Establishing an anesthetic protocol for refinement of intracerebral inoculation procedure

Mouse inoculation test (MIT) is a technique widely used for rabies diagnosis and must be liable to refinement due to animal welfare. The present study aims to compare five different anesthetic associations to stablish a protocol to improve the MIT procedure suitable for animal welfare and safe for a routine of viral isolation in newly weaned mice (3 weeks of age). 80 Swiss-Webster mice (Mus musculus) - 40 females and 40 males, 3-week-old, weight ranging from 11 to 14 grams ­ were used to conduct all procedures. Five anesthetic associations were tested: KX (Ketamine 100 mg/kg and Xylazine 10 mg/kg), KXA (Ketamine 80 mg/kg, Xylazine 5 mg/kg, and Acepromazine 1 mg/kg), KXT (Ketamine 80 mg/kg, Xylazine 5 mg/kg, and Tramadol 5 mg/kg), KXAT (Ketamine 100 mg/kg, Xylazine 10 mg/kg, Acepromazine 2 mg/kg and Tramadol 5 mg/kg) and ATI (Acepromazine 1 mg/kg + Tramadol 5 mg/kg + Isoflurane 5% - 0.5 L/min for induction and 2.5% - 0.5L/min for maintenance). Injectable anesthesia was administered intraperitoneally. We monitored the respiratory rate and body temperature. Response to anesthesia was evaluated according to the induction, surgical anesthesia, and recovery periods. The KXAT and ATI protocols induced surgical anesthesia, with the ATI protocol being the most appropriate and safe to perform the MIT procedure with 100% efficiency, absence of mortality, and rapid recovery of respiratory rate and temperature in the period after the procedure.

Oxygen supply as a refining technique for injectable anesthesia in laboratory rats

Well-controlled anesthesia is critical to reducing potential surgical complications and ensuring safe and successful procedures. Respiratory depression, inducing hypoxia, and hypercapnia are adverse effects of injectable anesthesia in laboratory rats. This study aimed to determine the effect of oxygen supply in laboratory rats anesthetized with the combination of ketamine (K) and xylazine (X) plus acepromazine (A) or methadone (Me). The results showed that oxygenation allowed adequate levels of SO2 and paO2, avoiding hypoxemia. However, all anesthetized rats showed respiratory acidosis with low pH and high paCO2 levels, which was not reversed after oxygen administration. The acidosis could be related to hypoventilation due to respiratory depression induced by the XKMe association, as well as absorption atelectasis with the CO2 accumulation during anesthesia. Despite respiratory acidosis, oxygen administration was beneficial for anesthetized rats preventing hypoxemia. This makes it possible to prevent all the metabolic alterations that cause cell death by hypoxia, improving the well-being of anesthetized rats, as well as the quality of the results obtained.

Assessment of general activity and anxiety-like behavior in mice following tramadol and meloxicam administration for managing immediate post-operative pain

After analgesic administration, we evaluated general activity in the Open-Field and anxiety-like behavior in the Elevated Plus Maze of vasectomized mice. We divided C57BL/6J male mice into eight groups: saline, three non-operated control groups treated with 10 mg/kg meloxicam, 20 mg/kg tramadol, or both intraperitoneally, and four vasectomized mice groups treated with the same analgesic protocol as the control groups. One group of vasectomized mice received both treatments and an additional 10 mg/kg lidocaine at the incision site. We conducted the vasectomy via scrotal approach under isoflurane inhalation anesthesia and performed behavioral tests after full anesthesia recovery. Mice treated with meloxicam demonstrated low ambulation, spontaneous activity, and rearing frequency. Mice treated with tramadol showed spontaneous behavior compared with the saline control. Due to behavior changes demonstrated by meloxicam controls, we were unable to identify whether meloxicam provided adequate analgesia. Vasectomized mice treated with tramadol showed general activity behavior similar to their control but displayed significantly less rearing, suggesting that they were under potential signs of pain or discomfort. In conclusion, the Open Field test and the Elevated Plus Maze can usefully pre-evaluate analgesic protocols to identify possible interference caused by adverse drug effects. For future directions, an appropriate regimen of meloxicam and tramadol for enhancing mice welfare post vasectomy should be better investigated.

Capacitação em Ciência de Animais de Laboratório / Training Course on Laboratory Animal Science

A Ciência de Animais de Laboratório envolve uma abordagem multi-disciplinar com conhecimento do modelo animal e suas necessidades etológicas espécie-específicas, refinamento de experimentos que melhoram o bem-estar animal com reconhecimento e tratamento da dor, anestesia e eutanásia, bem como delineamento experimental e análise estatística dos resultados experimentais. Para atender à essas necessidades, pessoas que realizam, participam, supervisionam procedimentos experimentais em animais, ou cuidam de animais de laboratório, devem receber treinamento, com programas voltados à implementação dos 3Rs e promoção do bem-estar dos animais de laboratório, garantindo assim a qualidade e reprodutibilidade de experimentos com benefícios éticos, científicos e econômicos. Nos países da Europa e nos Estados Unidos, e requerido mais recen-temente pelo Conselho Nacional de Controle de Experimentação Animal (CONCEA) no Brasil, um veterinário com experiência em medicina de animais de laboratório precisa fazer parte da equipe do Biotério. Este veterinário tem um papel fundamental na orientação de profissionais e pesquisadores em questões relacionadas ao bem--estar e cuidado com animais. Diante desta recomendação, fica clara a importância da formação de graduação e de médicos-veterinários para atuar na área de Animais de Laboratório, e poder desempenhar seu papel nos biotérios visando melhorar o cuidado e apoiar estudos experimentais que envolvem esses animais.(AU)

Laboratory Animal Science requires a multidisciplinary approach. Professionals working with laboratory animals should have the knowledge on how to choose the right animal model and its species-specific ethological needs, how to choose the best anesthesia, analgesia and euthanasia protocol, how to refine the care procedures including recognition and treatment of pain in order to improve the animals welfare , as well as how to design an experimental and to conduct statistical analysis of the experimental data. To meet these needs, professionals who perform, take part, supervise experimental procedures on animals, or take care of laboratory animals, should receive training, with programs aimed to implement the 3Rs and to promote the welfare of laboratory animals, and therefore guarantee the quality and reproducibility of experiments with ethical, scientific and economic benefits. Veterinarians with experience in laboratory animal medicine are required to be part of the Animal Facility staff in Europe and in the United States, and most recently, in Brazil, established by the National Council for the Control of Animal Experimentation (Concea). Veterinarians working with laboratory animals have a key role in guiding other professionals and researchers regarding issues related to animal welfare and care. Since it is necessary to follow the Concea recommendation, it is visible the importance to have the veterinary undergraduate students and veterinarians properly trained in order to provide the best quality of life for the animals used in research and consequently having relevant, translatable scientific data and the most beneficial use of these animals.(AU)

Capacitação em Ciência de Animais de Laboratório / Training Course on Laboratory Animal Science

A Ciência de Animais de Laboratório envolve uma abordagem multi-disciplinar com conhecimento do modelo animal e suas necessidades etológicas espécie-específicas, refinamento de experimentos que melhoram o bem-estar animal com reconhecimento e tratamento da dor, anestesia e eutanásia, bem como delineamento experimental e análise estatística dos resultados experimentais. Para atender à essas necessidades, pessoas que realizam, participam, supervisionam procedimentos experimentais em animais, ou cuidam de animais de laboratório, devem receber treinamento, com programas voltados à implementação dos 3Rs e promoção do bem-estar dos animais de laboratório, garantindo assim a qualidade e reprodutibilidade de experimentos com benefícios éticos, científicos e econômicos. Nos países da Europa e nos Estados Unidos, e requerido mais recen-temente pelo Conselho Nacional de Controle de Experimentação Animal (CONCEA) no Brasil, um veterinário com experiência em medicina de animais de laboratório precisa fazer parte da equipe do Biotério. Este veterinário tem um papel fundamental na orientação de profissionais e pesquisadores em questões relacionadas ao bem--estar e cuidado com animais. Diante desta recomendação, fica clara a importância da formação de graduação e de médicos-veterinários para atuar na área de Animais de Laboratório, e poder desempenhar seu papel nos biotérios visando melhorar o cuidado e apoiar estudos experimentais que envolvem esses animais.

Laboratory Animal Science requires a multidisciplinary approach. Professionals working with laboratory animals should have the knowledge on how to choose the right animal model and its species-specific ethological needs, how to choose the best anesthesia, analgesia and euthanasia protocol, how to refine the care procedures including recognition and treatment of pain in order to improve the animals welfare , as well as how to design an experimental and to conduct statistical analysis of the experimental data. To meet these needs, professionals who perform, take part, supervise experimental procedures on animals, or take care of laboratory animals, should receive training, with programs aimed to implement the 3Rs and to promote the welfare of laboratory animals, and therefore guarantee the quality and reproducibility of experiments with ethical, scientific and economic benefits. Veterinarians with experience in laboratory animal medicine are required to be part of the Animal Facility staff in Europe and in the United States, and most recently, in Brazil, established by the National Council for the Control of Animal Experimentation (Concea). Veterinarians working with laboratory animals have a key role in guiding other professionals and researchers regarding issues related to animal welfare and care. Since it is necessary to follow the Concea recommendation, it is visible the importance to have the veterinary undergraduate students and veterinarians properly trained in order to provide the best quality of life for the animals used in research and consequently having relevant, translatable scientific data and the most beneficial use of these animals.

Decontamination of genetically modified mice strains by embryo transfer for obtaining SPF colonies in a Brazilian animal facility / Descontaminação de linhagens de camundongos geneticamente modificadas por transferência embrionária para obtenção de colônias SPF em um biotério brasileiro (São Paulo, SP)

The introduction of new strains of mice in specific pathogen-free (SPF) animal facilities should be performed carefully to avoid breaking sanitary barriers. To meet this need, animals should be rederived to reduce infection risk and thus avoid research interference caused by loss of animal health status and welfare. The objective of this study was to implement mice embryo transfer in the laboratory mouse facility of the Department of Immunology at the Institute of Biomedical Sciences/University of São Paulo, Brazil. Embryo transfers were performed to rederive genetically modified mouse strains with undefined sanitary status, received from different research and educational institutions. Fertilized eggs at two-cell stage were obtained by natural means and transferred into the oviducts of SPF pseudo-pregnant female mice. All surgical procedures were performed under aseptic conditions. A total of 625 embryos were transferred into the recipients. 148 pups were born, of which 140 were reared. Viruses, bacteria and intestinal protozoa were eliminated using this technique. The improvement in the microbiological status of mice allowed their expansion in our SPF facility. With these results, we can stimulate the use of embryo transfer technique between rodent facilities in Brazil and thus encourage the distribution of better models to our scientific community.(AU)

A introdução de novas linhagens de camundongos em biotérios livres de patógenos específicos (SPF) deve ser realizada com critérios para evitar a quebra das barreiras sanitárias. Dessa forma, os animais devem ser rederivados para reduzir os riscos de infecção e evitar as interferências provocadas pela perda do status sanitário e do bem-estar dos animais. O objetivo deste estudo foi implementar a transferência de embriões murinos no Biotério do Departamento de Imunologia do Instituto de Ciências Biomédicas da Universidade de São Paulo, Brasil. As transferências embrionárias foram realizadas para rederivar linhagens de camundongos geneticamente modificadas com status sanitário não conhecido, recebidas de diferentes instituições de pesquisa e de ensino. Os embriões em duas células foram obtidos pelos métodos naturais e transferidos para os ovidutos de fêmeas de camundongos SPF pseudoprenhas. Todos os procedimentos cirúrgicos foram realizados sob condições assépticas. Um total de 625 embriões foram transferidos para as receptoras. Foram obtidos 148 filhotes nascidos vivos, destes 140 foram desmamados. Por meio desta técnica, foram eliminados vírus, bactérias e protozoários intestinais. A melhora no status microbiológico dos camundongos permitiu a expansão destes em nossa colônia SPF. Com esses resultados, podemos promover o uso da técnica de transferência de embriões entre os biotérios brasileiros e assim incentivar a distribuição de modelos mais adequados para a nossa comunidade científica.(AU)

Decontamination of genetically modified mice strains by embryo transfer for obtaining SPF colonies in a Brazilian animal facility / Descontaminação de linhagens de camundongos geneticamente modificadas por transferência embrionária para obtenção de colônias SPF em um biotério brasileiro (São Paulo, SP)

The introduction of new strains of mice in specific pathogen-free (SPF) animal facilities should be performed carefully to avoid breaking sanitary barriers. To meet this need, animals should be rederived to reduce infection risk and thus avoid research interference caused by loss of animal health status and welfare. The objective of this study was to implement mice embryo transfer in the laboratory mouse facility of the Department of Immunology at the Institute of Biomedical Sciences/University of São Paulo, Brazil. Embryo transfers were performed to rederive genetically modified mouse strains with undefined sanitary status, received from different research and educational institutions. Fertilized eggs at two-cell stage were obtained by natural means and transferred into the oviducts of SPF pseudo-pregnant female mice. All surgical procedures were performed under aseptic conditions. A total of 625 embryos were transferred into the recipients. 148 pups were born, of which 140 were reared. Viruses, bacteria and intestinal protozoa were eliminated using this technique. The improvement in the microbiological status of mice allowed their expansion in our SPF facility. With these results, we can stimulate the use of embryo transfer technique between rodent facilities in Brazil and thus encourage the distribution of better models to our scientific community.(AU)

A introdução de novas linhagens de camundongos em biotérios livres de patógenos específicos (SPF) deve ser realizada com critérios para evitar a quebra das barreiras sanitárias. Dessa forma, os animais devem ser rederivados para reduzir os riscos de infecção e evitar as interferências provocadas pela perda do status sanitário e do bem-estar dos animais. O objetivo deste estudo foi implementar a transferência de embriões murinos no Biotério do Departamento de Imunologia do Instituto de Ciências Biomédicas da Universidade de São Paulo, Brasil. As transferências embrionárias foram realizadas para rederivar linhagens de camundongos geneticamente modificadas com status sanitário não conhecido, recebidas de diferentes instituições de pesquisa e de ensino. Os embriões em duas células foram obtidos pelos métodos naturais e transferidos para os ovidutos de fêmeas de camundongos SPF pseudoprenhas. Todos os procedimentos cirúrgicos foram realizados sob condições assépticas. Um total de 625 embriões foram transferidos para as receptoras. Foram obtidos 148 filhotes nascidos vivos, destes 140 foram desmamados. Por meio desta técnica, foram eliminados vírus, bactérias e protozoários intestinais. A melhora no status microbiológico dos camundongos permitiu a expansão destes em nossa colônia SPF. Com esses resultados, podemos promover o uso da técnica de transferência de embriões entre os biotérios brasileiros e assim incentivar a distribuição de modelos mais adequados para a nossa comunidade científica.(AU)

Influência do enriquecimento ambiental e do material de cama no desempenho reprodutivo e no desenvolvimento pós-natal de ratos Wistar / Influence of environmental enrichment and bed materials on reproductive performance and postnatal development of Wistar rats

Recentemente, os programas de enriquecimento ambiental em biotérios têm sido amplamente discutidos. Muitos estudos, ao longo dos anos, procuraram esclarecer se as diferentes estratégias de enriquecimento ambiental (EA) podem afetar o comportamento e a fisiologia de roedores de laboratório, sendo que a maioria dos autores reconheceu o efeito positivo do EA para a melhora da qualidade de vida dos animais utilizados na experimentação. Neste trabalho foram realizados dois experimentos com o objetivo de avaliar o impacto do EA e do tipo de cama no desempenho reprodutivo e no comportamento maternal de ratas Wistar, bem como no desenvolvimento físico de sua prole. Para isto as ratas foram distribuídas em três grupos: EA-S (enriquecido com cama de sabugo de milho), EA-M (enriquecido com cama de maravalha) e NE-M (não enriquecido com cama de maravalha). Os resultados demonstraram que não houve diferença no intervalo entre partos, número de filhotes nascidos e desmamados nos três grupos avaliados, sendo que esses dados foram semelhantes aos descritos na literatura para ratos Wistar. Também não foi observada diferença estatística no comportamento maternal; no entanto no desenvolvimento físico observou-se antecipação no desdobramento das orelhas, erupção dos dentes incisivos e descida dos testículos dos filhotes do grupo EA-S; além do que as ratas dos grupos expostos ao EA confeccionaram ninhos mais íntegros e de melhor qualidade. Esses resultados reforçam a importância de se fornecer EA, como material de ninho, para que as mães criem seu próprio microambiente, e assim, possam oferecer melhor conforto e bem-estar aos seus filhotes.

Recently, environmental enrichment (EA) programs in laboratory animal facilities have been widely discussed. Many studies over the years have sought to clarify whether different environmental enrichment strategies may affect the behavior and physiology of laboratory rodents, in which most authors recognized the positive effect of EA for the life of animals used in research. In the present work two experiments were carried out to evaluate the impact of EA and bedding material on the reproductive performance and maternal behavior of Wistar rats, as well as the physical development of their offspring. For this, the rats were divided into three groups: EA-S (enriched with corn cobs bedding), EA-M (enriched with wood shavings bedding) and NE-M (not enriched with wood shavings bedding). The results showed that there was no difference in the interval between births, and number of pups born and weaned of the three groups evaluated, being these data similar to those described in the literature for Wistar rats. There was also no statistical difference in the maternal behavior; however in the physical development we observed anticipation of pinnae detachment, incisor teeth eruption and testicles descent of the EA-S group pups; in addition the female rats of the groups exposed to EA made more intact nests with better quality. These results reinforce the importance of providing EA, such as nest material, for mothers to create their own microenvironment, thus providing better comfort and well-being for their offspring.

Influência do enriquecimento ambiental e do material de cama no desempenho reprodutivo e no desenvolvimento pós-natal de ratos Wistar / Influence of environmental enrichment and bed materials on reproductive performance and postnatal development of Wistar rats

Recentemente, os programas de enriquecimento ambiental em biotérios têm sido amplamente discutidos. Muitos estudos, ao longo dos anos, procuraram esclarecer se as diferentes estratégias de enriquecimento ambiental (EA) podem afetar o comportamento e a fisiologia de roedores de laboratório, sendo que a maioria dos autores reconheceu o efeito positivo do EA para a melhora da qualidade de vida dos animais utilizados na experimentação. Neste trabalho foram realizados dois experimentos com o objetivo de avaliar o impacto do EA e do tipo de cama no desempenho reprodutivo e no comportamento maternal de ratas Wistar, bem como no desenvolvimento físico de sua prole. Para isto as ratas foram distribuídas em três grupos: EA-S (enriquecido com cama de sabugo de milho), EA-M (enriquecido com cama de maravalha) e NE-M (não enriquecido com cama de maravalha). Os resultados demonstraram que não houve diferença no intervalo entre partos, número de filhotes nascidos e desmamados nos três grupos avaliados, sendo que esses dados foram semelhantes aos descritos na literatura para ratos Wistar. Também não foi observada diferença estatística no comportamento maternal; no entanto no desenvolvimento físico observou-se antecipação no desdobramento das orelhas, erupção dos dentes incisivos e descida dos testículos dos filhotes do grupo EA-S; além do que as ratas dos grupos expostos ao EA confeccionaram ninhos mais íntegros e de melhor qualidade. Esses resultados reforçam a importância de se fornecer EA, como material de ninho, para que as mães criem seu próprio microambiente, e assim, possam oferecer melhor conforto e bem-estar aos seus filhotes.(AU)

Recently, environmental enrichment (EA) programs in laboratory animal facilities have been widely discussed. Many studies over the years have sought to clarify whether different environmental enrichment strategies may affect the behavior and physiology of laboratory rodents, in which most authors recognized the positive effect of EA for the life of animals used in research. In the present work two experiments were carried out to evaluate the impact of EA and bedding material on the reproductive performance and maternal behavior of Wistar rats, as well as the physical development of their offspring. For this, the rats were divided into three groups: EA-S (enriched with corn cobs bedding), EA-M (enriched with wood shavings bedding) and NE-M (not enriched with wood shavings bedding). The results showed that there was no difference in the interval between births, and number of pups born and weaned of the three groups evaluated, being these data similar to those described in the literature for Wistar rats. There was also no statistical difference in the maternal behavior; however in the physical development we observed anticipation of pinnae detachment, incisor teeth eruption and testicles descent of the EA-S group pups; in addition the female rats of the groups exposed to EA made more intact nests with better quality. These results reinforce the importance of providing EA, such as nest material, for mothers to create their own microenvironment, thus providing better comfort and well-being for their offspring.(AU)

Caracterização de uma nova mutação com perda de função do gene Kmt2d em camundongos / Characterization of a new mutation with loss of function in the Kmt2d gene in mice

O camundongo mutante recessivo bate-palmas (bapa) originou-se de mutagênese química induzida por ENU (N-ethyl-N-nitrosourea) e apresenta alterações posturais com movimentos anormais dos membros posteriores quando levantado pela cauda. No sequenciamento do exoma identificou-se uma mutação no gene Kmt2d, localizado no cromossomo 15, que foi confirmada pelo sequenciamento do DNA pelo método de Sanger. A perda da função do gene KMT2D localizada no cromossomo 12 em humanos foi descrita como responsável pela síndrome de Kabuki, que é uma anomalia congênita rara, autossômica dominante. O fenótipo clínico da doença é variável, mas algumas características mais comuns são face dismórfica, anormalidades esqueléticas, alterações nas impressões digitais, leve a moderado retardo mental e retardo do crescimento pós-natal. O presente trabalho teve como objetivo a análise do comportamento e da morfologia craniofacial dos camundongos bapa comparando com modelos de mutação do gene Kmt2d descritos na literatura.

The recessive mutant mouse named bate-palmas (bapa) – claps in Portuguese, originates from an ENU (N-ethyl-N-nitrosourea) mutagenesis program, presenting balance impairment and motor incoordination. Exome sequencing identified a mutation in the KMT2D gene, located on chromosome 15, which was confirmed by DNA sequence by the Sanger method. The loss of function of the gene KMT2D, located on chromosome 12 in humans, was described as being responsible for Kabuki syndrome, also known as Niikawa-Koruki syndrome, which is a rare congenital anomaly, autosomal dominant. The clinical phenotype of the disease is variable, but some common characteristics are dysmorphic facial features, skeletal abnormalities, fingerprint alterations, mild to moderate cognitive problems and postnatal growth retardation. The objective os this study was to analyze the behavior and craniofacial morphology of bapa mice comparing to KMT2D gene mutation models described on literature.

Caracterização de uma nova mutação com perda de função do gene Kmt2d em camundongos / Characterization of a new mutation with loss of function in the Kmt2d gene in mice

O camundongo mutante recessivo bate-palmas (bapa) originou-se de mutagênese química induzida por ENU (N-ethyl-N-nitrosourea) e apresenta alterações posturais com movimentos anormais dos membros posteriores quando levantado pela cauda. No sequenciamento do exoma identificou-se uma mutação no gene Kmt2d, localizado no cromossomo 15, que foi confirmada pelo sequenciamento do DNA pelo método de Sanger. A perda da função do gene KMT2D localizada no cromossomo 12 em humanos foi descrita como responsável pela síndrome de Kabuki, que é uma anomalia congênita rara, autossômica dominante. O fenótipo clínico da doença é variável, mas algumas características mais comuns são face dismórfica, anormalidades esqueléticas, alterações nas impressões digitais, leve a moderado retardo mental e retardo do crescimento pós-natal. O presente trabalho teve como objetivo a análise do comportamento e da morfologia craniofacial dos camundongos bapa comparando com modelos de mutação do gene Kmt2d descritos na literatura.(AU)

The recessive mutant mouse named bate-palmas (bapa) claps in Portuguese, originates from an ENU (N-ethyl-N-nitrosourea) mutagenesis program, presenting balance impairment and motor incoordination. Exome sequencing identified a mutation in the KMT2D gene, located on chromosome 15, which was confirmed by DNA sequence by the Sanger method. The loss of function of the gene KMT2D, located on chromosome 12 in humans, was described as being responsible for Kabuki syndrome, also known as Niikawa-Koruki syndrome, which is a rare congenital anomaly, autosomal dominant. The clinical phenotype of the disease is variable, but some common characteristics are dysmorphic facial features, skeletal abnormalities, fingerprint alterations, mild to moderate cognitive problems and postnatal growth retardation. The objective os this study was to analyze the behavior and craniofacial morphology of bapa mice comparing to KMT2D gene mutation models described on literature.(AU)

Biochemical and hematological parameters in mice (Mus musculus) from the UFMS central laboratory animal facilities / Determinação de parâmetros bioquímicos e hematológicos em camundongos (Mus musculus) do biotério central da UFMS

This study evaluated the biochemical and hematological profiles of Swiss Webster mice reared at the Central Laboratory Animal Facilities of the Universidade Federal de Mato Grosso do Sul. Blood samples were drawn from 18 animals (10 males, 8 females) aged 180 days and 16 animals (8 males, 8 females) aged 60 days, all of them of monitored conventional sanitary status. The hematological variables investigated were RBC count, hemoglobin, mean corpuscular volume, mean corpuscular hemoglobin, mean corpuscular hemoglobin concentration, platelet count, and total and differential WBC counts. The biochemical variables were total protein, albumin, alkaline phosphatase, urea, creatinine, alanine aminotransferase, and aspartate aminotransferase. Most results lay within the normal range for the species. Biochemical and hematological reference values for each colony are important because the results of exams can influenced by sex, strain, genotype, age, diet, handling, and environment, among other factors.

Este estudo teve como objetivo avaliar os perfis bioquímicos e hematológicos de camundongos Swiss Webster do Biotério Central da Universidade Federal de Mato Grosso do Sul. Foram utilizados 18 animais de 180 dias de idade (10 machos e 8 fêmeas) e 16 de 60 dias (8 machos e 8 fêmeas), todos de padrão sanitário convencional monitorizado, dos quais se coletou sangue para a realização de provas bioquímicas e hematológicas. Os parâmetros hematológicos analisados foram: contagem de hemácias, hemoglobina, volume corpuscular médio, hemoglobina corpuscular média, concentração de hemoglobina corpuscular média, contagem de plaquetas, contagem total de leucócitos e diferencial de células. Os parâmetros bioquímicos foram: proteína total, albumina, fosfatase alcalina, ureia, creatinina, alanina aminotransferase e aspartato aminotransferase. A maioria dos valores obtidos situou-se dentro da faixa de variação normal para a espécie. A importância de determinar valores de referência para exames laboratoriais de cada colônia animal deve ser considerada, pois os resultados podem ser influenciados por sexo, linhagem, genótipo, idade, dieta, manuseio e ambiente, entre outros fatores.

Biochemical and hematological parameters in mice (Mus musculus) from the UFMS central laboratory animal facilities / Determinação de parâmetros bioquímicos e hematológicos em camundongos (Mus musculus) do biotério central da UFMS

This study evaluated the biochemical and hematological profiles of Swiss Webster mice reared at the Central Laboratory Animal Facilities of the Universidade Federal de Mato Grosso do Sul. Blood samples were drawn from 18 animals (10 males, 8 females) aged 180 days and 16 animals (8 males, 8 females) aged 60 days, all of them of monitored conventional sanitary status. The hematological variables investigated were RBC count, hemoglobin, mean corpuscular volume, mean corpuscular hemoglobin, mean corpuscular hemoglobin concentration, platelet count, and total and differential WBC counts. The biochemical variables were total protein, albumin, alkaline phosphatase, urea, creatinine, alanine aminotransferase, and aspartate aminotransferase. Most results lay within the normal range for the species. Biochemical and hematological reference values for each colony are important because the results of exams can influenced by sex, strain, genotype, age, diet, handling, and environment, among other factors.(AU)

Este estudo teve como objetivo avaliar os perfis bioquímicos e hematológicos de camundongos Swiss Webster do Biotério Central da Universidade Federal de Mato Grosso do Sul. Foram utilizados 18 animais de 180 dias de idade (10 machos e 8 fêmeas) e 16 de 60 dias (8 machos e 8 fêmeas), todos de padrão sanitário convencional monitorizado, dos quais se coletou sangue para a realização de provas bioquímicas e hematológicas. Os parâmetros hematológicos analisados foram: contagem de hemácias, hemoglobina, volume corpuscular médio, hemoglobina corpuscular média, concentração de hemoglobina corpuscular média, contagem de plaquetas, contagem total de leucócitos e diferencial de células. Os parâmetros bioquímicos foram: proteína total, albumina, fosfatase alcalina, ureia, creatinina, alanina aminotransferase e aspartato aminotransferase. A maioria dos valores obtidos situou-se dentro da faixa de variação normal para a espécie. A importância de determinar valores de referência para exames laboratoriais de cada colônia animal deve ser considerada, pois os resultados podem ser influenciados por sexo, linhagem, genótipo, idade, dieta, manuseio e ambiente, entre outros fatores.(AU)

Detection of equid herpesvirus 1 DNA by Polymerase Chain Reaction after experimental inoculation of horses with a Brazilian A4/72 strain / Detecção do DNA do herpesvírus eqüino 1 pela reação em cadeia pela polimerase em cavalos inoculados com a estirpe brasileira A4/72

Seven conventional adult horses were inoculated intranasally with a Brazilian A4/72 strain of equid herpesvirus-1 (EHV-1). In the first ten days after the inoculation, they showed signs of a mild, self limitin gupper respiratory tract infection. In spite of the presence of neutralizing antibodies before the trial, seroconversion was observed in some horses. The virus was not isolated from nasal swabs and peripheral blood leukocytes (PBL) of any of the horses. However,the EHV-1 was detected through the polymerase chain reaction (PCR)from PBL of all horses in the experiment within the third to the eighth day after the inoculation that illustrated the viremia. In addition,the PCR assay also detected the virus in bronchoalveolar lavage fluid samples starting on the ninth day after the experimental infection in most of horses. For that reason, as a diagnostic tool, the PCR assay showed higher sensitivity and specificity than the conventional laboratorial methods in detection of EHV-1.(AU)

Sete cavalos adultos de status sanitário convencional foram inoculados por via intranasal com a estirpe brasileira A4/72 do herpesvírus eqüino tipo 1 (EHV-1). Nos primeiros dez dias após a inoculação viral, todos os cavalos apresentaram manifestações de infecção respiratória leve erestrita às vias aéreas anteriores. Apesar de possuírem títulos de anticorpos neutralizantes antes da inoculação, alguns cavalos apresentaram soroconversão após o desafio viral. O EHV-1 não foi isolado a partir das secreções nasais e leucócitos sanguíneos periféricos(PBL) de nenhum animal. Entretanto, o DNA viral foi detectado pela reação em cadeia pela polimerase (PCR) nos PBL entre o terceiro e o oitavo dias pós-inoculação (d.p.i.) em todos os animais, indicando a ocorrência de viremia. Além disso, a prova de PCR detectou o vírus nas amostras do lavado broncoalveolar a partir do nono d.p.i. na maioria dos animais. Com base nos resultados obtidos, foi possível concluir que a PCR é uma técnica com alta sensibilidade e especificidade para o diagnóstico do EHV-1, capaz de detectar a presença do DNA viral mesmo quando não ocorre a constatação do agente pelos métodos tradicionais.(AU)

Avaliação da etiopagenia da encefalite causada pelo herpesvírus equino tipo 1 utilizando um modelo murino de neuroinfecção / Evaluation of the encephalitis etiopathogenesis caused by equine herpesvirus type 1 using a mouse model of neuroinfection

O herpesvirus equino tipo 1 (EHV-1) é um importante patógeno que causa doença respiratória, abortamento e desordens neurológicas em equinos. O presente estudo foi realizado visando estabelecer um modelo murino de infecção pelo EHV-1 para investigar a resposta do hospedeiro frente à infecção viral e as alterações neurológicas causadas por esse agente. [...] A gravidade dos sinais observados em camundongos infectados pode ser correlacionada com o pico destas citocinas pró-inflamatórias (TNF-α e IL-6) e da quimiocina CCL2, que são produzidas logo após a infecção viral por células residentes da glia e/ou infiltrativas no SNC. Esses achados indicam que as diferentes linhagens de camundongos isogênicos são susceptíveis a infecção por estirpes neuropatogênicas do EHV-1 e poderiam servir como modelo para o estudo da patogênese e dos mecanismos que contribuem no desenvolvimento da mieloencefalopatia herpética equina

Equid herpesvirus type 1 (EHV-1) is a major pathogen which causes respiratory disease, abortions and neurological disorders in horses. The present study was carried out to establish a murine model of EHV-1 infection and investigate host response against the virus and neurological disorders caused by this pathogen. [...] Mice with the background C57BL/6, which exhibit predominantly Th1-type responses, showed the highest levels of TNF-α, IL-6 and CCL-2 mRNA in the CNS, when compared to BALB/c mice. The severity of signs observed in infected mice could be correlated with the peak of these proinflammatory cytokines (TNF-α and IL-6) and the chemokine CCL2, which are produced early after viral infection by both cells infiltrating into the CNS from the periphery and/or glial resident cells. These findings indicate that several inbred mouse strains are susceptible to neuopathogenic EHV-1 strains and should be useful models for studying the pathogenesis and mechanisms contributing to equine herpes myeloencephalopathy in horses

Avaliação da etiopagenia da encefalite causada pelo herpesvírus equino tipo 1 utilizando um modelo murino de neuroinfecção / Evaluation of the encephalitis etiopathogenesis caused by equine herpesvirus type 1 using a mouse model of neuroinfection

O herpesvirus equino tipo 1 (EHV-1) é um importante patógeno que causa doença respiratória, abortamento e desordens neurológicas em equinos. O presente estudo foi realizado visando estabelecer um modelo murino de infecção pelo EHV-1 para investigar a resposta do hospedeiro frente à infecção viral e as alterações neurológicas causadas por esse agente. [...] A gravidade dos sinais observados em camundongos infectados pode ser correlacionada com o pico destas citocinas pró-inflamatórias (TNF-α e IL-6) e da quimiocina CCL2, que são produzidas logo após a infecção viral por células residentes da glia e/ou infiltrativas no SNC. Esses achados indicam que as diferentes linhagens de camundongos isogênicos são susceptíveis a infecção por estirpes neuropatogênicas do EHV-1 e poderiam servir como modelo para o estudo da patogênese e dos mecanismos que contribuem no desenvolvimento da mieloencefalopatia herpética equina (AU)

Equid herpesvirus type 1 (EHV-1) is a major pathogen which causes respiratory disease, abortions and neurological disorders in horses. The present study was carried out to establish a murine model of EHV-1 infection and investigate host response against the virus and neurological disorders caused by this pathogen. [...] Mice with the background C57BL/6, which exhibit predominantly Th1-type responses, showed the highest levels of TNF-α, IL-6 and CCL-2 mRNA in the CNS, when compared to BALB/c mice. The severity of signs observed in infected mice could be correlated with the peak of these proinflammatory cytokines (TNF-α and IL-6) and the chemokine CCL2, which are produced early after viral infection by both cells infiltrating into the CNS from the periphery and/or glial resident cells. These findings indicate that several inbred mouse strains are susceptible to neuopathogenic EHV-1 strains and should be useful models for studying the pathogenesis and mechanisms contributing to equine herpes myeloencephalopathy in horses (AU)

Decontamination of genetically modified mice strains by embryo transfer for obtaining SPF colonies in a Brazilian animal facility / Descontaminação de linhagens de camundongos geneticamente modificadas por transferência embrionária para obtenção de colônias SPF em um biotério brasileiro (São Paulo, SP)

The introduction of new strains of mice in specific pathogen-free (SPF) animal facilities should be performed carefully to avoid breaking sanitary barriers. To meet this need, animals should be rederived to reduce infection risk and thus avoid research interference caused by loss of animal health status and welfare. The objective of this study was to implement mice embryo transfer in the laboratory mouse facility of the Department of Immunology at the Institute of Biomedical Sciences/University of São Paulo, Brazil. Embryo transfers were performed to rederive genetically modified mouse strains with undefined sanitary status, received from different research and educational institutions. Fertilized eggs at two-cell stage were obtained by natural means and transferred into the oviducts of SPF pseudo-pregnant female mice. All surgical procedures were performed under aseptic conditions. A total of 625 embryos were transferred into therecipients. 148 pups were born, of which 140 were reared. Viruses, bacteria and intestinal protozoa were eliminated using this technique. The improvement in the microbiological status of mice allowed their expansion in our SPF facility. With these results, we can stimulate the use of embryo transfer technique between rodent facilities in Brazil and thus encourage the distribution of better models to our scientific community.

A introdução de novas linhagens de camundongos em biotérios livres de patógenos específicos (SPF) deve ser realizada com critérios para evitar a quebra das barreiras sanitárias. Dessa forma, os animais devem ser rederivados para reduzir os riscos de infecção e evitar as interferências provocadas pela perda do status sanitário e do bem-estar dos animais. O objetivo deste estudo foi implementar a transferência de embriões murinos no Biotério do Departamento de Imunologia do Instituto de Ciências Biomédicas da Universidade de São Paulo, Brasil. As transferências embrionárias foram realizadas para rederivar linhagens de camundongos geneticamente modificadas com status sanitário não conhecido, recebidas de diferentes instituições de pesquisa e de ensino. Os embriões em duas células foram obtidos pelos métodos naturais e transferidos para os ovidutos de fêmeas de camundongos SPF pseudoprenhas. Todos os procedimentos cirúrgicos foramrealizados sob condições assépticas. Um total de 625 embriões foram transferidos para as receptoras. Foram obtidos 148 filhotes nascidos vivos, destes 140 foram desmamados. Por meio desta técnica, foram eliminados vírus, bactérias e protozoários intestinais. A melhora no status microbiológico dos camundongos permitiu a expansão destes em nossa colônia SPF. Com esses resultados, podemos promover o uso da técnica de transferência de embriões entre os biotéri