alveolar para obtenção das células de interesse, em sua maioria leucócitos, que foram destinados ao cultivo celular e posterior extração e amplificação do DNA. Por meio de Nested-PCR, a presença do DNA pró-viral foi confirmada em seis (10,48%) das 58 amostras estudas, demonstrando a presença do vírus Maedi-Visna no lavado bronco-alveolar, e reafirmando a importância da via respiratória na transmissão desse patógeno. Dessa forma, amostras de lavado bronco-alveolar podem ser utilizadas visando-se diagnosticar essa doença, sendo a detecção do DNA pró-viral um diagnostico conclusivo.

Maedi Visna Virus is a lentivirus belonging to the Retroviridae family, responsible for causing a multisystem disease that has no vaccine or treatment, called Maedi-Visna. The infected animal may show lesions in the lungs, joints, brain and mammary glands, singly or not, but usually the animal doesnt shows symptoms, and should be resorted to laboratory tests for diagnosis. The aim of this study was to detect the Maedi Visna Virus in bronchoalveolar lavage of sheep lungs from slaughterhouse in the Metropolitan Region of Fortaleza. For this purpose, samples lungs were collected from sheep, and performed bronchoalveolar lavage to obtain the cells of interest, mostly leukocytes, which were intended for cell culture and subsequent DNA extraction and amplification. By nested PCR, the presence of proviral DNA was confirmed in six (10.48%) of the 58 samples studied, demonstrating the presence of virus Maedi-Visna in bronchoalveolar lavage, and reaffirming the importance of airway in the transmission of this pathogen. Thus, samples of bronchoalveolar lavage can be used in order to diagnose this disease, and the detection of proviral DNA a conclusive diagnosis.

Detecção do vírus maedi-visna no lavado bronco-alveolar de pulmões ovinos / Detection of virus maedi visna bronchoalveolar washed in lungs of sheep

O vírus Maedi-Visna é um lentivírus pertencente à família Retroviridae, responsável por causar uma doença de caráter multissistêmico, que não possui tratamento ou vacina, denominada Maedi-Visna. O animal infectado pode apresentar lesões nos pulmões, articulações, glândulas mamárias e cérebro, isoladamente ou não; porém, normalmente, o animal se apresenta assintomático, devendo-se recorrer a testes laboratoriais para seu diagnóstico. O objetivo desse trabalho foi detectar o vírus Maedi-Visna no lavado bronco-alveolar de pulmões ovinos provenientes de abatedouro da Região Metropolitana de Fortaleza. Para tanto, foram coletadas amostras de pulmões ovinos, e realizado o lavado bronco-alveolar para obtenção das células de interesse, em sua maioria leucócitos, que foram destinados ao cultivo celular e posterior extração e amplificação do DNA. Por meio de Nested-PCR, a presença do DNA pró-viral foi confirmada em seis (10,48%) das 58 amostras estudas, demonstrando a presença do vírus Maedi-Visna no lavado bronco-alveolar, e reafirmando a importância da via respiratória na transmissão desse patógeno. Dessa forma, amostras de lavado bronco-alveolar podem ser utilizadas visando-se diagnosticar essa doença, sendo a detecção do DNA pró-viral um diagnostico conclusivo.(AU)

Maedi Visna Virus is a lentivirus belonging to the Retroviridae family, responsible for causing a multisystem disease that has no vaccine or treatment, called Maedi-Visna. The infected animal may show lesions in the lungs, joints, brain and mammary glands, singly or not, but usually the animal doesnt shows symptoms, and should be resorted to laboratory tests for diagnosis. The aim of this study was to detect the Maedi Visna Virus in bronchoalveolar lavage of sheep lungs from slaughterhouse in the Metropolitan Region of Fortaleza. For this purpose, samples lungs were collected from sheep, and performed bronchoalveolar lavage to obtain the cells of interest, mostly leukocytes, which were intended for cell culture and subsequent DNA extraction and amplification. By nested PCR, the presence of proviral DNA was confirmed in six (10.48%) of the 58 samples studied, demonstrating the presence of virus Maedi-Visna in bronchoalveolar lavage, and reaffirming the importance of airway in the transmission of this pathogen. Thus, samples of bronchoalveolar lavage can be used in order to diagnose this disease, and the detection of proviral DNA a conclusive diagnosis.(AU)

Seroepidemiological study of maedi-visna in sheep in Ceara, Rio Grande do Norte, Paraíba, and Sergipe States / Estudo soroepidemiológico da maedi-visna em ovinos nos estados do Ceará, Rio Grande do Norte, Paraíba e Sergipe

The production performance of a livestock herd can be compromised by various diseases. In sheep, maedi-visna (MV) infections, which have a chronic nature, are caused by a virus (maedi-visna virus (MVV)) belonging to the genus Lentivirus of the Retroviridae family. The infection can cause significant economic losses and has considerable health impacts on sheep breeding in production systems. Due to the importance of this disease in sheep flocks, the objective was to conduct a serosurvey of MVV in the states of Ceará (CE), Rio Grande do Norte (RN), Paraíba (PB), and Sergipe (SE). A total of, 3332 serum samples were collected in the four states, 1011 in CE, 931 in RN, 459 in PB, and 931 in SE, with the number of samples proportional to the actual herd size of each state. The samples were analyzed using the agar gel microimmunodiffusion test (AGID). Reproducers were revaluated using western blotting (WB). In addition to this serological survey, we administered an investigative questionnaire to identify possible risk factors that facilitate the introduction and spread of diseases (location, category, sex, breed type, creation system, production, herd size, and association with goats). After analysis of the sera using the AGID test, there was zero prevalence. Revaluating breeders by WB revealed a 5.5% prevalence of MV in the four states studied, with prevalences for the states of CE, RN, Paraiba, and SE of 2.3% (2/88), 10.4% (8/77), 3.6% (1/28), and 4.7% (2/42), respectively, corresponding to 13 breeders containing antibodies to the virus. These findings emphasized that the choice of diagnostic tests is extremely important for the early detection of seropositive animals and thus the prevention of the spread of the virus among herds in the region.

O desempenho produtivo de um rebanho pode ser comprometido por diversas enfermidades. Em relação aos ovinos, à ocorrência da Maedi - Visna (MV) doença infecciosa, de caráter crônico, causada por um vírus (Maedi-Visna Vírus MVV) pertencente ao gênero Lentivirus da família Retroviridae. A infecção pode causar importantes perdas econômicas e elevados impactos sanitários nos sistemas de produção da ovinocultura. Em virtude da importância desta enfermidade nos rebanhos ovinos, o objetivo do estudo foi realizar um levantamento soroepidemiológico do vírus da Maedi - Visna (MVV) nos estados do Ceará (CE), Rio Grande do Norte (RN), Paraíba (PB) e Sergipe (SE). Para tanto, foram coletadas 3332 amostras de sangue nos quatro estados, sendo 1011 do CE, 931 do RN, 459 da PB e 931 de SE, sendo este número de amostras proporcional ao rebanho efetivo de cada estado. As amostras foram analisadas utilizando o teste de microimunodifusão em gel de ágar (IDGA). Os reprodutores foram reavaliados pela técnica de Western Blot (WB). Associado a esse levantamento sorológico foi aplicado um questionário epidemiológico para identificar possíveis fatores de risco que podem facilitar a introdução e disseminação de enfermidades (localização, categoria, sexo, tipo racial, sistema de criação, produção, tamanho de rebanho e associação com caprinos). Após análise dos soros pelo teste de IDGA foi verificada uma soroprevalência nula nos rebanhos estudados. Os reprodutores reavaliados pelo WB apresentaram uma prevalência geral de 5,5% da MV nos quatro estados estudados, sendo que os estados do Ceará, Rio Grande do Norte, Paraíba e Sergipe apresentaram, 2,3% (2/88), 10,4% (8/77), 3,6% (1/28) e 4,7% (2/42) respectivamente, correspondendo a 13 reprodutores que apresentaram presença de anticorpos. Diante desses resultados, ressalta-se que a escolha dos testes diagnósticos é de extrema importância para que haja uma detecção precoce de animais soropositivos, e assim evitar a...