First report of fibropapillomatosis (FP) and Chelonid alphaherpesvirus 5 (ChHV5) in a green sea turtle (Chelonia mydas) from the historically fibropapillomatosis-free Fernando de Noronha Archipelago, Northeastern Brazil / Primeiro caso de fibropapilomatose (FP) e de Chelonid alphaherpesvirus 5 (ChHV5) em tartaruga-verde (Chelonia mydas) no Arquipélago de Fernando de Noronha, Nordeste do Brasil

Fibropapillomatosis (FP) is an infectious disease caused by Chelonid alphaherpesvirus 5 (ChHV5). Nevertheless, its clinical manifestations are considered multifactorial. Due to its relevance, FP is currently monitored in sea turtle populations in the United States, Australia, Caribbean, and Brazil. Between 2000 and 2020, the TAMAR Project/ TAMAR Project Foundation analyzed the prevalence of FP in nine states and oceanic islands along the Brazilian coast, including Fernando de Noronha Archipelago (FNA), a historically FP-free area. A total of 4,435 green sea turtles (Chelonia mydas) were monitored from 2010 to 2016. Additionally, in 2012 and 2014, 43 FP-free skin samples were analyzed for ChHV5 using a qualitative PCR for the UL30 polymerase (pol) sequence. In 2015, a bilateral ocular nodule characterized as an FP tumor was reported in one of the monitored individuals undergoing rehabilitation. Tissue samples were collected following surgical removal of the tumor. Characterization of a 454 bp UL30 polymerase gene revealed a ChHV5 sequence previously reported in other areas of the Atlantic Brazilian coast. In the years following this finding from January 2017 to March 2020, a total of 360 C. mydas were monitored in the same area and no FP tumors were detected. This is the first report of FP and the first detection of ChHV5 in FNA, a finding of great concern considering this site's historical absence of FP occurrence. This study highlights the importance of monitoring this disease in historically FP-free areas of the Brazilian Atlantic coast.(AU)

A fibropapilomatose (FP) é uma doença infecciosa causada pelo Chelonid alphaherpesvirus 5 (ChHV5). No entanto, as manifestações clínicas da doença são consideradas multifatoriais. Esta doença é monitorada atualmente em populações de tartarugas marinhas nos EUA, Austrália, Caribe e Brasil. Desde 2000, o Projeto TAMAR/Fundação Projeto TAMAR analisa a presença de FP em nove estados da costa brasileira e ilhas oceânicas, incluindo o arquipélago de Fernando de Noronha, uma área historicamente livre de FP. Um total de 4.435 indivíduos de Chelonia mydas foram monitorados de 2010 a 2016 e 43 amostras de pele foram analisadas para detectar ChHV5 em 2012 e 2014 com o objetivo de avaliar a presença do vírus em tecidos sem FP, usando uma PCR qualitativa para detecção de sequências do gene da UL30 polimerase. Em 2015, uma tartaruga verde (C. mydas) foi relatada com um nódulo ocular bilateral caracterizado como FP. Amostras de tecido foram coletadas durante sua reabilitação e procedimento cirúrgico para remover o tumor. A caracterização parcial de uma sequência de 454 bp do gene UL30 polimerase detectou ChHV5 anteriormente relatado em outras áreas da costa atlântica brasileira. Após estes achados, de janeiro de 2017 a março de 2020, um total de 360 indivíduos de C. mydas foram monitorados e nenhum caso de FP foi registrado. Este é o primeiro relato de FP e a primeira caracterização de ChHV5 no arquipélago de Fernando de Noronha, uma questão preocupante e que ressalta a importância do monitoramento desta doença em áreas historicamente livres de FP na costa atlântica brasileira.(AU)

First report of scuticociliatosis caused by Uronema sp. in ornamental reef fish imported into Brazil / Primeiro relato de scuticociliatose causada por Uronema sp. em peixes ornamentais de recife importados para o Brasil

Scuticociliatosis, which is caused by an opportunistic ciliate protozoan, is responsible for significant economic losses in marine ornamental fish. This study reports the occurrence of Uronema sp., which was found to be parasitizing three species of marine reef fish imported into Brazil and maintained in quarantine: Vanderbilts Chromis (Chromis vanderbilti), blue-green damselfish (Chromis viridis), and sea goldie (Pseudanthias squamipinnis). During the quarantine period, some fish presented with behavioral disorders and hemorrhages and ulcerative lesions on the body surface. Histopathological analysis showed hemorrhages, inflammation comprising mononuclear and granular cells in the skeletal muscle, and necrosis of the skin and the secondary lamellae of the gills, and parasites were also observed in the renal capsule. The absence of transboundary measures available to prevent the occurrence of ornamental fish diseases is also discussed.(AU)

Scuticociliatose, causada por protozoários ciliados oportunistas, é responsável por perdas econômicas significativas em peixes ornamentais marinhos. O presente estudo relata a ocorrência de Uronema sp., parasitando três espécies de peixes ornamentais de recife importados para o Brasil e mantidos em quarentena: Vanderbilts Chromis (Chromis vanderbilti), blue-green damselfish (Chromis viridis), e sea goldie (Pseudanthias squamipinnis). Durante o período de quarentena, alguns peixes apresentaram alterações comportamentais tais com hemorragias e lesões ulcerativas na superfície da pele. A histopatologia mostrou hemorragias, inflamação com células mononucleares e granulares na musculatura, e necrose da pele e lamelas secundárias das brânquias, e parasitas também foram observados na cápsula renal. A ausência de medidas transfronteiriças disponíveis para prevenir a ocorrência de doenças de peixes ornamentais também é discutida.(AU)

Epizootic amebiasis outbreak in wild black howler monkeys (Alouatta caraya) in a wildlife facility during captivity prior to translocation - Recommendations to wildlife management programs / Surto epizoótico de amebíase em Bugio preto (Alouatta caraya) provenientes de vida livre durante o cativeiro prévio a translocação - Recomendações a programas de manejo de fauna

The capture and quarantine of non-human primates could be necessary in some circumstances including those required under environmental permit. Mortality is undesirable for wildlife management programs and could be related to opportunistic pathogens, for example, deaths due to intestinal protozoa infection outbreaks as described here. Parasitological, necroscopic, microbiological, and molecular tests were used in the diagnosis of severe necrotic enteritis leading to death of three female and two male black howler monkeys (Alouatta caraya) captured and held in quarantine prior to translocation. Parasitological tests showed the presence of cysts of Entamoeba histolytica/dispar (5/5), Entamoeba coli (5/5) and Giardia duodenalis (1/5). Necroscopic assessment revealed areas of severe multifocal necrosis in the intestinal mucosa and submucosa. Histopathological examination revealed the presence of structures morphologically compatible to Entamoeba spp. in all individuals examined. Furthermore, G. duodenalis (1/5) was demonstrated by the nested PCR technique. During temporary captivity of non-human primates in management programs, proper handling protocols, including fast or immediate destination, are suggested in order to mitigate the negative effects of stress and decrease the risk of infections.(AU)

Óbitos por infecções causadas por protozoários intestinais são indesejáveis para programas de manejo de fauna, exigidos no âmbito do licenciamento ambiental e que demandam a captura e quarentena de primatas não humanos. Exames coproparasitológicos, necroscópicos, microbiológicos e moleculares foram utilizados para a confirmação do diagnóstico de uma severa enterite necrótica que levou a óbito três fêmeas e dois machos de Alouatta (A.) caraya capturados e mantidos em quarentena prévia à translocação. Exames coproparasitológicos revelaram a presença de cistos de Entamoeba (E.) histolytica/dispar (5/5), Entamoeba (E.) coli (5/5) e Giardia (G.) duodenalis (1/5). A avaliação necroscópica revelou áreas de necrose multifocal severa na mucosa e submucosa intestinal. A análise microscópica revelou a presença de estruturas morfologicamente compatíveis com trofozoítos do gênero Entamoeba spp. em todos os indivíduos examinados. Além disso, G. duodenalis (1/5) foi demonstrada pela técnica de Nested PCR. Sugere-se que quando for necessário o cativeiro temporário de primatas, deverão ser adotados protocolos de manejo adequados buscando a destinação imediata dos animais, de moto a mitigar os efeitos negativos do estresse e reduzir o risco da ocorrência de infecções.(AU)

Occurrence of anti-Toxoplasma gondii, Neospora caninum and Leptospira spp. antibodies in opossums (Didelphis spp.) in São Paulo State, Brazil / Ocorrência de anticorpos anti-Toxoplasma gondii, anti-Neospora caninum e antiLeptospira spp. em gambás (Didelphis spp.) no estado de São Paulo, Brasil

Opossum (Didelphis spp.) is an omnivorous marsupial native to the Americas that shows synanthropic behavior in urban areas. Despite its proximity to domestic animals and humans, knowledge of its participation in the epidemiology of some zoonotic agents is substantial. This study aimed to determine the presence of antibodies against Toxoplasma gondii, Neospora spp. and Leptospira spp. in blood samples collected from opossums in 18 municipalities in the state of São Paulo, Brazil, between 2003 and 2008. Blood samples from 343 opossums: Didelphis aurita (n = 256) and Didelphis albiventris (n = 87) were obtained. These were tested to detect antibodies against T. gondii, using the modified agglutination test (MAT-Toto; cutoff ≥ 25); Neospora spp., using the indirect fluorescent antibody test (IFAT; cutoff ≥ 25); and Leptospira spp., using the microscopic agglutination test (MAT-Lepto; cutoff ≥ 100). Frequency of anti-T. gondii, Neospora spp. and Leptospira spp. antibodies were in 22.7%, 1.5% and 3.5%, respectively. The serogroups-serovars of Leptospira spp. presenting positive MAT-Lepto reactions were: AutumnalisButembo; Mini-Mini; Ballum-Castellonis; Icterohaemorrhagiae-Icterohaemorrhagiae; Icterohaemorrhagiae-Copenhageni and Grippotyphosa-Grippotyphosa or Bananal. This study demonstrated that these zoonotic agents are circulating in opossum populations in the state of São Paulo. Therefore, investigations regarding the role of marsupials in the epidemiology of each of these diseases should be conducted, especially to understand the behavior of these animals as zoonosis maintenance hosts.(AU)

O gambá (Didelphis spp.) é um marsupial onívoro nativo das Américas que apresenta comportamento sinantrópico em áreas urbanas. Apesar da sua proximidade com animais domésticos e o homem, o conhecimento da sua participação na epidemiologia de alguns agentes zoonóticos é fundamental. Este estudo objetivou determinar a presença de anticorpos contra Toxoplasma gondii, Neospora spp. e Leptospira spp. em amostras de sangue colhidas de gambás de 18 municípios do estado de São Paulo, Brasil, entre 2003 e 2008. Foram obtidas amostras sanguíneas de 343 gambás: Didelphis aurita (n = 256) e Didelphis albiventris (n = 87). As amostras foram testadas para detecção de anticorpos contra T. gondii, utilizando o teste de aglutinação modificado (TAM-Toxo; ponto de corte ≥ 25); Neospora spp., utilizando a reação de imunofluorescência indireta (RIFI; ponto de corte ≥ 25); e Leptospira spp., utilizando a soroaglutinação microscópica (SAM-Lepto; ponto de corte ≥ 100). As frequências de anticorpos contra T. gondii, Neospora spp. e Leptospira spp. foram 22,7%, 1,5% e 3,5%, respectivamente. Os sorogrupossorovares de Leptospira spp. que apresentaram soropositividade foram: Autumnalis-Butembo; Mini-Mini; Ballum-Castellonis; Icterohaemorrhagiae-Icterohaemorrhagiae; Icterohaemorrhagiae-Copenhageni e Grippotyphosa-Grippotyphosa ou Bananal. Esse estudo demonstrou que esses agentes estão circulando em populações de gambás no estado de São Paulo. Desta forma, investigações que visam determinar o papel dos marsupiais na epidemiologia de cada doença devem ser conduzidas, especialmente visando o entendimento do comportamento desses animais como hospedeiros dessas zoonoses.(AU)

Occurrence of anti-Toxoplasma gondii, Neospora caninum and Leptospira spp. antibodies in opossums (Didelphis spp.) in São Paulo State, Brazil / Ocorrência de anticorpos anti-Toxoplasma gondii, anti-Neospora caninum e anti-Leptospira spp. em gambás (Didelphis spp.) no estado de São Paulo, Brasil

Opossum (Didelphis spp.) is an omnivorous marsupial native to the Americas that shows synanthropic behavior in urban areas. Despite its proximity to domestic animals and humans, knowledge of its participation in the epidemiology of some zoonotic agents is substantial. This study aimed to determine the presence of antibodies against Toxoplasma gondii, Neospora spp. and Leptospira spp. in blood samples collected from opossums in 18 municipalities in the state of São Paulo, Brazil, between 2003 and 2008. Blood samples from 343 opossums: Didelphis aurita (n = 256) and Didelphis albiventris (n = 87) were obtained. These were tested to detect antibodies against T. gondii, using the modified agglutination test (MAT-Toto; cutoff ≥ 25); Neospora spp., using the indirect fluorescent antibody test (IFAT; cutoff ≥ 25); and Leptospira spp., using the microscopic agglutination test (MAT-Lepto; cutoff ≥ 100). Frequency of anti-T. gondii, Neospora spp. and Leptospira spp. antibodies were in 22.7%, 1.5% and 3.5%, respectively. The serogroups-serovars of Leptospira spp. presenting positive MAT-Lepto reactions were: Autumnalis-Butembo; Mini-Mini; Ballum-Castellonis; Icterohaemorrhagiae-Icterohaemorrhagiae; Icterohaemorrhagiae-Copenhageni and Grippotyphosa-Grippotyphosa or Bananal. This study demonstrated that these zoonotic agents are circulating in opossum populations in the state of São Paulo. Therefore, investigations regarding the role of marsupials in the epidemiology of each of these diseases should be conducted, especially to understand the behavior of these animals as zoonosis maintenance hosts.(AU)

O gambá (Didelphis spp.) é um marsupial onívoro nativo das Américas que apresenta comportamento sinantrópico em áreas urbanas. Apesar da sua proximidade com animais domésticos e o homem, o conhecimento da sua participação na epidemiologia de alguns agentes zoonóticos é fundamental. Este estudo objetivou determinar a presença de anticorpos contra Toxoplasma gondii, Neospora spp. e Leptospira spp. em amostras de sangue colhidas de gambás de 18 municípios do estado de São Paulo, Brasil, entre 2003 e 2008. Foram obtidas amostras sanguíneas de 343 gambás: Didelphis aurita (n = 256) e Didelphis albiventris (n = 87). As amostras foram testadas para detecção de anticorpos contra T. gondii, utilizando o teste de aglutinação modificado (TAM-Toxo; ponto de corte ≥ 25); Neospora spp., utilizando a reação de imunofluorescência indireta (RIFI; ponto de corte ≥ 25); e Leptospira spp., utilizando a soroaglutinação microscópica (SAM-Lepto; ponto de corte ≥ 100). As frequências de anticorpos contra T. gondii, Neospora spp. e Leptospira spp. foram 22,7%, 1,5% e 3,5%, respectivamente. Os sorogrupossorovares de Leptospira spp. que apresentaram soropositividade foram: Autumnalis-Butembo; Mini-Mini; Ballum-Castellonis; Icterohaemorrhagiae-Icterohaemorrhagiae; Icterohaemorrhagiae-Copenhageni e Grippotyphosa-Grippotyphosa ou Bananal. Esse estudo demonstrou que esses agentes estão circulando em populações de gambás no estado de São Paulo. Desta forma, investigações que visam determinar o papel dos marsupiais na epidemiologia de cada doença devem ser conduzidas, especialmente visando o entendimento do comportamento desses animais como hospedeiros dessas zoonoses.(AU)

Serological evidence of exposure to tick-borne agents in opossums (Didelphis spp) in the state of São Paulo, Brazil / Evidência sorológica de exposição a agentes transmitidos por carrapatos em gambás (Didelphis spp) no estado de São Paulo, Brasil

Abstract This work involved a serological investigation of tick-borne pathogens in opossums in eight municipalities of the state of São Paulo, Brazil. Serum samples from 109 opossums (91 Didelphis aurita and 18 Didelphis albiventris) were tested to detect antibodies to Rickettsia rickettsii (Taiaçu strain, 1:64 cut-off) and Ehrlichia canis (São Paulo strain, 1:40 cut-off), by indirect immunofluorescence assay (IFA); and against Borrelia burgdorferi (strain G39/40) by enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). The presence of antibodies to anti-R. rickettsii, anti-E. canis and anti-B. burgdorferi was detected in 32 (29.35%), 16 (14.67%) and 30 (27.52%) opossums, respectively. Opossum endpoint titers ranged from 64 to 1,024 for R. rickettsii, from 40 to 160 for E. canis, and from 400 to >51,200 for B. burgdorferi. These serological results suggest that opossums have been exposed to Rickettsia spp., Ehrlichia spp., and B. burgdorferi-related agents in the state of São Paulo. Our study underscores the need for further research about these agents in this study area, in view of the occurrence of Spotted Fever and Baggio-Yoshinari Syndrome disease in humans in the state of São Paulo, Brazil.(AU)

Resumo O presente estudo investigou evidência sorológica de agentes transmitidos por carrapatos em gambás em oito municípios do Estado de São Paulo, Brasil. Amostras de soro de 109 gambás (91 Didelphis aurita e 18 Didelphis albiventris) foram testadas para detecção de anticorpos contra Rickettsia rickettsii (cepa Taiaçu, ponto de corte 1:64) Ehrlichia canis (cepa São Paulo, ponto de corte 1:40), pela reação de imunofluorescência indireta (RIFI); e contra Borrelia burgdorferi (cepa G39/40) pelo teste imunoenzimático (ELISA). A presença de anticorpos anti-R. rickettsii, anti-E. canis e anti-B. burgdorferi foi detectada em 32 (29,35%), 16 (14,67%) e 30 (27,52%) gambás, respectivamente. Os títulos finais variaram de 64 a 1.024 para R. rickettsii, de 40 a 160 para E. canis, e de 400 a >51.200 para B. burgdorferi. Esses resultados sugerem que os gambás foram expostos a agentes relacionados à Rickettsia spp., Ehrlichia spp., e B. burgdorferi no Estado de São Paulo. Neste estudo salienta a necessidade de novas pesquisas sobre esses agentes nessas áreas de trabalho, devido à ocorrência da Febre Maculosa e da Síndrome Baggio-Yoshinari em humanos no Estado de São Paulo, Brasil.(AU)

Determining organochlorine pesticides in samples of green sea turtles by QuEChERS approach / Determinação de pesticidas organoclorados em amostras de tartarugas verdes pelo método QuEChERS

Some Organochlorine Pesticides (OCPs) can pose numerous adverse effects on biota. Marine turtles face numerous threats, in particular those related to anthropogenic activities. Therefore, development and improvement methodologies for monitoring chemical compounds are a relevant task. In this work, we developed a methodology based on the QuEChERS (Quick, Easy, Cheap, Effective, Rugged and Safe) extraction for detection of twelve OCPs, by gas chromatography with electron capture detector, in fat and liver samples of green sea turtles. Quantification limits were lower than 5.3 ng g-1; acceptable recovery rates for most compounds; medium matrix effect; matrix-calibration with linearity at the range from 1.0 to 200 ng g-1. This methodology provides contributions for the study of pesticide residues with adverse effects on sea turtle health, important skills for new directions in conservation issues(AU)

Alguns Pesticidas organoclorados (OCPs) podem causar numerosos efeitos adversos na biota. As tartarugas marinhas enfrentam diversas ameaças, em especial aquelas relacionadas às atividades antropogênicas, por isso o desenvolvimento de melhorias nos métodos para monitorar compostos químicos são tarefas importantes. Neste trabalho foi desenvolvida uma metodologia baseada na extração QuEChERS (Quick, Easy, Cheap, Effective, Rugged and Safe) para a detecção de doze OCPs, por cromatografia gasosa com captura de elétrons, em amostras de gordura e fígado de tartarugas verdes. Os limites de quantificação ficaram abaixo de 5.3 ng g-1; com taxas de recuperação aceitáveis para a maioria de compostos; efeito matriz médio; calibração da matriz com linearidade variando de 1.0 a 200 ng g-1. Esta metodologia traz contribuições ao estudo de resíduos com efeito adverso na saúde das tartarugas marinhas, sendo importante instrumento para novas direções em temas de conservação(AU)

Epizootic amebiasis outbreak in wild black howler monkeys (Alouatta caraya) in a wildlife facility during captivity prior to translocation - Recommendations to wildlife management programs / Surto epizoótico de amebíase em Bugio preto (Alouatta caraya) provenientes de vida livre durante o cativeiro prévio a translocação - Recomendações a programas de manejo de fauna

The capture and quarantine of non-human primates could be necessary in some circumstances including those required under environmental permit. Mortality is undesirable for wildlife management programs and could be related to opportunistic pathogens, for example, deaths due to intestinal protozoa infection outbreaks as described here. Parasitological, necroscopic, microbiological, and molecular tests were used in the diagnosis of severe necrotic enteritis leading to death of three female and two male black howler monkeys (Alouatta caraya) captured and held in quarantine prior to translocation. Parasitological tests showed the presence of cysts of Entamoeba histolytica/dispar (5/5), Entamoeba coli (5/5) and Giardia duodenalis (1/5). Necroscopic assessment revealed areas of severe multifocal necrosis in the intestinal mucosa and submucosa. Histopathological examination revealed the presence of structures morphologically compatible to Entamoeba spp. in all individuals examined. Furthermore, G. duodenalis (1/5) was demonstrated by the nested PCR technique. During temporary captivity of non-human primates in management programs, proper handling protocols, including fast or immediate destination, are suggested in order to mitigate the negative effects of stress and decrease the risk of infections.(AU)

Óbitos por infecções causadas por protozoários intestinais são indesejáveis para programas de manejo de fauna, exigidos no âmbito do licenciamento ambiental e que demandam a captura e quarentena de primatas não humanos. Exames coproparasitológicos, necroscópicos, microbiológicos e moleculares foram utilizados para a confirmação do diagnóstico de uma severa enterite necrótica que levou a óbito três fêmeas e dois machos de Alouatta (A.) caraya capturados e mantidos em quarentena prévia à translocação. Exames coproparasitológicos revelaram a presença de cistos de Entamoeba (E.) histolytica/dispar (5/5), Entamoeba (E.) coli (5/5) e Giardia (G.) duodenalis (1/5). A avaliação necroscópica revelou áreas de necrose multifocal severa na mucosa e submucosa intestinal. A análise microscópica revelou a presença de estruturas morfologicamente compatíveis com trofozoítos do gênero Entamoeba spp. em todos os indivíduos examinados. Além disso, G. duodenalis (1/5) foi demonstrada pela técnica de Nested PCR. Sugere-se que quando for necessário o cativeiro temporário de primatas, deverão ser adotados protocolos de manejo adequados buscando a destinação imediata dos animais, de moto a mitigar os efeitos negativos do estresse e reduzir o risco da ocorrência de infecções.(AU)

Occurrence of anti-Toxoplasma gondii, Neospora caninum and Leptospira spp. antibodies in opossums (Didelphis spp.) in São Paulo State, Brazil / Ocorrência de anticorpos anti-Toxoplasma gondii, anti-Neospora caninum e anti-Leptospira spp. em gambás (Didelphis spp.) no estado de São Paulo, Brasil

Opossum (Didelphis spp.) is an omnivorous marsupial native to the Americas that shows synanthropic behavior in urban areas. Despite its proximity to domestic animals and humans, knowledge of its participation in the epidemiology of some zoonotic agents is substantial. This study aimed to determine the presence of antibodies against Toxoplasma gondii, Neospora spp. and Leptospira spp. in blood samples collected from opossums in 18 municipalities in the state of São Paulo, Brazil, between 2003 and 2008. Blood samples from 343 opossums: Didelphis aurita (n = 256) and Didelphis albiventris (n = 87) were obtained. These were tested to detect antibodies against T. gondii, using the modified agglutination test (MAT-Toto; cutoff ≥ 25); Neospora spp., using the indirect fluorescent antibody test (IFAT; cutoff ≥ 25); and Leptospira spp., using the microscopic agglutination test (MAT-Lepto; cutoff ≥ 100). Frequency of anti-T. gondii, Neospora spp. and Leptospira spp. antibodies were in 22.7%, 1.5% and 3.5%, respectively. The serogroups-serovars of Leptospira spp. presenting positive MAT-Lepto reactions were: Autumnalis-Butembo; Mini-Mini; Ballum-Castellonis; Icterohaemorrhagiae-Icterohaemorrhagiae; Icterohaemorrhagiae-Copenhageni and Grippotyphosa-Grippotyphosa or Bananal. This study demonstrated that these zoonotic agents are circulating in opossum populations in the state of São Paulo. Therefore, investigations regarding the role of marsupials in the epidemiology of each of these diseases should be conducted, especially to understand the behavior of these animals as zoonosis maintenance hosts.

O gambá (Didelphis spp.) é um marsupial onívoro nativo das Américas que apresenta comportamento sinantrópico em áreas urbanas. Apesar da sua proximidade com animais domésticos e o homem, o conhecimento da sua participação na epidemiologia de alguns agentes zoonóticos é fundamental. Este estudo objetivou determinar a presença de anticorpos contra Toxoplasma gondii, Neospora spp. e Leptospira spp. em amostras de sangue colhidas de gambás de 18 municípios do estado de São Paulo, Brasil, entre 2003 e 2008. Foram obtidas amostras sanguíneas de 343 gambás: Didelphis aurita (n = 256) e Didelphis albiventris (n = 87). As amostras foram testadas para detecção de anticorpos contra T. gondii, utilizando o teste de aglutinação modificado (TAM-Toxo; ponto de corte ≥ 25); Neospora spp., utilizando a reação de imunofluorescência indireta (RIFI; ponto de corte ≥ 25); e Leptospira spp., utilizando a soroaglutinação microscópica (SAM-Lepto; ponto de corte ≥ 100). As frequências de anticorpos contra T. gondii, Neospora spp. e Leptospira spp. foram 22,7%, 1,5% e 3,5%, respectivamente. Os sorogrupossorovares de Leptospira spp. que apresentaram soropositividade foram: Autumnalis-Butembo; Mini-Mini; Ballum-Castellonis; Icterohaemorrhagiae-Icterohaemorrhagiae; Icterohaemorrhagiae-Copenhageni e Grippotyphosa-Grippotyphosa ou Bananal. Esse estudo demonstrou que esses agentes estão circulando em populações de gambás no estado de São Paulo. Desta forma, investigações que visam determinar o papel dos marsupiais na epidemiologia de cada doença devem ser conduzidas, especialmente visando o entendimento do comportamento desses animais como hospedeiros dessas zoonoses.

Serosurvey of Leptospira interrogans, Brucella abortus and Chlamydophila abortus infection in free-ranging giant anteaters (Myrmecophaga tridactyla) from Brazil / Inquérito sorológico de Leptospira interrogans, Brucella abortus e Chlamydophila abortus em tamanduás-bandeira (Myrmecophaga tridactyla) de vida livre no Brasil

A serological survey for antibodies against Leptospira interrogans, Brucella abortus, and Chlamydophila abortus was conducted in 21 clinically healthy, free-ranging giant ant- eaters (Myrmecophaga tridactyla) from Parque Nacional das Emas (Goiás State, Brazil; n=6), Parque Nacional da Serra da Canastra (Minas Gerais State, Brazil; n=9), and RPPN SESC Pantanal (Mato Grosso State, Brazil; n=6) between July 2001 and September 2006. Sera were screened for antibodies against 22 serovars of Leptospira interrogans with a microscopic agglutination test. Twelve tested positive for L. interrogansserovars sentot (n=5 in PN Emas, n=2 in PN Serra da Canastra), butembo (n=2 in PN Serra da Canastra), autumnalis, bataviae, and shermani/icterohaemorrhagiae(n=1 each in SESC Pantanal)One adult female tested positive for B. abortus with the buffered plate antigen test. All sera were negative for C. abortususing the complement fixation text. This is the first report of pathogens that may interfere with the reproduction and population dynamics of free-ranging giant anteaters.(AU)

Inquéritos sorológicos para detecção de anticorpos contra Leptospira interrogans, Brucella abortus, e Chlamydophila abortus foram realizados em 21 tamanduás-bandeira (Myrmecophaga tridactyla) de vida livre do Parque Nacional das Emas (Goiás, Brasil, n=6), o Parque Nacional da Serra da Canastra (Minas Gerais, Brasil, n=9) e RPPN SESC Pantanal (Mato Grosso, Brasil, n=6) entre julho de 2001 e setembro de 2006. Os sor os foram testados para anticorpos contra 22 sorotipos de Leptospira interrogans com um teste de aglutinação microscópica. Doze animais foram considerados positivos para L. interrogans sorovares sentot (n=5 em PN Emas, n=2 em PN Serra da Canastra), butembo (n=2 em PN Serra da Canastra), autumnalis, bataviae e shermani/icterohaemorrhagiae(n=1 para cada sorovar em SESC Pantanal). Uma fêmea adulta testou positivo para B. abortuscom o teste do antígeno tamponado. Todos os soros se mostraram negativos para C. abortusatravés do teste de fixação do complemento. Este é o primeiro relato de patógenos que podem interferir na dinâmica reprodutiva de populações de tamanduás em estado selvagem.(AU)

Genetic similarity between APEC and Escherichia coli strains isolated from Guaruba guarouba in a survey on healthy captive psittacine birds / Similaridade genética entre APEC e cepas de Escherichia coli isoladas de Guaruba guarouba em um estudo com psitacídeos hígidos de cativeiro

The role of psittacine birds as a reservoir of avian pathogenic Escherichia coli (APEC) is not known but would be helpful in understanding the human animal interface, since the enteric microbiota of these birds consists of Gram positive bacteria. The aim of this study was to identify the presence of APEC in feces of clinically healthy Guaruba guarouba. To do this, we isolated and analyzed E. coli from cloacal fecal samples taken from 87 psittacine birds from six zoologic parks, three commercial breeders and one conservation breeder. Of the 87 birds examined, 46 (52.87%) presented E. coli in feces. The presence of the following eight virulence genes was determined by the polymerase chain reaction (PCR): irp2, iucD, iss, vat, cvi/cva, tsh, astA, and papC, and 29 (63.04%) of 46 E. coli isolates tested were positive at least one of the eight genes studied. The frequency of virulence genes observed in isolates of E. coli were 32.6% (15/46) irp2, 26% (12/46) iucD, 19.5% iss (9/46), 17.4% vat (8/46), 17.4% cvi/cva (8/46), 8.7% tsh (4/46), 4.4% astA (2/46) and 0% papC (0/46). The isolates were grouped in 13 genotypic profiles according to virulence gene combinations, but only 2 isolates were classified as APEC, with the pattern iuc, iss, cvi/cva, irp + and iuc, iss, cvi/cva, irp, tsh, vat +. This study reveals the presence of APEC in clinically healthy captive G. guarouba, suggesting that these psittacine birds may act as reservoir for pathogenic microorganisms. Epidemiological studies are needed to determine the relevance of this species as a reservoir and the implications for conservation of endangered species G. guarouba.(AU)

O papel dos psitacídeos como reservatório de Escherichia coli patogênicas para aves (APEC) não é conhecido, mas será útil para a compreensão da interface humano-animal, uma vez que a microbiota entérica destas aves é composta por bactérias Gram-positivas. O objetivo deste estudo foi identificar a presença de APEC em fezes de Guaruba guarouba clinicamente saudáveis. Para isso, foram isoladas e analisadas E. coli presentes em fezes cloacais coletadas de 87 psitacídeos, alojados em seis zoológicos, três criatórios comerciais e um criatório conservacionista. Das 87 aves examinadas, 46 (52,87%) apresentaram E. coli nas fezes. A presença de oito genes de virulência foi determinada pela reação em cadeia pela polimerase (PCR): irp2, iucD, iss, vat, cvi/cva, tsh, astA, e papC, e 29 (63,04%) dos 46 isolados foram positivos para pelo menos um dos oito genes estudados. A frequência dos genes de virulência observada nos isolados de E. coli foi 32.6% (15/46) irp2, 26% (12/46) iucD, 19.5% iss (9/46), 17.4% vat (8/46), 17.4% cvi/cva (8/46), 8.7% tsh (4/46), 4.4% astA (2/46) e 0% papC (0/46). Os isolados foram agrupados em 13 perfis genotípicos de acordo com combinações de genes de virulência, mas apenas duas amostras foram classificadas como APEC, com o perfil iuc, iss, cvi/cva, irp + e iuc, iss, cvi/cva, irp, tsh, iuc, iss, +. Este estudo revela a presença de APEC em aves de cativeiro (G. guarouba) clinicamente saudáveis, sugerindo que estes psitacídeos possam atuar como reservatórios de micro-organismos patogênicos. Estudos epidemiológicos são necessários para determinar a relevância desta espécie como reservatório e as implicações para a conservação da espécie ameaçada G. guarouba.(AU)

Estudo da eficácia de espuma para a depopulação de aves para situações de emergência sanitária / Experimental evaluation of foam-based poultry depopulation for emergencies

São inúmeras as dificuldades observadas na depopulação de elevado número de aves e é importante proceder-se àdepopulação no interior do próprio aviário por questões de biossegurança do homem em casos de emergência sanitáriacausada por doenças de aves de elevada transmissibilidade, como a influenza aviária e a doença de Newcastle. Construiuseo equipamento gerador de espuma para provocar a anóxia física em aves. Verificou-se a eficácia da espuma geradaatravés do uso de líquido detergente de alta expansão sobre o sacrifício de galinhas, avaliando-se os sinais sensoriais,tempo de morte, letalidade e lesões macro e microscópicas. Duzentas galinhas de postura com 78 semanas de idadeforam divididas em dez grupos experimentais e submetidas a diferentes períodos de exposição à espuma, variando de5min30s a 8min15s . A partir de seis minutos de exposição à espuma 100% das aves foram mortas. A presença de bolhasde espuma na cavidade oral e traqueia foram constatadas em todos os períodos de exposição à espuma, indicando aocorrência de asfixia física. Congestão nas mucosas da cavidade oral e traqueia foram também observadas em todos osperíodos de exposição. No exame histopatológico dos pulmões de todas as aves, observou-se a presença de congestãoe hemorragia difusa de moderada intensidade. Nenhuma alteração foi observada na traqueia das aves. A eficácia daespuma como método de depopulação de aves foi constatada neste trabalho, podendo ser recomendada diante danecessidade de atendimento a emergências sanitárias.(AU)

There are several difficulties in the control of quick spreading and highly contagious poultry diseases such as avianinfluenza and Newcastle disease, which require large numbers of poultry to be rapidly killed inside the poultry housesin order to minimize human exposure and disease spreading. We have built and tested an equipment that uses a waterbasedfoam from high expansion fire detergent that induces poultry anoxia measured by sensorial signs, time to death,lethality and macro and microscopically lesions. Two hundred 78-weeks old hens were divided into ten groups andexposed to different times of death according to exposure to water-foam varying from 5min30s to 8min15s. All poultrydied after six minutes of water-foam cover. Foam bubbles were observed in oral cavity and trachea of all poultry ateach time of exposure to foam, revealing physical asphyxia. Macroscopically, congestion in oral cavity and in tracheamucosa was observed. Histopathology revealed diffuse and moderate hemorrhage in lungs and no lesion in trachea.The efficacy of water-foam procedure for poultry depopulation was demonstrated validating its recommendation in case of emergency.(AU)

Principais processos neoplásicos encontrados em psitacídeos mantidos em cativeiro / Main neoplasic processes in psittacines birds kept in captivity

Um estudo anatomopatológico envolvendo 130 psitacídeos oriundos de centros de triagens, zoológicos e criadouros, visando a determinação da causa de morte destes animais, revelou a presença de neoplasias em sete animais, totalizando 5,4 por cento dos casos. Os processos neoplasicos foram caracterizados como colangiocarcinoma, colangioma, linfoma, hemangiossarcoma e carcinoma renal primário, sendo o colangiocarcinoma o mais freqüentemente encontrado, presente em três animais. Este trabalho descreve estas neoplasias, levando em consideração os aspectos macro e microscópicos, meios de diagnósticos e espécies acometidas.(AU)

An anatomopathologic study of 130 captivy psittacines from zoos, breeders and rehabilitation centers showed the presence of neoplastic disease in seven birds, totalizing 5.4 percent of the cases. The neoplasms were identified like cholangiocarcinoma, cholangioma, lymphoma, haemangiosarcoma and renal cell carcinoma. The cholangiocarcinoma was the tumor most commonly observed. it was present in birds. This study describes the macro and microscopic findings of these tumors; also reports diagnostic methods employed to identify these neoplasms.(AU)

Occurrence of Sarcocystis spp. in opossums (Didelphis aurita and Didelphis albiventris) in regions of the State of São Paulo, Brazil / Ocorrência de Sarcocystis spp. em gambás (Didelphis aurita e Didelphisalbiventris) em regiões do Estado de São Paulo, Brasil

The objective of this study was to determine the occurrence of Sarcocystis spp. in Didelphis albiventris and D. aurita in three regions of the state of São Paulo. Ninety-eight dead Didelphis were employed in this study, among which 66 were D. aurita and 32 D. albiventris. Twenty eight living D. aurita and five D. albiventris were also analyzed. Flotation centrifugation in sucrose solution was used in the isolation of Sarcocystis spp. of the small intestine and feces. Sarcocystis spp. was found in the small intestines of 9.1% of the D. aurita (6/66); in four of them, the feces were also positives. There was no statistically significant difference between males and females (P= 0,522), or among samples that came from different regions of the state of São Paulo(P= 0,627), regarding the occurrence of Sarcocystis spp. However, there was a significant difference of positive samples harvested from captive compared to free-ranging animals (P = 0.009), and between adults and off spring (P= 0,004). Adults were more affected by the parasite than the off spring, and only free-ranging animals were positives. From the samples collected from 28 living D. aurita, Sarcocystis spp. was found in 7.1% (2/28) of them. A total of 32 D. albiventris were studied,none of which had positive tests for Sarcocystis spp. in samples of intestine of feces, and five animals live were also negative. We conclude that the occurrence of Sarcocystis spp. in D. aurita and D. albiventris inthese three regions of the state of São Paulo is low in the conditions assessed in this study.(AU)

O objetivo deste estudo foi de determinar a ocorrência de Sarcocystis spp. em D. albiventris e D. aurita em três regiões do Estado de São Paulo. Para tal, utilizou-se noventa e oito Didelphis mortos, sendo 66D. aurita e 32 D. albiventris, e também 28 D. aurita e cinco D. albiventrisvivos. O método de centrífugo-flutuação em solução de sacarose foi empregado para isolamento dos oocistos/esporocistos de Sarcocystis spp. do intestino delgado e das fezes. Encontrou-se Sarcocystis spp.no intestino delgado de 9,1% dos D. aurita (6/66), sendo que quatro destes também houve positividade nas fezes. Não houve diferença estatística significativa entre machos e fêmeas positivos (P= 0,522), e entre os positivos de diferentes origens do Estado de São Paulo (P=0,627), quanto a ocorrência de Sarcocystis spp. Entretanto, houve diferença estatística significativa entre animais de vida livre e de cativeiro(P = 0.009), sendo que somente os de vida livre foram positivos.Entre adultos e filhotes positivos também houve diferença (P= 0,004),sendo os adultos mais parasitados que os filhotes. Das amostras provenientes dos 28 D. aurita vivos, encontrou-se Sarcocystis spp. em7.1% (2/28) deles. Dos 32 D. albiventris, todos foram negativos para Sarcocystis spp. nas amostras de intestino delgado e fezes. Os cincos D. albiventris vivos também foram negativos. Sendo assim, pode-se observar que a ocorrência de Sarcocystis spp. em D. aurita e D. albiventris nestas três regiões do Estado de São Paulo é baixa para estas condições analisadas.(AU)

Caracterização molecular dos fatores de virulência de estirpes de Escherichia coli isoladas de papagaios com colibacilose aviária / Molecular characterization of virulence factors in Escherichia coli strains isolated from parrots with colibacilosis

Oito amostras de Escherichia coli isoladas de papagaios com colibacilose aviária foram sorogrupadas e investigadas para a presença dos fatores de virulência: pili associado a pielonefrite (pap), fímbria S (sfa), adesina afimbrial (afa), cápsula K1 (neu), curli (crl, csgA), hemaglutinina termosensível(tsh), enterotoxinas termo-lábil (LT) e termo-estável (STa eSTb), Shiga-like toxinas (Stx1 e Stx2), Fator citotóxico necrotizante(cnf1), hemolisina (hly), aerobactina (iuc) e resistência sérica (iss). Os resultados mostraram que os isolados pertenciam a seis sorogrupos:O23; O54; O64; O76; O128 e O152. Os genes de virulência detectados foram: crl+ em todos os isolados; pap+; iss+ e iuc+ em três isolados, tsh+em dois isolados. Todas as amostras foram negativas para os genes neu, csgA, sfa, afa, hly, cnf e para as toxinas LT, STa, STb, Stx1 e Stx2.Estes resultados sugerem que amostras de E. coli isoladas de papagaios apresentam alguns fatores de virulência das amostras do patotipo de E. coli patogênica para aves (APEC).(AU)

A total of eight Escherichia. coli isolates from psittacine birds were serogrouping and investigated for the virulence factors: pili associated with pyelonephritis (pap), S fimbriae (sfa), afimbrial adhesin (afa), capsule K1 (neu), curli fibers (crl, csgA), temperature-sensitive hemagglutinin (tsh), heat labile (LT) and heat stable (STa and STb)enterotoxins, Shiga-like toxins (Stx1 and Stx2), Cytotoxic necrotizing factor (cnf1), haemolysin (hly), aerobactin production (iuc) and serum resistance (iss). The results showed that the isolates belonged to six serogroups: O23; O54; O64; O76; O128 and O152. The found virulence genes were: crl+ in all isolates, pap+, iuc+ and iss+ in three isolates; tsh+ in two isolates. All strains were negative for genes neu,csgA, sfa, afa, hly, cnf and LT, STa, STb, Stx1, Stx2 toxins. Our findings suggested that some E. coli isolated from psittacine birds present some virulence factors of avian pathogenic E. coli (APEC) pathotype.(AU)

Avaliação histopatológica, imuno-histoquímica e ultra-estrutural da resposta inflamatória crônica do robalo (Centropomus spp. ) ao BCG / Histopathological, immunohistochemical, and ultra-structural evaluation of chronic inflammatory response of robalo (Centropomus spp) to BCG

Objetivo do estudo foi avaliar a cinética da resposta inflamatória induzida experimentalmente com BCG em peixes modernos pertencentes ao gênero Centropomus sp. Os animais foram experimentalmente inoculados com BCG por via intramuscular na região do pedúnculo caudal sendo realizada a coleta do material nos tempos experimentais de 1, 3, 7, 14, 21 e 33 dias pós-inoculação. A fase aguda da resposta inflamatória se mostrou na forma de infiltrado composto predominantemente por células mononucleares, edema intersticial e necrose de tecido muscular. À medida que o processo se desenvolve, observa-se a organização do foco lesional na forma de um granuloma formado por células epitelióides. Essas células, ao exame imunohistoquímico apresentaram positividade a proteína S100 e citoqueratina, indicando características macrofágicas e secretória, além de apresentarem ao exame ultra-estrutural a presença de desmossomos entre as células adjacentes. Não houve participação efetiva de células gigantes e pigmentares, sugerindo ser uma característica relacionada à espécie.(AU)

This study set out to evaluate inflammatory response kinetics after experimental inoculation with BCG in modern Centropomus sp. fish.BCG was applied through intramuscular injection in the caudal peduncular region, and samples were collected for analyses at days 1,3, 7, 14, 21, and 33 post-injection. Acute phase inflammatory infiltrate was characterized by predominant mononuclear cells, intersticial edema,and muscular tissue necrosis. As the inflammatory response evolved,the lesion organized into a granuloma formed by epithelioid cells.These epithelioid cells were positive for the S100 protein and cytokeratinat histochemical analysis, which demonstrates macrophage and secretory activity, besides ultra-structural analysis showed desmosomic junctions within adjacent cells. It didnt have an expressive participation of giant cells and pigment containing cells in the inflammatory reaction,suggesting that its a specie-specific characteristic.(AU)

Experimental chronic granulomatous inflammatory process in fish: a morphological, ultrastructural anel immunocytochemical study / Processo inflamatório crônico granulomatoso experimental em peixes: um estudo morfológico, ultraestrutural e imunohistoquímico

The purpose of the present srudy was to evaluate the chronic granulomatous inflammatory process experimentally induced in Oreochromis niloticus by the inoculation ofBCG and to clarify aspects of the inflammatory reaction in fish for a better understanding of the phylogeny of the process. Results obtained by light microscopy and ultrastructural analysis showed the participation of macrophages, thrombocytes, lymphocytes, eosinophils, plasma cells and foreign type giant cells in the inflammatory process. Besides these cell types, a granulomatous reaction mainly consisting of epithelioid cells was also observed ultrastrucrurally. These epithelioid cells developed desmosomes throughout the experiment, and also began to express receptors for cytokeratin. Both findings are immunocytochemicaliy characteristic of epithelial cells. Pigment cells (melanomacrophages) could also be seen surrounding ali the granulomatoid formation in a crescent fashion and participating in the chronic granulomatous inflammatory reaction.(AU)

O objetivo do presente estudo foi avaliar o processo inflamatório crônico granulomatoso induzido experimentalmente em Oreochromis niloticus através da inoculação de BCG e elucidar aspectos da reação inflamatória em peixes para uma melhor compreensão da filogenia do processo. Os resultados obtidos por microscopia de luz comum e ultra-estrutural demonstraram a participação de macrófagos, trombócitos, linfócitos, eosinófilos, células plasmáticas e células gigante tipo corpo estranho no processo inflamatório. Além desses tipos celulares, uma reação granulomatosa constituída predominantemente de células epitelióides também foram observadas ultraestruturalmente. Essas células epitelióides desenvolveram desmossomos ao longo do experimento, e também passaram a expressar receptores para citoqueratina, características estas de células epiteliais. Células pigmentares (melanomacrófagos), envolvendo de maneira crescente toda a formação granulomatóide e, participando ativamente da reação inflamatória crônica granulomatosa.(AU)